叶下珠药物血清对人肝癌细胞株的诱导分化作用的实验研究

目的 :探讨叶下珠预防肝癌机制即对人肝癌细胞株的诱导分化作用。方法 :对经叶下珠药物血清处理后的人肝癌细胞株进行生长曲线、克隆形成、甲胎球蛋白 (AFP)白蛋白 (ALB)的合成和分泌、 -谷氨酰转肽酶( -GT)活力的测定及细胞形态的电镜观察。结果 :叶下珠药物血清对该系细胞能抑制其生长 ,抑制克隆形成(P <0 0 5 ) ,减少AFP和 -GT的合成和分泌 ,促进ALB的合成和分泌 (P <0 0 5 ) ,且呈现一定的浓度、时间依赖关系 ,诱导细胞形态向正常方向分化。结论 :叶下珠药物血清能诱导人肝癌细胞株Bel- 740 2向正常方向分化 ,具有预防原发性肝癌发生的作用     

虎杖对肺纤维化大鼠MMP-2和TIMP-2表达影响的实验研究

目的：观察虎杖抗肺纤维化的作用并探讨其机制。方法：选取雄性SD大鼠120只，随机分成正常对照组、模型组、虎杖预防组、虎杖7天治疗组和28天治疗组。气管内注射博来霉素诱导肺纤维化。采用RT-PCR和免疫组化观察各组大鼠肺组织MMP-2和TIMP-2表达的变化。结果：与模型组比较，虎杖预防组和7天治疗组MMP-2mRNA和MMP-2蛋白表达、TIMP-2mRNA和TIMP-2蛋白表达均较模型组减弱（P〈0．05或P〈0.01）；其中对TIMP-2持续抑制表达的时间更长。结论：虎杖对肺纤维化不同时期肺组织中MMP-2和TIMP-2的表达均有一定程度的抑制作用，可能是其延缓肺纤维化的作用机制之一。     

虎杖水煎液对体外培养感染柯萨奇B3病毒大鼠心肌细胞保护作用的实验研究

目的:探讨虎杖水煎液对病毒性心肌炎的保护作用.方法:实验取新生SD大鼠心室肌制备搏动心肌细胞,培养48h后添加103TCID50的柯萨奇B3病毒作为实验模型.实验分为4个组进行,即正常对照组、病毒对照组、阳性对照组(干扰素)组、虎杖水煎液组.结果:虎杖水煎液明显提高细胞搏动百分比;明显增加细胞内糖原颗粒数目,增强琥珀酸脱氢酶活性,降低乳酸脱氢酶活性.结论:虎杖水煎液对感染柯萨奇B3病毒SD大鼠心肌细胞具有明显的保护作用.     

凤尾草提取物体内抗肿瘤作用的研究

目的:研究凤尾草提取物的体内抗肿瘤作用。方法:采用S180细胞株接种昆明种小鼠,建立实体瘤和腹水瘤模型,分别灌胃给予凤尾草提取物20、50、100mg/kg,计算抑瘤率与生命延长率,流式细胞仪检测瘤细胞Bcl-2、Bax、P53蛋白表达。结果:50mg/kg、100mg/kg剂量的凤尾草提取物能够抑制小鼠体内肿瘤增长,同时明显提高腹水瘤小鼠半数存活时间和生命延长率,增加P53蛋白表达,增加Bax表达,减少Bcl-2表达。结论:凤尾草提取物具有抑制肿瘤S180生长的作用,其作用与诱导肿瘤细胞凋亡相关。     

水芹正丁醇提取物抗心律失常作用的实验研究

目的：研究水芹正丁醇提取物对心律失常的作用。方法：采用多种实验性心律失常模型，观察其对抗作用。结果：水芹正丁醇提取物(Sf—Bt)能够明显增加引起大鼠室性心律失常的乌头碱用量；显著减少氯化钡所致的双相性室性心律失常的动物个数，明显推迟心律失常的出现时间，综合维持时间，并明显增加引起起豚鼠室性心律失常的哇巴因用量。结论：水芹正丁醇提取物具有明显的抗心律失常作用。     

