尿激酶型血浆纤溶酶原激活物及其受体对胃癌细胞腹膜转移生物学行为的影响

我们选择高表达尿激酶型血浆纤溶酶原激活物（uPA）和高腹膜转移潜能的胃癌细胞系MKN45作为研究对象,观察μPA及其受体（uPAR）对胃癌细胞腹膜转移生物学行为的影响。[第一段]     

纤维蛋白对肾小球内皮细胞表达纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物的作用

目的：观察体外培养人肾小球内皮细胞（GEC）表面原位形成的纤维蛋白对GEC表达纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物（PA／PAI）的影响。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）,酶谱分析法与反向酶谱法分别在基因转录水平与蛋白质活性水平上检测纤维蛋白对GEC表达tPA,uPA gn PAI-1r 作用,纤维蛋白平板法检测纤维蛋白对GEC PA／PAI系统的综合效应,结果：纤维蛋白能够明显促进tPA,uPA与PAI－1的mRNA表达上调,无血清RPMI 1640培养下的GEC几乎检测不到PAI知性,但可检测到PAI－1的活性。纤维蛋白能够浓度依赖性刺激GEC tPA与uPA活性增加以及PAI01的活性增加,呈浓度依赖性与时间依赖性,相同剂量的纤维蛋白原与纤维蛋白的作用相似,放线菌酮与放线菌素D均可抑制纤维蛋白上调GEC表达tPA,uPA与PAI的作用,纤维蛋白平板法显示,纤维蛋白对GEC PA／PAI系统的综合效应是以升高PA活性为主,其活性能够被抑肽酶完全阻断。结论：肾脏局部毛细血[管内沉积的纤维蛋白可能通过对GEC PA／PAI系统的调节发挥其病理作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活物和基质金属蛋白酶9的mRNA表达与胃癌浸润转移的关系

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物mRNA(UPA mRNA)及基质金属蛋白酶9mRNA(MMP-9mRNA)在胃癌中的表达及其与肿瘤类型、生长方式、分化、脉管侵犯、转移和预后的关系。方法 应用原位杂交技术，检测105例胃癌组织中UPA和MMP-9的mRNA。结果 105例胃癌中UPA mRNA及MMP-9mRNA的阳性率均为58．1％；UPA mRNA阳性表达率与组织学类型(r=0．123．P=0．210)和分化程度(r=0．102，P=0．298)无关，而与肿瘤生长方式(r=0．344，P=0．001)、浸润深度(r=0．296，P=0．002)、脉管侵犯(r=0．198，P=0．042)、淋巴结转移(r=0．332，P=0．001)和远处转移(r=0．530，P=0．001)呈正相关；MMP-9mRNA阳性表达率与组织学类型(r=0．143，P=0．145)和分化程度(r=0．102，P=0．298)无关，而与肿瘤生长方式(r=0．267，P=0．006)、浸润深度(r=0．335，P=0．001)、脉管侵犯(r=0．209，P=0．032)、淋巴结转移(r=0．343，P=0．001)和远处转移(r=0．468，P=0．001)呈正相关；UPA mRNA表达水平与MMP-9mRNA呈正相关(r=0．237，P=0．015)；UPA mRNA和MMP-9mRNA阳性表达病例的平均生存时间和5年生存率均明显低于阴性表达的病例。结论 UPAmRNA和MMP-9mRNA的表达可预测胃癌浸润和转移，是指导临床治疗及估计预后的有意义指标。     

尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体高表达增强血管收缩性重塑和内膜增生的研究

目的　探讨血管壁中尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)和其受体 (uPAR)表达与血管收缩性重塑和内膜增生的相关性。方法　建立兔髂动脉粥样硬化再狭窄模型 ,比较内膜和中膜层的uPA、uPAR表达及其与内膜面积和血管重塑指数的相关性。结果　内膜层uPA、uPAR的抗原和mRNA表达明显强于中膜层 (P <0 .0 1) ,血管壁内膜uPA、uPAR的抗原和mRNA表达水平与血管重塑指数呈负相关 (r =-0 .870 0 7,P =0 .0 10 9;r =-0 .860 3 8,P =0 .0 13 0和r =-0 .845 5 5 ,P =0 .0 165 ,r =-0 .862 40 ,P =0 .0 12 5 ) ,与内膜面积呈正相关 (r=0 .92 0 0 0 ,P =0 .0 3 3 0 ;r=0 .90 772 ,P =0 .0 0 47和r=0 .92 14 9,P =0 .0 0 3 2 ;r =0 .90 614 ,P =0 .0 0 49) ,血管重塑指数和血管内膜面积与中膜uPA、uPAR表达无明显相关性。结论　内膜层uPA、uPAR高表达增强了血管重建后血管壁收缩性重塑和内膜增生。     

前交叉韧带损伤后尿激酶型纤溶酶原激活物形成变化的实验研究

[目的]探讨前交叉韧带损伤后尿激酶型纤溶酶原激活物形成变化。[方法]20只新西兰兔一期建立单侧前交叉韧带损伤模型。损伤术前、术后2、4和8周时采用ELISA检测血浆中尿激酶型纤溶酶原激活物含量变化。损伤术后8周时采用HE染色和免疫组织化学检测关节内组织病理变化和尿激酶型纤溶酶原激活物表达情况。[结果]前交叉韧带损伤后血浆尿激酶型纤溶酶原激活物含量变化明显,术后2周时尿激酶型纤溶酶原激活物含量显著增高(P<0.05)。术后8周时组织学检测显示滑膜、软骨和前交叉韧带呈病理改变,组织内尿激酶型纤溶酶原激活物广泛表达、阳性细胞数量增多(P<0.01)。[结论]前交叉韧带损伤后关节腔内多种组织尿激酶型纤溶酶原激活物表达异常,血浆尿激酶型纤溶酶原激活物含量变化明显。     

组织纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂-1与腹腔镜手术的关系

组织纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PA I-1)是纤溶系统的重要组成部分,传统开腹手术,t-PA与PA I-1之间的平衡被打破,导致术后腹腔粘连及血栓形成。腹腔镜手术对人体创伤小,对腹膜刺激少,因此,对t-PA和PA I-1之间的平衡影响减小,术后粘连及血栓形成的发生率及程度也随之降低。本文综述了t-PA和PA I-1与腹腔镜手术方面的研究进展。     

纤溶酶原激活物及其抑制剂与肾脏疾病

纤溶酶原激活物（PA）及其抑制剂（PAI）是调节纤溶系统活性的重要物质,肾脏固有细胞可合成PA和PAI－1,PA／PAI平衡对维持细胞外基质的合成与降解平衡十分重要,本文就PA／API－1在肾脏的合成,分布及其生理功能,肾脏疾病中外周血,肾组织PA／API和尿PA变化及其病理意义进行综述。     

尿激酶型纤溶酶原激活物在动物肾小管上皮细胞转分化中的表达及其意义

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)在动物肾小管上皮细胞转分化(EMT)中的表达及其意义。方法:将64只大鼠分为假手术组和单侧输尿管梗阻(UUO)组,术后3、7、14、28天取肾,观察肾小管间质损伤(TIS)、肾小管间质纤维化(RIF)程度及肾小管基底膜(TBM)破坏程度,免疫组织化学检测u-PA及上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)的变化,并进行统计学分析。结果:UUO组与假手术组相比,在同时间点各检测指标的差异均有统计学意义(P0.01),观察各指标在UUO组内各时间点的差异也均有统计学意义(P0.01)。UUO组u-PA与TBM断裂的肾小管百分比呈正相关(r=0.556,P0.01)。结论:u-PA的表达影响TBM的完整性,参与EMT进程。     

