胎盘中水通道蛋白9的表达水平与子痫前期发病的关系

【目的】本实验目的在于观察子痫前期患者胎盘中AQP-9蛋白表达,探讨子痫前期患者AQP-9在胎盘中表达量的变化及其与子痫前期发病间的关系。【方法】选择2009年7月-2009年11月晚期妊娠并行剖宫产术的子痫前期产妇20例（轻度子痫前期组10例,重度子痫前期组10例）,无其它妊娠合并症及并发症。随机选择同期无妊娠合并症及并发症的正常产妇10例为对照组。免疫组织化学（Immunohimchemistry;IHC）sp法观察正常组及子痫前期胎盘组织中AQP-9蛋白表达。【结果】免疫组化显示AQP-9在胎盘合体滋养细胞有表达,并随着病情的加重,表达量呈上升趋势,差异有统计学意义。【结论】通过免疫组化可知AQP-9分布于细胞膜,正常组AQP-9轻微表达于细胞膜,轻度子痫前期组AQP-9表达强于正常组,重度子痫前期组AQP-9较正常组,轻度子痫前期组表达升高,说明AQP-9在正常胎盘组织有表达,为维系胎儿的健康发育发挥重要作用。但在妊娠期高血压疾病中AQP-9表达增高,并与子痫前期的轻重程度成正相关。     

子痫前期胎盘组织瘦素的表达与病情的相关性研究

目的：探讨子痫前期患者胎盘组织瘦素基因的表达水平与病情的关系。方法：对照组选择正常孕妇15例,试验组选择妊娠期高血压患者10例、子痫前期轻度组10例、子痫前期重度组10例。采用RT—PCR技术检测各组胎盘组织瘦素的表达水平,同时检测子痫前期患者24小时尿蛋白定量及平均动脉压。结果：（1）子痫前期重度组、轻度组患者胎盘组织瘦素表达水平分别为0．507±0．036、0．476±0．023,均高于对照组,差异有统计学意义（t=4．97,P〈0．01;t=3．12,P〈0．01）。重度组高于轻度组,差异有统计学意义（t=2．68,P（0．05）;妊娠期高血压组胎盘组织瘦素表达水平为0．465±0．024,与对照组比较,差异无统计学意义（t=1．94,P〉0．05）。（2）子痫前期轻度组及重度组胎盘组织瘦素表达与患者尿蛋白及平均动脉压（MAP）有正相关关系（P〈0．05）。（3）子痫前期早发组与晚发组比较,胎盘组织瘦素表达水平,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：（1）子痫前期患者胎盘组织瘦素表达水平明显升高。（2）子痫前期患者胎盘组织瘦素表达水平与病情有关。     

上皮性卵巢癌中bcl-2/bax比值及CA125半衰期与化疗耐药的关系

目的探讨上皮性卵巢癌患者bcl-2/bax比值及CA125半衰期与化疗耐药的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测84例上皮性卵巢癌组织中bcl-2蛋白及bax蛋白表达情况,并计算其比值;同时术前及术后每周用放射免疫法动态监测患者血清CA125水平,计算CA125半衰期,分析bcl-2/bax比值及CA125半衰期与卵巢癌患者化疗耐药的关系。结果患者CA125半衰期>4周及bcl-2蛋白高表达和bax蛋白低表达(bcl-2/bax>1)与化疗耐药有关(P<0.05);bcl-2蛋白高表达和bax蛋白低表达(bcl-2/bax>1)在术前未化疗组中的比例高于术前化疗组(P<0.05);bcl-2/bax比值与CA125半衰期呈正相关(P<0.05)。结论化疗可以调节bcl-2蛋白和bax蛋白表达,bcl-2蛋白高表达和bax蛋白低表达(bcl-2/bax>1)及CA125半衰期>4周可预测化疗耐药情况。     

