大川芎方中天麻效应组分的体内移行研究

目的:借鉴血清药物化学的方法,探讨大川芎方中天麻的药效物质基础,为有效、全面地控制大川芎方及其制剂的质量奠定基础.方法:通过HPLC指纹图谱,比较空白血浆与含药血浆,空白脑脊液与含药脑脊液的成分异同,确定天麻效应组分的体内移行成分,并应用HPLC-DAD-MSn分析技术推测移行成分的化学结构.结果:灌胃大川芎方效应组分后,血浆中较明显来源于天麻效应组分的色谱峰有2个,经推断分别为天麻素和巴利森苷类成分;而脑脊液中未明显检测到来源于天麻效应组分的色谱峰.结论:天麻体内移行成分研究有助于阐明其效应物质基础.     

HPLC-DAD-MSn联用技术表征大川芎方效应组分中主要化学成分

目的:采用HPLC-DAD-MSn联用技术研究大川芎方效应组分的主要化学成分,为其体内物质基础研究及质量标准的完善奠定基础.方法:通过建立大川芎方效应组分指纹图谱,将其复杂的化学成分表征出来,并采用HPLC-DAD-MSn联用技术对各化学成分进行结构鉴定和推测.结果:推断出川芎效应组分中的3个化学成分和天麻效应组分中的8个化学成分.结论:大川芎方效应组分的化学成分研究有助于阐明其效应物质基础并完善其质量标准.     

丹红注射液体内外指纹图谱分析研究

目的:通过丹红注射液大鼠尾静脉注射给药后血浆、脑、肝脏HPLC指纹图谱的研究,建立准确、简单的体内定性分析方法,为丹红注射液在血、脑、肝脏的分布代谢研究奠定基础,对阐明药效物质基础提供依据。方法:采用清醒动物自动采样系统实时动态采集血浆,定时取脑和肝脏。建立丹红注射液及其含药血浆和脑、肝脏HPLC指纹图谱。结果:7批丹红注射液指纹图谱相似度均大于0.980,7批血浆、脑、肝脏组织样品的特征图谱的相似度均在0.86以上,结论:说明特征指纹图谱相对稳定、准确,可以用于体内成分的定性分析。     

大川芎方效应组分血中移行成分UPLC-MS分析

目的:研究硝酸甘油致实验性偏头痛模型大鼠灌胃大川芎方效应组分后血中移行成分及其归属.方法:以UP-LC-MS作为分析手段,以大川芎方效应组分、川芎效应组分、天麻效应组分、天麻素、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ作为对照,综合分析总离子流色谱图、质量色谱图及质谱图等信息,通过对比各色谱峰的保留时间及质谱图特征,确认硝酸甘油致实验性偏头痛模型大鼠灌胃大川芎方效应组分后血中移行成分及其归属.结果:大川芎方效应组分给药后血浆中共发现10个人血成分,其中4个为天麻素等天麻效应组分中原型成分,6个为阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ等川芎效应组分中原型成分.结论:本研究将为阐明大川芎方效应组分药效物质基础提供依据.     

川芎治疗偏头痛效应组分的体内移行研究

目的借鉴血清药物化学的方法,探讨川芎效应组分在血液及靶组织脑脊液中的移行成分(即药物以原型进入到体液的化学成分),从而为快速、有效地确定川芎效应组分的物质基础,进一步建立其完善的质量标准奠定基础。方法通过HPLC指纹图谱和紫外光谱分析,比较空白血清、含药血清,空白脑脊液、含药脑脊液成分异同,确定川芎效应组分的血中移行成分与脑脊液移行成分,并采用HPLC-DAD-MS/MSn分析技术推测移行成分的化学结构。结果阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ为川芎效应组分的血清移行成分,洋川芎内酯Ⅰ为其脑脊液移行成分,即洋川芎内酯Ⅰ为川芎效应组分即入血又入脑的化学成分。结论洋川芎内酯Ⅰ很可能是川芎效应组分治疗偏头痛最重要的生物活性成分。     

