整合素β_1和层粘连蛋白在不孕症患者子宫内膜和正常早孕蜕膜组织中表达的研究

目的:检测整合素β1(Integrinβ1)和层粘连蛋白(Laminin,LN)在不明原因不孕妇女子宫内膜、正常子宫内膜和宫内早孕蜕膜组织中的表达情况。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(S-P)法检测30例不明原因不孕症子宫内膜组织,20例宫内早孕蜕膜组织及20例正常宫内膜组织中整合素β1和LN的表达水平及分布。结果:整合素β1和LN在宫内早孕蜕膜腺上皮细胞中表达水平增高;整合素β1在不明原因不孕子宫内膜各期腺上皮、基质细胞表达水平显著减低,LN在不明原因不孕子宫内膜表达程度最高。结论:整合素β1和LN在子宫内膜的表达异常可使子宫内膜容受性降低、子宫内膜与胚泡发育不同步,从而使着床失败,导致不孕。     

薄型子宫内膜种植窗期雌孕激素及其受体与整合素β3的变化探讨

目的探讨薄型子宫内膜不孕妇女种植窗期雌孕激素水平及其受体与整合素β3的变化和意义。方法选择自然月经周期尿黄体生成素(LH)峰日子宫内膜厚度<8mm的不孕妇女25 例为研究对象,同期子宫内膜厚度>8 mm的不孕妇女25例作为正常对照,采用化学发光法、免疫组织化学技术分别检测两组患者黄体中期血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平以及子宫内膜雌激素受体 (ER)、孕激素受体(PR)和整合素β3的表达。结果两组患者血清E2、P水平及子宫内膜中ER、PR的表达强度比较,差异无显著性意义(P>0．05),研究组子宫内膜腺上皮整合素β3的表达强度明显低于对照组(P<0．01)。结论薄型子宫内膜不孕妇女种植窗期子宫内膜整合素β3表达降低,这可能是其胚胎种植率低下的一个重要原因。     

整合素β3在早孕及胎停育蜕膜组织中的表达

整合素是由均为跨膜糖蛋白的α、β亚单位组成的异源二聚体,普遍存在于细胞表面,介导细胞与细胞外基质的黏附.目前已知有14种α亚单位和8种β亚单位,其中,β3组(包括αⅡbβ3和αVβ3)中的αVβ3在体内上皮细胞广泛表达[1,2].研究表明,整合素β3表达于黄体中、晚期子宫内膜腺体上皮细胞及早孕蜕膜细胞,并且在早孕蜕膜组织中表达明显增高,提示其在孕卵着床时调节子宫内膜容受性方面发挥重要作用[3-6].但不明原因胎停育的蜕膜组织中整合素β3表达情况国内外罕见报道,因此本研究采用免疫组化技术,检测整合素β3在正常早期妊娠蜕膜组织及不明原因胎停育蜕膜组织的表达,探讨整合素β3与胎停育的关系.     

薄型子宫内膜种植窗期血管生成状态及整合素β3的表达

目的探讨人薄型子宫内膜种植窗期血管生成状态及整合素3β表达的变化。方法以月经周期尿黄体生成素(LH)峰日子宫内膜厚度<8 mm不孕妇女25例为研究对象,同期子宫内膜厚度>8 mm的不孕妇女25例作为正常对照,采用免疫组织化学技术检测两组患者黄体中期子宫内膜中微血管密度(MVD)和整合素3β的表达。结果研究组种植窗期子宫内膜MVD及整合素3β均明显低于对照组(P<0.01),且两组MVD与整合素3β的表达均存在正相关关系(分别为r=0.916,P<0.01;r=0.956,P<0.01)。结论薄型子宫内膜种植窗期存在血管生成不良和整合素3β表达下降,这可能是导致这类妇女妊娠率低下的原因之一。     

黄体中期血清孕酮测定和子宫内膜活检在不孕症诊断中的意义

目的对原因不明不孕症患者的黄体中期行血清孕酮测定和子宫内膜活检,寻找不孕的原因及其在诊断中的意义。方法对58例不孕症患者黄体中期（排卵后第7天）检测血清孕酮水平,同时取子宫内膜病理检查。结果 58例不孕症患者中黄体中期分泌延迟46例,分泌正常12例（P（0.01）。血清孕酮水平（47.7nmol/L30例,≥47.7nmol/L28例（P（0.05）。在分泌延迟的46例不孕症患者中,60.87%黄体中期血清孕酮水平（47.7nmol/L,39.13%≥47.7nmol/L（P（0.01）。结论黄体中期行血清孕酮测定和子宫内膜活检更易发现患者不孕的原因。对于不孕症的诊断和指导治疗具有重要的意义。     

