酒大黄对动脉粥样硬化兔血脂和NO 及主动脉iNOS表达的影响

目的:探讨酒大黄对实验性动脉粥样硬化(AS)兔血脂、血清一氧化氮(NO)含量及主动脉诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:将健康雄性新西兰兔32只随机分为4组(n=8):空白对照组(N组)、AS模型组(M组)、酒大黄低剂量组(L组)和酒大黄高剂量组(H组),常规高脂饮食建立动脉粥样硬化模型。治疗给药12周,全自动生化分析仪检测血清脂蛋白的表达水平,硝酸还原酶法检测家兔血清NO水平,免疫组织化学法检测主动脉组织iNOS蛋白表达,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测兔主动脉组织iNOS mRNA的表达。结果:12周末与模型组相比,酒大黄低、高剂量组血清总胆固醇(TC),低密度脂蛋白(LDL),血清NO含量明显下降(P<0.01或P<0.05),高密度脂蛋白(HDL)明显升高(P<0.01),酒大黄高剂量组甘油三脂(TG)水平显著降低(P<0.01)。主动脉组织iNOS组化染色及iNOS mRNA的表达均明显减弱(P<0.01或P<0.05)。结论:酒大黄干预能抑制AS兔主动脉iNOS及其mRNA的过度表达,减少NO的产生,降低血脂,有利于延缓动脉粥样硬化进程。     

补阳还五汤对动脉粥样硬化小鼠诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的:研究补阳还五汤对动脉粥样硬化小鼠一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶表达的影响。方法:喂饲高脂饲料复制小鼠动脉粥样硬化模型;Griess法检测血浆中NO水平;蛋白质免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶的表达。结果:动脉粥样硬化小鼠9周开始出现一氧化氮显著增加,补阳还五汤显著抑制一氧化氮水平,并降低诱导型一氧化氮合酶的表达。结论:补阳还五汤可能通过抑制诱导型一氧化氮合酶的表达降低动脉粥样硬化小鼠一氧化氮水平,防治动脉粥样硬化。     

脂必妥对动脉粥样硬化小鼠iNOS表达的影响

目的:研究脂必妥对动脉粥样硬化小鼠一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶表达的影响。方法:喂饲高脂饲料复制小鼠动脉粥样硬化模型,G riess法检测血浆中NO水平,蛋白质免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶的表达。结果:动脉弱样硬化小鼠9周开始出现一氧化氮显著增加,脂必妥显著抑制一氧化氮水平,并降低诱导型一氧化氮合酶的表达。结论:脂必妥可能通过抑制诱导型一氧化氮合酶的表达降低动脉粥样硬化小鼠一氧化氮水平,防治动脉粥样硬化。     

玉屏风散对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮生成的影响及机理

目的:研究玉屏风散对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法:制备玉屏风散水煎液,分离健康昆明种小鼠原代腹腔巨噬细胞进行体外培养,培养基中分别加入不同剂量上述药液使终末浓度分别达到1.67、3.33、8.33、16.67 g/L(折合生药)进行细胞培养,并设空白对照组.培养24h后,分别用Griess法和免疫细胞化学法检测NO生成量和iNOS表达量.结果:与空白对照组相比,玉屏风散加药组NO生成量和iNOS表达量显著增加(P＜0.05).结论:玉屏风散可以刺激小鼠腹腔巨噬细胞NO的生成,且可能通过诱导巨噬细胞表达iNOS,继而产生NO.这可能是玉屏风散增强机体免疫功能、抑菌、抗病毒等作用的途径之一.     

三七复合有效成分对恒河猴细菌感染性子宫出血模型内膜组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的 :探讨一氧化氮 (NO)及诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在炎性子宫出血中的作用及三七复合有效成分的影响。方法 :选择月经正常雌性育龄恒河猴 11只 ,随机分为中药组 (三七复合有效成分 ) 4只、模型组 4只及正常对照组 3只。应用化学比色法检测三组子宫内膜中一氧化氮及一氧化氮合酶的活性 ,用免疫组化法检测三组子宫内膜中一氧化氮合酶 (iNOS)蛋白的表达水平。结果 :中药组与模型组比较 ,子宫内膜NO、iNOS的活性及iNOS蛋白表达水平明显降低 ,差异有显著性 ,P <0 0 1;结论 :NO可能参与了炎性子宫出血的发病机制 ,三七减少炎性子宫出血的机制可能与调节NO、iNOS的活性及iNOS蛋白表达水平有关     