铁包金在血清、血浆、尿液及粪便中的HPLC指纹图谱

目的建立铁包金Berchemia lineata在血清、血浆、尿液及粪便中的HPLC指纹图谱,并进行体内定性分析。方法大鼠灌胃铁包金水提物后,建立血清、血浆、尿液、粪便中的HPLC指纹图谱,并比较其相似度。结果与给药前的指纹图谱相比,9个移行成分以原型入血,7个入尿,2个入粪便。结论铁包金中的大部分成分以原型入血,然后被肾脏代谢,进入尿液。     

大川芎方多元释药系统在大鼠体内的药效学评价

目的评价大川芎方多元释药系统在大鼠体内的药效学行为。方法制备硝酸甘油致大鼠偏头痛模型,口服给药后以对NO的抑制作用为药效学指标,大川芎方效应组分与大川芎片(混悬液)为对照,评价多元释药系统起效时间与药效作用维持时间。结果与效应组分、大川芎片比较,多元释药系统可在0.5 h内迅速降低大鼠血浆NO水平,起效速度与提取物及大川芎片接近,抑制作用可维持10 h以上,显著长于后两者(约2 h左右)。结论从药效学角度而言,大川芎方多元释药系统具有速效、缓释的作用。     

指纹图谱结合一测多评模式在参芎养心颗粒质量评价中的应用研究

目的建立指纹图谱与一测多评(QAMS)结合的考察模式,验证该方法在制剂质量评价中应用的准确性和可行性。方法以参芎养心颗粒为研究对象,以葛根素为参照物建立参芎养心颗粒HPLC指纹图谱,计算该成分与阿魏酸、橙皮苷、丹酚酸B、甘草酸铵、五味子醇甲的相对校正因子,并计算其量,实现QAMS。同时对QAMS的计算值与外标法实测值进行比较,以确证QAMS法的可行性和科学性。结果建立了参芎养心颗粒HPLC特征指纹图谱共有模式,标定了17个共有峰,指认了其中6个共有峰,10批参芎养心颗粒的相似度均大于0.99。10批参芎养心颗粒中6个主要成分的计算值与实测值间无显著差异。结论 QAMS结合指纹图谱的质量控制模式在参芎养心颗粒中得到验证,该方法快速准确灵敏,可为参芎养心颗粒定量测定和指纹图谱质量控制提供参考。     

补阳还五汤血浆指纹图谱的建立

目的:建立补阳还五汤含药血浆指纹图谱,探讨补阳还五汤在大鼠体内的药效物质基础。方法:通过比较补阳还五汤水煎液、补阳还五汤水煎液含药血浆、空白血浆HPLC指纹图谱,推断大鼠口服补阳还五汤水煎液后,血浆中的原型成分及代谢产物。结果:口服补阳还五汤水煎液后,在大鼠血浆中发现了30个入血成分,其中10个为血浆固有成分,1个为溶剂峰,19个为药源性成分,其中4个为药材原型成分,15个为代谢产物,其中2个为黄芪代谢产物,1个为桃仁代谢产物。结论:该研究建立的方法准确、可靠,可用于补阳还五汤水煎液血浆指纹图谱和药效物质基础的研究。     

酸枣仁汤含药脑脊液指纹图谱研究

目的:通过对酸枣仁汤含药脑脊液指纹图谱的研究,为酸枣仁汤镇静催眠药效物质基础研究提供方法学基础。方法:采用反相高效液相色谱法,以梯度洗脱的方式,50 min内在同一图谱中同时完成水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱的建立,同时将含药脑脊液、空白脑脊液、酸枣仁汤及各单味药HPLC指纹图谱进行对比分析。结果:通过对脑脊液采集方法、前处理方法及洗脱梯度、检测波长等色谱条件的筛选,建立了可将酸枣仁汤含药脑脊液中化学成分完全分开的指纹图谱,并进行归属分析,初步鉴定出含药脑脊液中的固有成分、药源性物质及代谢产物。结论:方法可作为探索酸枣仁汤药效物质基础研究的有效手段。     

