血友病A基因治疗的研究进展

血友病A是凝血因子VⅢ(FVⅢ)基因缺陷所致的X连锁隐性遗传性疾病，目前FVⅢ基因的结构已基本明确，已确认的基因突变种类繁多。基因治疗就是利用病毒载体，将正常的FVⅢ基因导人患者体内，并表达治疗水平的FVⅢ，从而实现彻底治愈血友病A。选择适合血友病A基因治疗的病毒载体，将关系到基因治疗的成功与否。该文对血友病A基因治疗中常用的病毒载体和靶细胞的研究进展作一简要综述。     

血友病A基因治疗的研究进展

血友病A是凝血因子VIII(FVIII)基因缺陷所致的X连锁隐性遗传性疾病,目前FVIII基因的结构已基本明确,已确认的基因突变种类繁多。基因治疗就是利用病毒载体,将正常的FVIII基因导入患者体内,并表达治疗水平的FVIII,从而实现彻底治愈血友病A。选择适合血友病A基因治疗的病毒载体,将关系到基因治疗的成功与否。该文对血友病A基因治疗中常用的病毒载体和靶细胞的研究进展作一简要综述。     

血友病A携带者的检测及产前诊断的研究进展（综述）

血友病A(BA)是一种性联隐性出血性疾病,因因子Ⅷ(FⅧ)缺乏,导致凝血障碍,男性的发病率为1/5000。目前主要靠替代疗法,尚不能根治。HA的分子生物学基础即是各种类型的基因突变,一般情况下,这种突变类型不详,因此应     

血友病A携带者检测与产前诊断的研究进展

血友病A是最常见的遗传性出血性疾病，由于目前尚无有效的治疗措施，所以携带者的检测及早期产前诊断显得更加重要。直接检测基因突变位点的方法是最理想、最准确和最可靠的诊断方法，然而凝血因子VIII基因突变的异型性和复杂性使得直接法在血友病A的诊断中变得困难，因此作为间接法的连锁分析仍是目前广泛采用的方法，本文拟简要阐述近年来血友病A携带者的基因检测与产前诊断的研究进展。     

外科临床见到的血友病A

３０余年收治５例血友病Ａ患儿患有外科疾病或误诊为外科疾病。其中３例术前未诊断出血友病，术中、术后伤面及切口渗血不止，经抢救痊愈。详细询问出血史对诊断血友病有重要参考价值，最终需经凝血酶原时间（ＰＴ）、凝血酶原消耗试验（ＰＣＴ）、Ｂａｇｇ＇ｓ凝血活酶生成试验（ＴＧＴ）、白陶土部分凝血活酶时间（ＫＰＴＴ）等检查确诊。对已发生出血、渗血者输入正常人新鲜血、血浆或Ⅷ因子浓缩剂是最有效的治疗方法。提出对已确诊为血病Ａ患儿发生外科疾病的处理原则。     

重型血友病A患儿关节出血与关节评估的相关性研究

目的了解血友病患儿出血与关节病变之间的关系,为临床治疗和预后判断提供理论依据。方法选取2016年6月至2017年1月于首都医科大学附属北京儿童医院及成都市新世纪妇女儿童医院就诊的1~7岁重型血友病A且有关节出血记录的患儿,以患儿关节出血为研究关节,收集前3个月研究关节的出血次数,应用超声、X线、磁共振成像(MRI)和血友病关节健康评分(HJHS)评分系统对关节进行评估。将关节出血次数与超声、X线、MRI和HJHS评分进行相关性分析,并对超声、X线、MRI和HJHS评分间的相关性进行分析。结果1.共收集重型血友病A患儿18例,年龄(5.6±1.8)岁,共30个出血关节,中位年关节出血次数为4次(4~16次),中位年靶关节出血次数为8次(4~16次)。2.关节出血次数与超声、X线评估有相关性(r=0.390,P=0.033;r=0.517,P=0.008),与HJHS评估、MRI评估均无相关性(均P>0.05)。3.超声、X射线、HJHS和MRI两两之间均呈极显著正相关[r=0.815(超声与X线),r=0.510(超声与HJHS),r=0.812(超声与MRI),r=0.666(X线与HJHS),r=0.911(X线与MRI),r=0.781(HJHS与MRI),均P<0.01]。4.关节超声和/或MRI评估异常的关节中,出血次数与关节评估间均无相关性(P>0.05)。结论关节出血与关节评估获得的关节病变程度结果不一致,因此准确判断关节病变情况需综合评估关节结构、功能等,以便更加全面地指导血友病患儿的治疗。     

