成纤维细胞生长因子对关节软骨细胞转化生长因子β1作用的免疫组织化学观察

目的观察成纤维细胞生长因子对培养兔关节软骨细胞转化生长因子β１的表达。方法培养１月龄新西兰兔关节软骨细胞，在每次换液时加入成纤维细胞生长因子１００ｎｇ／ｍｌ，铺满后收集细胞，作关节软骨细胞转化生长因子β１常规及电镜免疫组织化学观察。结果光镜下实验组细胞明显呈棕色，电镜下细胞膜表面有明显的胶金颗粒黏附。结论成纤维细胞生长因子能促进关节软骨细胞转化生长因子β１的表达。     

骨形态发生蛋白和转化生长因子—β及碱性成纤维细胞生长因？…

观察骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）、转化生长因子－β、碱性成纤维细胞生长因子在骨折修复中的表达及分布情况,进而探讨其作用机制。方法以成年雄性新西兰兔为研究对象,制作桡骨骨折愈合模型。伤后不同时期处死取材,分别进行这和ＢＭＰ、ＴＧＦ－β和ｂＦＧＦ免疫组化染色观察。结果（１）伤后３ｄ开始形成原始骨痂。１周时肉芽组织中的间质细胞开始分化为软骨细胞,软骨形成后再进行软骨内化骨。４周时形成连接骨折端的桥接骨痂。２     

被动运动对制动后兔膝关节软骨和关节囊超微结构变化的影响

本文通过对30只兔左侧膝关节屈曲位石膏固定,观察制动、制动后的不同运动形式对关节软骨和关节囊组织超微结构的影响,发现制动4周后,软骨细胞出现退行性变,而成纤维细胞呈代谢活跃;制动9周后,软骨细胞退行性变迸一步加重,成纤维细胞同样出现退行性变。去制动后自行活动9周,软骨细胞和成纤维细胞退行性变尚未恢复。去制动后如给予早期被动运动,与同期自行活动相比,软骨细胞和成纤维细胞退行性变的恢复明显加快。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1在人发育骨与软骨中的表达及意义

观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在人发育骨与软骨中的表达和分布,认识这两种生长因子在人发育骨与软骨中的作用,用组织学、免疫组化及原位杂交技术,对临床经过石蜡包埋的人发育骨与软骨组织进行定位、定性检测。结果显示ＴＧＦβ和ｂＦＧＦ在人发育的骨与软骨细胞中共同表达。作者认为ＴＧＦβ和ｂＦＧＦ协同作用可能在人发育骨与软骨中起重要作用。     

颞下颌关节髁突软骨中生长因子的研究进展

生长因子是一组具有促进细胞生长、增殖和合成作用的蛋白多肽。软骨组织中含有多种生长因子及其受体,它们共同作用于软骨细胞。颞下颌关节髁突软骨属于纤维软骨,它介导了髁突的生长发育及适应性改建。髁突软骨细胞同样受到多种生长因子的调控,主要有：胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor,IGF）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF—β）、     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对软骨细胞移植修复关节软骨缺损的作用

目的：观察胰岛素样生长因子－Ⅰ（insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)对关节软骨缺损修复的作用。方法：采用组织工程方法制备骨基质明胶（BMG）－软骨细胞移植物。40只4－5个月龄的新西兰兔均分为软骨细胞实验组及软骨细胞对照组,BMG对照组,空白对照组。实验组兔膝关节注射IGF－Ⅰ,各对照组均注射等渗盐水。术后行大体,组织学观察及免疫组化检测。结果：实验组软骨细胞生长较快,术后24周修复的软骨组织Safranin-O染色,Ⅱ型胶原染色与正常关节软骨一致,软骨细胞呈柱状排列,软骨细胞对照组术后24周修复软骨组织Safranin-O染色较淡,部分软骨细胞呈柱状排列,BMG,空白对照组未修复。结论：IGF－Ⅰ能促进关节软骨缺损修复。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1 在人发育骨与软骨中的表达及意义

观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)和转化生长因子β1(TGFβ1)在人发育骨与软骨中的表达和分布,认识这两种生长因子在人发育骨与软骨中的作用,用组织学、免疫组化及原位杂交技术,对临床经过石蜡包埋的人发育骨与软骨组织进行定位、定性检测。结果显示TGFβ1和bFGF在人发育的骨与软骨细胞中共同表达。作者认为TGFβ1和bFGF协同作用可能在人发育骨与软骨中起重要作用。     