三七复合有效成分对恒河猴感染性子宫出血一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在炎性子宫出血中的作用及三七复合有效成分的影响.方法:选择月经正常雌性育龄恒河猴11只,随机分为中药组(三七复合有效成分)4只、模型组4只及正常对照组3只.应用化学比色法检测三组子宫内膜中一氧化氮及一氧化氮合酶的活性,用免疫组化法检测三组子宫内膜中一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达水平.结果:中药组与模型组比较;子宫内膜NO、iNOS的活性及iNOS蛋白表达水平明显降低,差异有显著性,P＜0.01;与正常组比较无显著性差别.结论:NO可能参与了炎性子宫出血的发病机制,三七减少炎性子宫出血的机制可能与调节NO、iNOS的活性及iNOS蛋白表达水平有关.     

青白散抗炎作用及对损伤组织TNF-α、IL-6、iNOS和NO表达的影响

目的:研究青白散抗炎作用及其机理。方法:采用小鼠二甲苯性耳肿胀,大鼠蛋清性足肿胀和棉球性肉芽肿等多种炎症模型,观察本品抗炎作用;采用慢性软组织损伤动物模型,检测大鼠慢性软组织损伤后组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,并分析其相关性。结果:(1)青白散可明显抑制小鼠二甲苯性耳肿胀,显著抑制大鼠蛋清性足肿胀和棉球性肉芽组织增生。(2)青白散能显著抑制大鼠慢性软组织损伤后组织中致炎因子TNF-α和IL-6表达的升高差异。(3)青白散能显著降低大鼠慢性软组织损伤后肌组织中NO含量和iNOS的活性。结论:青白散有明显的抗炎作用,可能通过抑制大鼠慢性损伤组织中致炎因子TNF-α和IL-6的含量增高,抑制iNOS诱导过量NO的产生,为慢性软组织损伤的修复创造了有利条件。     

针刺对抑郁大鼠前额叶皮层核转录因子κB、诱导型一氧化氮合酶、一氧化氮表达的影响

目的:观察针刺对慢性应激抑郁模型大鼠前额叶皮层核转录因子κB(NF-κB)炎性信号通路中NF-κB、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)表达的影响,探讨针刺抗抑郁的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、氟西汀组,每组8只。采用28d慢性不可预知应激法建立抑郁模型。针刺组针刺"百会""内关"穴,隔日1次,共14次;氟西汀组予氟西汀灌胃(10mg/kg),1次/d,共28次。观察大鼠糖水摄入量及旷场实验行为;Western blot法检测大鼠前额叶皮层NF-κB的表达水平;ELISA法检测前额叶皮层iNOS表达,硝酸还原酶法检测前额叶皮层NO含量。结果:与空白组比较,造模后大鼠糖水摄入量、旷场实验爬格数与站立次数显著降低(P0.01),前额叶皮层NF-κB、iNOS、NO表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,针刺组及氟西汀组大鼠糖水摄入量、旷场实验爬格数与站立次数显著升高(P0.01,P0.05),前额叶皮层NF-κB、iNOS、NO表达水平显著降低(P0.01)。针刺组与氟西汀组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刺可能通过抑制NF-κB炎性信号通路,下调NF-κB、iNOS、NO的表达水平,从而缓解炎性反应引起的脑损伤,发挥抗抑郁作用,这可能是针刺治疗抑郁症的机制之一。     

大黄素对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察大黄素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及机制。方法:斑贴法培养大鼠主动脉VSMC,AngⅡ刺激VSMC建立细胞增殖模型。采用MTT法检测细胞增殖,观察大黄素(10,20,40,80μmol.L^-1)、亚硝基-精氨酸甲酯(L-NAME,100μmol.L^-1)对AngⅡ诱导VSMC增殖的影响。免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达;硝酸还原酶及化学比色法测细胞上清液中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平。半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测VSMC iNOS mRNA的表达。结果:大黄素在10~80μmol.L^-1呈剂量及时间依赖性抑制VSMC增殖,但可被100μmol.L^-1的L-NAME部分抵消;大黄素能减少PCNA阳性细胞表达,升高NO,NOS,iNOS水平,增加iNOS mRNA的表达。结论:大黄素对AngⅡ诱导的VSMC增殖有抑制作用,抑制VSMC PCNA的表达,上调iNOS基因表达,升高NO水平可能是其发挥作用的机制。     