长期小剂量凝血因子Ⅷ预防重度血友病A患儿关节出血的疗效与相关因素分析

目的探讨重组人凝血因子Ⅷ(FⅧ)长期小剂量次级预防重度血友病A患儿关节出血的疗效与相关因素。方法对2010年4月1日～2011年4月1日我院16位2～16岁重度血友病A患儿进行FⅧ预防性静脉输注(每次5～15 U/kg,间隔3 d),记录治疗前1年与治疗后1年的关节出血次数,同一关节反复出血的情况,治疗前后FⅧ抑制物产生情况,梅毒、艾滋病、乙肝、丙肝、丁肝、戊肝感染情况及肝功能变化。结果治疗前1年关节出血次数为(29.69±4.48),治疗后1年关节出血次数为(10.94±3.30)次,治疗前后比较差异有显著性(P<0.01)。治疗前靶关节出血发生率为45.2%,治疗后靶关节出血发生率为14.6%,治疗前后比较差异有显著性(P<0.01)。治疗后FⅧ抑制物产生率为12.5%,产生率低及抗体滴度低,治疗前后梅毒、艾滋病、乙肝、丙肝、丁肝、戊肝均阴性,肝功能正常。结论 FⅧ长期小剂量次级预防输注可有效减少中重度血友病A患儿关节出血次数,同时可有效减少靶关节出血发生率,从而在一定程度上保护关节的功能,且FⅧ抑制物产生率及滴度低,无相关疾病传播,安全可靠。     

中重型血友病A患儿关节出血情况与关节结构、功能相关性研究

目的对血友病关节出血情况和关节结构、功能的数据进行分析,以了解三者间的相关性,为临床治疗和预后判断提供理论依据。方法(1)选取4-8岁男性中型-重型血友病A且有关节出血记录的患儿,以每位患儿出血次数最多的1个关节为研究关节。收集患儿研究关节的出血情况,包括研究关节的首次关节出血年龄、年关节出血率、近3个月关节出血次数及总出血次数。同期采用Pettersson评分系统对关节结构评分,采用HJHS评分系统评估关节功能。(2)将研究关节的关节出血情况分别与该关节X线Pettersson评分和HJHS评分进行分析,并将X线评分与HJHS评分进行相关性分析。结果(1)共收集16例血友病A患儿,16例研究关节的总出血次数与HJHS评分呈正相关(P0.05),年关节出血率、近3月总出血次数、首次出血年龄与HJHS评分无明显相关性。首次关节出血年龄、年关节出血率、近3月关节出血次数及总出血次数与Pettersson评分相关性均较小。(2)16例研究关节的Pettersson评分与HJHS评分呈正相关(P0.05)。(3)4例无出血的研究关节,Pettersson或HJHS评分异常;3例Pettersson和HJHS评分均为0的研究关节,有关节出血;5例Pettersson或HJHS评分异常的研究关节,出血及另一项评分为0。结论关节总出血次数越多,对关节功能影响越明显。但仅根据出血评估关节病变情况来调整治疗是不全面的,需结合关节结构及功能综合评估。     

血友病A携带者检测与产前诊断的研究进展

血友病A是最常见的遗传性出血性疾病,由于目前尚无有效的治疗措施,所以携带者的检测及早期产前诊断显得更加重要。直接检测基因突变位点的方法是最理想、最准确和最可靠的诊断方法,然而凝血因子VIII基因突变的异型性和复杂性使得直接法在血友病A的诊断中变得困难,因此作为间接法的连锁分析仍是目前广泛采用的方法。本文拟简要阐述近年来血友病A携带者的基因检测与产前诊断的研究进展。     

