茅莓总皂苷联合化疗药通过Fas途径协同诱导白血病HL-60细胞凋亡研究

目的 :探讨茅莓总皂苷(TSRP)抑制HL-60细胞及分别与化疗药高三尖杉酯碱(Hom)、阿糖胞苷(Ara-c)的协同作用,并探讨其协同作用的可能机制。方法 :MTT法检测不同浓度的TSRP与化疗药联用对HL-60细胞增殖影响;DAPI染色法观察一定浓度下TSRP联合化疗药诱导HL-60细胞凋亡的形态变化;Annexin V-FITC/PI检测不同浓度的TSRP与化疗药联用对HL-60细胞凋亡情况;RT-PCR检测TSRP联合化疗药干预HL-60白血病细胞后Fas和Caspase-3 mRNA表达。以上实验均用药物相互作用指数(CDI)评价药物协同作用。结果:MTT显示在一定浓度范围内TSRP和化疗药有显著的协同作用;DAPI染色法和Annexin V-FITC/PI法检测到一定浓度范围内TSRP联合化疗药后显示明显的凋亡,CDI均<1,具有协同作用;RT-PCR检测到在一定浓度范围内TSRP联合化疗较单用TSRP的FasmRNA表达明显增加和Caspase-3 mRNA表达明显减少,CDI均<1,具有协同作用。结论:TSRP分别和化疗药Hom或Ara-c联用对HL-60细胞有明显的协同增殖抑制和诱导凋亡作用,可能是通过Fas-Caspase途径增强凋亡效应,从而增加化疗药物的敏感性,具有良好的临床应用前景。     

紫草素诱导白血病HL-60细胞凋亡及其机制研究

目的：研究紫草素在体外对人早幼粒白血病细胞株HL-60增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法：MTT比色法检测紫草素对HL-60细胞增殖的抑制作用;AnnexinV／PI双标记流式细胞术检测紫草素对HL-60细胞凋亡率。结果：MTT测定显示紫草素能够对HL-60细胞起到明显的增殖抑制作用,且呈现剂量一效应依赖关系。AnnexinV／PI显示紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,凋亡率呈剂量依赖性。结论：紫草素能抑制人白血病HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。     

灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究

应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、ＤＮＡ片段凝胶电泳及ＤＮＡ片百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长及ＨＬ－６０细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长有促进作用,而对白血病系ＨＬ－６０细胞集落生长则表现了剂量依赖性抑制;细胞形态学经为芝复方对ＨＬ－６０细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。８和１６ｍｇ／ｍｌ灵芝复方作用４８ｈ,可使ＨＬ－６０细     

茅莓总皂苷和高三尖杉酯碱、阿糖胞苷体外协同诱导白血病细胞凋亡的机制研究

目的:探讨茅莓总皂苷(TSRP)抑制K562和人原代白血病细胞及分别与化疗药高三尖杉酯碱(Hom)、阿糖胞苷(Ara-c)的协同作用,并探讨其协同作用的可能机制。方法:MTT法和PHA-LCM液相-半固体二步培养法检测不同浓度的TSRP对K562和人原代白血病细胞增殖及其与化疗药联用后的影响;观察TSRP分别和Hom、Ara-c联用的抑制作用,用药物相互作用指数评价药物协同作用;DAPI染色法观察一定浓度下TSRP协同化疗药诱导K562细胞凋亡;Western blot检测促凋亡蛋白Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和Cleaved PARP以及抗凋亡蛋白Survivin的表达。结果:TSRP能够抑制K562和人原代白血病细胞的增殖,呈浓度依赖性,在一定浓度范围内TSRP和化疗药有显著的协同作用;DAPI染色法观察TSRP和化疗药协同较单用化疗药出现明显凋亡现象,诱导细胞发生凋亡;Western blot检测TSRP联合Hom较单用Hom显著提高了K562细胞内PARP、Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-9的活性;TSRP联合Ara-c较单用Ara-c显著提高了K562细胞内PARP和Cleaved caspase-3的活性,但是对Cleaved caspase-9的活性影响差别不大;TSRP联合Hom或Arac对Survivin的活性影响均未见明显差别。结论:TSRP分别和化疗药Hom或Ara-c联用对K562和人原代白血病细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡作用,且主要是通过线粒体途径增强凋亡效应,从而增加化疗药物的敏感性,具有良好的临床应用前景。     

