用于超微病理诊断样品的几种制备方法

超微病理诊断是对光镜诊断加以补充和说明 ,因而日益引起临床工作者的重视 ,如无色素性黑色素瘤靠组织学检查难以作出诊断 ,如果做电镜检查 ,由于在肿瘤细胞内能证实贫于色素沉着或无色素沉着小的黑素体 ,可以确诊。而送检标本的来源条件各不同 ,如有些标本已制成石蜡块或石蜡切片 ,这就要求我们把由诊断价值的信息保留下来 ,制成超薄切片 ,供电镜观察诊断。1　常规电镜样品制备方法适用于活检、手术及需要病检的软组织标本。主要分组织处理、超微切片和电子染色三个阶段。2　大体病理标本、石蜡块或石蜡切片转制成超薄切片样品方法2 .1　大…     

应用Spurr树脂包埋剂结合多次离心技术制备血液电镜标本

目的：探讨Spurr树脂包埋剂是否适合制备血样电镜样品。方法：多次离心技术制备血样，并对原始的Spurr配方进行改良。改变增塑剂乙二醇二甘油醚的量，调节包埋块的硬度，使其适合制备体液样品的电镜超薄切片。结果：超薄切片上红、白细胞排列紧密，每个视野可见多个细胞。与常规的Epon树脂包埋剂相比，明显增加了可供观察的信息量。细胞的结构清晰，未见明显的聚合损伤以及人工假象等。结论：Spurr树脂包埋剂是制备血样电镜标本的良好包埋剂。     

透射电镜超薄切片法与负染法探讨

透射电镜生物样品超薄切片技术是医学生物学研究中常用的方法。其它一些制备技术如免疫电镜、电镜细胞化学、放射自显影等,都必须进行超薄切片;而超薄切片所显示的生物样品的微细结构,也是识别扫描电镜图像、冷冻蚀刻复型及其他电镜图像的基础。负染色是相对正染色而言...     

电镜超薄切片技术实践的探讨

在21世纪的今天 ,电子显微镜技术早已在工业、农业、地矿、环境科学尤其在生物医学、计量医学、远程病理诊断等方面得到普遍的应用。在整个电子显微镜技术中 ,超薄切片技术是技术的难点与关键 ,因电镜下观察样品制备的优劣直接反映在超薄切片上。影响切片质量的因素很多 ,不论什么样的组织 ,不论何种病变基础 ,不论标本块包埋的软硬度如何 ,超薄切片者保证要切出良好的切片 ,否则将给电镜观察者带来很多困难。现根据多年来超薄切片技术的经验 ,浅谈切片缺陷的产生及对策。1超薄切片的常见问题切片缺陷大致可分为10种。有刀痕、颤痕、皱褶、…     

介绍一种免疫电镜标本定位方法

免疫电镜标本制备方法有:组织块免疫染色法,冰冻切片免疫染色法,超薄冰冻切片法。其中以冰冻切片法最常用,免疫电镜成功与否受很多因素影响,标本块的定位十分重要。国外多用半簿切片定位,即先切一、二张0.5～2μ的大面积切片,在光学显微镜观察,找出免疫酶反应部位。然后将标本与切片对照,进行修块,再制超薄切片。最近我们开展对免疫电镜研究,发现用上法对冰冻切片免疫染色的电镜标本定位不     

影响透射是生物样品超薄切片效果因素分析

由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm 以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术。但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等。笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下。1 具有性能良好的超薄切片机一台性能良好的超薄切片机是切出没有刀痕与颤痕的优质超薄切片的重要保证。我们电镜室1997年购置的德国徕卡牌超薄切片机,就是性能优…     

影响透射电镜生物样品超薄切片效果因素分析

由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术.但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像,客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等.笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下.     

透射电镜样品超声波和微波处理快速制备方法的研究

目的：透射电镜样品制备时间比较长,而临床病理诊断要求提高电镜样品制备速度,以满足临床电镜病理诊断的需要。方法：通过超声波和真空对样品在固定过程和浸透过程进行处理,以提高样品制备速度。结果：实验表明利用超声波和微波处理的样品仅用24h左右,而且样品固定充分,浸透均匀,样品硬度适中,半薄和超薄切片质量比较好。结论：电镜下图像清晰,能够反映细胞的超微结构,可以满足临床电镜病理诊断的需要。     

电镜半薄切片制备方法的改进

透射电子显微镜生物标本制备中，半薄切片(厚度0．6～0．8μm)的制备是一种常用制样手段。半薄切片图像的清晰度、分辨率远优于石蜡切片，视野大于超薄切片，有利于获得高质量的光镜图像，同时也是电镜超薄切片技术中一种有效的定位方法。半薄切片制备中的一些关键技术如切片、捞片、脱脂、     