7个血友病A家系基因型与临床表型分析

目的 确定各家系凝血因子Ⅷ(F Ⅷ)基因突变类型,了解基因突变与临床表型的关系。方法 对7 个家系患者进行活化部分凝血酶原时间(APTT)及凝血因子Ⅷ凝结活性(F Ⅷ :C)检测,再采用PCR 方法对7 个血友病A家系患者进行内含子22、内含子1 倒位检测,对检测结果阴性患者采用直接测序法确定基因突变类型,并对家系相关成员进行相应位点的扩增与测序。结果 8 例血友病A患者APTT 为91.6~131 s,F Ⅷ :C 为0.8%~2%,基因检测结果显示8 例患者中未检出内含子22 倒位,仅检出1 例内含子1 倒位。余7 例血友病A 患者中,共检出5 种基因型,其中6例位于外显子14,1例位于外显子23,均为单碱基突变;有1 例检出基因型为p.His1202LeufsX16(c.3666delA),经检索为新突变。结论 F Ⅷ突变热点区域位于外显子14,新突变p.His1202LeufsX16 的发现丰富了F Ⅷ基因突变数据库。     

中国重型血友病A患儿规律预防治疗的选择及其影响因素分析-来自中国12家血友病中心的调查和分析

目的探讨医疗保险政策及慈善项目对中国重型血友病A患儿选择规律预防治疗的影响。方法 (1)对2007年11月1日至2013年5月31日期间,在中国12个血友病中心接受过Ⅷ因子规律预防治疗的重型血友病A患儿进行回顾性研究。(2)记录研究期间的各项临床资料。(3)从各中心收集重型血友病A患儿选择或放弃规律预防治疗影响因素的调查问卷。(4)查询12个中心(位于11个城市)历年的血友病相关医保政策,比较不同医保报销比例下患儿年均FⅧ使用量及自付水平。比较参加慈善援助项目及未参加慈善援助项目年均FⅧ使用量的差异。结果 (1)2008年开始出现患儿选择规律预防治疗,并且人数呈逐年增加的趋势。(2)患儿选择规律预防治疗的前三位原因为:既往按需治疗效果不理想、当地医保政策改善、患儿或家属对疾病认识提高。中途放弃规律预防治疗的主要原因为家庭经济支付能力不足。(3)研究中83.4%的患儿享受医保报销,其中80.11%患儿的医保政策年度支付上限不低于15万元,可满足其规律低剂量预防方案的医疗费用。(4)医保报销比例高的患儿年均FⅧ使用量相对较高。医保报销比例低的患儿,自付水平明显较高(P0.05)。66.4%的患儿自付水平≥50%,其人均可支配收入的一半以上需用于支付预防治疗费用。(5)预防治疗的患儿中79.6%接受了慈善援助项目的支持。(6)2012年患儿实际年FⅧ使用量均值为30376IU(合999IU/kg),仅为全年坚持规律预防治疗理论用量的62.9%,明显低于高收入国家FⅧ使用量。结论(1)医保政策是影响中国儿童选择和坚持预防治疗的重要因素,慈善援助项目对其起到了推动作用。(2)对于低剂量预防治疗方案来讲,医保报销比例,而非年度支付上限,可能是制约患儿坚持长期规律预防治疗的重要因素。(3)目前中国儿童血友病预防治疗为短疗程、低剂量.与中高收入国家FⅧ使用量存在明显差距,医保政策有待进一步改善。     

血管性血友病Ⅲ型误诊为血友病A一例

患儿男，15岁，因右足踝肿痛及背部肌肉疼痛于2006年6月入院。患儿出生后3个月因自发性出血及创伤后流血不止，多次诊断为血友病A（因子Ⅷ水平1％）。患儿反复出现关节腔出血；并在2岁时并发颅内出血，接受因子Ⅷ浓缩制剂替代治疗。13岁时曾因不明严重血便导致急性重度贫血，血红蛋白降至40g／L。患儿胞妹10岁因自发性出血进行实验室检查，活化部分凝血活酶时间（AFTT）为69．3s，     

散发性血友病A家系的分子遗传学研究

本文应有用Southern印迹杂交和PCR技术对6个散发性血友病A家系进行了限制性片段长度多态性分析,并结合凝血资料,确定了其中两个家系中的母亲和1名姐姐为女性携带者,另外4个家系亦与遗传具有相关性,这一结果为遗传咨询提供了信息。     