复发性流产患者绒毛膜和蜕膜组织SOCS-3和LIF的表达

目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling3,SOCS-3)和白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)在复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者绒毛膜和蜕膜组织中的表达情况,为RSA的早期识别和临床诊治提供一定理论依据.方法 随机抽取RSA患者45例作为观察组,选取同期在门诊行人工流产术的45例正常妊娠妇女作为对照组,采用Western blot法对所有患者绒毛膜和蜕膜组织中SOCS-3和LIF的表达水平进行检测.结果 观察组患者绒毛膜和蜕膜组织中的LIF相对表达量低于对照组(P<0.05),SOCS-3的相对表达量低于对照组(P<0.05).结论 较之于正常妊娠患者,RSA患者绒毛膜和蜕膜组织中SOCS-3和LIF的表达水平显著降低,可能反映出其宫体内妊娠状态时Th1/Th2的免疫耐受失衡、LIF的免疫保护作用减弱,进而引发的免疫损伤可能是导致RSA发病的原因之一.SOCS-3和LIF水平有望作为RSA患者识别的标志物之一.     

浅谈黄体功能不健性不孕、流产的诊治体会

笔者自1998年3月至2008年3月在本院妇产科门诊治疗黄体功能不健性不孕、流产患者130余例,经治疗82例已足月妊娠分娩,现将对此类患者的诊治情况介绍如下。1资料与方法将来自本院妇产科门诊82例患者列为一组。这些患者有不孕史或连续2次以上早孕自然流产史;年龄23~35岁,其中44例为原发性不孕,38例有2次以上早孕自然流产史。1.1诊断这些患者,除在非孕期行妇科常规检查及男方精液常规检查外,还进行了基础体温测定(BBT)和子宫内膜活组织检查。有部分患者进行血细胞染色体检查,及女性激素测定,T3、T4测定等。通过参照有关资料,笔者将BBT和子宫内膜活组织检查作为诊断黄体不健的主要方法。诊断依据:患者连续做BBT三周以上,BBT为不典型双相型,呈梯形缓慢上升,黄体期<12d,体温升高平均<0.4℃。在月经周期第23~26天行子宫内膜活组织检查,表现为分泌期内膜腺体呈分泌不良,组织菲薄,间质发育不良,腺体与间质发育不同步。病因:正常黄体机能的维持有赖于下丘脑-垂体-卵巢性腺轴功能的完善。不仅黄体期,卵泡期出现异常也可致黄体功能障碍。目前一般认为黄体功能不全与下列因素有关:卵泡期FSH分泌不足,卵泡液中FSH和雌二...     

IL-6在早孕绒毛蜕膜中的表达及米非司酮对其的影响

目的观察IL-6在早孕绒毛、蜕膜组织中的表达及米非司酮对其表达的影响,探讨药物流产的分子免疫作用机制。方法采用免疫组化染色测定早孕绒毛及蜕膜组织中IL-6的表达,其中正常早孕人工流产组20例,米非司酮药物流产组22例。结果IL-6在正常早孕绒毛及蜕膜组织中均呈阳性表达,米非司酮药物流产组表达强度明显降低(P<0.01)。结论IL-6在早孕绒毛及蜕膜中有较高水平表达,可能与胚泡着床、妊娠维持有关,米非司酮明显降低其表达,影响胚胎发育引起流产。     

PTEN在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床意义的研究

目的检测PTEN蛋白在增生性子宫内膜、分泌性子宫内膜和子宫内膜样腺癌组织中的表达,分析该蛋白在3种组织中表达的差异,探讨正常子宫内膜向子宫内膜样腺癌转变的分子生物学机制。方法采用免疫组织化学SP法对60例子宫内膜样腺癌、60例增生性子宫内膜组织、30例分泌性子宫内膜组织共150例石蜡包埋组织进行PTEN的检测。结果PTEN在增生性子宫内膜组织和分泌性子宫内膜组织中的表达均高于子宫内膜样腺癌组,而尚未发现其在增生性子宫内膜组与分泌性子宫内膜组间有统计学意义(P>0.05)。PTEN的表达与子宫内膜样腺癌的病理分级之间有统计学意义(P<0.05)。结论PTEN蛋白的表达降低能促进正常子宫内膜向内膜样腺癌的转变;其低表达能提高子宫内膜样腺癌的病理分级。     

