陈皮多甲氧基黄酮类成分对人肝癌SMMC-7721、HepG2细胞株增殖的影响

目的:研究陈皮多甲氧基黄酮类成分(CM)对人肝癌株增殖的影响。方法:采用MTT法观察CM对人肝癌株SMMC-7721、HepG2的生长抑制作用;采用Wright-Giemsa染色观察CM作用于SMMC-7721、HepG2细胞株的形态变化。结果:CM20 mg/L、40 mg/L作用于SMMC-7721细胞株48 h,细胞抑制率分别为21.84%、44.83%,72 h细胞抑制率分别为40.00%、60.00%;CM20 mg/L、40 mg/LHepG2细胞株48 h,细胞抑制率分别为38.54%、51.04%,72 h细胞抑制率分别为43.40%、55.67%;CM与SMMC-7721、HepG2细胞株共同作用48 h,大部分细胞出现明显凋亡特征。结论:CM可以抑制人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2的生长并对两株细胞的增殖呈现时间、浓度依赖性。     

陈皮多甲氧基黄酮类成分组成、提取纯化及生物活性研究进展

陈皮属药食两用药材,首载于《神农本草经》,列为上品。多甲氧基黄酮类化学成分结构复杂、种类繁多,是陈皮质量控制成分及药效物质基础,具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、神经保护等多种药理活性。本文对陈皮多甲氧基黄酮类成分、提取纯化工艺与生物活性研究等进行综述,以期为其质量评价和开发利用提供参考。     

高速逆流色谱分离制备广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的研究

目的采用高速逆流色谱技术(HSCCC)从广陈皮中制备分离高纯度多甲氧基黄酮类成分。方法应用制备型高速逆流色谱仪,通过优化各分离条件,以四元两相溶剂系统石油醚-醋酸乙酯-甲醇-水(1∶0.8∶0.7∶0.8),上相为固定相,下相为流动相,制备分离广陈皮醋酸乙酯萃取部分粗提物。结果300 mg粗提物经过260 min一次制备分离,得到了3个多甲氧基黄酮类化合物,经EI-MS及1H-NMR分析,鉴定为川陈皮素、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮及橘皮素,其质量分数分别为96.25%、97.10%、99.22%。结论该方法简便、经济,所得化合物既可作为广陈皮质量控制的参考物质,又可为柑橘属植物分类学研究提供一定的依据。     

陈皮多甲氧基黄酮类成分对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：探讨陈皮多甲氧基黄酮类成分（CM）对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：制造小鼠荷瘤模型,采用巨噬细胞吞噬功能测定．血清溶血素生成试验．PHA诱导淋巴细胞转化试验和IL-2、TNF—α定量分析,观察CM对荷瘤小鼠非特异免疫、体液免疫、细胞免疫以及细胞因子的影响。结果：CM中、高剂量可提高荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬率以及吞噬指数．增强腹腔巨噬细胞吞噬功能并可提高荷瘤小鼠的血清溶血素水平,2组间作用无显著性差异;CM低、中、高剂量可提高荷瘤小鼠PHA诱导淋巴细胞的转化率．3个剂量组的作用有明显的量效关系：CM低、中、高剂量组均可提高荷瘤小鼠IL－2以及TNF-α生成水平。结论：CM通过对小鼠的非特异性及特异性免疫应答,提高荷瘤小鼠的免疫功能。     