电镜半薄切片染色液的改良及应用

电镜是观察组织细胞超微结构的一种手段。但由于切片太小，有时难于观察到目标结构，为此需大量制备样品造成工作量大且消耗多。为使超薄切片能精确地切到目标部位，在行超薄切片前要做半薄切片进行定位。一般是在超薄切片机上切取数张1—2μm厚的切片进行染色观察。半薄切片的染色常规方法有：甲苯胺兰染色法、天青Ⅱ美兰染色法、H-E染色法和Giemsa染色法等，无论哪种方法都需预先做脱树脂处理，     

生物样品电镜超薄切片染色技术的改进

目的 提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量.方法 在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式.结果 在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色.结论 与传统方法相比省时省药,减少污染概率,电镜观察结构清晰,反差较好.     

Electron microscopic studies of microvasculature and sympathetic nerve fibers in dilated cardiomyopathy

OBJECTIVE: To investigate the ultrastructural pathological alterations of the microvasculature and nerve fibers in the endomyocardial biopsied specimens of the left ventricular myocardium obtained from patients with idiopathic dilated cardiomyopathy and chronic heart failure. METHODS: Transmission electron microscopic observations of endomyocardial biopsied specimens of the left ventricular myocardium were carried out in 10 patients with idiopathic dilated cardiomyopathy and chronic heart failure. RESULTS: Various degrees of ultrastructural pathological alterations in the microvessels and sympathetic nerves in the diseased myocardium were consistently demonstrated in idiopathic dilated cardiomyopathy. In addition, abnormal accumulation of collagen tissue and edematous fluid were often seen in the interspace between myocardial cells and nerve endings and capillaries. CONCLUSIONS: Based on the ultrastructural pathological findings in this study, we consider that all the structures forming the muscle cells and the tissues around them, namely the microvessels and nerves may participate in the pathological process in the course of dilated cardiomyopathy. The damage of microvasculature and sympathetic nerves resulting from the underlying disease processes are considered to be an important pathogenetic mechanism responsible for progressive development of myocardial degeneration and dysfunction throughout the course of the disease. It is hoped that our data may provide some insights into the understanding of the role of microcirculation and sympathetic nerves in the etiopathogenesis of dilated cardiomyopathy.     

用聚氯乙烯等作包埋剂的初步探讨

用聚氯乙烯加上聚苯乙烯其溶于乙酸乙酯内,形成无色透明胶状液。其可用作电镜中制作超薄切片用的包埋剂。使用这种包埋剂对胎盘、肾脏及骨骼肌等制作出的超薄切片表明:该包埋剂能承受电子束的轰击,无纪构,电子穿透性好和超微结构保存完好。其半薄切片易被苏木精和伊红染色。使用这种包埋剂可使制样成本降低,简化制样过程。     

早孕绒毛吸取与绒毛细胞直接制备染色体的探讨

1985年6月～1985年11月我们对早孕绒毛的取材和直接制备染色体初步进行了研究,共131例。在B超下取材19例,盲取112例,其成功率分别为37%,72.3%,其中80例进行了绒毛直接制备染色体的检查,每例都成功的发现了染色体,其中33例形态较好,可进行核型分析,最后对取材和直接制片问题进行了讨论。     

兔上腔静脉中的心肌细胞组织学结构

目的 :观察兔上腔静脉壁内心肌细胞组织学结构。方法 :选取健康的新西兰大白兔 10只 ,取上腔静脉和右心房 ,10 %福尔马林溶液固定 ,HE染色。另取健康的新西兰大白兔 10只 ,取上腔静脉和右心房 ,切成 1mm宽的小组织块置于 2 .5 %戊二醛固定液 ,染色后 ,透射电镜下观察。结果 :发现上腔静脉壁内有心肌细胞的延伸 ,壁内的心肌呈纵向、环行或斜行排列 ,电镜下可见壁内心肌细胞的存在 ,细胞之间可以见到明显细胞连接 ,心肌细胞内可见心房肽颗粒。结论 :兔上腔静脉壁内有心肌细胞存在 ,可能在心房收缩时起到阀门作用 ,是发生心律失常的结构基础 ,上腔静脉内心肌细胞在体液调节中发挥着一定的生理作用     