微流控芯片上胰岛素样生长因子1和碱性成纤维细胞生长因子对兔关节软骨细胞增殖的影响

目的 在微流控芯片平台上探索三维培养环境下胰岛素样生长因子1(IGF-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对软骨细胞体外增殖的影响.方法 微流控芯片上,分别在IGF-1、bFGF以及二者组合浓度梯度下三维培养兔关节软骨细胞,2周后计算软骨细胞增殖率并与传统的96孔板培养结果进行比较.结果 IGF-1在57.14ng/ml产生最大增殖效应,平均倍增2.38倍；bFGF在5.72ng/ml产生最大增殖效应,平均倍增3.85倍；85.71ng/ml IGF-1+1.43ng/ml bFGF的组合可使软骨细胞产生最大的增殖效应,平均倍增4.76倍.微流控芯片与96孔板传统培养的软骨细胞增殖率差异无统计学意义.结论 一定浓度组合的IGF-1和bFGF可协同产生最大的增殖效应；微流控芯片技术可用于软骨组织工程领域,具有广阔的应用前景.     

相关生物因子对体外培养关节软骨细胞促增殖作用的比较研究

目的　筛选关节软骨组织工程种子细胞优化获取的高效促增殖剂。　方法　采用培养细胞3H -胸腺嘧啶脱氧核苷 (3H -TdR)掺入实验、四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢检测及Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)分析方法 ,比较一定浓度维生素C(vitaminC ,VC) +骨形态发生蛋白 2 (bonemorphogeneticprotein 2 ,BMP2 )、类胰岛素生长因子 1(insulin -likegrowthfac tor1,IGF1 ) (体积分数为 2 %的血清培养时 )及碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、转化生长因子 - β1 (transforminggrowthfactor- β1 ,TGF - β1 ) (体积分数为 10 %的血清培养时 )对适宜密度接种、体外单层传代培养兔关节软骨细胞的促增殖作用。　结果　适宜浓度VC +BMP2 、IGF1 及bFGF、TGF - β1 均可促进体外传代培养关节软骨细胞的分裂增殖。增殖后的培养细胞仍具有其特异性表型表达 ,而IGF1 培养的细胞则有向成骨样细胞分化的趋向。其综合效能依次为 :VC +BMP2 >bFGF >TGF - β1 >IGF1 。　结论　一定浓度VC +BMP2 及bFGF对适宜密度接种、体外单层传代培养关节软骨细胞具有显著的促增殖作用 ;其中VC +BMP2 具有经济、高效的优点。     

骨形态发生蛋白和转化生长因子-β及碱性成纤维细胞生长因子在骨折修复中的表达

目的 观察骨形态发生蛋白(BMP)、转化生长因子-β(TGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在骨折修复中的表达及分布情况,进而探讨其作用机制. 方法 以成年雄性新西兰兔为研究对象,制作桡骨骨折愈合模型.伤后不同时期处死取材,分别进行组织学和BMP、TGF-β和bFGF免疫组化染色观察. 结果 (1)伤后3 d开始形成原始骨痂.1周时肉芽组织中的间质细胞开始分化为软骨细胞,软骨形成后再进行软骨内化骨.4周时形成连接骨折端的桥接骨痂.(2)伤后不同时期,血肿中炎性细胞表达bFGF.骨膜增殖细胞、骨端骨细胞以及原始骨痂成骨细胞表达TGF-β.肉芽组织中间质细胞、单核巨噬细胞和多核巨细胞表达TGF-β、bFGF.原始骨痂成骨细胞、骨端骨细胞和软骨细胞表达BMP.表达后BMP、TGF-β较均匀分布于软骨基质以及肉芽组织间质中,bFGF 主要分布于肉芽组织中非活跃的间质细胞周围. 结论 BMP、TGF-β和bFGF有着各自的表达和分布特点,并共同调解骨原细胞的增殖和成骨细胞、软骨细胞的分化,最终完成骨折修复.     