六神丸诱导白血病细胞株HL-60细胞凋亡的实验研究

目的从诱导细胞凋亡角度探讨六神丸治疗白血病的机理.方法选择HL-60细胞为实验对象,以六神丸及其主要成分之一的蟾酥进行该实验.以台盼蓝染色作为细胞的活力指标,采用显微镜和流氏细胞仪检测方法来观察细胞凋亡.结果显示六神丸、蟾酥在较高的浓度时表现为细胞毒作用,在较低浓度时则有诱导细胞凋亡作用.其效果与药物浓度及作用时间密切相关.结论这可能是六神丸治疗白血病的机制之一.     

右旋柠烯诱导人白血病HL-60细胞凋亡及其机制的研究

目的:探讨右旋柠烯诱导人髓性白血病HL60细胞凋亡的作用及其相关机理。方法:采用碘化丙啶染色法、流式细胞仪技术、荧光染色以及免疫细胞化学技术,观察右旋柠烯对白血病细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。结果:不同浓度的右旋柠烯(0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mmol/L)均对白血病细胞增殖有抑制作用,呈时间及剂量依赖关系。右旋柠烯可诱导白血病细胞凋亡,浓度在0.5、0.75、1.0mmol/L时的凋亡率(%)分别为7.31±1.17,30.07±2.17,25.06±1.78。荧光染色可见细胞凋亡的形态学改变,随右旋柠烯浓度的增高,细胞内Bcl2蛋白的表达逐渐减少,细胞内的突变型P53及bcl2基因蛋白表达没有变化。结论:右旋柠烯可以抑制HL60细胞增殖并可以诱导其凋亡,其作用机理与下调细胞内的Bcl2蛋白的表达有关。     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡机制的探讨

目的：本实验拟用熊果酸干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞,体外培养实验,证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用,并通过免疫细胞化学方法检测bcl-2,survivin在熊果酸与该细胞株作用后表达,探讨熊果酸诱导HL-60细胞调亡可能的分子机制。方法：荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率：琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA;免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Survivin蛋白。结果：荧光显微镜下观察,80gmol／LUA作用24h的HL一60细胞可看到典型的细胞凋亡形态学变化;40umol／L、80umol／LuA可使G0／G1期细胞增多,出现G0／G1期阻滞,S期和G2／M期细胞数减少,凋亡细胞峰（sub-G1）及凋亡率逐渐增高,Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,当UA浓度为40gmol／L时,P〈0．01,有显著性差异。结论：UA呈浓度和时间依赖性抑制HL．60细胞增殖,诱导其凋亡机制可能与下调Bcl-2、Survivin蛋白表达有关。     

全蝎能诱导HL-60细胞凋亡

天津中医学院一附院血液科承担的课题“全蝎诱导HL-60细胞(即急性早幼粒细胞白血病细胞株)凋亡及对其相关基因的影响”通过成果鉴定。 全蝎用于临床治疗白血病有良好疗效。天津中医学院一附院血液科的研究人员采用细胞培养、流式细胞仪及分子生物学等实验方法,观察了全蝎对HL-60细胞增殖、周期分布、凋亡及其相关基因表达等方面的作用。他们发现,全蝎对HL-60细胞增殖有抑制作用,并可诱导其凋亡。其机理是全蝎提高了促凋亡基因P53和C-myc的表达,同时调低了抑制凋亡基因bcl-2的表达。为中医治疗白血病提供了新的思路。 全蝎能诱导HL-60细…     

菱角提取物诱导HL-60细胞凋亡的机制探讨

目的 探讨菱角提取物对人早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60细胞增殖和凋亡的影响及凋亡的分子机制.方法 采用MTT法检测菱角提取物对HL-60细胞的增殖抑制作用;吖啶橙染色和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化;比色法测定Caspase-3、9蛋白活性.结果 菱角提取物能抑制HL-60细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性.菱角提取物可诱导HL-60细胞凋亡并显示一定的剂量依赖关系.与对照组比较,菱角提取物可明显降低HL-60细胞线粒体膜电位,上调Caspase-3、9蛋白活性.结论 菱角提取物可抑制HL-60细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位、激活Caspase-3、9蛋白继而诱导HL-60细胞凋亡有关.     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡及其机制的初探

