树突细胞疫苗诱发抗肿瘤免疫特异性的体内研究

目的:探讨卵巢肿瘤提取物负载的树突细胞(DC)体内诱发抗肿瘤免疫效应的特异性。方法:应用rrGM-CSF(终浓度40ng/ml)、rrIL-4(终浓度40ng/ml)及rrTNF-α(终浓度40ng/ml)体外培养Fischer344大鼠骨髓来源的单个核细胞,于培养第12天通过流式细胞仪检测细胞标志CD86、OX62抗原,用电镜观察细胞形态,证实获得树突细胞。分别利用NuTu-19卵巢肿瘤细胞和CBRH-7919大鼠肝癌细胞肿瘤提取物制备肿瘤抗原致敏Fischer344大鼠骨髓来源的树突细胞,得到两种肿瘤DC疫苗,即NuTu-DC和CBRH-DC。体内试验:Fischer344大鼠随机分为3组(1)对照组;(2)NuTu-DC治疗组;(3)CBRH-DC治疗组。于大鼠皮下接种NuTu-19细胞,5天后出瘤,开始于肿瘤接种对侧接种DC疫苗,每隔1周给予疫苗1次,共治疗2次。于第0天(未荷瘤时),第5天(出瘤后),第26天(治疗后1周),第40天(治疗后3周)天眼球取血分析各组动物外周血CD3/4/8表达水平;于荷瘤30,32,34,36,38,40天测量肿瘤体积,观察大鼠皮下肿瘤生长情况。于荷瘤40天处死各组实验动物,取肿瘤组织称重,评价治疗效果。结果:大鼠骨髓来源的骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclearcells,BMMNC)在相关细胞因子的作用下可以培养出成熟的树突细胞,负载肿瘤提取物后,高表达表面抗原OX-62,CD-86。流式细胞仪检测外周血CD3/4/8水平显示:各组大鼠CD4/CD8比值升高,与未荷瘤时(第0天)相比,差异有统计学意义(P<0.05);CD3+CD4+T细胞表达百分率及CD4/CD8在治疗后3周时(第40天)NuTu-DC治疗组明显高于另两组(P<0.05),而对照组与CBRH-DC比较无差异。通过测量肿瘤生长曲线可见NuTu-DC治疗组各大鼠肿瘤体积较其它两组小,荷瘤第40天时,NuTu-DC治疗组为106.57±56.65mm3,对照组为299.78±118.17mm3,CBRH-DC治疗组为299.12±85.61mm3,与对照组和CBRH-DC组比较差异有统计学意义(P<0.01);而且NuTu-DC治疗组肿瘤平均瘤重为0.197±0.039g,与对照组和CBRH-DC治疗组有显著差异(P<0.01),其抑瘤率为64.4%;而CBRH-DC治疗组大鼠平均肿瘤体积、生长速度及瘤重与对照组无明显差异(P>0.05),其抑瘤率仅为0.22%。结论:应用大鼠卵巢癌细胞肿瘤提取物负载的树突细胞体内治疗卵巢癌荷瘤大鼠,能有效抑制肿瘤生长,且所诱发的抗肿瘤免疫具有组织特异性。     

盐酸克仑特罗对小鼠胚胎体外发育的影响

目的:探讨盐酸克仑特罗对小鼠1-细胞胚胎和2-细胞胚胎体外发育的影响。方法:获取小鼠1-细胞和2-细胞胚胎,分别与盐酸克仑特罗10 ng/mL,3 ng/mL和1 ng/mL的3个剂量组共培养,观察胚胎各阶段的发育情况并计算胚胎的发育率。结果:1ng/mL和3ng/mL组的1-细胞小鼠胚胎,从4-细胞期到囊胚阶段的发育率与对照组相比差异显著(P<0.05),3 ng/mL组显现出比1ng/mL组更强的抑制作用(P<0.01),10 ng/mL组,2-细胞期就与对照组有差异(P<0.05,其中 4-细胞至囊胚阶段P<0.01),囊胚率只有2.4％。10 g/mL组及3 ng/mL组的2-细胞小鼠胚胎,分别从4-细胞期和8-细胞期与对照组相比差异显著(P<0.05),1 ng/mL组的各个阶段胚胎发育率与对照组相比未见统计学差异(P>0.05)。培养液中含有盐酸克仑特罗使胚胎的粗颗粒增多,部分印裂球碎裂、退化。结论:盐酸克仑特罗对小鼠胚胎的体外发育有毒性作用并呈一定的剂量效应。盐酸克仑特罗使1-细胞小鼠胚胎被抑制在2-细胞期,对处于晚2-细胞期胚胎的影响明显降低。     

