乳腺癌局部微环境中免疫相关细胞因子mRNA表达状态及临床病理意义

目的 研究乳腺癌局部微环境中免疫相关细胞因子干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-βmRNA表达的状况,并与临床病理特征相比较,探讨其意义.方法 48例乳腺浸润性导管癌手术切除标本,根据是否淋巴结转移分为两组,采用地高辛末端标记的寡核苷酸探针,以原位杂交技术检测肿瘤浸润单个核细胞和肿瘤细胞IFN-γ、IL-10和TGF-βmRNA的表达状况.结果 淋巴结转移组乳腺癌细胞TGF-β和IL-10 mRNA表达明显高于无淋巴结转移组(TGF-β[%/积分指数]:46.25±12.88/0.49±0.27 vs 19.33±7.69/0.28±0.18;IL-10[%/积分指数]:39.08±17.49/0.42±0.19 vs 22.58±7.87/0.33±0.17,t=4.330,P<0.01;t=2.962,P<0.05),TGF-βmRNA在乳腺癌细胞中表达的差别更为明显.未检出IFN-γmRNA阳性肿瘤细胞.肿瘤间质浸润的单个核细胞中,淋巴结转移组IFN-γmRNA阳性细胞明显低于TGF-β、IL-10 mRNA阳性细胞(TGF-β:35.58±13.62/0.40±0.25,IL-10:40.83±15.49/0.47±0.22,IFN-γ:18.17±8.41/0.18±0.08,t=3.005,P<0.05;t=4.390,P<0.01;t=3.563,P<0.01).结论 乳腺癌组织局部微环境中,调节T细胞和Th2免疫相关细胞因子mRNA表达明显占优势,使得肿瘤免疫微环境趋于抗瘤免疫反应抑制状态.     

原发性肝癌患者外周血中IL-8、IP-10及其mRNA表达

[目的]探讨原发性肝癌患者外周血IL-8、IP-10及其mRNA表达,局部肿瘤手术切除对其表达的影响。[方法]选择2006年1月~2006年12月安徽理工大学附属医院、淮南新华医院收治的原发性肝癌患者64例,选取健康人群70例为正常对照组。以酶联免疫吸附检测患者血清中IP-10、IL-8蛋白含量;荧光实时定量PCR检测患者外周血单个核细胞内IP-10mRNA、IL-8mRNA含量。[结果]原发性肝癌患者血清IL-8、IP-10水平分别为(486.2±52.3)pg/ml、(386.7±42.5)pg/ml;PBMC内IL-8mRNA、IP-10mRNA水平分别为(1.1352±0.1395)、(0.6387±0.0768),显著高于正常对照组(P﹤0.01);22例原发性肝癌患者第1周血清IL-8、IP-10及其mRNA水平应激性升高,术后1周血清IL-8、IP-10分别为(869.6±90.7)pg/ml、(439.8±51.5)pg/ml;PBMC内IL-8mRNA、IP-10mRNA水平分别为(1.3671±0.1447)、(0.8032±0.0817),与术后第1个月、第3个月比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]原发性肝癌患者外周血中IL-8、IP-10及其mRNA表达高于正常对照组,局部肿瘤切除手术后1周内导致外周血IL-8、IP-10及其mRNA认识应激性升高,其随术后恢复而逐渐下降。     

晕船过程大鼠脑内5-羟色胺受体mRNA变化规律

目的 探讨晕船适应过程中5-羟色胺(5-HT)受体mRNA的变化规律.方法 大鼠模拟晕船刺激后,定位取出脑干前庭核,应用实时定量PCR法检测晕船适应过程中5-HT1A、5-HT1B、5-HT1D和5-HT1F受体mRNA变化规律.结果 5-HT1A、5-HT1D受体mRNA表达量在晕船刺激第1 d开始升高,分别为晕船刺激前的2.32和2.71倍(P＜0.01),在晕船刺激3 d后达高峰,分别为晕船前的2.54,7.63倍(P＜0.01),5-HT1B受体在模拟晕船刺激第1 d无明显变化,但在模拟晕船刺激第3 d明显升高,为晕船前的2.72倍(P＜0.01),模拟晕船刺激7 d后各受体mRNA表达量均开始回落,14 d接近正常水平;5-HT1F受体mRNA表达量在晕船适应前后无明显变化.结论 5-HT1受体可能在晕船的发生及适应过程中发挥重要作用.     