Drosha在子宫内膜癌组织中的差异表达及临床意义

目的 探讨Drosha在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法 应用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blot检测正常子宫内膜组织(25例)、不典型增生子宫内膜组织(20例)及子宫内膜癌组织(40例)中Drosha的表达,分析Drosha在子宫内膜癌组织中的表达与临床病理因素之间的关系。结果 子宫内膜癌组Drosham RNA及蛋白表达水平均低于不典型增生子宫内膜组及正常子宫内膜组(均P<0.05),不典型增生子宫内膜组及正常子宫内膜组的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。不同年龄、组织分级、病理分型、淋巴结转移、肌层浸润深度和FIGO分期的子宫内膜癌患者的Drosha m RNA表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 Drosha在子宫内膜癌组织中表达下调,可能与子宫内膜癌的发生发展有关。     

935MHz微波电磁辐射对小鼠着床期内膜细胞LIF蛋白表达的影响

目的:研究935MHz微波电磁辐射对小鼠着床期内膜细胞LIF蛋白表达的影响。方法:将受精后小鼠暴露于不同时间、不同强度的935MHz辐射波连续辐射3天,于受孕第4天取孕鼠子宫内膜,运用Western blot方法检测细胞内LIF蛋白的表达。结果:在辐射时间相同的情况下,高强度4h/d组和中强度4h/d组子宫内膜腺上皮细胞内膜LIF表达量明显下降;辐射强度相同时,中强度4h/d组与中强度2h/d组组比较、高强度4h/d组组与高强度2h/d组比较,LIF表达量也有明显减弱,显示辐射时间的长短可能影响LIF的表达,且微波对LIF表达的抑制作用具有蓄积效应。结论:935MHz微波电磁辐射通过影响孕鼠胚胎着床期子宫内膜细胞内LIF蛋白的表达,导致子宫内膜容受性发生改变,进而影响胚胎着床过程。     

中药抑抗汤含药血清对子宫内膜容受性的影响

目的探讨中药抑抗汤含药血清对体外培养的小鼠子宫内膜容受性的影响。方法40只实验小鼠随机分为两组,分别用中药抑抗汤0.8ml和等量生理盐水灌胃28d,制备含药血清和空白血清。提取妊娠第4天(D4)雌鼠子宫内膜细胞后分为含药血清(A组)、胎牛血清(B组)和空白血清(C组)三组进行细胞培养。黏附实验检测子宫内膜细胞的黏附能力,ELISA法检测细胞培养液白血病抑制因子(LIF)水平,Western blot检测整合素ανβ3蛋白水平。结果 A组细胞黏附能力、LIF和整合素ανβ3蛋白表达均较B、C组显著增加(P<0.05)。结论抑抗汤可能是通过增强细胞黏附功能,增加LIF和整合素ανβ3的表达来改善子宫内膜容受性。     

In vitro action of leukemia inhibitory factor (LIF) on mid-secretory stage endometrial stromal cells collected from hormone-simulated, ovariectomized monkey and maintained in three-dimensional primary culture

Leukemia inhibitory factor (LIF) is a pleiotropic cytokine that is known to play an important role in blastocyst implantation. The putative action of LIF in the regulation of uterine function has been examined using mid-secretory stage monkey endometrial stromal cells cultured on rat-tail collagen type I and treated with recombinant human LIF (rhLIF) or immunoneutralized LIF (in LIF) under serum-free condition. Long-term ovariectomized rhesus monkeys (n=8) underwent simulation of their menstrual cycles with steroid hormones and endometrial tissue samples were collected on cycle day 18; stromal cells were isolated and grown in primary culture on three-dimensional collagen matrix. Significant decline in cellular protein synthesis (P < 0.01) and cell proliferation index (P < 0.05) was observed in cells with increasing doses (0-1000 ng/ml) of rhLIF under serum-free in vitro condition. JAK1 expression in cultured cells increased (P < 0.01) in response to rhLIF as revealed from Western blot and confocal laser scanning microscopic examination, STAT1 and STAT2 expressions were unchanged, while pSTAT3 expression increased (P < 0.01) with increased concentration of rhLIF in culture medium. Autophosphorylation of JAK1 in endometrial stromal cells showed no change with increasing concentration (0.01 to 100 ng/ml) of rhLIF in vitro, but significant (P < 0.05) increase was observed with the time of exposure to rhLIF. Immunoneutralization of LIF or no addition of rhLIF to cultured cells led to significant (P < 0.01) increase in stromal cell proliferation index and significant (P < 0.01) decrease in the level of JAK1 and its autophosphorylation as compared to cells exposed to rhLIF alone. From the present set of experiments we conclude that rhLIF affects the physiological behaviour of monkey mid secretory stage endometrial stromal cells in vitro via the JAK-STAT signaling pathway.     