尿激酶及其受体对膀胱癌细胞系侵袭转移影响的体外研究

目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR）与膀胱癌侵袭转移的关系。方法：对BIU-87、T24及EJ细胞系进行体外培养,夹心抗体ELISA法测定细胞培养上清及细胞溶解产物uPA含量,对培养细胞团块行uPAR免疫组化测定,并进行体外人工基底膜侵袭检测。结果：BIU-87、T24和EJ细胞培养上清uPA检测结果分别为（11．77&#177;3．65）ng／ml、（8．70&#177;2．45）ng／ml、（105．9&#177;8．60）ng／ml,EJ细胞培养上清uPA明显高于BIU87和T24细胞系（P〈0．001）。细胞溶解产物uPA结果分别为（1．15&#177;0．40）ng／ml、（0．78&#177;0．34）ng／ml、（1．92&#177;0．56）ng／ml,EJ细胞溶解产物uPA含量明显高于BIU-87、T24细胞溶解产物（P〈0．02,P〈0．01）。EJ细胞uPAR蛋白主要弥散于细胞质,着色强度与数量明显多于T24细胞（P〈0．01）,而BIU-87细胞基本无着色。EJ细胞具有浸润Matrigel的能力,BIU-87、T24无浸润Matrigel能力。结论：肿瘤细胞有uPA的分泌或来源并同时表达uPAR在体外即具备浸润能力,uPA系统在膀胱肿瘤的浸润转移过程中起重要作用。     

Galectin-3蛋白表达与胃癌腹膜转移关系的研究

目的探讨胃癌组织中半乳糖结合蛋白(galectin)-3蛋白表达与胃癌腹膜转移的关系。方法应用鼠抗人galectin-3单克隆抗体和免疫组织化学SP染色法检测35例同期伴腹膜转移胃癌患者的癌旁正常胃黏膜、胃癌原发灶、胃癌腹膜转移灶及淋巴结转移灶中galectin-3蛋白的表达。结果胃癌原发灶、胃癌腹膜转移灶及淋巴结转移灶中galectin-3强表达,且阳性表达率为97%(34/35);胃癌旁正常胃黏膜中galectin-3蛋白表达很弱,阳性表达率为14%(5/35)。正常胃黏膜中galectin-3的表达与胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶之间比较,差异具统计学意义(P<0.05)。胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶3者间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌病灶中的galectin-3检查可能成为判断胃癌术前是否腹膜转移及预后的生物学指标。     

封闭负压引流技术对创面愈合过程纤溶酶原激活剂级联表达的影响

目的研究封闭负压引流技术对急慢性创面纤溶酶原激活剂(plasminogen activator,PA)级联中尿激酶型纤溶酶激活剂(urokinase-type plaminogen activator,uPA)和尿激酶型纤溶酶激活剂受体(urokinase-type plasminogen activator receptor,uPA)表达的影响。方法雄性小家猪5头,背部两侧形成急性创面,分为实验组和对照组,仅实验组动物接受封闭负压引流治疗。分别在治疗前和治疗后第1、3、6、9、12、18、25天于创缘切取标本,用兔抗人uPA和uPAR单克隆抗体按ABC程序进行免疫组织化学染色,并计算uPAA和uPAR的标记指数。人慢性创面6例,清创后进行持续封闭负压引流治疗,在治疗后第13、、5、7天采集创面渗出液,并用ELISA法检测渗出液中uPA和uPAR的含量。结果猪急性创面在封闭负压引流治疗后uPA和uPAR均增加,在第3天达到高峰,然后急速下降,但实验组的基因表达量和染色强度均显著高于对照组。6例人慢性创面进行治疗前uPA和uPAR表达较多,随着治疗时间的延长而逐渐减少。结论封闭负压引流治疗既能上调急性创面伤口周围的表皮角质形成细胞的uPA和uPAR表达,使之迅速增殖迁移;又能通过抑制慢性创面uPA和uPAR表达,从而减少细胞外基质的降解。     

胃癌患者肝转移和腹膜扩散的相关因素及其预后分析

目的 探讨胃癌患者肝转移和腹膜扩散的相关临床病理因素和近远期预后以及姑息性手术对预后的影响。方法回顾性分析1994年8月至2005年7月间胃癌数据库资料中792例患者的临床病理资料和随访结果。结果本组患者肿瘤穿透浆膜、淋巴结转移、肝转移、全胃癌、未分化癌、Borrmann Ⅳ型、女性患者因素与腹膜扩散相关，而Borrmann Ⅳ型、淋巴结转移、腹膜扩散与胃癌肝转移相关（P〈0．05）。肝转移患者1年生存率低于腹膜扩散患者（P〈0．05）；而3、5年生存率两者差异无统计学意义（P〉0．05）。腹膜扩散组中姑息性切除术患者1年生存率高于旁路手术／喂食性造口术和剖腹探查患者（P〈0．05）；而肝转移患者3种手术者1、3、5年生存率比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论有肝转移的胃癌患者近期预后比腹膜扩散患者差；姑息性切除术可改善腹膜扩散胃癌患者的近期生存率。而对肝转移患者影响不明显。     

