抗人脑胶质瘤单克隆抗体的制备及识别抗原的提取

目的：制备新的抗人脑胶质瘤单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb)，并提取其识别抗原。方法：以人脑恶性胶质瘤细胞系SHG－44为抗原免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤技术获得稳定分泌抗胶质瘤McAb的杂交瘤细胞株。以酶联免疫吸附测定及免疫组化等方法研究McAb的特性。通过亲和层析法提取该McAb识别的抗原。结果：得到1株稳定分泌抗体、效价高的杂交瘤细胞株，命名为SU－2000。鉴定表明该McAb属IgGl亚类，效价高，特异性高。识别的抗原位于胞膜，可能属于神经外胚层抗原；通过亲和层析法成功地提取出该抗原，十二脂硫酸3钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳证实提取的抗原纯度高，分子量约为75kDa。结论：SU－2000 McAb及其识别抗原可进一步用于相关实验研究。     

抗人脑恶性胶质瘤单克隆抗体的制备及若干方法的改进

用胶质瘤细胞系BT325和人脑胶质瘤组织各免疫Balb/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞P_3×63-Ag_8653融合,经检测筛选,共取得15株分泌抗人脑胶质瘤的单克隆抗体杂交瘤细胞系,对其中E_4-A_6、E_4-B_6、3B_2-A_1三株进行生物学特性分析,证明对人脑恶性胶质瘤有一定特异性,对正常脑组织、正常细胞系无交叉反应。本文着重介绍了用半固体琼脂糖培养和免疫吸附检测法直接制备单克隆抗体的优点以及间接免疫荧光和改良的ELISA检测抗体的方法,应用这些方法使我们的实验取得了稳定而满意的结果。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ39单链抗体的构建及初步表达

目的：研究人脑胶质瘤基因工程单抗。方法：采用基因重组技术分别将抗人脑胶质瘤单抗ＳＺ３９重链和轻链可变区基因片段连接，构建表达载体，并在大肠杆菌中表达。结果：表达的ＳｃＦｖ抗体为可溶性，ＥＬＩＳＡ和ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测证实能特异性地与人脑胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４表面抗原结合，其表达量为２２０μｇ／Ｌ。结论：成功地构建了抗人脑胶质瘤单抗ＳＺ３９ＳｃＦｖ表达质粒，并得到了与胶质瘤细胞表面抗原相结合的单链抗体。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39对脑瘤的导向作用

本文以~(131)I标记抗胶质瘤单克隆抗体SZ-39及正常小鼠IgG,经腹腔注入人脑胶质瘤,室管膜瘤及脑内转移癌裸小鼠模型体内。然后通过γ-照相,组织放射性分布测定及整体组织放射自显影研究SZ-39在体内的分布和对脑瘤的导向作用。结果显示~(131)I标记McAbSZ-39可选择性地在胶质脑内浓集,γ-照相能清晰显示肿瘤影像。表明McAbSZ-39在人脑瘤裸小鼠体内具良好特异性、对胶质瘤有明显导向作用。提示其潜在的临床应用价值。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39特异性及其识别抗原的初步鉴定

以人脑恶性胶质瘤细胞系 SHG-44为抗原免疫BALB/c 小鼠,通过杂交瘤技术获得了一株稳定地分泌抗胶质瘤细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株 SZ-39。经 ELISA、间接免疫荧光法和 ABC 免疫组化法分别检测了 SZ-39与各种肿瘤和正常细胞,脑瘤和正常人体组织的反应性。结果显示 SZ-39与10种被检测恶性胶质瘤细胞系中9种发生强结合反应,而与血液细胞等7种正常细胞及脑组织等12种人体组织无交叉反应。ABC 免疫组化检查了50例颅内肿瘤,结果提示 SZ-39与84.7%星形细胞瘤发生反应,尤以恶性星形细胞瘤反应最强。McAbSZ-39在移植性胶质瘤裸小鼠体内显示出良好的特异性。经免疫转移电泳法证实该抗体识别抗原为胶质瘤细胞膜上 Mw180000糖蛋白。     

胶质瘤基因工程单链抗体的制备及其抗瘤效应的初步研究

目的：构建并高效表达抗胶质瘤单链抗体（ScFv)，为基因工程双功能抗体及免疫毒素的制备奠定基础。方法：以抗胶质瘤杂交瘤细胞重、轻链可变区基因构建ScFv基因，并克隆入pET－20b表达载体，在大肠 杆菌BL21 DE3中诱导表达，以Western印迹及酶联免疫吸附测定（ELISA）检测表达产物。结果：测序证实基因构建正确，表达产物相对分子质量（Mr）为28000，表达量占菌体总蛋白的15．0％，且保留了胶质瘤相关抗原的特异结合活性。结论：初步得到有活性的胶质瘤ScFv，为脑肿瘤的分子导向诊治提供了新的选择。     