基于指纹图谱的决明子有效组分纯化工艺

目的:采用HPLC指纹图谱指导优化决明子有效组分纯化工艺。方法:采用HPLC建立决明子指纹图谱,以5个主要峰的回收率和指纹图谱相似度为指标,优选大孔树脂型号、上样量和洗脱条件。结果:D-101树脂对5个成分的回收率最高,上样量为3 m L,树脂用量为10 m L,洗脱溶剂为75%乙醇50 m L,纯化后主峰回收率均85%,RSD均0.6%,HPLC指纹图谱相似度0.98。结论:采用HPLC指纹图谱指导优化决明子有效组分大孔树脂纯化工艺,可保持分离前后有效组分中化学成分的一致性。     

非线性化学指纹图谱技术结合高效液相色谱法鉴别天麻产地及活性成分测定

目的:利用非线性化学指纹图谱技术结合HPLC对天麻的产地进行鉴别,并对不同产地天麻中天麻素及整体活性成分进行定量分析。方法:采集了云南、湖北、贵州和东北三省4个产地天麻,利用非线性化学指纹图谱及HPLC指纹图谱对其产地进行鉴别。采用硫酸+硫酸锰+溴酸钠+丙酮+样品成分振荡体系,以天麻样本作振荡底物,建立天麻的非线性化学指纹图谱,结合图谱显著的直观差异及系统相似度模式识别对不同产地天麻进行鉴别评价,并测定不同产地天麻活性物质相对整体含量。同时,建立4个产地天麻的高效液相色谱指纹图谱,进行模糊聚类分析,并测定不同产地天麻的天麻素含量。结果:非线性指纹图谱法与HPLC指纹图谱分类结果一致,均能把天麻的产地给予溯源。活性成分相对含量的比较结果显示不同产地的天麻存在品质差异,两种方法相结合,既能对单个活性组分进行定性定量分析,又可获得活性成分整体含量的结果。结论:该研究为天麻的产地鉴别提供了一种简单、经济、快速的新方法,为科学表征天麻活性成分含量提供了新的技术手段。     

大川芎方中川芎提取纯化工艺及其镇静镇痛作用

目的:探讨大川芎方中川芎的提取纯化工艺条件。方法:分别采用回流法提取、大孔树脂法纯化川芎提取物,用高效液相色谱法测定提取物中阿魏酸的含量,采用小鼠镇痛、镇静试验验证提取物的药效。结果:川芎的最佳提取工艺为乙醇体积分数为70%,溶剂用量为8倍量,提取次数为3次,时间为每次2 h;提取液采用HPD100型大孔树脂纯化;纯化条件为上样液浓度0.5 g.mL-1,洗脱剂为6倍柱体积50%乙醇。药效试验表明提取物具有较好的镇静与镇痛效果。结论:提取纯化方法简便、准确,可为大川芎方现代制剂的开发提供技术参考。     

少毛北前胡化痰作用的谱效关系研究

目的:分析少毛北前胡氯仿提取部位高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱与化痰药效关联性,以确立其化痰“药效成分组”.方法:通过HPLC测定分析少毛北前胡氯仿提取部位HPLC指纹图谱,用小鼠酚红化痰法研究其化痰作用,急支糖浆为阳性对照药(12 mL· kg-1),给小鼠灌胃氯仿提取物6 d(1.4 g· kg-1),用分光光度计测定小鼠气管的酚红分泌量,然后用灰关联度分析方法研究其谱效关系.结果:少毛北前胡氯仿提取部位的化痰作用是其所有化学成分共同作用的结果,各特征峰代表各自化学成分,其对化痰作用贡献的大小顺序(按特征峰编号)为13＞12＞16＞18＞19＞6＞20＞14＞1＞11＞15＞10＞17＞2＞5＞4＞7＞3＞8＞9,其中1,3,4,10,13,16号特征峰鉴定为异紫花前胡苷元,补骨脂素,花椒毒素,Pd-Ib,蝉翼素,peuformosin.结论:少毛北前胡氯仿提取部位具有较强化痰活性,其HPLC指纹图谱与化痰作用之间有一定对应关系.     