六味地黄丸对去卵巢高血脂大鼠血清一氧化氮的影响

目的观察六味地黄丸(地黄丸)对去卵巢高血脂雌鼠一氧化氮(NO)的影响。方法采用摘除卵巢、给予高脂饲料复制去卵巢高血脂模型,地黄丸组给予六味地黄丸,每鼠每日喂约相当于2.4g 地黄丸:雌二醇组每次给予苯甲酸雌二醇约0.2 mg,3天1次,共12次:对照组给予生理盐水,共6周。观察用药后血清雌二醇(E_2)、一氧化氮(NO)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的变化。结果地黄丸组与对照组比较,E_2水平升高54.48%(P<0.01);NO 水平明显升高113.6%,且两组 E_2与 NO 有显著相关性(r=0.613,P<0.05)。雌二醇组与对照组比较 E_2水平明显升高,约上升252.99%,NO 水平明显升高120%(P<0.01)。雌二醇组 NO 水平与地黄丸组比较,差异无显著性。地黄丸组血脂与对照组比较:TC、TG下降,HDL-C 升高;雌二醇组与时照组比较:TC 下降,TG、HDL-C 升高。结论六味地黄丸具有一定降脂作用,并在整体水平、病理条件下升高 NO 水平,为其在绝经女性心血管防护方面的应用提供了支持。     

六味地黄丸对胰岛素抵抗小鼠糖代谢的影响及其与骨钙素的关系

目的探讨六味地黄丸对胰岛素抵抗小鼠糖代谢的影响及其与骨钙素的关系。方法将高脂饮食诱导的胰岛素抵抗模型小鼠,分为六味地黄丸小剂量组、中剂量组、大剂量组、西药组(吡格列酮),模型组,加上正常组共6组。给予相应药物干预8周后,检测空腹血糖(FBG)、胰岛素(Fins)和骨钙素。结果与模型组比较,六味地黄丸小剂量组能够明显改善胰岛素抵抗小鼠的FBG(P0.01);六味地黄丸小剂量组和大剂量组的Fins均明显降低(P0.01,P0.05);六味地黄丸各剂量组均能明显升高胰岛素抵抗小鼠的未羧化骨钙素(P0.01,P0.05),同时小剂量组能明显升高未羧化骨钙素/羧化骨钙素。相关性分析显示,未羧化骨钙素与FBG存在负相关(P0.05);未羧化骨钙素/羧化骨钙素与FBG和Fins均存在负相关(P0.01,P0.05)。结论六味地黄丸能明显改善胰岛素抵抗小鼠的FBG和Fins;相比于未羧化骨钙素,未羧化骨钙素/羧化骨钙素能更好地解释六味地黄丸对糖代谢的改善作用。     

基于网络药理学的六味地黄丸治疗高血压作用机制探讨

目的:基于网络药理学探索六味地黄丸治疗高血压的分子机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集六味地黄丸的有效化合物,在PharmMapper数据库中预测化合物可能的靶点,与GeneCards数据库中高血压相关靶点相映射,获得六味地黄丸调节高血压的可能作用靶点;对这些靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络的构建、基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,以揭示六味地黄丸治疗高血压可能的作用机制;运用AutoDock进行分子对接验证。结果:共筛选出六味地黄丸中的69个化合物及269个作用靶点,其中作用于高血压的相关靶点有14个;PPI网络显示,血清白蛋白(ALB)、一氧化氮合酶3 (NOS3)、表皮生长因子受体(EGFR)、肾素(REN)是4个联系最多的靶点,涉及对胆固醇的反应、血小板活化的负调节等生物过程,作用机制与调控黏附分子表达、破骨细胞分化、FoxO信号通路、肾素-血管紧张素系统等生物学通路有关。结论:六味地黄丸治疗高血压的主要成分有茯苓酸、泽泻醇、芍药苷、谷甾醇、豆甾醇等,ALB、NOS3、EGFR、REN是其主要作用靶点。     