目的研究熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制及诱导凋亡作用,探讨其中可能的分子机制。方法用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,免疫细胞化学技术研究熊果酸处理HL-60细胞后,Bcl-2,Survivin蛋白的表达情况。结果 MTT法证实熊果酸对细胞抑制作用强,呈明显的浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL-60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变:细胞染色质浓缩,聚集于核边缘;细胞体积缩小,核固缩深染,凋亡小体形成。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于Go/G1期。免疫细胞化学技术检测熊果酸作用24 h后Bcl-2蛋白表达降低,Survivin蛋白表达降低。结论熊果酸体外可抑制急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与凋亡基因Bcl-2,survivin表达下调有关。     

华蟾素诱导白血病细胞株HL-60凋亡的实验研究

华蟾素 (Cinobufacini)是中华大蟾蜍皮水溶性成分制成的注射液。经实验研究及临床实验表明有一定的抗肿瘤作用 ,且毒副作用小 ,使用安全可靠 [1 ,2 ]。目前已试用于某些消化系统肿瘤如肝癌、胃癌等的治疗。华蟾素是以蟾皮为主要原料制成的一种水溶性制剂 ,临床和实验研究都表明其具有一定的抗肿瘤作用。但尚未有文献报道其有诱导白血病细胞株 HL-6 0凋亡的作用。笔者观察了华蟾素对白血病细胞增殖和凋亡的影响 ,并对其机制作了初步的探讨 ,为应用华蟾素治疗白血病提供一定的实验依据。1　材料和方法1.1　主要试剂及药品 :小牛血清 :杭州四…     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗白血病的疗效机理。该当以ＨＬ－６０细胞株为体外模型，终浓度为０．２０μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３作用２４、４８ｈ后，用ＰＩ／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ双标记，流式细胞术观察Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０细胞凋亡及其对细胞株端粒酶活性的影响。结果：Ａｓ２Ｏ３作用于ＨＬ－６０细胞后ＰＩ阴性／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ细胞性细胞增多，提示细胞发生凋亡，ＤＮＡ周期分析显示主要作用在     

六神丸诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:从细胞凋亡角度探讨六神丸治疗白血病的机理,为临床应用提供依据。方法:分别制备六神丸乙醇提取剂和六神丸含药血清,用MTT法检测六神丸对HL-60细胞增殖的抑制作用,吉姆萨染色观察细胞凋亡的形态学变化,原位末端标记(POD)法检测细胞凋亡现象。结果:六神丸乙醇提取剂对HL-60细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈现浓度依赖关系;中剂量组所得六神丸含药血清对HL-60细胞增殖的抑制作用优于低剂量组和高剂量组。吉姆萨染色显示六神丸乙醇提取剂和六神丸含药血清处理过的HL-60细胞均出现典型的凋亡形态。原位末端标记表明,六神丸乙醇提取剂诱导HL-60细胞凋亡在一定范围内呈现时间-浓度依赖关系;六神丸含药血清诱导HL-60细胞凋亡作用优于As_2O_3血清组和空白血清组(P<0.01)。结论:六神丸体外诱导HL-60细胞凋亡可能是六神丸治疗白血病的作用机制之一。     

六神丸诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:观察六神丸诱导HL-60白血病细胞凋亡的作用.方法:应用TUNEL法和Annexin V/PI双染法检测不同浓度和不同时间段六神丸诱导HL-60细胞的凋亡率.结果:TUNEL法表明凋亡率与剂量呈正相关性,100μg/mL六神丸凋亡率最高;Annexin V/PI双染法表明50μg/mL六神丸作用32h凋亡率最高.结论:六神丸可诱导白血病细胞凋亡.     

