镧对仔鼠海马核转录因子-κB表达影响

目的探讨亚慢性氯化镧(La Cl3)暴露对子代大鼠海马组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法健康成年雌性Wistar大鼠24只,随机分为对照组及0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组,染镧组仔鼠自雌鼠受孕至断乳后1个月通过自由饮水摄入镧;利用免疫组化法检测海马p-IKKα/β的分布和表达;应用Western blot法检测海马组织p-IκBα和p-NF-κBP65的表达。结果 0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马CA1区p-IKKα/β表达分别为(54.72±10.04)、(40.73±4.90)、(32.99±5.42),CA3区表达分别为(64.80±8.27)、(47.78±4.92)、(36.17±7.71),DG区表达分别为(303.67±34.78)、(166.83±29.8)、(87.01±17.40);CA1、CA3、DG区各染镧组仔鼠海马3区的p-IKKα/β表达与对照组比较,除DG区0.25%La Cl3组外其他各染镧组仔鼠海马p-IKKα/β表达均低于对照组(P<0.05);0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达IDV值分别为(0.58±0.06)和(0.46±0.06)、(0.49±0.07)和(0.36±0.08)、(0.36±0.09)和(0.25±0.08),均低于对照组的(0.68±0.05)和(0.56±0.08)(P<0.05),仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达均与La Cl3染毒剂量呈负相关(r=-0.994、-0.978,P<0.05)。结论亚慢性La C13染毒可引起子代大鼠海马细胞NF-κB活性降低,可能是镧引起学习记忆能力下降的机制之一。     

矽肺患者外周血的单核细胞核转录因子-κB水平

目的观察矽尘接触者和矽肺患者外周血单核细胞核转录因子-κB(NF-κB)水平的变化,探讨NF-κB在矽肺发生发展中的作用。方法采用ELISA法对100名不接触粉尘的对照人群,200名接触矽尘1年以上的接尘工人,32名矽尘作业观察对象(原诊断0+患者)及79例矽肺患者,检测其外周血单核细胞胞核蛋白中的NF-κB水平。结果矽肺组NF-κB水平较对照组和接尘组明显升高,接尘组NF-κB水平较对照组明显升高,差异均有统计学意义;在不同期别矽肺患者中NF-κB水平随矽肺期别升高也有升高的趋势。多元回归分析也表明NF-κB水平与接尘情况和矽肺的病情有关。结论接尘组和矽肺组外周血单核细胞NF-κB均有升高,此种升高除与矽肺的发病有关外,与矽肺的严重程度也有关,提示对外周血单核细胞NF-κB水平的监测可能成为矽肺发病预测、预后评估的生物标志物,而适当干预NF-κB的活化可能是矽肺防治新的干预靶点。     

雌马酚抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖及机制研究

目的研究雌马酚对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用并初步探讨其分子机制。方法利用MTT法测定不同浓度(0.1、0.5、1、5和10μmol/L)雌马酚对MCF-7细胞增殖率的影响,流式细胞仪测定雌马酚对细胞凋亡率和细胞周期的影响,Western blot测定bag-1、bcl-2、VEGF、ERK1/2、p-ERK1/2、p38以及p-p38蛋白表达。结果随着雌马酚浓度升高,人乳腺癌细胞MCF-7的增殖率下降(P0.05),细胞凋亡率升高,细胞周期被阻滞于G0/G1期,雌马酚可以下调bag-1、bcl-2、VEGF、p-ERK1/2以及p-p38蛋白表达,并具有一定剂量-效应关系。结论雌马酚可以通过促进细胞凋亡并阻滞细胞周期于G0/G1期,以及下调bag-1、bcl-2、VEGF蛋白、抑制ERK1/2和p38蛋白磷酸化的方式实现对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制。     

肿瘤坏死因子-α诱导核转录因子-κB信号通路在肺纤维化分子机制中作用

尘肺是以肺组织弥漫性纤维化为主的全身性疾病,由职业活动中长期吸人生产性粉尘后在肺内潴留而引起[1].其临床表现主要有咳嗽、咯痰、胸痛、胸闷和气短等,易合并呼吸道感染、慢性支气管炎、肺心病等,最终因呼吸衰竭、心力衰竭而危及生命[2].目前对肺纤维化的研究已进入细胞、细胞因子和信号转导通路等领域.通过参与调控肺纤维化的细胞因子、效应分子,特别是干预介导肺纤维化的重要信号转导分子,将为肺纤维化的治疗提供新的策略和方法.近年来对肿瘤坏死因子(TNF)-α和核转录因子-KB (NF-κB)在尘肺发病过程中作用的研究较为深入.本文就TNF-α和NF-κB在肺纤维化形成中的作用进行综述.     

迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数的建立

目的建立迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数,为准确检测核转录因子-κB奠定基础。方法分子探针标记,细胞的分离、培养和核转录因子的提取,NF-κB聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果实验条件为300V,电泳18分钟后,对分子探针活性没有影响,分子探针与核转录因子结合特异性良好,电泳条带清晰。结论本文建立的方法省时、简便,敏感性高、特异性强。     

S-雌马酚通过ERβ调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路改善油酸钠诱导的BRL细胞脂肪变性

目的 观察S-雌马酚(S-equol,S-Eq)对油酸钠(sodium oleate,NaOL)诱导的BRL细胞脂肪变性的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养BRL细胞,以不同浓度的S-Eq、NaOL、PHTPP处理48 h,通过CCK-8法检测细胞存活率、油红O染色及细胞TG检测确定诱导BRL细胞脂肪病变模型的NaOL以及S-Eq、PHTPP干预的适宜浓度。将细胞分为对照组、模型组,模型+S-Eq低、高浓度组(10^-6 mol/L,10^-5 mol/L),模型+雌二醇干预组(estradiol,E210^-7 mol/L),模型+S-Eq(10^-5 mol/L)+PHTPP (10^-6 mol/L)。干预48 h后检测细胞TG、TNF-α、IL-6含量,qRT-PCR检测细胞TNF-α、IL-6 mRNA表达水平,Western bloting检测细胞ERβ,PI3k,AKT,p-AKT,p-p65蛋白表达水平。结果与对照组比较,当NaOL浓度为0.48 mmol/L时BRL细...     

SiO2对人肺泡巨噬细胞核因子-κB表达的意义

目的：探讨二氧化硅（SiO2）对人肺泡巨噬细胞核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）表达的影响。方法：收集硅肺患者肺泡灌洗液中的肺泡巨噬细胞（AM），在体外再次染尘和无血清培养基：培养3、6、12、18、24、36h，用免疫组化检测AM中NF-κB的表达。结果：处理组（AM二次染尘，S组）NF-κB的表达明显上调，并且随刺激时间不同表达量不同，于18h达高峰。处理组NF-κB的表达在3、6、12、18、24、36h均高于对照组（ 矽肺患者AM，C组）。结论：SiO2可诱导AM的NF-κB的高表达，提示其在肺纤维化过程中起重要作用。     

核因子-κB在胚胎发育、毒物致畸中研究进展

胚胎及胚胎微环境的细胞因子对于维持正常妊娠很重要,其精细调控细胞的增殖、分化和凋亡.核转录因子-κB是调节凋亡的关键因子,通过对多种基因表达的调节,对妊娠的维持,胚胎发育有重要作用.该文对核转录因子-κB家族的基本组成结构和核转录因子-κB在胚胎发育及毒物致畸中的作用作以综述.     

矢车菊素-3-O-葡糖苷干预核因子-κB通路抑制过氧化氢诱导的细胞凋亡

目的研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)对H₂O₂诱导人胚肾细胞(human embryonic kidney 293 cells,HEK-293)损伤的抗凋亡作用。方法以0.4 mmol/L H₂O₂诱导HEK-293细胞凋亡,1.25、5、20μmol/L C3G预处理,检测凋亡细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率和线粒体膜电位,免疫印迹法和反转录定量PCR(qRT-PCR)检测核因子(nuclear factor,NF)-κB凋亡信号通路中P65蛋白和mRNA表达量。结果 H₂O₂损伤细胞后,LDH释放率提高[(100±5.53)%比(57.28±4.83)%],线粒体膜电位下降[(55.97±1.89)%比100%],P65蛋白[(122.73±7.45)%比100%]和mRNA[1.66±0.06比1.00]表达均显著上调,差异均有统计学意义(P<0.0...     

