陡脉冲磁场促进磁性微球中链霉素体内释放的研究

目的:研究超顺磁性硫酸链霉素PLA-PEG共聚物微球(superparamagnetic streptomycin sulfatePLA-PEG block polymer microspheress,pSPM)在陡脉冲振荡磁场作用下体内药物释放规律。方法:用复乳化(W/O/W)溶剂挥发法制备spSPM,新西兰大白兔15只,随机分为3组,实验组为spSPM加用陡脉冲振荡磁场,2个对照组分别为spSPM和硫酸链霉素原料药溶液;臀肌注射spSPM后,定时取动物外周静脉血,采用高效液相色谱法(HPLC)测定硫酸链霉素的血药浓度,比较spSPM加陡脉冲振荡磁场s、pSPM和硫酸链霉素原料药溶液在3组动物体内的释放情况。结果:加用陡脉冲振荡磁场后spSPM中链霉素的释药量提高。结论:陡脉冲振荡磁场能促进spSPM中链霉素的释放。     

163株肠球菌对高浓度氨基糖甙类抗生素耐药情况调查

为了解肠球菌的耐药情况,使用脑心浸液琼脂稀释筛选平板法(ADSP),检测从住院患者的标本中分离出的163株肠球菌对庆大霉素和链霉素的高度耐药菌株(MICs≥2000mg/L)。结果表明,抗庆大霉素高度耐药菌株109株(66.9％),抗链霉素高度耐药菌株114株(69.9％)。全部试验菌株对万古霉素敏感。提示临床应慎用抗生素,要选择敏感药物进行治疗。还对临床常用的筛选氨基糖甙类高度耐药株的其它方法如VITEK-GPS-TA药敏卡,单一浓度微量肉汤稀释法(SCMB)的准确性进行比较,结果显示VITEK-GPS-TA药敏卡不能准确检测高浓度氨基糖甙类耐药株。     

黄芩苷对结核分枝杆菌抑菌作用的初步研究

目的:通过体外抑菌试验探讨黄芩苷对结核分枝杆菌的体外抑菌活性.方法:采用改良罗氏培养基绝对浓度法检测黄芩苷对37株结核分枝杆菌的抑菌作用.结果:黄芩苷对37株结核分枝杆菌临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)最低为1.5 g/L,最高＞48 g/L,MIC90为12g/L,MIC75和MIC50均为6g/L.全敏感菌株在MIC为6g/L时数量比例最大,随着MIC值向两侧递减;异烟肼(INH)低耐菌株的数量与MIC值无明显关联,乙胺丁醇(EMB)低耐菌株数量随着MIC由低到高的变化而显著增多;利福平(RFP)低耐菌株数量随着MIC由低到高的变化而逐步减少.结论:黄芩苷在体外对结核分枝杆菌具有一定的抑菌作用.     

白色念珠菌伊曲康唑耐药和敏感菌株SAP活性与菌株毒力关系的研究

目的探讨白色念珠菌伊曲康唑耐药菌株和敏感菌株分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)活性与菌株毒力及致病性之间的关系。方法将收集鉴定出的白色念珠菌伊曲康唑耐药株[最小抑菌浓度(MIC)≥1 mg/L]和敏感株(MIC≤0.125 mg/L)各20株分别接种在牛血清白蛋白(BSA)培养基上,计算Pz值,比较2组菌株的SAP活性;制备小鼠人工菌血症模型,观察1个月,比较各组小鼠的死亡率和生存率。结果耐药组和敏感组菌株均可产生特异性透明环,其Pz值分别为0.611±0.015和0.667±0.015,2组菌株SAP活性差异有统计学意义(t=11.935,P<0.01);耐药组小鼠死亡16只,敏感组死亡7只,2组小鼠的死亡率差异有统计学意义(χ2=8.286,P=0.004)。结论白念珠菌伊曲康唑耐药菌株SAP的活性、毒力及对小鼠的致病性均高于敏感株;菌株毒力随着Sap活性的增强而增强;白念珠菌SAP与耐药有一定关系。     