母胎界面内脂素、MMP-2、MMP-9的表达及其在妊娠期高血压疾病发病中的意义

目的观察内脂素、MMP-2、MMP-9在子痫前期患者母胎界面的表达情况,探讨母胎界面的内脂素与子痫前期发病的关系。方法选择子痫前期患者40例,其中子痫前期轻度20例,子痫前期重度20例;选择正常足月妊娠孕妇40例为对照组。采用免疫组化法,检测2组胎盘中内脂素、MMP-2、MMP-9的表达情况。结果对照组胎盘中内脂素免疫组化光密度值为0.35±0.05,轻度子痫前期组为0.43±0.01,重度子痫前期组为0.52±0.01。对照组MMP-2、MMP-9免疫组化光密度值为0.21±0.02,0.19±0.01;轻度子痫前期组分别为0.16±0.02,0.15±0.01;重度子痫前期组分别为0.13±0.02,0.13±0.01。子痫前期组内脂素与MMP-2、MMP-9之间存在负相关性,MMP-2与MMP-9之间存在着正相关性。结论母胎界面胎盘组织中内脂素的表达随子痫前期病变严重程度的增加而升高,内脂素、MMP-2、MMP-9是妊娠期母胎界面胎盘组织中的重要因子,可能参与了子痫前期的发病。     

扶正抑瘤颗粒对H22瘤细胞bax、bcl-2及 caspase-3蛋白表达的影响

目的观察扶正抑瘤颗粒对H 22瘤细胞bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响.方法采用免疫组织化学方法检测瘤组织切片中bax、bcl-2及caspase-3的蛋白表达.结果扶正抑瘤颗粒各治疗组bax及caspase-3的IOD值均高于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);扶正抑瘤颗粒各治疗组bcl-2的IOD值均低于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论通过促进bax及caspase-3的蛋白表达、抑制bcl-2基因的蛋白表达来诱导H22瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应.     

康泉方对大鼠前列腺组织凋亡调控基因bax、bcl-2mRNA表达的影响

目的 探讨康泉方对实验性大鼠前列腺组织凋亡调控基因bax mRNA、bcl-2 mRNA的影响.方法 采用大鼠去势后注射丙酸睾丸酮致前列腺增生法造模,同时灌胃给药30天后,处死大鼠取前列腺组织并测量湿重,RT-PCR法检测各组前列腺腹叶组织bax mRNA、bcl-2 mRNA的表达.结果 与模型组比较,康泉各剂量组前列腺湿重显著下降（P＜0.05或P＜0.01）;康泉高剂量组前列腺湿重与正常组比较,差异无显著性（P＞0.05）;与模型组比较,康泉各剂量组bax mRNA及bax/bcl-2显著升高（P＜0.01）,bcl-2 mRNA显著下降（P＜0.01）;康泉高剂量组bax mRNA、bcl-2 mRNA及bax/bcl-2与正常组比较,差异无显著性（P＞0.05）.结论 康泉方对大鼠良性前列腺增生有明显的治疗作用,其作用机理可能通过调节前列腺组织bax mRNA、bcl-2 mRNA表达,促进前列腺细胞凋亡,并呈明显量效关系.     

高敏C反应蛋白和同型半胱氨酸与妊娠期高血压疾病的关系

目的:探讨高敏C反应蛋白(hs-CRP)和同型半胱氨酸(HCY)与妊娠期高血压疾病的关系。方法:选择HDCP孕妇57例,正常孕妇35例作为对照组;采用乳胶增强免疫比浊法测定h-CRP、高效液相色谱法测定HCY。结果:与正常对照组相比,轻度子痫前期和重度子痫前期组h-CRP、HCY均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与轻度子痫前期组相比,重度子痫前期组hs-CRP、HCY均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);hs-CRP与HCY水平呈明显正相关(r=0.642,P<0.01)。结论:hs-CRP和HCY水平与HDCP的发生和发展有关,且两者呈明显正相关。     