肝硬化患者外周血IL-8及其mRNA表达

目的 探讨肝硬化患者血清白细胞介素-8(IL-8)含量及外周血单个核细胞(PBMC)中IL-8 mRNA表达.方法 筛选典型HBV感染后肝硬化患者,以ELISA法检测血清IL-8水平;Real-time PCR检测PBMC中IL-8 mRNA含量.结果 肝硬化患者外周血IL-8及其mRNA水平分别为(431.39±97.39)pg/ml,1.112 5±0.202 4与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01).而且病毒复制组表达水平高于非复制组(P<0.01,P<0.05),丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)升高者外周血IL-8及其mRNA均明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 肝硬化患者外周血IL-8及其mRNA表达增高,并与体内病毒复制水平、肝细胞损伤程度密切相关.IL-8在介导肝硬化进展中起重要作用.     

HBV感染产妇及新生儿外周血IL-8、IL-8mRNA表达

目的探讨HBV感染产妇外周血IL-8、IL-8mRNA的表达及其对新生儿的影响。方法以ELISA法检测产妇、新生儿乙肝标志物和血清IL-8含量,Real-timePCR检测产妇PBMC与新生儿CBMC中IL-8mRNA含量。结果 HBV感染产妇有59.76%(49/82)的新生儿出现宫内感染,其中新生儿出现单一HBsAg(+)者为27.27%,"小三阳"者为62.50%,"大三阳"者为82.14%。HBV感染产妇、新生儿外周血IL-8、IL-8mRNA的表达水平均高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HBV感染产妇和新生儿外周血IL-8、IL-8mRNA水平均显著增高,两者呈正相关,HBV感染可能是介导产妇和新生儿外周血IL-8、IL-8mRNA水平升高的重要原因。     

CD105和F-8RAg在乳腺癌的表达及其生物学行为的关系

目的观察CD105在乳腺癌的表达和探讨CD105与乳腺癌生长侵袭转移的关系.方法采用免疫组化S-P法,检测50例乳腺浸润性导管癌,20例乳腺导管内癌,20例乳腺良性增生组织CD105和F-8RAg标记的微血管密度.结果 CD105的表达在乳腺浸润性导管癌明显高于乳腺导管内癌及乳腺良性增生组织(P值均＜0.01).F-8RAg的表达在乳腺浸润性导管癌和导管内癌中MVD均明显高于良性增生组织(P＜0.01).在乳腺浸润导管癌组织中CD105与F-8RAg的表达存在显著性差异(P＜0.01),乳腺导管内癌和良性增生组织中CD105与F-8RAg的表达无显著性差异(P＞0.05).结论 CD105在乳腺癌的表达与其生长侵袭和转移密切相关,癌组织中MVD计数明显优于F-8RAg.     

血管内皮生长因子和血小板反应素-1在甲状腺乳头状癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和血小板反应素(TSP)-1在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系.方法 应用免疫组织化学Envision法检测80例PTC组织和50例正常甲状腺组织中VEGF和TSP-1的表达情况,并检测肿瘤微血管密度(MVD),分析VEGF和TSP-1的表达与肿瘤血管生成的关系.结果 PTC组织中VEGF阳性表达率和MVD分别为75.0％(60/80)、68.4±6.8,均明显高于正常甲状腺组织的0、25.9±3.7,而TSP-1阳性表达率38.8％(31/80)明显低于正常甲状腺组织的80.0％(40/50),差异均有统计学意义(P＜0.05).VEGF、TSP-1阳性表达率和MVD水平在80例PTC组织中均与是否有颈部淋巴结转移、浸润深度以及AJCC分期密切相关(P＜0.01).PTC组织中VEGF的阳性表达率与MVD呈正相关(r=0.605,P＜0.05),TSP-1的阳性表达率与MVD呈负相关(r=-0.564,P＜ 0.05),而VEGF、TSP-1阳性表达率之间呈负相关(r=-0.513,P＜0.05).结论 VEGF和TSP-1参与了肿瘤血管生成,并与PTC的浸润、转移和预后密切相关.     