血友病的诊断治疗研究进展

血友病是由于基因缺陷而使相关凝血因子含量不足或功能缺陷所致,发病率约５／１０００００－１０／１０００００。血友病分子遗传学的研究进展,高纯化和基因重组凝 因子的使用及对该类病人管理的加强,提高了血友病的基因诊断,治疗水平,降低了输血相关疾病的发生,改善了病人生活质量。     

以磁共振评分评估重型血友病A患儿规律低剂量预防治疗的长期关节结局

目的对规律低剂量预防治疗重型血友病A患儿长期随访,采取磁共振等方法评估患儿的长期关节结局,并对影响关节结局的因素进行初步分析。方法 2008年1月—2011年12月就诊于北京协和医院血友病中心,接受规律低剂量FVIII预防治疗的重型血友病A患儿,进行长达10年的长期随访,收集其临床病例资料,统计患儿开始低剂量预防治疗年龄、随访时间、预防时间(总周数)、预防剂量等,应用年关节出血次数(AJBR)、靶关节数、关节磁共振评分(IPSG MRI评分)等评估患儿在长期规律低剂量预防治疗方案下关节的状态及其损伤程度。结果 21例患儿入组年龄为1岁9个月～17岁11个月,随访时间为6～10年,其关节MRI评分为2～24分(13.52±6.17),21/21(100%)有关节损伤,19/21例(91%)患儿有关节软骨损伤,17/21例(81%)患儿有骨质损伤。IPSG MRI评分越高,关节损害越严重;关节MRI评分与年关节出血次数、开始预防年龄有明显相关性(P<0.05)。结论(1)低剂量预防治疗下,长期随访100%患儿仍然有关节受损,说明低剂量方案有待提高;(2)儿童尽早开始低剂量预防性治疗,可有效减少血友病A患儿关节出血次数,可能改善关节结局;(3)关节MRI检查敏感发现关节结构破坏,可能是评估关节早期损伤的首选检查方法。     

血友病乙患儿一家系基因突变分析

目的探讨凝血因子Ⅸ(FⅨ)基因突变致血友病乙的分子机制。方法回顾分析1例确诊血友病乙并经家系基因检测患儿的临床资料。结果先证者男,2岁4个月,反复皮肤瘀斑、鼻衄。查活化部分凝血活酶时间118. 3 s,凝血酶原时间15 s,血小板287×10~9/L,FⅨ2. 3%。明确诊断血友病乙型。收集其家系临床资料,提取家系DNA,运用PCR扩增及Sanger双脱氧链终止法对其FⅨ基因8个外显子及其侧翼序列进行测序,先证者FⅨ基因突变为c. 129 delGp.Pro 44 Glnfs*60,突变位于2号外显子,家系中5例女性为该位点的杂合突变,先证者大姨的胎儿经产前诊断提示未携带该致病基因。结论 c.129delG p.Pro44Glnfs*60是该家系FⅨ基因突变类型,基因检测有助于产前诊断。     

慢性肾脏病及透析患儿的疫苗接种

慢性肾脏病患儿大多存在免疫紊乱及免疫功能缺陷.各种病原菌的感染率明显增高,尤其容易感染肺炎链球菌、HBV及流感病毒.在全球范围内,肺炎链球菌是细菌性肺炎和中耳炎的最常见病原,是细菌性脑膜炎的主要病原菌.血液透析的患儿更是HBV易感染的高危人群.流感是具有高度传染性及极其广泛的传播性疾病.美国免疫实践指南咨询委员会(ACIP)及改善全球肾脏病预后(KDIGO)特别推荐慢性肾脏病及慢性透析的患者接种的3种疫苗是HBV疫苗、灭活流感病毒疫苗及肺炎链球菌疫苗.接种疫苗是特异性的预防措施,可对慢性肾脏病及透析患者提供有效的预防保护.     

血友病的诊断治疗研究进展

血友病是由于基因缺陷而使相关凝血因子含量不足或功能缺陷所致，发病率约5／100000～10/100000。血友病分子遗传学的研究进展、高纯化和基因重组凝血因子的使用及对该类病人管理的加强，提高了血友病的基因诊断、治疗水平，降低了输血相关疾病的发生，改善了病人生活质量。