顺铂联合持续热灌注治疗胃癌腹腔种植转移的临床疗效观察

目的 探讨顺铂（DDP）联合持续热灌注治疗胃癌腹腔种植转移的临床疗效.方法 2009年2月至2012年2月间治疗的84例胃癌腹腔种植转移患者,随机分为观察组和对照组,每组各42例.观察组采用DDP联合腹腔持续热灌注治疗,对照组采用单独DDP腹腔灌注治疗.观察并记录两组患者腹水控制情况、不良反应发生情况.对患者进行随访,统计生存情况.结果 观察组和对照组总有效率分别为71.4％和50.0％,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.两组中位生存期分别为10.3个月和6.0个月.两组不良反应发生率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 DDP联合持续热灌注治疗胃癌腹腔种植转移的临床疗效好,不良反应少,值得临床上进一步推广.     

术中腹腔灌洗液检测对胃癌患者预测腹膜转移及判断预后的临床价值

目的 探讨术中腹腔灌洗液细胞学检测(peritoneal lavage cytology,PLC)和癌胚抗原蛋白测定(pCEA)对胃癌患者术后预测腹膜转移及判断预后的价值。方法 术中采集57例进展期胃癌患者和8例胃良性疾病患者的腹腔灌洗液,进行细胞学检测和放射免疫法测定pCEA水平。结果 胃癌患者腹腔液pCEA阳性率(43.9％)明显高于PLC(26.3％)(P<0.05),PLC和pCEA阳性率与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.05～0.01)。与PLC相比,pCEA对胃癌术后预测腹膜转移有较高的敏感度(94.7％)和较低的假阴性率(5.3％)。PLC阳性组及pCEA阳性组术后1、3、5年生存率均明显低于PLC阴性组及pCEA阴性组(P<0.05)。多因素分析表明pCEA是影响胃癌患者生存率的独立预后因素。结论 对于胃癌患者术后腹膜转移的预测和预后判断,术中pCEA测定是一种较PLC更加灵敏、可靠的指标。     

尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义

目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)及其特异受体 (uPA R)与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。　方法　应用免疫组织化学方法检测 5 1例膀胱移行细胞癌组织中uPA及uPA R蛋白水平的表达。　结果　随膀胱移行细胞癌分级、分期的增高和转移的出现 ,uPA和uPA R表达明显增高 (P值分别 <0 0 1,0 0 5 ,0 0 1)。　结论　uPA及uPA R的阳性表达与膀胱移行细胞癌的浸润和转移能力增强有关 ,且在肿瘤细胞浸润和转移过程中有协同和相互调节的作用     

Postoperative changes in plasma tissue-type plasminogen activator and type I plasminogen activator inhibitor

To clarify the changes which occur postoperatively in intravascular fibrinolysis, plasma levels of tissue-type plasminogen activator (t-PA) antigen, the total plasminogen activator inhibitor type-1 (PAI-1) antigen, and the t-PA-PAI-1 complexes were assayed in this study. Blood samples were taken the morning before surgery, then at 0, 12, 24, 36, 60, 108, and 156h postoperatively in ten patients who underwent radical surgery for thoracic esophageal cancer. The plasma levels of the t-PA and total PAI-1 antigens, and the t-PA-PAI-1 complexes were then measured by enzyme immunoassay. The plasma t-PA and total PAI-1 levels increased significantly in the immediate postoperative period, the percent increase of the latter being much greater than that of the former. Moreover, the calculated free t-PA antigen level was decreased throughout the postoperative period, suggesting postoperative hypofibrinolysis. The platelet count and neutrophil elastase level were significantly correlated with the free t-PA antigen level atr = 0.630,P < 0.001, andr = -0.447,P < 0.01, respectively. The results of this study indicated that postoperative hypofibrinolysis caused by the increased synthesis of PAI-1 may enhance postoperative hypercoagulability, and this may lead to the development of organ damage. Thus, the concentration of the PAI-1 antigen may be a potentially important index for the prediction of postoperative illness.     