"消癌平"对人肝癌细胞治疗作用的实验研究

为探讨“消癌平”地人体肝癌细胞的影响,采用ＭＩＴ比色法和放射免疫法,分别观察它对体外培养的人肝癌Ｂｅｌ－７４０４细胞、ＨｅｐＧ２细胞的作用,以及对人肝癌细胞甲胎收（ＡＦＰ）分泌的影响。结果：消癌平地上述肝癌细胞有显著的抑制作用,能显著降低ＡＦ宾分泌,提示消癌平在抑制肝癌细胞增殖的同时,能使ＡＦＰ分泌量降低,可能使肝癌细胞向正常方向分化。     

参龙散抗人肝癌SMMC-7721细胞生长及其机理的实验研究

目的:探讨参龙散对人肝癌细胞系SMMC-7721的抑制作用及其机理。方法:用MTT法、DNA凝胶电泳和流式细胞术等方法观察不同浓度参龙散对SMMC-7721细胞系生长的影响并探讨其相应的机理。结果:不同浓度参龙散(0.5、5、50mg/ml)对SMMC-7721细胞均有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性,其中药物作用48h的肿瘤抑制率分别为16.8%、56.8%和67.4%;在中低剂量(0.5、5mg/ml)时DNA凝胶电泳呈现梯形图谱,而高剂量时则呈现膜状条带;细胞周期检测显示对细胞周期无明显影响,但有S期减少的倾向,有待进一步研究。结论:中药复方参龙散有确切抗肿瘤效应,其机制包括诱导的细胞凋亡和促坏死作用。     

虎杖提取物抗动物高尿酸血症的实验研究

目的：观察虎杖提取物对高尿酸血症动物尿酸及痛风性关节炎的作用。方法：采用尿酸酶抑制剂法,造成小鼠高尿酸血症,观察虎杖提取物对该模型血尿酸的抑制作用;采用腺嘌呤＋乙胺丁醇法造成正常大鼠高尿酸血症模型,取血测其血尿酸和黄嘌呤氧化酶浓度,观察虎杖提取物对高尿酸血症大鼠动物模型的影响;同时取动物关节组织,观察滑膜组织的病理改变。结果：虎杖提取物可显著降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平,可明显降低大鼠高尿酸症的血尿酸水平和抑制黄嘌呤氧化酶的活性,可改善痛风性关节炎的病理改变。结论：虎杖提取物能改善高尿酸血症和痛风性关节炎的病理改变。     

苦菜提取物抗炎作用的实验研究

目的:观察苦菜提取物的抗炎作用及其机理。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、皮肤毛细血管通透性增高、腹腔注射醋酸致小鼠腹腔染料渗出和角叉菜胶诱导大鼠后足爪肿胀等方法观察药物的抗炎作用。大鼠炎足炎症渗出液中NO测定用Griess重氮化反应法;NOS活性用NADPH黄递酶染色法测定,IL-IB、TNF-α含量用放射免疫法测定。结果:苦菜提取物对小鼠耳肿胀、大鼠足爪肿胀有明显的抑制作用,染色皮肤面积和皮肤染料含量明显减少,对小鼠腹腔毛细血管通透性的增加有明显的抑制作用,使大鼠炎足炎症渗出液中NO、IL-IB、TNF-α含量显著减少,NOS活性降低,并呈一定的量效关系。结论:苦菜具有明显的抗炎作用,其抗炎作用与抗氧化和减少炎症细胞因子如IL-IB、TNF-a的生成有关。     

蝉花粗提物对肺癌细胞作用的实验研究

目的:研究蝉花粗提物对PAA细胞株的作用。方法:不同浓度粗提物以及联合DDP处理PAA细胞48小时,用MTT法检测细胞活性;粗提物处理PAA细胞不同时间,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果:随粗提物浓度升高,PAA细胞活性受抑制,但是与DDP联合未见效果提高;粗提物能使PAA细胞G0/G1期比例逐渐增加,而S期和G2/M期比例下降。结论:蝉花粗提物能选择性杀伤G2/M期细胞,显著抑制PAA细胞生长,但是和DDP无联合效应。     