云南省普洱市家鼠鼠疫疫源地鼠疫噬菌体的分离及鉴定

目的 调查云南省普洱市家鼠鼠疫疫源地宿主动物中携带鼠疫噬菌体的情况,并进行鉴定。 方法 2015年11月—2016年6月在普洱市的澜沧县、墨江县及思茅区选取9个疫点,采用鼠铗法捕获老鼠,取其肠道标本;以鼠疫疫苗株EV76为饲养菌,采用双层平板法分离鼠疫噬菌体,并对噬菌体进行电镜扫描等鉴定。同时对肠道标本进行鼠疫菌特异基因caf1检测。 结果 共采集286份样本,从中分离到4株鼠疫噬菌体,总分离率1.40%;4株鼠疫噬菌体分离自3个疫点,其中澜沧县勐朗镇勐宾村自226份标本中分离到2株,墨江县龙潭乡大沙坝村自4份标本中分离到1株,思茅区云仙乡大石头村自7份标本中分离到1株;4株鼠疫噬菌体中,有3株分离自黄胸鼠,1株分离自斯氏家鼠;4株鼠疫噬菌体初次分离时其噬斑表现出多态性,选择其中2株噬菌体进行电镜扫描,皆为肌尾病毒科噬菌体;所有肠道标本caf1检测阴性。 结论 首次在普洱市家鼠鼠疫疫源地中分离到鼠疫噬菌体,所分鼠疫噬菌体为肌尾病毒科噬菌体且具有多态性,值得进一步研究。     

儿童逼尿肌反射亢进的逼尿肌超微结构观察

目的：对逼尿肌反射亢进患儿的逼尿肌进行超微结构观察，探讨可能存在的结构改变特征和临床意义。方法：13例逼尿肌反射亢进患儿标本，括约肌活动协调型5例，不协调型8例；另设3例正常儿童膀胱组织作为对照。采用透射电镜观察。结果：逼尿肌反射亢进的逼尿肌超微结构特点为：(1)肌细胞扭曲变形，排列紊乱；(2)平滑肌线粒体内质网等细胞器出现肿胀变性，肌丝排列紊乱；(3)肌细胞间隙增宽，胶原纤维增多；(4)中间连接减少。括约肌活动不协调组另有以下特点：(1)细胞受损程度加重；(2)细胞间胶原纤维含量增加；(3)在部分患儿中出现异常细胞连接。结论：逼尿肌反射亢进患儿的逼尿肌超微结构有明显改变。这些改变都可以造成逼尿肌收缩能力受损，顺应性下降。不协调组的结构改变明显较协调组严重，异常细胞连接的出现，加速了逼尿肌反射亢进的病理生理过程。     

剖宫产切口愈合不良的非生物因素临床分析

目的：探讨剖宫产切口愈合不良的非生物因素及预防。方法：回顾性分析100例剖宫产切口感染患者的临床资料，按1：2比例随机选择同期无切口愈合不良剖宫产200例作为对照组进行比较。结果：切口愈合不良发生率4．08％；其中切口感染82例，脂肪液化11例，裂开7例。发生切口愈合不良的相关非生物因素为：BMI高、Hb低、住多人间病房、阴检肛查次数多、胎膜早破、伴有基础疾病、术前未预防应用抗生素、手术时间长、夏季、非主刀医生缝合、备皮至手术时间长。结论：造成剖宫产术后切口愈合不良的因素很多，针对上述易感因素，采取适当措施可减少切口愈合不良。     

关节软骨受压状态下的组织形态学观察

目的 探讨正常关节软骨在受压时的内部结构变化。方法 取正常关节软骨制成圆柱形标本，并用压头进行轴向加载，置于固定液中固定；纵向切取标本，分别作常规HE染色和甲苯胺蓝染色，观察软骨细胞的形态和软骨基质的染色；用扫描电镜观察胶原纤维的结构。结果 关节软骨在受压后软骨细胞变得扁平，软骨基质染色增加，胶原纤维变得弯曲，不规则，甚至断裂。结论 关节软骨在受压后会出现内部结构的变化；如果应变较大，则会引起软骨细胞的损伤和胶原纤维断裂等结构破坏征象。     

长沙、株洲两地秋冬季婴幼儿急性胃肠炎的病原学研究 Ⅱ、轮状病毒超微结构观察

本文报道1982年秋冬季长沙、株洲二地婴幼儿急性胃肠炎的病原学检查。从50例胃肠炎患儿粪便中,以电镜方法检出轮状病毒颗粒者42例(阳性率84％)。根据病毒的形态特点和免疫电镜所见,,确认了轮状病毒的存在,且认为该病毒系本次婴幼儿急性胃肠炎的病原。