输卵管积液对小鼠胚胎体外发育的影响

目的 :了解输卵管积液是否具有胚治毒性。方法 :收集兔输卵管液和机械诱导的输卵管积液 ;小鼠超数排卵 ,收集 2 -细胞胚胎 ,随机分配到含有不同浓度输卵管积液、输卵管液 (正常对照 )和培养液 (空白对照 )中培养 ,观察并记录胚胎形态 ,同时测定新形成囊胚的细胞数和有丝分裂指数。结果 :1 0 0 %输卵管积液组囊胚形成率和胚胎孵化率均明显低于两对照组 (P<0 .0 0 1 ) ;而低浓度 (2 0 %和 1 0 % )积液组囊胚形成率和胚胎孵化率与两对照组相比 ,均无明显差异。各实验组囊胚的细胞数和有丝分裂指数均明显低于两对照组(P<0 .0 5)。结论 :机械诱导的输卵管积液 ,会影响早期种植前胚胎质量     

IL-4与IL-10联合免疫对趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3的选择性诱导对自然流产模型小鼠胚胎丢失率的影响

目的:观察IL-4与IL-10对趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3的选择性诱导对自然流产模型小鼠胚胎丢失率的影响,探讨趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法:建立自然流产小鼠模型与正常妊娠小鼠模型,观察细胞因子IL-4与IL-10对CCR3、CCR5、CXCR3的选择性诱导作用,用双标记流式细胞分析技术,检测正常妊娠模型组孕鼠(CBA/J×BALB/c)、自然流产模型无干预组孕鼠(CBA/J×DBA/2)、自然流产模型IL-4免疫组孕鼠、自然流产模型IL-4+IL-10联合免疫组孕鼠和自然流产模型-生理盐水(NS)免疫组孕鼠中外周血CD4+T细胞CCR3、CCR5、CXCR3等3类趋化因子受体的表达率,并观察各组孕鼠胚胎丢失率。结果:(1)流产模型无干预组胚胎丢失率显著高于正常妊娠模型组,差异有统计学意义(P<0.01),IL-4免疫组、IL-4+IL-10联合免疫组胚胎丢失率皆明显低于NS组与流产模型无干预组(P<0.01,P<0.01);(2)自然流产模无干预组外周血CD4+T细胞CCR3表达水平明显低于正常妊娠模型组(P<0.01),而CCR5、CXCR3表达率明显高于正常妊娠模型组(P<0.01);转输IL-4、IL-4+IL-10后CCR3表达率明显上调、CXCR3表达率明显下降,均与流产模型无干预组差异有显著性(P<0.01)。此外,IL-4+IL-10联合免疫组外周血CD4+T细胞上CCR5表达率也明显低于流产模型无干预组(P<0.05),但IL-4免疫组与流产模型无干预组无明显差异(P>0.05)。结论:CD4+T细胞上CCR3、CCR5、CXCR3表达异常可能在自然流产发病中起重要作用,细胞因子IL-4与IL-10联合作用可能通过诱导CCR3高表达,抑制CCR5与CXCR3表达来诱导妊娠免疫耐受,降低胚胎丢失率。     

不同高浓度CO2对2—细胞小鼠胚胎体外发育的影响

目的：观察不同高浓度二氧化碳(CO2)对2-细胞小鼠胚胎体外发育的影响。方法：获取小鼠2-细胞胚胎，置于CZB培养液微滴，覆盖经三蒸水处理的石蜡油，分别在5％CO2(对照组)、5．7％CO2、6．0％CO2和15％CO2浓度下体外培养；在15％CO2时，另设覆盖经磷酸盐缓冲液(PBS)处理的石蜡油或不覆盖石蜡油的实验组，观察胚胎发育情况。结果：5个实验组的囊胚率均显著低于对照组(P＜0．01)，5．7％CO2时仅为4．3％，其余4组的均为0。CO2浓度5．7％和6．0％时，胚胎大部分停滞在2-细胞和4-细胞期，两者间无统计学差异(P＞0．05)。CO2浓度15％时，覆盖经三露水处理的石蜡油组，有15％的胚胎发育到4-细胞阶段，但4-细胞胚胎的卵裂球不规则，很快退化；覆盖经PBS处理过的石蜡油组，有2．2％的胚胎发育到4-细胞，其余出现严重的退化。结论：高浓度CO2对小鼠胚胎发育有强毒性效应，引致胚胎发育停滞和严重降解；高浓度CO2时，胚胎覆盖三蒸水处理石蜡油的效果优于经PBS处理的石蜡油；严密监控CO2浓度对胚胎体外发育是重要的。     