人参皂甙诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的：观察人参皂甙（GS）是否具有诱导髓性白血病HL－60细胞株的凋亡作用。方法：取不同浓度的GS处理HL－60细胞，观察GS所致的细胞形态学的变化；流式细胞术分析细胞DNH含量的改变，并进行DNA片段分析（DNA Ladder);用Annexin V-FITC试验法分析细胞凋亡百分率。结果：人参皂甙能够抑制HL－60细胞生长，在一定剂量和时间范围内可引起细胞凋亡。结论：提示人参皂甙能特异性地诱导HL－60细胞凋亡，可为临床应用人参皂甙作为化疗药物的辅助剂治疗白血病提供实验依据。     

赤雹根总皂苷体外诱导人白血病NB4细胞凋亡及其机制研究

目的 探讨赤雹根总皂苷(TSTR)对白血病NB4细胞的诱导凋亡作用及其机制.方法 以不同的浓度的TSTR作用于体外培养的NB4细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度TSTR作用后细胞凋亡率,应用Western blot检测细胞凋亡后Caspase-3及其裂解底物多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP(poly ADP-ribose polymerase)的表达水平.结果 与空白对照组比较,给药24 h后,TSTR能显著抑制NB4细胞增殖和促进NB4细胞凋亡,并呈剂量依赖性,Western blot检测结果表明TSTR作用24h后Caspase-3酶原呈下调趋势,出现的17kDa亚单位呈上调趋势,同时PARP裂解出现89kDa的亚单位呈上调趋势.结论 TSTR对白血病NB4细胞具有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用,TSTR诱导NB4细胞凋亡可能通过激活Caspase-3而实现.     

鸦胆子油乳诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的 :研究鸦胆子油乳诱导HL-60细胞凋亡的作用。方法 :鸦胆子油乳 1∶100 ,1∶40 ,1∶20(V/V)分别处理HL-60细胞 6h ,琼脂糖凝胶电泳法 ,流式细胞仪法 ,荧光显微镜法 ,电镜分别观察药物诱导HL 60细胞凋亡的作用。结果 :鸦胆子油乳 1∶40组产生明显DNA梯状条带 ;流式细胞仪检测药物浓度为 1∶40 ,1∶20组的凋亡细胞百分率分别为 86.8%和97% ;鸦胆子油乳 1∶40组在荧光显微镜呈现明显凋亡细胞特征 ;药物浓度为 1∶40 ,1∶20组的细胞经电镜观察呈现明显凋亡细胞特征。结论 :鸦胆子油乳 1∶20和 1∶40组有明显的诱导HL-60细胞凋亡的作用。     

三七总皂甙注射液体外诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的观察三七总皂甙诱导人白血病细胞株HL-60细胞凋亡作用及机制。方法在体外细胞培养的基础上用200～1600μg/ml三七总皂甙处理HL-60细胞,光镜下观察细胞形态；用MTT法测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测凋亡峰,免疫组化法检测p53和bcl-2凋亡相关基因的表达,采用真彩色图像分析仪定量分析。结果200～1600μg/ml三七总皂甙可抑制HL-60细胞生长,抑制率有剂量依赖性。细胞凋亡峰随药物浓度增大而增加。三七总皂甙800、1600μg/ml可使p53表达上调,bcl-2表达明显下降,表达改变有浓度依赖性。结论三七总皂甙在体外可抑制HL-60细胞生长,诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用与凋亡相关基因p53表达上调、而抗凋亡基因bcl-2表达下调有关。     

虎眼万年青总皂苷诱导活化肝星状细胞凋亡机制研究

目的:探索虎眼万年青总皂苷诱导活化肝星状细胞(HSC)凋亡机制。方法:肝星状细胞培养至对数生长期,接种于6孔板,加入肿瘤坏死因子-α(TNF-α)至最终浓度为10ng/mL。采用蛋白免疫印迹测定虎眼万年青总皂苷对激活的t-HSC细胞总蛋白MMP-13、TIMP-1以及核蛋白中NF-κB p65的表达。结果:虎眼万年青总皂苷可诱导肝星状细胞的凋亡,通过激活NF-κB诱导MMP-13表达,最终诱导细胞凋亡。结论:虎眼万年青总皂苷可诱导活化肝星状细胞凋亡。