活性氧对核因子-κB和低氧诱导因子-1的调控

氧是需氧生物必不可少的基本物质.需氧细胞在代谢过程中产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS),不仅参与细胞的凋亡、坏死;还作为信号分子,参与细胞信号转导、激活转录因子、影响基因表达,以协调应答各种氧分压变化.     

核因子-κB、p53及Bcl-2在铅诱导PC12细胞凋亡中的作用

目的探讨核因子κB(NFκ-B),p53及Bcl-2在铅诱导PC12细胞凋亡中的作用。方法应用细胞培养、流式细胞术、RT-PCR、Western Blot的方法分析NFκ-B、p53、Bcl-2基因的表达情况,研究醋酸铅诱导PC12细胞凋亡及其分子机理。结果PC12细胞经不同浓度醋酸铅(100、200和400μmol/L)处理24h后,用流式细胞仪检测其凋亡率(n=3),铅组凋亡率明显高于对照组,改变呈剂量依赖性。差异有显著性(P<0.05)。RT-PCR结果显示NFκ-B p65 mRNA、p53 mRNA转录水平随铅剂量升高而升高(P<0.05),两基因表达的改变呈剂量依赖性。Western Blot结果显示,表明随着铅浓度的增加,Bcl-2蛋白表达逐渐降低。结论铅诱导PC12细胞凋亡的这种效应可能与增强NFκ-B及p53基因的活性、降低Bcl-2基因的活性有关。     

氟对原代培养大鼠海马细胞周期及细胞凋亡和核因子-κB表达的影响

目的 探讨氟对原代大鼠海马细胞存活、细胞周期、凋亡和核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 原代培养大鼠海马细胞分别暴露于20、40和80μg/ml氟化钠24 h后,采用噻唑蓝(MTT)、流式细胞术(FCM)、逆转录PCR(RT-PCR)分别检测大鼠海马细胞存活情况、细胞周期分布、凋亡率、NF-κB表达水平.结果 与对照组比较,80 μg/ml剂量组海马细胞存活率下降(P＜0.05);40、80 μg/ml剂量组凋亡率和S期细胞百分率皆显著高于对照组(P＜0.05),各剂量组NF-κB mRNA显著高于对照组(P＜0.05).结论 一定剂量氟可抑制海马细胞存活,诱导NF-κB mRNA表达和凋亡发生.氟对发育中海马细胞NF-κB表达水平的影响可能是氟神经毒性的机制之一.     

核因子-κB与缺血缺氧所致疾病的关系

核因子-κB是细胞中一个重要转录调控因子，存在于多种类型的细胞中。机体组织器官受到缺血缺氧的创伤后，核因子-κB被激活，从胞浆中进入细胞核内，结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点，诱导基因转录，参与缺血缺氧导致心脏，肾脏，脑等重要器官的损伤，乃至危及生命。     

核因子-κB与缺血缺氧所致疾病的关系

核因子 κB是细胞中一个重要转录调控因子 ,存在于多种类型的细胞中。机体组织器官受到缺血缺氧的创伤后 ,核因子 κB被激活 ,从胞浆中进入细胞核内 ,结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点 ,诱导基因转录 ,参与缺血缺氧导致心脏 ,肾脏 ,脑等重要器官的损伤 ,乃至危及生命。     