IKCa1在围着床期子宫内膜的表达及其作用

摘要：目的　检测中电导钙激活性钾离子通道（IKCa1）在围着床期子宫内膜的表达及其在胚胎着床过程中的作用。方法　分别取分泌和增生早、中、晚期子宫内膜组织各5例。应用qPCR和免疫组化技术检测各期IKCa1 mRNA和蛋白的表达。体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞，不同浓度（0、10、20、30 µmol/L）IKCa1阻滞剂TRAM-34干预后，qPCR检测细胞IKCa1表达，CCK-8法检测细胞增殖能力，Transwell实验检测细胞体外胚胎黏附能力，Western blot检测细胞上皮-间质转化（EMT）相关蛋白E盒结合蛋白1（Zeb1）和上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）表达。结果　IKCa1在人子宫内膜中呈时序性表达，分泌期表达水平较增生期显著增高，以分泌中期最高。TRAM-34抑制IKCa1表达后，Ishikawa细胞增殖和胚胎黏附能力减弱；EMT标志蛋白E-cadherin表达显著上调，Zeb1表达显著下调（P＜0.05）。结论　IKCa1可能参与围着床期子宫内膜容受性的建立，并通过影响子宫内膜细胞增殖和EMT调控胚胎着床。     

活血消异方对子宫内膜异位症模型小鼠子宫内膜容受性的影响研究

目的 探讨子宫内膜异位症对子宫内膜容受性的影响机制以及活血消异方对子宫内膜异位症模型小鼠子宫内膜容受性的作用.方法 通过"皮下+腹腔"同系异体子宫内膜注射的方法建立子宫内膜异位症妊娠功能低下小鼠模型,假手术予等量0 Z.9%氯化钠溶液注射.建模成功后,随机分为中药组和模型组,中药组予活血消异方干预治疗,模型组和假手术组予等量0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)灌胃.连续治疗3个周期后,3组分别与不育雄鼠合笼,次日清晨8:00观察阴栓,见栓者定为假孕第1天,于假孕第4天晚上10:30取材,运用Western blot法检测小鼠子宫内膜整合素αvβ3和LIF的蛋白表达.结果 模型组小鼠种植窗口期子宫内膜整合素αvβ3和LIF的蛋白表达量较假手术组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);中药组小鼠种植窗口期子宫内膜整合素αvβ3和LIF的蛋白表达量较模型组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),但均低于假手术组(P<0.05).结论 子宫内膜异位症对子宫内膜容受性存在不良影响.活血消异方能够显著提高小鼠围着床期子宫内膜着床因子整合素αvβ3和LIF的蛋白表达量,从而改善子宫内膜异位症模型小鼠子宫内膜容受性.     

PTEN和CerbB-2在子宫内膜腺癌中的表达及意义

目的探讨子宫内膜腺癌组织中PTEN、CerbB-2蛋白表达异常及其与子宫内膜腺癌发生发展的关系。方法应用免疫组化S-P法对24例正常增生期子宫内膜组织、37例子宫内膜增生症组织、46例子宫内膜腺癌组织中PTEN、CerbB-2蛋白的表达进行研究。结果在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症、子宫内膜腺癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率呈递减趋势熏CerbB-2蛋白的表达率呈递增趋势。子宫内膜腺癌组织中PTEN蛋白阳性表达率明显低于正常增生期子宫内膜(P<0.01)及子宫内膜单纯性增生症组织(P<0.05);正常增生期子宫内膜、复杂性增生组织中PTEN蛋白表达具有显著性差异(P<0.05);子宫内膜腺癌组织中CerbB-2蛋白表达明显高于正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症组织,具有显著性差异(P<0.01,P<0.01);正常增生期子宫内膜CerbB-2蛋白表达与子宫内膜单纯性增生、复杂性增生组织间具有显著性差异(P<0..05,P<0.01)。PTEN蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织学分级、肌层浸润、5年生存率有关(P<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05);CerbB-2蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织学分级、肌层浸润有关(P<0.01,P<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论PTEN、CerbB-2蛋白的异常表达与子宫内膜腺癌的发生有密切的关系,PTEN基因异常表达可促使子宫     