碱性成纤维细胞生长因子及胰岛素样生长因子-1对体外兔关节软骨细胞的生物学效应

目的：了解胰岛素样生长因子－1（IGF－1）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对兔关节软骨细胞分裂增殖及功能代谢的影响，为组织工程方法修复关节软骨缺损提供实验依据。方法：取生长良好的兔正常关节软骨细胞，在含体积分数为10％新生小牛血清的DMEM条件下体外单层培养，细胞贴壁后随机分组，并分别加入不同浓度的bFGF和（或）IGF－1；培养液不加任何因子为对照组，以四唑盐（MTT）法检测细胞相对数，二苯胺显色法测各瓶细胞DNA含量，咔唑硫酸法测基质中糖醛酸含量，以间接反映蛋白多糖含量。并采用流式细胞技术进行细胞周期亚时相分析。结果：在实验浓度范围内，两种因子均促进细胞增殖，DNA合成及增加胞外基质中葡萄糖醛酸含量，且呈剂量－效应依赖关系。当IGF－1浓度≥10ng/ml,bFGF浓度≥1ng/ml时，其促进效果较显著（P＜0．05，0．01）。bFGF的促细胞增殖作用更为明显，最大为对照组的1．32倍，而IGF－1对细胞外基质葡萄糖醛酸含量的影响更显著，最大为对照组的1．78倍，bFGF能明显缩短DNA合成前期（G1期）和分裂前期及分裂期（G2M期）时间；bFGF IGF-1作用后，同样缩短G1期和G2M期时间，显著缩短G1期时间；而IGF－1仅缩短G2M期时间。结论：在本实验条件下，bFGF及IGF－1均以剂量依赖性方式影响细胞，刺激细胞增殖及功能代谢，两种因子的协同作用仅表现在对细胞的增殖作用上，对细胞功能代谢没有明显影响。两种因子促进细胞增殖是通过缩短细胞周期不同亚时相而实现的。     

聚乙醇酸负载同种异体软骨细胞移植修复兔关节软骨缺损

目的：应用聚乙醇酸（ＰＧＡ）负载的兔软骨细胞培养移植修复同种异体关节软骨缺损．方法：应用在生物体内可降解吸收、纤维状多孔态的ＰＧＡ作为支架行兔软骨细胞培养．培养１４天后，软骨细胞在ＰＧＡ提供的三维空间中大量分裂、增殖并合成大量软骨基质，形成ＰＧＡ－软骨细胞复合体，然后利用该复合体移植修复同种异体兔膝关节全层软骨缺损，对侧膝关节作对照．术后行大体、组织学、电镜动态观察及修复组织厚度测定．结果：ＰＧＡ在术后８周完全降解吸收，实验侧与对照侧修复组织的厚度有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；术后１６周在实验侧可见典型的软骨组织，电镜下为成熟的软骨细胞，而对照侧为纤维组织修复．结论：应用ＰＧＡ－软骨细胞复合体移植，可修复同种异体的兔关节软骨缺损，为临床治疗关节软骨缺损奠定了基础．     

转化生长因子—β1Ⅱ型受体同源序列1对瘢痕疙瘩中成纤维细胞？…

目的 初步探讨转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）Ⅱ型受体同源序列１（ＴＲＨ１）的生物学功能。方法 根据已知序列合成ＴＲＨ１多肽,以瘢痕疙瘩成纤维细胞为靶细胞,分别于蛋白水平和ｍＲＮＡ水平检测该多肽对ＴＧＦ－β１所诱导的细胞胶原合成的拮抗作用。结果 ＴＲＨ１可以明显抑制ＴＧＦ－β１所诱导的颜瘢痕疙瘩成纤维细胞的胶原合成及细胞Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ的表达。结论 ＴＲＨ１可能通过模拟ＴＧＦ－β１Ⅱ型受体的结     

同种异体关节软骨细胞分离体外培养再移植修复关节软骨缺损实 …

关节软骨一旦缺损，其修复能力有限。本实验通过移植同种异体兔软骨细胞，修复关节软骨缺损。方法软骨细胞取自发生后３周雄性新西兰幼兔，体外培养，移植于成年雌性新西兰兔膝关节。股骨内髁缺损区为移植细胞组，左股骨外髁缺损为移植胶原凝胶组，右股骨外缺损为空白对照组。     

碱性成纤维细胞生长因子与透明质酸对培养兔软骨细胞的作用

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）与透明质酸（ＨＡ）对兔软骨细胞的增殖影响及其协同作用。方法 培养兔膝关节软骨细胞,加入ｂＦＧＦ、ＨＡ,用四氮甲基唑蓝（ＭＴＴ）方法测定其对软骨增殖的影响。结果 ｂＦＧＦ在１０ｎｇ／ｍｌ即可显著促进软骨细胞增殖,当ｂＦＧＦ浓度增至５０ｎｇ／ｍｌ,其促进作用是达到最大值;单纯使用ＨＡ并不促进软骨细胞增殖;当联合应用ｂＦＧＦ与ＨＡ时,ｂＦＧＦ浓度为５０～５００     