NF-κB与Caspase-9在大豆异黄酮诱导人乳腺癌细胞凋亡中的作用

目的探讨核转录因子NF-κB和Caspase-9在大豆异黄酮诱导人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的作用和可能的机制。方法大豆异黄酮处理MCF-7细胞后,采用流式细胞仪检测乳腺癌细胞凋亡、线粒体心磷脂的变化,及免疫荧光显微技术检测线粒体中细胞色素c释放情况;并应用酶联免疫吸附方法检测了细胞凋亡中Caspase-9及NF-κB活性变化。结果 80mg/L大豆异黄酮处理乳腺癌MCF-7细胞24h后,细胞发生凋亡,凋亡率为7.56%;随时间的延长凋亡率不断上升,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01);同时,细胞线粒体心磷脂丢失增多,即大豆异黄酮处理组中心磷脂含量降低的凋亡细胞所占比例为(21.33±5.38)%,高于对照组(4.34±1.85)%,差别有统计学意义(P0.01)。大豆异黄酮处理后,线粒体细胞色素c释放增多,Caspase-9活性增加,24h其活性为(13.65±3.42)μmol(/L·h·mg)蛋白,并随时间的延长而增加。经大豆异黄酮处理后,乳腺癌细胞NF-κB活性被抑制,24hNF-κB活性为0.19±0.03,低于对照组0.21±0.02,差别有统计学意义(P0.05)。结论大豆异黄酮触发了线粒体途径而诱导肿瘤细胞凋亡,其可能机制为引发线粒体心磷脂丢失,造成线粒内膜损伤,导致细胞色素c释放和Caspase-9激活,同时抑制NF-κB活性,最终诱导细胞发生凋亡。     

细胞核转录因子-κB与地方性氟中毒骨骼病变

地方性氟中毒(简称地氟病)是由于长期生活在高氟环境中摄入过量的氟而引起的慢性全身中毒性病变,中国是地方性氟中毒流行最为严重的国家之一。氟对骨组织具有特殊的亲和力,吸收后>90%蓄积于此。     

核因子-κB在左卡尼汀抑制肝细胞氧化损伤中的作用

目的研究左卡尼汀(L-carnitine)抑制过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导的肝细胞损伤作用是否与核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)有关。方法 CCK-8及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法测定核因子-κB抑制剂对过氧化氢诱导HL7702肝细胞损伤的影响;蛋白质印迹法检测左卡尼汀对过氧化氢损伤HL7702肝细胞核因子-κB表达的影响;细胞免疫荧光染色法测定核因子-κB的核易位情况;凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)分析核因子-κB的DNA结合活性。结果与过氧化氢损伤组相比,核因子-κB抑制剂组细胞活性明显升高,乳酸脱氢酶释放率降低(P0.05,P0.01);过氧化氢损伤后细胞核核因子-κB表达增加,左卡尼汀预孵育对过氧化氢诱导的核因子-κB核转位具有明显抑制作用(P0.01);左卡尼汀对过氧化氢诱导的核因子-κB DNA结合活性增加也有抑制作用。结论左卡尼汀通过抑制核因子-κB活性而抑制过氧化氢诱导的肝细胞损伤。     

亚砷酸钠对HaCaT细胞NF-κB蛋白表达的影响

目的 研究不同浓度亚砷酸钠（NaAsO2）对人角质形成细胞株（HaCaT）核转录因子（NF-κB）蛋白表达的影响及其与活性氧（ROS）及过氧化物酶（CAT）的关系。方法 用流式细胞仪检测细胞内ROS水平，用紫外速率直接法测定CAT活性，用蛋白印迹（western blot）方法检测NF-κB蛋白表达。结果 从2．5μmol／L组开始。细胞内ROS水平增高，且呈剂量一反应关系；5μmol／L以上组CAT活性明显下降，5μmol／L以上组NF-κB表达减弱（P〈0．05）。结论 砷诱导HaCaT细胞氧化应激，抑制NF-κB蛋白的表达。     

核因子-κB反义核酸对前炎症细胞因子表达的实验研究

目的研究核因子(NF)-κB反义寡核苷酸对NF-κB表达及其下游前炎症细胞因子表达的影响.方法将不同浓度经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(PS-AODN)导入培养的RAW 264.7细胞中(与脂多糖预孵育),设立空白对照组和错义寡核苷酸(MODN)组.采用免疫组织化学SABC法检测细胞中NF-κB p65、内皮细胞黏附因子(ICAM)、一氧化氮合酶(iNOS)的表达.结果AODN组的NF-κBp65,ICAM,iNOS表达较空白对照组及MODN组明显降低(P＜0.05),且在1.0～5.0 μmol/L范围内AODN的作用随其浓度增加而增加.结论AODN能有效阻抑NF-κB在脂多糖刺激下的表达,从而抑制各前炎症细胞因子的表达.