白花蛇舌草对人肝癌Bel7402细胞凋亡的影响

目的从基因水平研究白花蛇舌草对体外培养的人肝癌Bel7402细胞诱导凋亡的作用及其可能的作用机制。方法采用人肝癌Bel7402细胞常规体外培养,随机设定空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)阳性对照组、白花蛇舌草组。倒置显微镜直接观察细胞形态变化。HE染色法光镜下观察细胞形态改变,计算凋亡指数。采用MTT法检测白花蛇舌草对癌细胞的生长抑制作用。RT-PCR半定量法检测Bcl-xl、p53基因mRNA表达的变化。结果光镜下观察到白花蛇舌草组肿瘤细胞脱壁,有细胞出芽现象等凋亡形态改变;凋亡指数略低于5-Fu阳性对照组,但与空白对照组比较有显著差异(P<0.01);细胞抑制率略低于5-Fu阳性对照组,与空白对照组相比有显著差异(P<0.01);上调p53基因mRNA表达,降低Bcl-xl基因mRNA表达,与空白对照组比较均有显著差异。结论白花蛇舌草抑制人肝癌Bel7402细胞增长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与激活抑癌基因p53基因、抑制原癌基因Bcl-xl基因表达有关。     

抗纤灵药物血清对人肝癌细胞体外生长的抑制及机理研究

目的研究抗纤灵的抑癌作用及分子机理.方法采用人肝癌细胞(HepG2)体外培养,血清药理学及免疫组织化学等方法.结果含抗纤灵血清18、9、3g/kg对体外培养的HepG2细胞的细胞生长抑制率分别为63.09%±5.08%,55.09%±4.09%,48.08%±4.08%,细胞毒活性分别为48.06%±4.08%,38.09%±5.01%,25.00%±4.1 3%,其细胞毒活性均高于空白血清(P＜0.01).含抗纤灵血清各组细胞生长抑制率和细胞毒活性与环磷酰胺血清比较,差异有显著性或无显著性(P＜0.05或P＞0.05).含抗纤灵血清1 8、9、3g/kg体重各组HepG 2 P 21WAF1/CIP1蛋白表达高于环磷酰胺血清组及空白血清组((P均＜0.01).结论抗纤灵具有抑制人肝癌细胞体外生长的作用,其分子机理与该方提高HepG 2 P 21WAF1/CIP1蛋白表达有关.     

构树叶总黄酮调控Bcl-2与Bax蛋白表达及caspase-3活性诱导HepG-2细胞凋亡的研究

目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用体外细胞培养方法,取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,应用MTT法检测TFBP对人肝癌细胞HepG-2生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察各浓度TFBP作用细胞48 h后的细胞的形态变化;通过免疫细胞化学SP法检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;比色法检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果:TFBP在体外对人肝癌细胞HepG-2有较强的浓度依赖性和时间依赖性抑制作用,9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可分别达52.46%,64.72%,与对照组具有显著性差异(P<0.01),可诱导细胞凋亡,质量浓度9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞48 h后就可出现典型的凋亡小体,TFBP可升高caspase-3活性,并具有浓度效应,同时还可下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2/Bax。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2/Bax以及增强caspase-3的活性有关。     

蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株凋亡相关基因作用的研究

目的:探讨蛴螬提取物体外对MGC-803胃癌细胞株的诱导凋亡作用的分子生物学机制.方法:通过倒置显微镜、HE染色、吖啶橙(A0)/溴化乙锭(EB)荧光染色方法检测蛴螬提取物对MGC-803胃癌细胞诱导凋亡和抑制作用的方式;应用免疫组织化学技术(S-P法)检测用药前后凋亡相关基因bcl-2、bax表达的改变,探讨蛴螬提取物在体外对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用的可能机制.结果:光镜结果表明,蛴螬(终浓度为4mg/ml)作用于MGC-803胃癌细胞24h后,可见胞核固缩、胞核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化;经AO/EB荧光染色观察结果表明,当终浓度为4mg/ml的蛴螬作用于MGC-803细胞24h后,其凋亡率和破膜率与自然凋亡率和破膜率相比均有显著性差异,其凋亡率为86.3%(P＜0.001),破膜率为41.9%(P＜0.001).免疫组化结果表明,用药前后凋亡相关基因bcl-2、bax均有显著性改变(P＜0.001).结论:蛴螬提取物在体外对人MGC-803胃癌细胞株有显著性抗增殖及诱导凋亡作用,其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制与凋亡相关基因bcl-2、bas的表达改变有关.     