薄型子宫内膜30例临床分析

目的探讨薄型子宫内膜的临床特点、治疗方案和妊娠结局,为薄型子宫内膜的诊疗提供临床经验。方法对2011年1月至12月接诊的30例薄型子宫内膜病例进行回顾性分析,分析其病因及妊娠结局。结果 30例薄型子宫内膜病例,78个周期,共有9例临床妊娠。结论薄型子宫内膜是导致女性不孕的一个重要的原因,寻找病因、积极治疗和提高子宫内膜的容受性可以改善薄型子宫内膜,提高妊娠率。     

Effect of vaginally administered fumagillin on immunohistochemical distribution of leukemia inhibitory factor,interleukin 6, transforming growth factor beta and vascular endothelial growth factor in implantation stage endometrium of the rhesus monkey

Intravaginal administration of an anti-angiogenic agent, fumagillin, during blastocyst implantation inhibits pregnancy establishment in a dose-related manner in the rhesus monkey. In the present study, mated female rhesus monkeys were vaginally inserted with tampons containing vehicle (group 1; n = 5) and test agent (fumagillin, 4 mg/animal; group 2; n = 6) on cycle day 20, and endometrial tissue samples were collected on cycle day 24 from all monkeys and processed for histological examination and immunohistochemical localization for LIF, IL-6, TGF-beta and VEGF. Concentrations of estradiol-17 beta, progesterone and chorionic gonadotrophin in peripheral circulation were determined. From the serum profiles of the hormones, 2 monkeys in group 1, and 1 monkey in group 2 appeared pregnant. However, endometrial morphology revealed histological evidence of pregnancy in 3 out of 6 fumagillin-treated animals. Histometric analysis of immunohistochemical staining in epithelial, stromal and vascular compartments revealed that per cent areas occupied by immunoprecipitate for the cytokines studies did not change in epithelial and stromal compartments, except that for TGF-beta which was higher (P < 0.05) in epithelial compartment in group 2. No change was observed in immunoprecipitation areas for IL-6 in epithelial, stromal and vascular compartments. On the other hand, changes (P < 0.05) for LIF, TGF-beta and VEGF were evident in the vascular compartment. It is possible that disparate responses observed in glandular, stromal and vascular compartments in implantation stage endometrium following fumagillin treatment actually caused from associated decline in progesterone concentration in peripheral circulation. It is also possible that fumagillin, an angiostatic agent, affects the synthesis and secretion of cytokines primarily in the vascular compartment of implantation stage endometrium, and thereby manifests differential responses in epithelial, stromal and vascular compartments.     

妊娠期高血压疾病胎盘组织中白血病抑制因子与基质金属蛋白酶-9表达水平与子痫前期病情的关系研究

目的 探讨妊娠期高血压疾病(HDCP)孕妇胎盘组织中白血病抑制因子(LIF)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平与子痫前期病情的关系.方法 选取2013年3月—2017年2月陕西省榆林市第二医院收治的HDCP子痫前期患者76例,按照疾病严重程度分为轻度子痫前期组与重度子痫前期组,每组38例,选取同期36例正常孕妇作为对照组,比较分析3组胎盘组织中LIF与MMP-9表达水平与子痫前期病情的关系.结果 轻度子痫前期组与重度子痫前期组LIF与MMP-9阳性表达率均低于对照组,且重度子痫前期组低于轻度子痫前期组,差异有统计学意义(P<0.05).重度子痫前期组LIF与MMP-9表达水平呈正相关(r=0.413,P=0.031).结论 正常孕妇与HDCP子痫前期患者的胎盘组织中均有LIF与MMP-9的表达,子痫前期患者LIF与MMP-9的表达水平明显下降,且与病情严重程度有关.