天花粉蛋白对小鼠胚胎早期发育的影响

本实验利用胚胎培养和动物试验测试天花粉蛋白对胎鼠早期器官形成有致畸作用；头、躯干和四肢可发生畸形，体节数目及轴长减少。母鼠在器官形成期给药，天花粉蛋白可降低胎鼠存活能力、活胎率下降、吸收点数目增加。存活胎鼠顶臀长度较对照组短。畸形胎鼠数目增加。畸形以露脑最为显著。此外有短肢、短尾和矮小。结果显示天花粉蛋白对离体和体内胚胎的发育皆有不良的影响。     

不同高浓度CO_2对2-细胞小鼠胚胎体外发育的影响

目的 :观察不同高浓度二氧化碳 ( CO2 )对 2 -细胞小鼠胚胎体外发育的影响。方法 :获取小鼠 2 -细胞胚胎 ,置于 CZB培养液微滴 ,覆盖经三蒸水处理的石蜡油 ,分别在 5 % CO2 (对照组 )、5 .7%CO2 、6.0 % CO2 和 1 5 % CO2 浓度下体外培养 ;在 1 5 % CO2 时 ,另设覆盖经磷酸盐缓冲液 ( PBS)处理的石蜡油或不覆盖石蜡油的实验组 ,观察胚胎发育情况。结果 :5个实验组的囊胚率均显著低于对照组 ( P<0 .0 1 ) ,5 .7% CO2 时仅为 4.3% ,其余 4组的均为 0。 CO2 浓度 5 .7%和 6.0 %时 ,胚胎大部分停滞在 2 -细胞和 4-细胞期 ,两者间无统计学差异 ( P>0 .0 5 )。CO2 浓度 1 5 %时 ,覆盖经三蒸水处理的石蜡油组 ,有 1 5 %的胚胎发育到 4-细胞阶段 ,但 4-细胞胚胎的卵裂球不规则 ,很快退化 ;覆盖经 PBS处理过的石蜡油组 ,有 2 .2 %的胚胎发育到 4-细胞 ,其余出现严重的退化。结论 :高浓度 CO2 对小鼠胚胎发育有强毒性效应 ,引致胚胎发育停滞和严重降解 ;高浓度 CO2 时 ,胚胎覆盖三蒸水处理石蜡油的效果优于经 PBS处理的石蜡油 ;严密监控 CO2 浓度对胚胎体外发育是重要的     

自然流产胚胎组织中人类纺锤体有丝分裂俘获缺陷基因的表达及意义

目的 探讨自然流产胚胎组织中人类纺锤体有丝分裂俘获缺陷(hsMAD)2基因的表达,以及hsMAD2基因表达降低与染色体数目异常的相关性.方法 采集2006年3月至2007年3月重庆医科大学附属第一、第二医院妇产科自然流产患者的胚胎组织标本33份,其中流产1次者23份,流产2次及以上者10份;同时采集人工流产患者的胚胎组织标本35份.采用FQ-PCR和蛋白印迹法检测自然流产和人工流产胚胎组织中hsMAD2基因的mRNA和蛋白表达水平;原代培养人工流产胚胎组织并经染色体分析筛选出5例具有正常核型的胚胎细胞,构建hsMAD2基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体,转染筛选出来的胚胎细胞以抑制其内源性hsMAD2基因的表达,将细胞分为实验1组(转染重组干扰质粒pshRNA-hsMAD2-1)、实验2组(转染pshRNA-hsMAD2-2)、实验3组(转染pshRNA-hsMAD2-3)、对照1组(未做任何处理)、对照2组(转染pTZU6+1干扰质粒空载体)、无关对照组(转染pshRNA-N1).用蛋白印迹法和定量PCR技术评价shRNA的干扰效果,四甲基偶氮唑蓝比色法测定胚胎细胞增殖抑制率,流式细胞技术检测胚胎细胞周期的分布,并计算染色体数目的 变化.结果 (1)自然流产1次者、自然流产2次及以上者、人工流产者的胚胎组织中hsMAD2基因mRNA的表达量分别为0.00879±0.00035、0.00901±0.00033、0.00941±0.00026,3者分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);hsMAD2蛋白的表达量分别为0.2791±0.0311、0.0431±0.0020、0.5790±0.0331,3者分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制胚胎细胞中hsMAD2基因的表达,转染有效干扰质粒后,实验1组胚胎细胞的增殖抑制率为54%,分别与对照1组(4%)、对照2组(3%)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);G2/M期细胞比例实验1组为17.9%,与对照1组(8.2%)、对照2组(8.0%)比较均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);实验1组染色体异常率平均值为30.0%,与对照1组(4.8%)比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 hsMAD2基因的表达下调可能是导致患者染色体数目异常、胚胎发育异常乃至自然流产发生的重要原因之一.     