转铁蛋白介导的单克隆抗体治疗胶质瘤动物模型

目的观察转铁蛋白受体单链抗体Fv片段介导的Survivin-siRNA治疗胶质瘤动物模型的效果。方法构建雌性裸鼠的胶质瘤动物模型,设计Survivin-siRNA,构建Survivin-siRNA质粒,构建单链Fv片段抗体-转铁蛋白,将单链抗体-转铁蛋白(scFV)与Survivin-siRNA结合。实验分为对照组、单纯质粒组、对照基因质粒组(Si-M组),Survivin-siRNA质粒组(SiS组),单链抗体Fv片段-转铁蛋白组(scFV组),转铁蛋白受体单链抗体Fv片段Survivin-siRNA组(Si-S-P-scFv组)。分别观察各组裸鼠脑内Survivin蛋白表达与各组裸鼠生存时间。结果小鼠Survivin蛋白表达,Si-S组受到轻度抑制,Si-S-P-scFv组受抑制较强(P0.01)。小鼠生存时间,Si-S组高于对照组(P=0.02);与对照组和Si-S组比较,Si-SP-scFv组小鼠生存时间最长(分别为P0.001,P=0.018)。结论转铁蛋白受体单链抗体Fv片段介导的Survivin-siRNA可较理想通过胶质瘤动物模型的血-脑脊液屏障,能明显延长实验动物生存时间。     

关于抗Aβ单克隆抗体的临床应用建议（2024版）

最新研发的抗Aβ单克隆抗体陆续在国内外获批上市,并逐渐应用于我国临床实践。为促进抗Aβ单克隆抗体在我国阿尔茨海默病治疗中更合理、安全的应用,本文结合抗Aβ单克隆抗体现有临床试验证据及阿杜卡单抗在上海交通大学医学院附属瑞金医院海南医院的临床应用经验,总结抗Aβ单克隆抗体的临床应用建议,包括临床用药指征、用药前评估及准备、用药时医嘱及注意事项、用药后临床监测,旨在为临床医师提供翔实的用药指导和建议。     

H12单克隆抗体荧光标记活体脑胶质瘤的实验研究

目的 :识别肿瘤边界 ,确保正常神经组织不受损伤的前题下更完全地切除脑胶质瘤。方法 :FITC标记的单克隆抗体 40 0 μg/只 ,腹腔注射或局部点染脑胶质瘤C6细胞颅内肿瘤裸鼠模型 ,共聚焦激光扫描显微镜观察。结果 :C6胶质瘤本身和肿瘤瘤周水肿区被染成绿色 ;正常脑组织未被染色 ;镜下可以辨别经FITC标记单克隆抗体特异结合的肿瘤组织与正常脑组织之间的界限 ,瘤周水肿区存在一个显著的荧光辉度渐变带。结论 :该显像技术可用于肿瘤边界的确定 ,为脑胶质瘤显微外科手术的彻底性提供了理论和实践基础     

褪黑激素抗胶质瘤作用体外试验研究

报告了褪黑激素（ＭＬＴ）抗胶质瘤作用的体外试验。采用生长曲线、集落形成率、蛋白含量测定、核仁组织区定量研究及抗增殖细胞核抗原ｋｉ－６７单抗免疫组化分析，表明ＭＬＴ对ＴＪ８６１人脑恶性星形细胞瘤体外细胞系的细胞增殖有明显抑制作用。应用流式细胞术分析细胞周期时相发现ＭＬＴ使细胞阻滞于Ｇ２／Ｍ期。此外，ＭＬＴ尚可明显减少肿瘤细胞的多胺合成。因此，ＭＬＴ的抗胶质瘤增殖作用值得进一步研究。     

胶质瘤抗血管生成治疗的实验研究

目的 研究VEGF反义寡脱氧核苷酸(AODN)对大鼠C6胶质瘤生长的影响,探讨抗血管生成作为胶质瘤辅助治疗新途径的可能性。方法 制备大鼠皮下C6胶质瘤模型,在接种细胞后不同时间点局部给予VEGF-AODN和其他处理因素,观察皮下肿瘤形成情况,测量肿瘤体积及重量,TUNEL法和电镜技术检测瘤细胞凋亡。结果 接种72h后开始局部注射反义寡核苷酸,使大鼠皮下C6胶质瘤的成瘤潜伏期延长,为(25.13±3.00)d,肿瘤重量减轻,为(1.13±0.17)g;皮下局部肿瘤形成后连续注射AODN,使肿瘤体积缩小,瘤细胞凋亡增加,瘤内坏死区扩大,但对细胞增殖无明显影响;电镜观察到AODN治疗组微血管基膜增厚,管径变小。结论 抗血管生成治疗可望成为胶质瘤治疗的一种辅助手段,具有临床应用前景。     