组织因子及其抑制物在妊娠期高血压疾病患者胎盘中的表达及临床意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中组织因子(TF)及其抑制物——组织因子途径抑制物(TFPI)的表达变化,探讨妊娠期高血压疾病的发生机制。方法采用免疫组化法检测妊娠期高血压患者、子痫前期患者及正常妊娠妇女胎盘组织中TF和TFPI的水平。结果与正常妊娠组相比,妊娠期高血压组胎盘表达TF有升高趋势,但差异无统计学意义(P0.05);与正常妊娠组和妊娠期高血压组相比,子痫前期组胎盘表达TF明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。妊娠期高血压组与正常妊娠组相比,TFPI表达有下降趋势,但差异无统计学意义(P0.05);子痫前期组胎盘表达TFPI明显下降,与正常妊娠组和妊娠期高血压组相比差异均有统计学意义(P均0.05)。结论 TF、TFPI值的变化及其比例失调导致了胎盘内凝血功能的异常,可能与妊娠期高血压疾病的发生、发展有关。     

结直肠腺瘤癌变细胞凋亡及免疫组化研究

目的了解细胞增殖与凋亡相关基因表达在结直肠腺瘤癌变转化过程中的作用,并寻求判断腺瘤癌变的分子生物学指标。方法应用免疫组化法检测61例结直肠腺瘤癌变标本中P53、bcl-2、Fas、bax在腺瘤癌变区及腺瘤轻、重度异型增生区的表达;以ki-67指数和TUNEL法计量细胞增殖率及凋亡率。结果61例结直肠腺瘤癌变标本中P53蛋白在腺瘤癌变区、重度异型增生区及轻度异型增生区的表达分别为67.2%,57.4%和19.7%;bcl-2蛋白的表达分别为77.1%,80.3%和49.2%;腺瘤癌变区、重度异型增生区及轻度异型增生区的平均ki-67指数分别为38.4%、36.5%和16.1%;平均细胞凋亡指数分别为2.2%,1.9%及0.5%。P53蛋白、bcl-2蛋白的表达和ki-67指数、细胞凋亡指数在腺瘤重度异型增生区与癌变区比轻度异型增生区显著增高(P<0.05)。结论凋亡抑制和增殖异常共同参与了腺瘤癌变的转化过程。重度异型增生是一类具有明显癌变倾向的病变,检测上述蛋白可作为腺瘤癌变早期诊断的重要参考指标。     

抗骨增生片对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:观察抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡和凋亡调控基因bcl-2及其抑制基因bax的影响,探讨抗骨增生片对关节软骨的保护作用是否与抑制细胞凋亡与调节bcl-2及bax的表达有关。方法:选用健康日本大耳白兔30只,随机分成3组:A正常对照组,B模型对照组,C抗骨增生片组。用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型,抗骨增生片组灌胃给药4周后处死全部动物,TUNEL法检测软骨细胞凋亡,免疫组化法检测关节软骨中bcl-2、bax的水平。结果:C组细胞凋亡率明显低于B组(P<0.05),bcl-2在C组中的表达高于B组(P<0.05),bax的表达低于B组(P<0.05)。结论:抗骨增生片通过上调bcl-2的表达,下调bax的表达,达到抑制兔膝骨关节炎软骨细胞的过度凋亡,这可能是该药治疗骨性关节炎机制之一。     

仙甲汤对前列腺增生大鼠前列腺组织bcl-2及bax表达影响的研究

目的　观察实验性前列腺增生大鼠前列腺组织bcl- 2及bax的表达及仙甲汤对其的影响。方法　去势加丙酸睾酮注射法复制大鼠前列腺增生模型 ,采用免疫组织化学法检测各组大鼠前列腺组织bcl- 2及bax的表达。结果　bcl- 2表达率模型组显著高于正常组 (P <0 .0 5 ) ,bax表达率模型组显著低于正常组 (P <0 .0 5 ) ;仙甲汤中剂量组、高剂量组及癃闭舒组的bcl- 2 ,bax表达率均接近正常组 (P均 >0 .0 5 )。结论　模型大鼠前列腺组织bcl- 2和bax调控失衡 ,仙甲汤可通过调节凋亡基因的平衡而起到抑制前列腺增生的作用     