结核分枝杆菌药敏试验结果分析

目的探讨结核分枝杆菌依赖抗结核药物的发生率及特点。方法采用绝对浓度间接法对1522株分枝杆菌（结核分枝杆菌1450株,非结核分枝竿菌72株）进行7种药物的敏感性试验,药物依赖判定：在含抗结核药物的L-J培养基上生长旺盛程度和菌量,高浓度药物培养基≥低浓度药物培养基≥对照培养基。结果1450株结核分枝杆菌和72株非结核分枝杆菌共检出依赖菌330株（21、6％）。其中依赖异烟肼110株（7、23％）,依赖利福平260株（17、8％）,依赖链霉素（7、10％）,同时倚赖2种药物者148株（9、72％）。结论药物依赖现象均发生自耐多药菌株,尚未发现非结核分枝杆菌及初始耐药菌药物依赖。     

西藏自治区鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度的测定及研究

目的 根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)药敏试验方法中的琼脂平板稀释法，对分离自西藏自治区鼠疫自然疫源地内的164株鼠疫耶尔森菌进行抗菌药物最低抑菌浓度的测定，监测西藏地区耐药鼠疫耶尔森菌株，掌握其抑菌范围，为鼠疫的临床治疗提供基础数据。方法 利用琼脂平板稀释法分别测定氧氟沙星、环丙沙星、复方磺胺甲恶唑(甲氧苄啶-磺胺甲恶唑)、硫酸卡那霉素、链霉素、头孢曲松钠、氨苄青霉素钠、氯霉素、盐酸壮观霉素、头孢呋辛钠、盐酸四环素、莫西沙星共12种抗生素对164株鼠疫耶尔森菌的最低抑菌浓度(MIC)。若发现耐药菌株，则用K-B法进行验证。结果 所测的164株鼠疫耶尔森菌中有1株对链霉素具有耐药性(MIC=4096 μg/mL)，链霉素K-B法检测抑菌环直径为0，这株菌对其余11种抗菌药物均敏感。其余163株菌对12种抗生素均敏感。结论 发现1株鼠疫耶尔森菌对链霉素具有耐药性，这是我国首次发现鼠疫耶尔森菌对链霉素耐药。因链霉素是国内外治疗鼠疫的首选药物，耐药鼠疫耶尔森菌会引起链霉素治疗失败，从临床和公共卫生的角度来看，对鼠疫耶尔森菌分离株的抗菌敏感性监测应常规开展。     

DHPLC法和测序法检测结核分枝杆菌临床分离株链霉素的耐药性

目的我国是WHO认定的结核病高发区域之一。链霉素在我国已经使用50年以上,现在在结核病治疗中仍广泛使用。本工作采用变性高效液相色谱(DHPLC)法和测序法来分析结核分枝杆菌链霉素耐药基因rpsL和rrs基因突变,从而检测是否对链霉素耐药。方法215株结核分枝杆菌临床分离株(经常规方法证实,115株为链霉素耐药,100株为敏感),测定链霉素最小抑菌浓度(MIC),同时采用DHPLC和测序法检测rpsL和rrs基因突变。结果85.2%(98/115)的链霉素耐药株携有rpsL或/和rrs基因突变,其中rpsL基因突变占大多数(76.5%,88/115)。对98株带有基因突变的菌株的分析表明,rpsL,rrs基因的突变类型与MIC之间未见密切关系。100株敏感株未检出基因突变。DHPLC法与测序法结果完全一致。结论本工作建立的DHPLC法可以认为是结核分枝杆菌链霉素耐药分析的一种有效的工具。     

531株结核分枝杆菌的药敏分析

目的对结核分枝杆菌的药敏试验结果进行分析,根据敏感率和耐药率情况为临床制定治疗方案和选择用药提供参考依据。方法采用罗氏培养基培养临床标本,药物敏感试验用液体培养基和96孔U型细菌鉴定及药敏试剂板。结果对16种分枝杆菌治疗药物进行药敏测定,其中耐药率最高的是氯法齐明,其次是链霉素,分别是92.7%和39.5%,敏感率最高的是利奈唑胺,敏感度为95%,氟喹诺酮类药物对结核分枝杆菌也有较强的抑菌效果。非结核分枝杆菌药物克拉霉素对结核分枝杆菌也具有较好的抑菌效果。结论本文对531株结核分枝杆菌的药敏试验进行分析,认为对复治的肺结核患者痰培养和药敏试验是必要的,临床用药可以适当考虑选用氟喹诺酮类药物和克拉霉素。     