白藜芦醇四甲氧基衍生物提高耐药人乳腺癌细胞MCF-7/DOX对阿霉素的敏感性

目的:研究白藜芦醇四甲氧基衍生物(TMS)对人乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素(doxorubicin,DOX)的人乳腺癌细胞MCF-7/DOX这两株细胞增殖的影响,探讨白藜芦醇四甲氧基衍生物能否提高耐药细胞MCF-7/DOX对阿霉素的敏感性。方法:用SRB法检测白藜芦醇四甲氧基衍生物的细胞毒性,同时检测白藜芦醇四甲氧基衍生物和DOX联用后对细胞株MCF-7/DOX药物敏感性的影响,用Western-blot方法检测不同浓度的白藜芦醇四甲氧基衍生物对P-gp蛋白表达的影响,罗丹明转运实验考察白藜芦醇四甲氧基衍生物对P-gp转运活性的影响。结果:白藜芦醇四甲氧基衍生物(7.5、15、30μg/ml)能够有效抑制耐药细胞MCF-7/DOX的增殖,然而与此相应的浓度范围内白藜芦醇的细胞增殖抑制作用较差,使用非细胞毒性剂量(3、6μg/ml)的白藜芦醇四甲氧基衍生物能有效提高MCF-7/DOX对阿霉素的敏感性,Western-blot结果显示6μg/ml的白藜芦醇四甲氧基衍生物能够明显下调P-gp的表达,此外,罗丹明转运实验显示白藜芦醇四甲氧基衍生物组(3、6μg/ml)细胞内罗丹明123积累量均有上升,表明白藜芦醇四甲氧基衍生物可以抑制P-gp的转运活性。结论:白藜芦醇四甲氧基衍生物可通过抑制P-gp表达和活性的方式增加MCF-7/DOX对阿霉素的敏感性,从而逆转耐药。     

小柴胡汤对体外培养人肝癌细胞株HepG2增殖的影响

目的探讨小柴胡汤45%乙醇提取物对体外培养人肝癌细胞株HepG2增殖的影响及其可能的机理。方法采用ATP-Lite法测定不同浓度小柴胡汤对体外培养的HepG2增殖的作用,同时利用氧自由基清除能(ORAC)法测定样品的抗氧化活性;以LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮(NO),Griess法测定NO的终产物亚硝酸盐的含量,观察样品对NO生成的影响。结果小柴胡汤在62.5～500mg/L浓度范围内可以显著抑制HepG2增殖,抑制作用呈剂量相关性,计算半数抑制浓度(IC50)为(90.7±23.7)mg/L。小柴胡汤提取物具有一定的抗氧化活性,其抗氧化能力为阳性对照维生素C的1.3倍。小柴胡汤在3.125～50mg/L浓度范围内均可以显著抑制NO的生成(P0.05,P0.01)。结论小柴胡汤具有体外抑制人肝癌细胞株HepG2增殖的作用,其抑制作用可能与其抗氧化活性及抑制NO生成有关。     

陈皮中多甲氧基黄酮类成分的高效分离及其抑制SARS-CoV-2 3CLpro的潜在活性研究＊

目的 实现陈皮中多甲氧基黄酮类成分（PMFs）的高效富集和纯化，研究其抑制SARS-CoV-2 3CL^pro的潜在活性。方法 采用固相萃取结合高速逆流对陈皮中的PMFs进行富集纯化，利用体外酶活实验测定其对3CL^pro的抑制活性，并借助分子模拟技术探讨其潜在机制。结果 从陈皮中分离得到高纯度（ > 97%）的川陈皮素、3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' – 七甲氧基黄酮和橘皮素；体外酶活实验表明3个成分对3CL^pro均有一定的抑制作用，其中3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' - 七甲氧基黄酮的活性较强，IC₅₀为（65.65 ± 1.00） μmol·L^-1；分子模拟显示各成分与蛋白结合活性强弱顺序与实验结果一致。结论 本研究实现了陈皮中PMFs的高效富集纯化，3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' - 七甲氧基黄酮对3CL^pro表现出的较强抑制活性为抗SARS-CoV-2潜在先导化合物的发现提供了新的指引。     

刺五加皂苷对人肝癌细胞株血管内皮生长因子表达的抑制作用

目的研究刺五加皂苷(ASS)对血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA表达的影响。方法以人肝癌细胞株(HepG2)为研究对象,分别用ELISA及RT-PCR检测ASS对HepG2细胞VEGF蛋白及mRNA水平表达的影响。结果ASS250,500μg/mL作用于HepG2细胞株,VEGF蛋白及mRNA表达量下降(P<0.05或P<0.01)。结论一定剂量的ASS能抑制HepG2细胞株的VEGF mRNA表达及蛋白的表达,提示ASS可能是通过抑制VEGF介导的肿瘤血管新生,进而抑制肿瘤的生长与转移。     