RU 486对体外小鼠着床前胚胎的影响

本文研究了RU486对体外着床前不同时期小鼠胚胎的RNA聚合酶活性及糖蛋白合成的影响。RNA聚合酶活性以~3H-尿嘧啶核苷(~3H-尿苷)的掺入率为指标,糖蛋白合成以~3H-氨基葡萄糖的掺入量为依据。实验发现:10~(-7)M～10~(-5)MRU486使各期胚胎~3H-尿苷及~3H-氨基葡萄糖掺入降低(P<0.05～0.01);在10~(-6)MRU486处理同时加入10~(-7)M～10~(-5)M孕酮,则各期胚胎两种前体的掺入有不同程度的恢复(P<0.05)。实验结果说明RU486可直接作用于着床前小鼠胚胎,而且这种作用与孕酮相拮抗,为RU486抗早孕提供了一种理论依据。     

不同机械辅助孵化方式对小鼠胚胎体外发育影响的研究

目的:探讨不同机械切口辅助孵化方式对小鼠胚胎体外发育的影响。方法:将678枚2-4-细胞期昆明白种小鼠胚胎随机分为A(183枚)、B(177枚)、C(168枚)组和对照组(150枚)。A、B、C组采用机械法在透明带上分别开“─”、“┼”、“┤”形状切口,对照组不作切口,比较各组的囊胚获得率和孵出率。结果:A、B、C组d5囊胚获得率分别为92.35%、92.09%和91.07%,与对照组的93.33%比较,无统计学差异(P>0.05);d6囊胚完全孵出率依次为75.00%、91.52%和90.57%,显著高于对照组的48.25%(P<0.001)。B、C组d6囊胚完全孵出率无统计学差异(P>0.05),但均显著高于A组(P≤0.001)。A组的辅助孵化时间(13.88±1.72s)显著小于B、C组(44.46±2.61s和53.73±3.29s)(P<0.05);且B、C组间也有显著差异,P<0.05。结论:不同机械切口的辅助孵化方式均能有效提高囊胚孵出率;“┼”和“┤”形状切口的辅助孵化效果显著优于单一切口者;“┤”较“┼”形状切口的辅助孵化方式更省时、安全,较“─”方式更有效,值得推广。     

三种不同玻璃化冷冻方法对小鼠2-细胞期胚胎冷冻效果的比较

目的:比较三种玻璃化方法冷冻小鼠胚胎的存活率及继续发育能力的差异。方法:将573个小鼠2-细胞期胚胎随机分为四组:Straw冷冻组144个,OPS冷冻组142个,CPS冷冻组149个,比较胚胎复苏后存活率、囊胚形成率及孵化率,并以未冷冻为对照组(138个)。结果:Straw组及CPS组存活率均显著性高于OPS 组(P <0.05);囊胚形成率及孵化率OPS组和CPS组均显著性高于Straw组(P均<0.05),OPS和CPS两组之间无显著性差异(P均>0.05)。结论:OPS与CPS方法能够更好地保持胚胎复苏后的继续发育能力。且CPS方法存活率高于OPS方法,并降低了交叉感染的危险性,更具临床应用潜力。     