COX-2、HIF-1α在乳腺癌组织中的表达及其与微血管生成的关系

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与微血管密度(MVD)的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测50例乳腺癌、20例癌旁组织中COX-2、HIF-1α蛋白的表达情况.用CD34抗体标记乳腺癌血管内皮细胞,计算MVD.结果 乳腺癌组织中COX-2的阳性表达率为66%(33/50),HIF-1α的阳性表达率为60%(30/50),显著高于癌旁组织(P＜0.01),在乳腺癌组织中COX-2、HIF-1α蛋白表达之间存在显著正相关(r=0.630.P＜0.01).COX-2、HIF-1α表达与淋巴结转移、临床分期显著相关(P＜0.05),与患者的年龄、肿瘤大小无明显相关性(P＞0.05),COX-2、HIF-1α阳性的乳腺癌组织MVD高于阴性者,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 乳腺癌组织中存在COX-2、HIF-1α的高表达.COX-2蛋白可通过诱导HIF-1α蛋白的表达上调,增强乳腺癌细胞的侵袭力,促进乳腺癌浸润、转移.     

Twist、p53和E-钙黏附蛋白联合检测在乳腺癌中意义

目的 观察乳腺癌中Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达及其相互关系.方法 选取初次就诊的30例乳腺癌患者行改良根治术的乳腺癌组织和癌旁组织及10例乳腺良性病变患者的正常乳腺组织,分别应用RT-PCR的方法检测Twist、p53和E-钙黏附蛋白mRNA的表达,与临床病理因素关系及其相互关系.结果 乳腺癌组织Twist mRNA表达与分化程度[高中分化93.33％(14/15),低分化53.33％(8/15)]、淋巴管浸润[是93.75％(15/16),否50.00％(7/14)]和TNM分期[Ⅰ～Ⅱ期46.15％(6/13),III～Ⅳ期94.12％(16/17)]有明显相关性(P＜0.05),而与年龄、肿瘤直径、外膜浸润、雌激素受体和孕激素受体无明显相关性(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist和p53 mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显升高[(112.36±12.53)％比(101.37±9.12)％和(98.03±9.04)％、(101.73±13.32)％比(91.43±7.43)％和(90.83±6.58)％,P＜0.01],而E-钙黏附蛋白mRNA表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显降低[(55.43±12.49)％比(69.39±5.63)％和(72.73±7.93)％,P＜0.01],癌旁组织和正常乳腺组织比较差异无统计学意义(P＞0.05).乳腺癌组织中Twist mRNA表达与p53 mRNA呈正相关(r=0.526,P=0.004),而与E-钙黏附蛋白mRNA表达呈负相关(r=-0.500,P=0.000).结论 Twist和p53在乳腺癌组织中呈高表达,而E-钙黏附蛋白呈低表达.Twist可能通过上调p53的表达,同时下调E-钙黏附蛋白的表达,从而促进乳腺癌的浸润、转移,并在其中起重要作用.     

Snail mRNA及E—cadherin mRNA在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨Snail mRNA及E—cadherin mRNA在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义。方法应用原位杂交技术测30例乳腺单纯性增生、30例乳腺导管内癌和70例乳腺浸润性导管癌组织中Snail mRNA及E—cadherin mRNA的表达。结果Snail mRNA及E—cadherin mRNA在乳腺单纯性增生、乳腺导管内癌和乳腺浸润性导管癌组织中的阳性率分别为23．3％、46．7％、81．4％和96．7％、66．7％、35．7％,差异有统计学意义（P〈0．01）;Snail mRNA及E-cadherin mRNA在同组间表达差异有统计学意义（P〈0．05）;Snail mRNA表达与年龄、肿瘤大小和组织学分级无关（P〉0．05）,淋巴结转移与否Snail mRNA表达差异有统计学意义（P〈0．01）;E-cad mRNA表达与年龄、肿瘤大小无关（P〉0．05）,淋巴结转移与否、不同组织学分级E-cad mRNA表达差异有统计学意义（P〈0．01）;Snail mRNA与E-cadherin mRNA的表达呈负相关（r=-0．56,P=0．00）。结论Snail mRNA过表达与E-cadherin mRNA低表达可能参与乳腺癌浸润转移的发生,并与淋巴结转移密切相关,因而检测两者的表达对判断乳腺癌预后、转移有重要价值。     