抗人活化血小板单克隆抗体在脑血栓诊断中的应用研究

利用抗人活化血小板α-颗粒膜蛋白(α-Granule Membrane Protein,GMP-140)单克隆抗体SZ-51经放射免疫法评估22例急性脑血栓患者体内血小板的活化程度。结果为血浆内GMP-140的含量在脑血栓急性期显著增高(P<0.01),缓解期恢复正常,血小板表面GMP-140分子数未见显著改变,提示血浆内GMP-140的浓度可作为脑血栓急性期体外诊断新的参考指标。当兔颈动脉植入人血栓并用~(125)I-SZ-51作为示踪剂,4h后离体血栓与血液的放射活性比值(T/B)高达6.8:1,而用~(125)I-IgG时T/B值仅为1.4:1,提示单克隆抗体SZ-51在体内能与血栓结合,为脑血栓新的体内定位诊断方法提供了一定的理论依据。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ－39轻链可变区基因的克隆与序列分析

从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总ＲＮＡ，并以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）柱纯化ｍＲＮＡ，经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）直接扩增出３１８ｂｐ的轻链可变区（ＶＬ）ｃＤＮＡ片断，经核苷酸序列分析研究，证实已获得了ＳＺ－３９单抗轻链可变区基因。这为今后进一步制备基因工程抗体打下基础。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ—39轻链可变区基因的克隆与序列分析

从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总ＲＮＡ，并以Ｏｌｉｇｏ柱纯化ｍＲＮＡ，经逆转录－聚合酶链反应直接扩增出３１８ｂｐ的轻链可变区ｃＤＮＡ片断，经核苷酸序列分析研究，证实已获得了ＳＺ－３９单抗轻链可变区基因。这为今后进一步制备基因工程抗体打下基础。     

L-NAME抗C6胶质瘤细胞增殖的体外研究

一氧化氮 (NO)对实体肿瘤具有促进生长作用 ,但它对离体肿瘤细胞生长、分化作用尚存在争议。该实验通过体外培养 C6细胞株检测应用 NO合酶 (NOS)抑制剂 N-硝基精氨酸甲酯 (L-NAME)对其生长的影响。1　材料和方法　取对数生长期细胞 ,加 0 .2 g/ L EDTA-1 .2 5 g/ L 胰蛋白酶 (1     

荧光素钠引导下胶质瘤切除的临床应用及研究进展

胶质瘤具有弥漫浸润性生长的特点,手术最大程度且安全地切除肿瘤是目前胶质瘤治疗的关键,也是对临床工作者的重要挑战。荧光引导技术利用荧光显影药物标识肿瘤,提高肿瘤边界辨识度,帮助确定安全切缘,改善治疗效果。荧光素钠(FLS)为常用的荧光显影药物,具有操作简便,效果直观等特点,同时也具有一定局限性。本文对FLS在胶质瘤显微手术切除中的临床应用、研究进展、优缺点和推广前景进行综述。     

生酮饮食抗胶质瘤的作用机制研究

生酮饮食具有抗胶质瘤作用,近年来受到学者们广泛关注。本文阐述了生酮饮食通过产生大量酮体替代葡萄糖为机体供能,改变了肿瘤患者体内的能量代谢方式,利用肿瘤细胞高度依赖葡萄糖、线粒体缺乏酮体代谢相关酶等特征,可能通过限制葡萄糖供应、降低胰岛素和胰岛素样生长因子水平、提高抗氧化应激能力、抑制炎症反应及增强抗肿瘤免疫等多种途径发挥抗肿瘤作用,这些机制为生酮饮食治疗胶质瘤提供了理论依据。     

颅内胶质瘤术中超声的临床应用

目的 探讨颅内胶质瘤术中超声的使用方法及其价值。方法 将2011年2月至2013年2月收治的72例颅内胶质瘤手术患者分为超声组（33例,使用术中超声）和对照组（39例,未使用术中超声）。超声组使用术中超声对肿瘤进行定位,引导术者选择合适的手术入路,并对切除后的瘤腔进行探查,实现最大程度地安全切除肿瘤。对比分析两组患者肿瘤的定位率和全切率以及手术时间。结果 超声组肿瘤定位准确率（100%）显著高于对照组（82.1%,32/39;PP<0.05）,超声组手术时间[（85.7±31.1）min]明显少于对照组[（117.4±40.8）min;>P<0.05]。低级别和高级别胶质瘤在超声图像上有不同的特征性表现。>结论 术中超声具有低成本、准备时间短、方便快捷、实时监测、可重复和无辐射等优点,是胶质瘤手术重要的辅助工具,在胶质瘤定位和实时监测残余肿瘤方面具有重要价值。