丹参诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2、bax基因表达研究

目的探讨丹参作用类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞bcl-2和bax基因mRNA水平的表达。方法关节液原代培养获取成纤维样滑膜细胞,分别用终浓度为0,0.195和0.39 g/L的丹参作用24 h后,提取总RNA并逆转录成cDNA保存,采用rt-PCR方法检测bcl-2和bax在mRNA水平的表达。结果以丹参浓度为0(bcl-2的相对表达量为0.55±0.27)作为溶剂对照组,bcl-2的表达在丹参浓度为0.195 g/L时(bcl-2的相对表达量为0.53±0.35)没有显著性差异(P=0.468),当丹参浓度达到0.39 g/L时,bcl-2的表达(相对表达量为0.25±0.17)显著性降低(P<0.05);bax的表达在2种丹参浓度条件下均无显著性差异(P均>0.05)。结论丹参可抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2的表达,从而通过降低bcl-2/bax的值促进成纤维样滑膜细胞凋亡。     

黄芪甲甙保护阿霉素心肌损伤大鼠抗凋亡作用的机制研究

目的 探讨黄芪甲甙（简称黄芪）抗阿霉素所致心肌细胞凋亡的可能机制。方法 取SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄芪3个剂量（低、中、高）组。空白组腹腔注射生理盐水,余4组分别给予阿霉素造模（15mg／kg,隔日腹腔注射1次,共6次）。黄芪3个剂量组同时用不同剂量黄芪甲甙灌胃治疗,空白组和模型组同时给予羧甲基纤维素钠。采用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡。细胞免疫组织化学检测bcl-2、bax蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测bcl-2、bax基因的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡发生率增高（P〈0．01）,抑制凋亡因子bcl-2基因及蛋白表达下降（P〈0．01）,而促进凋亡因子bax基因及蛋白表达增强（P〈0．01）,bcl-2／baxmRNA比值降低（P〈0．05）。与模型组比较,黄芪高剂量组大鼠心肌细胞的凋亡率显著下降（P〈0．05）,bcl-2基因及蛋白水平表达增强（P〈0．05）,bax基因及蛋白水平表达下降（P〈0．05）,bcl-2／baxmRNA比值明显上升（P〈0．05）。结论 高剂量黄芪甲甙治疗可以抑制阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与凋亡基因bcl-2表达有关。     

健脑方对SHRsp大鼠卒中后脑神经细胞凋亡的防治作用

目的:观察急性脑卒中后大鼠脑神经细胞凋亡的变化及健脑方对凋亡的防治作用.方法:选择易卒中型自发性高血压(SHRsp)大鼠制作急性脑卒中动物模型,用健脑方干预治疗,观察造模前后大鼠神经系统症状、体征及大鼠海马组织病理结构的改变,应用原位末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记(TUNEL)法、免疫组化法及固定化蛋白质印迹(Western blot)法观察大鼠造模及药物干预前后脑神经细胞凋亡的改变.结果:预防给药组大鼠卒中发生率明显低于模型组(P＜0.01).TUNEL法显示模型组棕色颗粒在3天后达到高峰,应用健脑方干预后,棕色颗粒表达明显减少(P＜0.05).Western结果显示,模型组bcl-2、bax、caspase3在卒中后不同时相较正常组表达均增加.应用健脑方预防及治疗后均可使bcl-2表达升高(P＜0.05或P＜0.01),caspase3表达下降(P＜0.05或P＜0.01);bax在预防给药组表达下降(P＜0.05或P＜0.01),与治疗给药组比较差异无显著性(P＞0.05).结论:健脑方对脑卒中大鼠有明显的脑保护作用,其机制与抑制神经细胞凋亡及凋亡相关信号的传导有关.     