卵巢癌SKOV3细胞培养液对脐血树突细胞前体细胞亚群的影响

目的:研究卵巢癌细胞培养上清能否诱导树突细胞前体细胞亚群比例发生变化。方法:以脐血来源的CD34+干细胞通过细胞因子FLT3-L(100ng/ml)、SCF(50ng/ml)的诱导在体外扩增分化为DC前体细胞(pre-DC)。培养并收集卵巢癌细胞株SKOV3上清,经透析法浓缩。将上清培养的pre-DC,经不同浓度上清(0%、25%、50%、75%、100%、150%)作用后,用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测pre-DC表面抗原CD123、CD11c、HLA-DR、CD80、CD86的表达。结果:上清促进CD11c和HLA-DR抗原的表达,不促进CD123、CD80、CD86抗原的表达。结论:卵巢癌细胞株上清影响两类DC前体细胞亚群的比例变化,可能通过此途径参与形成腹腔免疫缺陷。     

Fas及FasL表达对大鼠睾丸局部热作用生精细胞凋亡的影响

目的 :探讨 Fas及 Fas L表达对睾丸局部热作用后生精细胞凋亡的影响。方法 :在大鼠睾丸局部受热后 0 .5 d、1 d、3d和 6d,应用流式细胞仪、原位末端标记法 ( TUNEL)检测生精细胞凋亡情况 ;应用流式细胞仪和免疫组化法检测 Fas和 Fas L蛋白表达情况。结果 :与其对照组相比热处理各组生精细胞凋亡明显升高 ( P<0 .0 1 ) ,各热处理组 Fas表达明显增强 ( P<0 .0 1 ) ,Fas L表达亦增强 ( P<0 .0 5 ) ;并且热处理后 Fas及 Fas L阳性表达增强和凋亡增多在发生时间和生精细胞的定位上基本吻合。结论 :睾丸局部热作用可引起生精细胞凋亡增多 ;Fas和 Fas L基因在这方面可能起重要作用     

表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF-Ⅱ)对小鼠1-细胞胚胎体外发育的影响

目的:研究表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)在小鼠早期胚胎体外发育中的作用,以及EGF联合胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-likegrowthfactor-II,IGF-Ⅱ)对小鼠早期胚胎体外发育是否有协同促进作用。方法:①在mKSOM培养液中添加0ng/ml(对照组)、0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml的EGF、10ng/mlIGF-Ⅱ、1ng/mlEGF+1ng/mlIGF-Ⅱ、1ng/mlEGF+10ng/mlIGF-Ⅱ、10ng/mlEGF+1ng/mlIGF-Ⅱ、10ng/mlEGF+10ng/mlIGF-Ⅱ培养小鼠1-细胞胚胎,每组胚胎在培养箱中连续培养120h,每24h观察胚胎发育情况,分别计算2-细胞率、4-细胞率、桑椹胚率、囊胚率和孵化率,并进行囊胚细胞计数。结果:添加1ng/ml、10ng/mlEGF组的囊胚率及孵化率显著增加;EGF+IGF-Ⅱ组较单一添加组、对照组囊胚率及孵化率显著增加(P<0.05),且EGF+IGF-Ⅱ组囊胚细胞计数显著高于其他组(P<0.05),其中10ng/mlEGF+10ng/mlIGF-Ⅱ组的孵化率及囊胚细胞数最高(P<0.05)。结论:EGF浓度在1￣10ng/ml范围内可以提高体外培养鼠胚的囊胚率及孵化率;EGF及IGF-Ⅱ对体外培养鼠胚的发育有协同促进作用;本实验范围内10ng/mlEGF+10ng/mlIGF-Ⅱ为最优组合。     

重组白细胞介素－1β对小鼠胚胎着床的影响

本文报道了重组白细胞介素－１β（ｒＩＬ－１β）对小鼠胚胎着床的影响，并对其作用机理进行初步的探讨。研究证实，ｒＩＬ－１β能够有效地阻断妊娠第３、４天小鼠胚胎着床的发生，此外，ｒＩＬ－１β能致小鼠早期胚胎发育异常，运行滞缓，并改变小鼠胚泡植入阶段受卵巢激素调控的子宫内膜有丝分裂模式，还诱发着床前子宫腔白细胞浸润现象。上述结果表明，ｒＩＬ－１β对抗着床效应是多因素的协同作用。     