Thrombospondin-1 and transforming growth factor beta-1 upregulate plasminogen activator inhibitor type 1 in pancreatic cancer

Controlled degradation of the extracellular matrix by proteases is crucial in tumor cell invasion. We have shown that thrombospondin-1 (TSP-1), through activation of transforming growth factor beta-1 (TGF-β1), regulates the plasminogen/plasmin protease system in breast cancer. To determine whether this occurred in other epithelial neoplasms, we studied the role of TSP-1 and TGF-β1 in the regulation of the plasminogen/plasmin system in pancreatic cancer. ASPC-1 and COLO-3S7 pancreatic cancer cells were treated with TSP-1 or TGF-β1 at varying concentrations. The TSP-1 and TGF-β1-treated cells were also treated with either anti-TSP-1, anti-TSP-1 receptor, or anti-TGF-β1 antibodies. Urokinase plasminogen activator (uPA) and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) expression was determined by enzyme-linked immunosorbent assay. TSP-1 and TGF-β1 promoted a dose-dependent upregulation of ASPC-1 and COLO-3S7 PAI-1 expression. The TSP-1 effect could be blocked with anti-TSP-1 or anti-TGF-β1 antibodies. The TGF-β1 effect could be blocked only with anti-TGF-β1 antibody. Anti-TSP-1 receptor antibody blocked the TSP-1 effect on PAI-1 expression but had no effect on TGF-β1-mediated PAI-1 expression. Neither TSP-1 nor TGF-β1 had an effect on uPA production. We conclude that TSP-1, in a receptor-mediated process that involves the activation of TGF-β1, upregulates PAI-1 expression in pancreatic cancer without an effect on uPA production. Supported in part by National Institutes of Health grants CA65675 and CA69722 (Dr. Tuszysnki). Dr. Berger is the recipient of an American Cancer Society Clinical Career Development Award 96-09. Presented at the Thirty-Eighth Annual Meeting of The Society for Surgery of the Alimentary Tract, Washington, D.C., May 11–14,1997.     

胃癌腹腔灌洗液中免疫球蛋白黏蛋白1mRNA对预测腹膜转移的意义

目的研究T细胞免疫球蛋白黏蛋白1（Tim-1）mRNA在胃癌患者腹腔灌洗液中的表达与其临床意义,探讨预测胃癌腹膜转移的方法。方法收集128例胃癌患者及12例良性病变患者的腹腔冲洗液作为对照组。采用实时定量RT-PCR法检测128例胃癌患者腹腔灌洗液中Tim-1mRNA的表达情况,术后随访半年至3年,根据超声,CT,MRI,或术中的诊断,明确腹膜转移的发生及时间。分析Tim-1mRNA与临床各病理参数关系及出现胃癌腹膜转移时间的关系,统计学分析。结果 128例患者中,57例（44.5%）术后出现腹膜转移,分为4组分析：术后半年出现腹膜转移23例（术后半年组）,术后2～3年出现腹膜转移34例（术后2～3年组）,术后无腹膜转移组71例及对照组12例。术后半年组Tim-1mRNA表达明显高于术后2～3年组,差异有统计学意义（P〈0.05）;这两组Tim-1mRNA表达又明显高于无腹膜转移组和对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;无腹膜转移组和对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。在肿瘤直径≥4cm、低分化、有淋巴结转移、浸润深度T3＋T4期、TNM分期Ⅲ＋Ⅳ期Tim-1mRNA为高表达,组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Tim-1mRNA在胃癌患者腹腔灌洗液中的表达与肿瘤的侵袭转移密切相关,可以作为预测胃癌腹膜转移的方法,Tim-1mRNA表达的高低对胃癌术后腹膜转移的早期和晚期预测有一定的临床意义,优于腹腔灌洗液脱落细胞学的检查。