广东地区结核分枝杆菌利福平耐药与基因rpoB突变关系分析

目的 为了解广东地区结核分枝杆菌rpoB基因突变特点,并探讨其与利福平耐药之间的关系.方法 本研究根据结核病诊断细菌学检验规程从临床结核病疑似患者痰液中分离鉴定结核分枝杆菌,采用绝对浓度法对其进行药敏试验,并用PCR-DNA直接测序法对结核分枝杆菌rpoB基因进行序列分析.结果 结果分离得到利福平耐药株27株,其中低浓度耐药8株,高浓度耐药19株.经测序分析,所有利福平敏感株rpoB基因均未发生氨基酸突变 利福平耐药株rpoB基因的突变率为81.5%（22/27）,突变均发生在利福平耐药决定区内,突变位点为526、531及533,以Ser531Leu突变最为常见（55.6%,15/27）,并且高浓度耐药株的突变率明显高于低浓度耐药株.结论 结果表明广东省结核分枝杆菌rpoB基因突变是结核分枝杆菌利福平耐药性产生的主要分子机制,突变位点同国内外研究基本一致,但各位点突变形式所占比例有自身特点.     

杭州地区结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因rpsL和rrs突变分析

目的 分析杭州地区结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因核糖体蛋白S12编码基因(rpsL)和16S rRNA编码基因(rrs)的突变情况.方法 采用比例法对杭州地区74株结核分支杆菌临床分离株进行药敏试验;设计特异性引物,对目的基因片段rpsL和rrs进行扩增、克隆后测序分析.结果 74株结核分枝杆菌中有31株耐链霉素表型阳性,耐药率41.9％.31株耐药株中,20株rpsL 43(AAG→AGG)位点发生突变,占总耐药菌株的64.5％;2株rpsL 88 (AAG→AGG)位点发生突变,占总耐药菌株的6.5％;2株两个位点同时发生突变者占总耐药菌株的6.5％.43株链霉素敏感结核分支杆菌中未见rpsL和rrs基因发生突变、插入或缺失.结论 杭州地区结核分支杆菌耐链霉素主要由rpsL基因突变引起.其中,rpsL 43 (AAG→AGG)位点突变占绝大部分.     

紫外分光光度法测定复方链霉素软膏中2组分的含量

目的:建立以紫外分光光度法测定复方链霉素软膏中硫酸链霉素和氨苯磺胺含量的方法。方法:采用麦芽酚-硫酸铁铵比色法,以硫酸铁铵为显色剂,于521nm波长处测定硫酸链霉素的吸收度;以0.1mol/L氢氧化钠溶液为溶剂,于251nm波长处测定氨苯磺胺的吸收度。结果:硫酸链霉素、氨苯磺胺检测浓度分别在200～950(r=0.9994)、1.464～7.784(r=0.9998)μg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为99.1%(RSD=1.90%)、99.7%(RSD=1.60%)。结论:本方法简便、准确,可用于复方硫酸链霉素软膏的质量控制。     

注射用硫酸链霉素细菌内毒素检查限值的研究

目的:提高注射用硫酸链霉素细菌内毒素检查限值,与临床实际用法用量及"化学药品注射剂安全性检查法应用指导原则"要求相符合,且与国际标准接轨。方法:按2010年版《中国药典》(二部)细菌内毒素检查法,用不同厂家鲎试剂对6个厂家生产的43批注射用硫酸链霉素进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果:样品浓度稀释到5mg·mL-1时对所用细菌内毒素检查法无干扰作用;细菌内毒素的限值提高为"每1mg链霉素中小于0.10EU"时,按此标准检查,43批样品细菌内毒素均符合规定。结论:建议注射用硫酸链霉素细菌内毒素检查限值由2010年版《中国药典》规定的"每1mg链霉素中小于0.25EU"提高至"每1mg链霉素中小于0.10EU",体现了临床使用中联合用药的要求,可保证用药安全,且与2000年版《日本抗生物质医药品基准解说》对本品细菌内毒素检查限值要求一致。     

硫酸链霉素注射液无菌检查法试验验证

目的：探讨硫酸链霉素注射液的无菌检查方法，考察其抑菌作用及测定方法的可行性。方法：采用薄膜过滤法．通过无菌验证试验确定无菌检查方法的有效性。结果：含供试品各容器中的试验菌均生长良好。结论：通过验证试验的无菌检查方法可行，所得结果可靠，适合该药品的无菌检查。     

紫外分光光度法测定硫酸链霉素鱼肝油滴鼻剂中主药的含量

目的:建立测定硫酸链霉素鱼肝油滴鼻剂中主药含量的方法。方法:采用紫外分光光度法,在检测波长为521nm条件下检测该制剂中硫酸链霉素的吸光度并计算含量。结果:硫酸链霉素检测浓度的线性范围为250～700μg·mL-(1r=0.9998);平均回收率为99.75%,RSD=0.98%。结论:本方法简便、准确,可用于该制剂的质量控制。     