四君子汤合膈下逐瘀汤对人肝癌细胞株HepG2和SMMC体外作用的实验研究

目的:观察四君子汤合膈下逐瘀汤对人肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721的影响。方法:倒置显微镜观察中药组、阴性对照组、氟尿嘧啶组中He PG2及SMMC-7721细胞生长情况。采用MTT法检测3组细胞生长的抑制率,流式细胞仪(FCM)检测人肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞凋亡情况及细胞周期。结果:倒置显微镜下观察阳性对照组及中药组中人肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞生长明显受抑制,MTT法测定细胞增殖抑制率。中药对Hep G2和SMMC-7721细胞的增殖均有明显的抑制作用,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。FCM检测中药对Hep G2、SMMC-7721细胞凋亡具有一定的诱导作用,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:四君子汤合膈下逐瘀汤具有抑制人肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡的作用。     

青龙衣提取物对人肝癌细胞株抑制作用的实验研究

目的：通过青龙衣提取物对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用,筛选出其抑瘤活性成分并探讨其机制。方法：青龙衣抑瘤活性成分胡桃醌与氟尿嘧啶、奥沙利铂、亚砷酸注射液分别作用于人肝癌细胞株SMMC-7721,分别于24h、48h、72h收集细胞,采用MTT法比较胡桃醌与其他组药物的抑瘤率,借助电镜观察胡桃醌作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞微细结构的形态变化,于激光共聚焦显微镜下检测细胞内Ca2＋浓度变化。结果：MTT结果显示胡桃醌抑瘤具有剂量依赖性;0．01mg／mL剂量24、48 hMTT结果显示胡桃醌的抑瘤强度高于亚砷酸注射液,与氟尿嘧啶相当,低于奥沙利铂;电镜结果显示肝癌细胞染色质凝聚,核固缩,游离核糖体减少,出现大溶酶体颗粒,线粒体数量增多形成髓样变,部分细胞坏死;激光共聚焦显微镜检测结果显示胡桃醌作用于肝癌细胞SMMC-7721后细胞内Ca2＋浓度增加。结论：青龙衣提取物抑瘤活性成分为化合物胡桃醌;胡桃醌对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用可能是直接杀伤肿瘤细胞。     

漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2增殖、生长周期和细胞凋亡的影响

目的 观察漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用 MTT比色法研究漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪检测DNA含量,分析细胞周期的分布.结果 MTT实验结果表明较高浓度的漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞具有直接的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,200 μmol·L-1 的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2细胞72 h后,对细胞生长的抑制率最高可达53.78%,同对照组相比(P<0.01);流式细胞术实验结果表明,不同浓度的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2 12 h后,可使G1期肿瘤细胞增多,引起G1期阻滞,作用时间为24 h、48 h时,则可引起S期阻滞;同时,不同浓度的漆树黄酮在不同的时间点都可使HepG2细胞出现明显的凋亡峰.结论 漆树黄酮具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用,其机制可能与引起细胞周期阻滞和诱导凋亡有关.     

番荔枝内酯化合物对人肝癌细胞株HepG2的作用

目的研究番荔枝内酯AS-4在体外对人肝癌细胞株HepG2生长的抑制作用。方法设AS-4不同浓度组(6.25、12.5、25、50μg/mL)、顺铂阳性对照组(25μg/mL)和空白对照组,常规培养24、48h,进行MTT比色试验和倒置相差显微镜观察。结果AS-4可明显抑制HepG2细胞的生长,最高抑制效应达到91.68%,且有细胞毒性的时间和剂量依赖关系,48hIC50为6.67μg/mL。结论番荔枝内酯AS-4在体外对人肝癌细胞株HepG2有杀伤作用,显示出较强的细胞毒活性。     