LIF及其抗体对小鼠胚胎着床影响的体外研究

目的 :研究外源性白血病抑制因子 (LIF)及其抗体对小鼠胚胎着床的影响。方法 :将妊娠 4d的小鼠胚胎种植于已建立的子宫内膜体外模型上 ,观察不同浓度的LIF及其抗体对小鼠胚胎的粘附、植入及扩展情况。并用RT PCR法测定子宫内膜上皮细胞整合素β3的变化。结果 :不同浓度的LIF促进了胚胎的粘附 (P <0 .0 5 ) ,胚胎的扩展率降低。加入LIF抗体 (5 ,1 0 μg/ml)降低了胚胎的粘附率 (P <0 .0 5 ) ,同时LIF对整合素β3的表达有明显的促进作用 (P <0 .0 1 ) ,加入抗体后整合素β3的表达降低。结论 :LIF可能通过上调整合素β3的表达促进胚胎的粘附和植入     

雌激素对小鼠阴道上皮细胞C-型凝集素表达的影响

目的:探讨雌激素增加假丝酵母菌阴道定植量的分子机制。方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测雌激素组、去势组、动情间期组C57BL/6J雌性清洁级小鼠阴道上皮层中C-型凝集素mRNA的表达。结果:雌激素组及动情间期组小鼠阴道上皮层中均检测到C-型凝集素mRNA的表达,雌激素组相对表达量(1.02±0.16)显著高于动情间期组(0.71±0.57)(P<0.05)。去势组未检测到C-型凝集素mRNA的表达。结论:雌激素可能上调C-型凝集素在阴道上皮细胞的表达。     

阿司匹林对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及其作用机制研究

目的:探讨阿司匹林对卵巢癌细胞凋亡的影响以及对凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的作用。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法分析阿司匹林对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用,用流式细胞术分析方法定量检测细胞凋亡及细胞周期的变化。用RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的表达。结果:阿司匹林对SK-OV3细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈量效和时效的关系;1、5、10mmol/L3个浓度的阿司匹林处理细胞48h后,细胞凋亡率呈剂量依赖性增加,而且G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例升高,细胞被阻滞在G2/M期,细胞周期也发生明显改变;阿司匹林可抑制卵巢癌细胞的bcl-2mRNA表达,而上调bax mRNA的表达。结论:阿司匹林能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡。此作用可能与阿司匹林抑制细胞bcl-2mRNA的表达和上调bax mRNA表达有关。     

蛋白激酶B(AKT)抑制剂对小鼠1-细胞期胚胎分裂的影响

目的:研究蛋白激酶B(AKT)在小鼠1-细胞期受精卵中的作用。方法:激酶活性分析检测2种AKT的抑制剂在小鼠1-细胞期胚胎中对MPF活性的调节;G2/M期的细胞计数检测AKT抑制剂对小鼠1-细胞期胚胎细胞分裂的影响;Western blotting检测AKT抑制剂对小鼠1-细胞期胚胎中pCDC2Tyr15的去磷酸化状态的改变。结果:AKT抑制剂抑制了MPF活性、G2/M期的转换,pCDC2Tyr15的去磷酸化状态。结论:AKT存在于小鼠1-细胞期胚胎中并通过调节MPF活性和pCDC2Tyr15的去磷酸化状态调节细胞分裂的进程。     

米非司酮对人早孕期蜕膜细胞凋亡及其调控基因bcl-2/bax的影响

目的 :探讨米非司酮对早孕期蜕膜组织细胞bcl 2 /bax的影响及与妊娠终止的关系。方法 :用琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法检测凋亡的发生及凋亡细胞的定位 ,用免疫组化法检测bcl 2 /bax蛋白的表达和相互关系。结果 :(1)正常早孕 4 0 + 天蜕膜组织细胞大量凋亡 ,bcl 2蛋白表达量较低 ,bax蛋白有较强表达 ;(2 )正常早孕 5 0 + 天 ,凋亡细胞明显减少 ,bcl 2的表达显著增强 ,bax蛋白表达减弱 ;(3)早孕 5 0 + 天应用米非司酮 ,蜕膜组织出现大量凋亡细胞及明显凋亡带 ,bcl 2蛋白表达明显降低 ,bax蛋白表达较前明显增强。结论 :早孕期米非司酮流产的机制可能与蜕膜组织细胞凋亡异常相关 ,bcl 2 /bax途径可能是其诱导早孕期蜕膜细胞凋亡的重要因素。