乳腺癌组织芯片中Survivin的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的探讨Survivin在乳腺癌组织芯片中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法免疫组化S-P法检测80例乳腺疾病（乳腺良性增生18例和乳腺癌62例）标本组织芯片中Survivin蛋白的表达,并探讨其与患者组织学分级、临床分期和淋巴结转移等临床病理特征和预后的关系。并取20例癌旁正常组织作对照。结果正常乳腺、乳腺良性增生及乳腺癌组织中Survivin的阳性表达率分别为0（0／20）、33．3％（6／18）和72．5％（45／62）,Survivin在正常乳腺、乳腺良性增生及乳腺癌组织中的表达呈逐渐增高趋势（x^2=34．62,P〈0．01）。乳腺癌组织中Survivin的表达与临床分期、淋巴结转移和生存年限相关（r=0．452,0．502,-0．423,P〈0．05或P〈0．01）,与组织学分级无关（P〉0．05）。结论Survivin蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段的表达呈进行性上升趋势,Survivin蛋白可促进乳腺癌细胞的侵袭、转移等活动,与患者的预后密切相关。     

Sema4D和HER-2在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Sema4D和人类表皮生长因子受体2（HER-2）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学sP法检测110例乳腺癌组织中Sema4D和HER-2的表达,并检测肿瘤微淋巴管密度（Microlymphtic vessel density,MLVD）。结果乳腺癌组织中Sema4D和HER-2蛋白的阳性表达率分别为71．82％（79／110）和33．64％（37／110）,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）：淋巴结转移阳性组的Sema4D阳性表达率和MLVD值显著高于淋巴结转移阴性组（P〈0．01）;Sema4D和HER-2阳性表达与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及ER表达状态显著相关（P〈0．05）,而与肿瘤大小及PR表达状态无关（P〉0．05）。相关分析结果显示Sema4D与HER-2表达呈正相关（r=0．535,P〈0．01）;单因素生存分析显示,Sema4D高表达组的5年生存率（74．19％）高于低表达组（53．16％）,其差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Sema4D可能对乳腺癌的发生、发展起重要作用。     

EZH2蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的研究EZH2蛋白在乳腺癌中的表达情况及其临床意义。方法通过免疫组化SP法检测EZH2蛋白在40例乳腺癌伴有淋巴结转移、63例乳腺癌不伴淋巴结转移及31例乳腺增生组织中的表达情况。结果从乳腺增生-乳腺癌不伴淋巴结转移-乳腺癌伴有淋巴结转移,EZH2蛋白阳性表达率依次增强,分别为22.58%、52.38%、75.00%。EZH2与患者乳腺癌及淋巴结转移呈显著关系（p〈0.01）。结论 EZH2蛋白在乳腺癌中高表达,尤其是在乳腺癌伴有淋巴结转移中的表达显著提高,提示EZH2的过表达与乳腺癌进展及不良预后有关。     

人乳头瘤病毒16、18感染对乳癌的诱导作用

目的探讨人乳头瘤病毒16、18(HPV16、18)感染与乳腺癌发生发展的关系。方法选取乳腺癌和乳腺增生患者各50例,其中乳腺癌患者中浸润性导管癌25例、单纯癌18例、其他类型7例,采用原位杂交法检测所有患者人乳头瘤病毒16、18的表达,对两组患者及不同组织学分型乳腺癌患者中人乳头瘤病毒16、18表达情况进行统计分析。结果乳腺癌组HPV16感染率、HPV18感染率及HPV16、HPV18感染率分别为36.00%、20.00%和18.00%,乳腺增生组三者感染率分别为8.00%、4.00%和4.00%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。浸润性导管癌、单纯癌及其他类型乳腺癌三组患者中HPV16感染率、HPV18感染率及HPV16、HPV18感染率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HPV16、18感染与乳腺癌的发生发展密切相关,但乳腺癌的组织分型与HPV16、18感染无明显关系。     

人乳头瘤病毒16、18感染对乳癌的诱导作用

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)16、18感染与乳癌的发病关系。方法用原位杂交法检测60例乳癌和60例乳腺增生症中HPV16、18表达。结果在乳癌中HPV16、18感染率分别为45%和55%、在乳腺增生症分别为15.00%和16.67%(P<0.05),在不同组织学类型以及有无淋巴结转移中HPV16、18的感染率差异无明显性(P>0.05)。结论HPV16、18感染能够诱导乳癌的发生,HPV16、18感染与乳癌组织学类型以及有无淋巴结转移无明显相关性。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子和血管内皮生成因子-C在乳腺癌的表达及其意义