26种生物碱类化合物对人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖抑制活性的筛选

目的：从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法：应用人乳腺癌细胞系BCAP细胞筛选26种生物碱类化合物对其增殖的抑制作用。结果：小檗胺和喜树碱对人乳腺癌细胞株BCAP细胞增殖有-定程度的抑制作用；其次为马兜铃酸Ⅰ和利血胺；西萝芙木碱、番茄碱和那可丁仅有较弱的抑制活性；它们的抑制活性皆呈浓度-效应关系。士的宁、β-可鲁勃林、依卡金、萝芙木辛、育亨宾、柯楠碱、蛇根精、长春胺、骆驼蓬碱、茵芋碱、白藓碱、γ-崖椒碱、4-甲氧基-1-甲基-2-喹诺酮、去氢贝母碱Ⅳ-氧化物、倒千里光碱、毛果芸香碱、DL—N-甲基四氢罂粟碱、左旋麻黄碱和左旋去甲基伪麻黄碱在本实验条件下无效。结论：小檗胺、喜树碱、马兜铃酸Ⅰ、番茄碱和利血胺可能是含有该毕物碱的、右杭肿瘤活件中药的右特成分，亦可能成为开发抗肿瘤新药的候选药物。     

填精补元制剂对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用实验研究

目的：研究填精补元制剂对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用。方法：培养HepG2细胞，利用四唑盐比色法（MTT）检测HepG2细胞对该制剂的药物敏感性，观察细胞形态学改变，制作细胞生长曲线，并测AFP与ALb的含量及r-GT、ALP、TAT的活力。结果：该制剂（简称XY）能抑制细胞生长，降低AFP的合成与分泌量，抑制r-GT活性，促进ALb、ALP、TAT的分泌．结论：XY可以抑制HepG2细胞的增殖，有诱导HepG2细胞分化的作用。     

青蒿素和青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7细胞的体外抑制作用比较研究

目的 对比研究青蒿素及其衍生物青蒿琥酯对人乳腺癌MCF—7细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法 采用体外培养的人乳腺癌MCF—7细胞株，利用SRB法测定青蒿素和青蒿琥酯对MCF—7细胞增殖的影响，FCM法测定细胞周期的变化，亚Gl期含量测定和DAN荧光染色法观察细胞凋亡。结果 10μmol/L青蒿素和lμmol/L青蒿琥酯能明显改变MCF—7细胞的细胞周期，使S期细胞显著减少，G0 Gl期细胞明显增加。青蒿素对MCF—7细胞增殖仅有微弱抑制作用，但其衍生物青蒿琥iB却有显著的抑制作用，IC50为0．3lμmol/L。同样，lμmol/L青蒿琥酷引起MCF—7细胞的凋亡和直接的细胞毒作用明显强于10μmol/L青蒿素的作用。结论 体外研究表明，对肿瘤细胞增殖的抑制青蒿琥酯比青蒿素作用强。     

青蒿琥酯抑制人肝癌细胞株HepG2细胞生长及其机制的初步研究

目的：研究青蒿琥酯对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖和survivin表达的影响,探讨青蒿琥酯影响肝癌细胞增殖的可能机制.方法：常规培养人肝癌细胞株HepG2,设立空白对照组;青蒿琥酯不同浓度组（3.125μg/ml、6.25μg/ml、12.5μg/ml、50μg/ml）,作用不同时间后用MTT法检测青蒿琥酯对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的影响,应用RT-PCR检测细胞survivin在mRNA水平的表达.结果：青蒿琥酯作用人肝癌细胞株HepG2后,与对照组比较细胞生长明显受到抑制（P〈0.05）,当青蒿琥酯浓度在12.5μg/ml时,survivin的表达（相对表达量为（0.75＋0.01）显著降低（P〈0.05）.结论：青蒿琥酯可通过下调survivin的表达来抑制肝癌细胞HepG2的生长.     