IL1,TGFβ和BMP在骨性关节炎的关节软骨中的表达

采用免疫组织化学染色技术，检测白细胞介素１（ＩＬ１），转化生长因子β（ＴＧＦβ）和骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）在骨性关节炎的关书软骨中的表达。结果显示：（１）ＩＬ１与ＴＧＦβ在病损的关节软骨表浅层细胞中表达，ＴＧＦβ还在病损的关节软骨中由发生族集的软骨细胞表达。（２）在关节软骨病损达软骨下骨部位，ＢＭＰ，ＴＣＦβ和ＩＬ１在新生的软骨组织的一些细胞中表达。我们的结果提示，ＩＬ１，ＴＧＦβ和ＢＭＰ以自分泌和（或）旁分泌的形式，在骨性关节炎的病理过程中起重要作用，涉及关节软骨的病损及修复。     

骨形态发生蛋白-2诱导成骨过程中血管内皮生长因子的表达及分析

近年来，骨形态发生蛋白（bone mophorgenetic protein，BMP）作为一种有价值的生长因子越来越受到人们的重视，然而其诱导成骨的机制目前却并不完全清楚。最近的研究发现，血管内皮生长因子（VEGF）在骨形成和修复过程中发挥着重要的调节作用，多种生长因子可促进VEGF的分泌，如转化生长因子-β1（TGF-β1）、成纤维细胞生长因子（FGF）、成骨蛋白-1（OP-1）等，从而提示VEGF可能是某些骨生长因子的中介因子。     

回转模拟失重对心肌成纤维细胞生长因子及ERK信号传导的影响

目的研究回转模拟失重条件下,心肌成纤维细胞中某些生长因子表达与分泌的变化,以及细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路的活化状态.方法通过新生大鼠原代培养获取心肌成纤维细胞,利用水平回转器模拟失重效应,对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子β1(TGFβ1)的表达进行蛋白质印迹(western blotting)分析,以放射免疫检测方法测定细胞培养上清液中血管紧张素II(Ang II)浓度的变化;利用western blotting对ERK1/2及磷酸化ERK1/2分别进行检测并分析其活化状态. 结果与对照组比较,回转后心肌成纤维细胞的bFGF表达增加,TGFβ1表达没有明显变化,Ang II分泌增加;ERK1/2表达总量增加,但其磷酸化水平下降.结论不同的生长因子对回转模拟失重有不同的响应;作为生长因子的重要下游信号通路,ERK1/2的活化受到抑制.     

重组融合饰胶蛋白拮抗转化生长因子β1刺激 增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用

目的观察重组谷胱甘肽S-转移酶与饰胶蛋白的融合蛋白(GST-Decorin)对转化生长因子β1刺激增生性瘢痕成纤维细胞的作用,探索瘢痕治疗的新方法。方法采用RT-PCR技术克隆饰胶蛋白(Decorin)cDNA并连接到pGEX-4T-1载体上,大肠杆菌内表达GST-Decorin;体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,加入1∶6.25,1∶12.50,1∶25.00,1∶50.00,1∶100.00稀释度的GST-Decorin,经四唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖速度;进一步将2mg/L的TGF-β     

转化生长因子β在神经组织、肝脏以及平滑肌损伤时的表达及作用

1　转化生长因子 β的概况转化生长因子 ( tuansforming gronth factor,TGF)是 1 987年 Delarco等先从 Rous Scarcoma病毒转化的小鼠成纤维细胞的培养上清液中发现。转化生长因子是细胞产生和分化的多功能调节因子 [1,2 ] ,具有调节细胞增殖 ,分化及细胞外基质合成代谢的作用。 1 990年 ,Moses[3 ]又发现转化细胞产生两种具有活性的因子 ,分别命名为 TGFα和TGFβ。近些年来 ,人们对 FGFβ的分子结构和生物学功能及在临床疾病中的作用有了广泛深入的研究。TGFβ主要有五种异构体 ,即 TGFβ1、2、3、4、5,哺乳类动物主要有 TGFβ2…