目的 研究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）和血管内皮生成因子-C（VEGF-C）蛋白表达与乳腺癌浸润和转移之间的关系.方法 免疫组化法检测乳腺增生组21例、导管内癌组10例、浸润性导管癌组68例病灶内EMMPRIN和VEGF-C蛋白的表达情况.结果 EMMPRIN蛋白在增生组、导管内癌组、浸润性导管癌组表达阳性率分别为4.76%（1/21）、40.00%（4/10）73.53%（50/68）,3组之间的阳性率差异均有统计学意义（P〈0.01）.VEGF-C蛋白在增生组、导管内癌组、浸润性导管癌组表达阳性率分别为14.29%（3/21）、60.00（6/10）、77.94%（53/68）,导管内癌组和浸润性导管癌组阳性率明显高于增生组（P〈0.01）.乳腺癌组织中EMMPRIN和VEGF-C的表达呈正相关（rs=0.390,P〈0.01）,而且EMMPRIN和VEGF-C的表达与腋窝淋巴结转移及淋巴结转移数目有关（P〈0.01）.结论 EMMPRIN和VEGF-C的过度表达是促进乳腺癌浸润和转移的重要因素,二者在乳腺癌的浸润和转移过程中可能起着协同作用.     

人乳腺癌Kaiso的核表达与乳腺癌恶性表型关系的研究

目的研究BTB/P0Z蛋白家族成员Kaiso在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理学参数的关系。方法应用免疫组织化学法研究120例不同临床分期乳腺癌组织及39例乳腺增生组织中Kaiso的表达情况与亚细胞定位,并对其与乳腺癌临床病理参数进行相关性分析。结果免疫组织化学染色表明在120例乳腺癌组织中Kaiso呈明显的核表达,核阳性率为65.00%(78/120),而在39例对照组乳腺增生组织中呈零或极微弱的表达。Kaiso蛋白核表达与乳腺癌组织TNM分期(P=0.000)和淋巴结转移(P=0.001)呈正相关;而与乳腺癌患者的性别、年龄以及乳腺癌组织分化程度均无明显相关性(P0.05)。结论 Kaiso在乳腺癌中主要为核表达,且Kaiso的表达与乳腺癌的恶性表型及转移呈正相关,提示Kaiso可能成为乳腺癌新的肿瘤标志物和治疗靶点。     

1357例妇女乳腺超声检查结果分析

目的：探讨超声检查在妇女乳腺疾病普查中的应用价值。方法：回顾性分析1357例行二维超声及彩色多普勒检查的患者资料。结果：乳腺小叶增生症885例（65．21％）,乳腺纤维腺瘤170例（12．52㈣,乳管扩张症26例（1．91哟,乳腺囊肿30例（2．21％）,乳腺脂肪瘤12例（0．88嘲,乳腺癌7例（0．51％）,乳腺导管内乳头状瘤1例（0．07％）,双乳未见明显异常226例（t6．65％）。结论：运用超声检查对妇女进行乳腺疾病普查对乳腺疾病的早期发现、早期诊断、早期治疗具有极其重要的意义。     

PIM-1蛋白激酶在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨PIM-1蛋白激酶在乳腺癌组织、乳腺非典型增生组织及正常乳腺组织中的表达及生物学意义。方法利用免疫组织化学、Westernblot方法检测乳腺癌组织、乳腺非典型增生组织和正常乳腺组织中P1M-1蛋白激酶的表达水平。结果乳腺癌组织、乳腺非典型增生组织和正常乳腺组织中PIM-1蛋白激酶的阳性表达率分别为78．75％（63／80）、42．00％（21／50）、23．33％（7／30）;乳腺癌组织中PIM-1的蛋白水平明显高于癌旁正常乳腺组织（灰度值：118．807±19．99VS103．062±13．51,t=8．578,P〈0．05）;PIM-1蛋白激酶的表达与乳腺癌的P-TNM分期和淋巴结转移密切相关（P：0．004,P=0．003）,与年龄和肿块大小无关（P=0．654,P=0．084）。结论PIM-1在乳腺癌中表达阳性率明显高于非典型增生的乳腺组织和正常乳腺组织,PIM-1可能是乳腺癌形成过程中的早期分子事件,其表达增强与乳腺癌的浸润性发展密切相关,有可能成为新的早期筛查和判断乳腺癌生物学行为的诊断指标。利用石蜡标本检测指标是可行的,具有方便,易得,经济的特点。