Identification and control of impurities in streptomycin sulfate by high-performance liquid chromatography coupled with mass detection and corona charged-aerosol detection

For the control of impurities in streptomycin sulfate a reversed phase ion-pair high performance liquid chromatography (HPLC) method using charged aerosol detection (CAD) was developed. With this method, 21 impurities could be separated and tentatively identified using a combination of exact mass measurement by TOF-MS and MS/MS experiments with a triple quadrupole MS. For three impurities the suggested structures could be confirmed by in situ formation. The CAD detector response was found to be linear over 2 orders of magnitude allowing a straightforward quantification of all impurities. A limit of quantification of 0.09% for streptomycin sulfate and of 0.008% for streptidine sulfate (referred to the concentration of the 5 mg/ml test solution) could be achieved. The HPLC method was applied to the purity testing of 12 samples of commercially available streptomycin sulfate from different manufacturers. Impurity levels between 4.6% and 16.0% were found. The current European Pharmacopoeia monograph for streptomycin sulfate only limits streptomycin B by a TLC test to 3.0%. Therefore, the results of this study underline the importance of introducing a state-of-the-art test for the control of impurities in the monograph. The new HPLC-CAD method is considered suitable for this purpose.     

New drug salt formation in biodegradable microspheres

PURPOSE: To investigate the effects of inorganic salts in the external phase of an oil-in-water (O/W) emulsion method during microsphere preparation. METHODS: An O/W emulsion method was used to prepare poly(D,L-lactic acid) microspheres containing quinidine sulfate. Different inorganic salts were used in the external phase during microsphere preparation. Microsphere drug loading was determined by UV and the drug salt anions inside the microspheres were determined by ion chromatography. RESULTS: New drug salts were formed during encapsulation in the microspheres when salts with non-common anions to the drug salt were used. Drug loading increased when NaClO4 or NaSCN were used. The fraction of drug as the new salt in microspheres increased non-linearly with the salt concentration in the external phase, however, the fraction of drug as the new encapsulated salt was linearly related to drug loading. Drug loading decreased and new salt fraction increased with increasing organic solvent volume or with decreasing cosolvent polarity. CONCLUSIONS: Introducing salts containing non-common anions to the drug salt employed in the external phase of O/W emulsion microsphere method leads to new salt formation. The extent of new drug salt formation is affected by salt levels added, cosolvent type and polymer concentration.     

旋光法测定低浓度硫酸链霉素皮试液的效价

目的 :建立一种测定低浓度硫酸链霉素皮试液效价的方法。方法 :采用旋光法测定结果并与医疗单位制剂规程 ( 1 984 )中采用的比色测定法进行比较。结果 :两种方法之间无显著性差异。结论 :旋光法简便 ,快速准确 ,适合该制剂的含量测定     

Liquid chromatographic analysis of streptomycin sulfate

The analysis of streptomycin sulfate using a column packed with base deactivated reversed phase silica gel and ultraviolet (UV) detection at 205 nm is described. The mobile phase consists of an aqueous solution containing 14 g/l of sodium sulfate, 1.5 g/l of sodium octanesulfonate, 50 ml/l of acetonitrile and 50 ml/l of a 0.2 M phosphate buffer at pH 3.0. The method allows separating streptidine, streptomycin B, streptomycin and dihydrostreptomycin, as well as several other components, which were not yet identified. The total time of analysis is 50 min. The effects of the different chromatographic parameters on the separation were investigated. A number of commercial samples were analyzed using this method.     

硫酸卷曲霉素注射液在复治涂阳肺结核中的临床应用

目的:观察硫酸卷曲霉素静脉滴注在复治涂阳肺结核中的临床应用。方法:根据有关标准选取复治涂阳肺结核219例,随机分为两组:试验组硫酸卷曲霉素0.75g静脉滴注qd×2个月;对照组硫酸链霉素0.75g肌肉注射qd×2个月,同时辅以其它抗痨药。结果:试验组和对照组2月末与8月末痰菌阴转率差异有显著性,8月末X线阴影好转率亦有显著性差异,但8月末空洞闭合率差异无显著性。毒副作用发生率对照组(40%)较试验组(33.8%)稍高,尤其是注射局部疼痛硬结较为多见。结论:硫酸卷曲霉素对复治肺结核涂阳病例痰菌阴转效果显著。