金丝桃素对HepG2细胞的体外杀伤效应的研究

目的研究金丝桃素及贯叶金丝桃中金丝桃素提取物对人肝癌细胞株HepG2的体外杀伤效应。方法通过测定胞内荧光强度以确定细胞对金丝桃素的吸收，用显微镜观察和MTT法研究金丝桃素及其提取物对细胞的生长抑制作用。结果光活化的金丝桃素对HepG2细胞有显著的体外杀伤效应，其抑制细胞生长的能力与金丝桃素的浓度、给药与光照的时间间隔以及光照能量密切相关。结论金丝桃素及其提取物能明显抑制HepG2细胞的生长，预示金丝桃素及其提取物在癌症治疗中有良好的开发研究前景。     

翻白草诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的研究(英文)

目的:研究翻白草乙醇提取物对人肝癌细胞HepG-2体外增殖的抑制作用及凋亡的诱导作用。方法:用不同浓度的翻白草乙醇提取物对人肝癌细胞HepG-2,MTT法测定对细胞生长的抑制率,用琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯状条带和DAPI染色观察凋亡小体,再用Western blot法检测对caspase-3和PARP蛋白表达的影响。结果:翻白草乙醇提取物对人肝癌细胞HepG-2有较强的浓度依赖性抑制作用,诱导细胞出现明显的形态学改变,琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯状条带,Western blot分析结果发现,翻白草乙醇提取物促进caspase-3活化而引发下游PARP裂解,进而诱导人肝癌细胞HepG-2细胞走向自体凋亡的途径。结论:翻白草乙醇提取物可能通过抑制人肝癌细胞HepG-2的增殖及诱导其凋亡而产生抗肿瘤作用。     

构树叶总黄酮对人肝癌HepG-2细胞增殖及其细胞周期的影响

目的： 研究构树叶总黄酮（total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP）对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。 方法： 取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L^-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化并用流式细胞仪检测细胞的周期及细胞凋亡率。 结果： MTT结果显示,各质量浓度3,6,9,12 g·L^-1的TFBP对HepG-2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系,3,6,9,12 g·L^-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细48 h后,细胞增殖抑制率分别为20.2%,29.44%,39.21%,43.96%;9 g·L^-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可达52.46%,与对照组具有显著性差异（P<0.05）;Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,随着TFBP作用浓度的增加,加药组细胞凋亡率加药组凋亡率与对照组相,有显著差异（P < 0.01）,G₀/G₁期细胞逐渐减少,G₂/M期细胞数逐渐增多,与对照组比较差异有显著性（P < 0.05）,细胞周期被阻滞在G₂/M期。 结论： TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,其抑制机制可能和诱导细胞凋亡与阻滞细胞周期有关。     

人参茎叶皂甙抑制肝癌细胞系SMMC7721增殖的实验研究

目的:探讨人参茎叶皂甙(GSL)对人肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:人肝癌细胞系 SMMC 7721在体外培养条件下,经浓度为200 gg/ml 的 GSL 作用3天后,进行如下检测:应用流式细胞仪检测对照组和 GSL 组人肝癌细胞细胞周期频数分布及细胞周期蛋白 D_1(Cyclin D_1)表达水平;运用原位杂交技术检测其 N-ras 基因 mRNA 转录水平,通过图像分析仪测量其胞浆内阳性杂交颗粒的平均吸光度值进行半定量分析。结果:GSL 组 S 期细胞数明显小于对照组(P<0.01);Cyclin D_1蛋白表达及 N-ras 基因 mRNA转录亦明显较对照组降低(P<0.0)。结论:人参茎叶皂甙通过抑制 N-ras 基因 mRNA 转录,进而 Cyclin D_1蛋白表达下调,从而使较多的人肝癌细胞被阻止于 G_1/S 检查点(checkpoint)。     

中药长必安复方浸膏溶液对人盲肠腺癌细胞系HCe-8693作用的体外研究

目的:探讨中药长必安对体外培养的人盲肠未分化腺癌细胞系(HCe-8693)的影响及其机制,并为临床使用该药治疗大肠癌提供理论依据.方法:用长必安复方浸膏溶液对HCe-8693细胞进行了体外实验,观察了不同浓度的中药对HCe-8693细胞生长、细胞集落形成率、细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响.结果:中药长必安对HCe-8693有明显的抑制作用.作用随浓度增加而增强,并以联合用药组对细胞的抑制作用为最明显.用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的结果表明,该中药主要是阻滞细胞周期中G2 M时相细胞.细胞凋亡现象也随中药浓度增高而凋亡率升高.结论:中药长必安能抑制人肠癌细胞的增殖,并能诱导肠癌细胞凋亡.当中药长必安与氟脲嘧啶(5-FU)联合用药时效果更佳,显示了中药长必安协同并增强了5-FU的抗肠癌作用.