银菊解毒口服液大孔树脂纯化工艺研究

目的在指纹图谱的基础上,联用AHP-CRITIC混合加权法、Plackett-Burman设计(PBD)与Box-Behnken设计(BBD),多目标筛选银菊解毒口服液(YJOL)的纯化工艺。方法采用HPLC法建立YJOL HPLC图谱,以6种指标成分绿原酸、蒙花苷、R,S-告依春、哈巴俄苷、补骨脂素、异补骨脂素的回收率和HPLC图谱相似度为指标,筛选10种大孔树脂中最佳型号。AHP-CRITIC混合加权法赋予6种指标成分的回收率和相似度权重,计算综合指标作为评价标准,运用PBD筛选显著性影响因素,结合BBD优选大孔树脂纯化YJOL的最佳工艺参数。结果 HPD-400型大孔树脂对复方中6个指标成分的富集选择性最高。最佳工艺参数为径高比1∶7,上样pH值3.5,上样质量浓度0.18 g/m L,上样量(药材:树脂)0.96g/g,8 BV的77%乙醇洗脱。纯化后6个指标成分的回收率为78%~98%,HPLC指纹图谱相似度大于0.99,成分均衡回收。模型综合评价预测值为94.28%,实验所得综合评价为93.69%,相对偏差0.59%。结论在HPLC图谱的基础上,联用AHP-CRITIC混合加权法、PBD与BBD筛选YJOL纯化工艺是科学可行的,不仅能提高有效成分的纯度,还能保持化学成分的一致性。     

基于HPLC指纹图谱的不同产地金钱草及其地方习用品与混用品的鉴定研究

目的 对不同产地的金钱草Lysimachia chriatinae及其常见的地方习用品与混用品的HPLC指纹图谱进行研究,比较分析不同产地金钱草及其习用品与混用品的差异,为其鉴定技术的开发应用奠定基础。方法 利用80%甲醇制备金钱草及其习用品与混用品样品的提取溶液,采用HPLC法建立不同产地的金钱草及其习用品与混用品提取液的指纹图谱,明确金钱草及其地方习用品与混用品的特征鉴别峰,分析比较不同产地金钱草样品间指纹图谱的差异,利用SPSS软件对不同样品的指纹图谱进行聚类分析和主成分分析,明确HPLC指纹图谱在不同产地金钱草样品的质量评价和习用品与混用品的正伪鉴别中的作用。结果 HPLC指纹图谱共获得了区分度较好的8个特征峰数据,可用于后续的鉴别和质量评价,其中金钱草和其地方习用品浙金钱草与几种混用品的指纹图谱存在显著差异,SPSS聚类分析结果表明HPLC指纹图谱可将金钱草及其地方习用品与混用品进行准确高效区分;不同产地金钱草的指纹图谱存在一定差异,其中四川产地和贵州、云南产地的可以进行有效区分。结论 HPLC指纹图谱能有效区分不同产地金钱草及其地方习用品与混用品,鉴定结果具有快速、准确和操...     

基于色谱指纹图谱和含量测定相结合的青风藤质量控制方法研究

目的 建立青风藤的液相色谱指纹图谱与含量测定方法,更全面、合理地控制青风藤药材的质量。方法 建立青风藤药材的液相色谱指纹图谱方法,对74批青风藤药材进行分析,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对74批青风藤药材进行相似度评价,确定共有峰,使用SIMCA-P(V14.1)软件对74批青风藤药材的指纹图谱数据进行正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）,从活性物质中选择对青风藤产地及部位影响较大的共有成分作为青风藤的质量控制成分,对其进行含量测定,并分析测定结果。结果 方法学验证结果表明,所建方法适用于青风藤药材指纹图谱和含量测定;经化学计量学分析与文献调研,最终选择木兰花碱和青藤碱作为青风藤的质量控制成分含量测定。结果表明,不同药用部位的青风藤中青藤碱含量差异较大,而不同产地的青风藤中木兰花碱含量差异较大,青风藤根茎与根中的青藤碱含量较藤茎中青藤碱含量高,湖北产青风藤中木兰花碱较其他产地高。结论 所建立的青风藤指纹图谱和含量测定方法色谱峰分离度、拖尾因子、准确度...