外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl-2基因及bax基因表达的影响

目的观察外燥对小鼠气管细胞凋亡与bc l-2基因及bax基因表达的影响。方法30只昆明种小鼠随机分为常温常湿组(A组),温燥组(B组),凉燥组(C组),每组10只。经处理后第14天用免疫组化法检测各组气管细胞凋亡率(%)、bc l-2、bax阳性指数(PI,%)、bc l-2/bax累积阳性指数(AI,%)与bc l-2:bax蛋白表达比值。结果3组小鼠气管细胞凋亡率均≤0.3%;B组与C组bc l-2 PI与AI均低于A组(P<0.01),B组、C组气管细胞bc l-2:bax蛋白比值中bax增加。结论外燥致气管细胞bc l-2表达降低、bc l-2:bax蛋白比值改变,bc l-2、bax阳性细胞以气道炎性病灶或纤毛缺损处多见,提示与外燥分子致病机制有关。     

牛蒡子苷对胰腺癌细胞抑制作用及其作用机理的实验研究

目的通过牛蒡子苷对胰腺癌细胞株(CAPAN-1)体内外实验,验证其是否具有抗胰腺癌作用。方法在CAPAN-1细胞培养液中加牛蒡子苷,培养72 h并观察癌细胞的增殖抑制率及癌细胞形态变化。流式细胞仪(FCM)检测CA-PAN-1细胞周期及凋亡率;TUNEL法检测CAPAN-1细胞凋亡率;免疫细胞化学检测CAPAN-1细胞的增殖凋亡调控相关蛋白(bax、bc l-2)表达。用CAPAN-1细胞制作Balb/c裸小鼠荷瘤模型,连续每天腹腔注射牛蒡子苷(10 mg.kg-1.d-1)10d,以5-FU(30 mg.kg-1.d-1)作阳性对照观察抑瘤率。结果牛蒡子苷抑制CAPAN-1细胞生长;阻滞CA-PAN-1细胞周期于G0/G1期并诱导细胞凋亡;通过上调bax蛋白表达(P<0.01),下调bc l-2蛋白表达(P<0.05)诱导CAPAN-1细胞凋亡;抑制荷瘤裸小鼠肿瘤生长,抑瘤率为41.7%。结论牛蒡子苷具有抗胰腺癌活性,其作用机理之一是诱导细胞凋亡。     

消瘤汤干预大肠癌细胞凋亡相关基因bcl-2 bax表达的实验研究

目的：探讨消瘤汤促进大肠癌细胞株HT-29凋亡的作用机制。方法：采用MTT法测消瘤汤对大肠癌细胞株HT-29作用的有效剂量，运用流式细胞仪测定消瘤汤对人大肠癌细胞株HT-29凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。结果：消瘤汤可促进大肠癌细胞株HT-29凋亡；能抑制凋亡相关基因bcl-2、bax的表达，但对凋亡抑制基因bcl-2的抑制更明显。结论：消瘤汤能促进肿瘤细胞凋亡，其作用机制可能是通过抑制凋亡相关基因表达实现的。     

p53、bcl-2蛋白表达与胃癌生物学行为的关系

目的研究p53、bcl-2蛋白在胃癌及癌前病变中的表达与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法,检测p53、bcl-2蛋白在60例胃癌、46例异型增生和20例正常胃黏膜中的表达情况。结果p53在正常胃黏膜不表达,异型增生表达率为20%,随胃黏膜异型增生程度的加重,p53表达逐渐增高,在胃癌中的阳性表达率为53%。bcl-2在胃癌中的阳性表达率为47%,在异型增生中表达率为48%,在正常胃黏膜中表达呈弱阳性。bcl-2表达与胃癌的分化程度有关(P<0.05),与淋巴结转移、浸润深度无关(P>0.05);p53表达与上述临床病理因素均无关。结论p53、bcl-2蛋白的表达与胃黏膜增殖和恶化密切相关,可作为评估胃癌预后的参考指标。