40种香豆素类化合物对人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖抑制活性的筛选

目的从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物、类药或先导化合物。方法应用人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株筛选40种香豆素类化合物对其增殖的抑制活性。结果花椒毒素、前胡素、虎耳草素、牛防风素和甘草香豆素对人表皮癌细胞系A432细胞株增殖具有弱的抑制作用,且呈浓度-效应关系;其IC50值分别为8.40×10-4、5.00×10-5、7.30×10-5、1.00×10-5、5.00×10-5mol.L-1。蛇床素、欧前胡素、香柑内酯、羌活烯醇、紫苜蓿酚和考迈斯托醇对人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖具有弱的抑制作用,且呈浓度-效应关系;其IC50值分别为6.70×10-5、2.11×10-4、2.77×10-5、6.62×10-5、4.16×10-5、2.26×10-4mol.L-1。结论某些香豆素类化合物具有潜在的抗肿瘤活性,可能发展成为类药或先导化合物。     

乳奥康对乳腺癌细胞株MCF-7增殖及BCL-2表达的影响

目的:探讨乳奥康对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响及其对BCL-2表达的影响。方法:培养乳腺癌细胞株MCF-7,采用MTT法检测乳奥康在不同浓度和不同作用时间下对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响;Western blotting法检测乳奥康对乳腺癌细胞BCL-2表达的影响。结果:MTT结果显示,乳奥康具有对MCF-7细胞抑制的作用,其抑制作用和浓度、作用时间呈正相关。MCF-7细胞经乳奥康作用,BCL-2的表达逐渐降低。结论:乳奥康对乳腺癌细胞MCF-7的增殖具有抑制作用,其作用机制可能是通过抑制乳腺癌细胞BCL-2的表达,从而启动炎症抑制相关机制,使肿瘤细胞发生凋亡。     

竹节香附素A对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用

目的探讨竹节香附素A对人肝癌细胞HepGz增殖的影响。方法将不同质量浓度的竹节香附素A与HepG。细胞共同培养,采用MTT比色法及细胞集落形成法检测竹节香附素A对HepG。细胞生长、增殖的影响。结果竹节香附素A对HepG2细胞生长的IC50为8．94μg／mL。与未处理组相比,5、10、20、40μg／mL的竹节香附素A分别与HepG2细胞共同培养72h,在培养24h时的细胞增殖抑制率分别为：（24．81±0．55）％、（39．17±1．30）％、（62．45±7．56）％、（79．93±5．48）％,在培养48h时的抑制率为（35．67±0．81）%、（49．73土9．18）％、（71．62±1．03）％、（87．06±1．84）%,在培养72h时的抑制率为（42．52±1．31）％、（59．75±7．47）％、（78．85土3．15）％、（91．36±0．84）％;顺铂对照组在细胞培养24、48、72h的抑制率分别为（2．60±0．53）％、（60．55±5．66）％、（82．61±8．95）％。竹节香附素A各剂量的作用与未处理组相比,在各时间点均有显著差异（P〈0．001）;与顺铂相比,竹节香附索A起效更快,24h检测具有显著差异（P〈0．001）;5、10、20μg／mL剂量在24h以外的时间点与顺铂相比无差异,40μg／mL剂量在各时间点对HepG2细胞的抑制作用仍较顺铂的作用强（P〈0．01）。集落形成实验显示,对照组的集落形成率为45．47％;而竹节香附素A1．25、2．5、5μg／mL3个剂量组仅分别为15．73％、7．2％、3．33％,即集落形成抑制率分别为（66．75±1．66）%、（84．25土3．11）％、（92．55±2．33）％,与对照组相比有显著差异（P〈0．001）。结论竹节香附素A对HepG：细胞增殖有明显抑制作用,在一定范围内随着试药质量浓度的升高和作用时间的延长而增强。     

白花蛇舌草挥发油对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用

目的探讨白花蛇舌草挥发油对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法采用不同浓度的白花蛇舌草挥发油对人肝癌HepG2细胞进行药物干预24 h,用MTT法测定不同浓度药物对细胞活力的影响,并在倒置显微镜下观察细胞的形态。结果白花蛇舌草挥发油能使人肝癌HepG2细胞密度减少,细胞变小,核固缩;能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,具有剂量依赖性,IC50值为369.3μg/mL。结论白花蛇舌草挥发油在体外能有效抑制肝癌细胞的增殖。