六味地黄丸对产后母性应激导致仔鼠生长迟缓的影响

目的探讨六味地黄丸（TJ-87）对产后母性束缚应激致仔代生长迟缓的影响。方法应用ICR小鼠建立产后母性束缚应激模型,产后第2天将母鼠移离仔鼠,给予母鼠每天1次每次3小时的束缚应激,持续至产后3周断乳时结束。本研究以仔鼠为研究对象：①研究断乳时模型组及正常对照组,观察两组仔鼠的体质量、身长、股骨长、血中胰岛素样生长因子（IGF-1）水平及脑垂体生长激素GH mRNA表达情况;②研究断乳后给予六味地黄丸（TJ-87）大、中、小剂量各治疗组（药物与饲料混合浓度为1．8％,1．2％,0．6％剂量组,连续给药8周）与模型组,观察治疗后各组仔鼠的体质量、身长、股骨长、血中IGF-1水平及脑垂体GH mRNA表达情况。结果①与正常对照组比较,产后3周断乳时模型组仔鼠表现出低体质量、低身长及低股骨长,同时模型组仔鼠血浆IGF-1水平降低,垂体GH mRNA相对表达低下,差异均有统计学意义（P〈0．01）。②经六味地黄丸治疗8周后,与模型组比较,六味地黄丸大、中剂量组仔鼠身长及股骨长增加,同时六味地黄丸大、中剂量组仔鼠血浆IGF-1水平升高,其垂体GH mRNA相对表达也升高,差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;六味地黄丸大、中、小剂量组仔鼠体质量差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论六味地黄丸可能通过GH—IGF-1通路改善产后母性束缚应激仔代的生长。     

六味地黄丸对老年小鼠造血干细胞影响的实验研究

目的观察六味地黄丸对老年小鼠骨髓造血干细胞的数量、表型、细胞周期和集落形成能力的影响.方法老年昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组及六味地黄丸高、中、低剂量组,灌胃给药7 d后,分离骨髓造血干细胞,进行细胞计数;流式细胞仪检测细胞表型和细胞周期;并采用甲基半固体培养基检测集落的形成.结果各组小鼠骨髓单核细胞和悬浮细胞数量以及集落产率无显著差异,但低、中剂量组Sca-1和CD34的表达提高,说明较低剂量的药物能提高骨髓中造血干细胞的数量,而且药物还具有提高细胞增殖能力的作用.结论六味地黄丸激活造血干细胞,通过升高骨髓中造血干细胞的数量和增殖能力提高造血机能,以达到提高免疫功能的作用.     

六味地黄丸含药血清对MC3T3-E1细胞增殖以及对Runx2、FOXO1 mRNA表达的影响

目的探讨六味地黄丸含药血清对MC3T3-E1细胞增殖以及对Runx2、FOXO1 mRNA表达的影响。方法制作六味地黄丸混悬液,对成年Wistar大鼠进行灌胃,获取六味地黄丸含药血清。常规培养MC3T3-E1细胞24 h后更换含10%不同浓度含药血清的培养基,分别培养48 h和72 h后用CCK-8法检测MC3T3-E1细胞的增殖;对MC3T3-E1细胞进行诱导培养22天后进行饥饿培养24h,随后更换含10%不同浓度的含药血清,培养72 h后检测Runx2、FOXO1 mRNA表达。结果六味地黄丸含药血清能促进MC3T3-E1细胞增殖,并且呈现一定的剂量依赖性;同时六味地黄丸含药血清各剂量组均能明显促进Runx2 mRNA的表达(P0.01),高剂量组的表达明显高于低剂量组(P0.01)。高剂量组的FOX01 mRNA表达明显高于其他3组(P0.01)。结论六味地黄丸含药血清能促进MC3T3-E1细胞增殖,同时能促进Runx2、FOXO1 mRNA表达。     

补益方抗环磷酰胺造模小鼠脾细胞凋亡作用的研究

目的:研究六味地黄丸等5种补益方对环磷酰胺(CPP)造模小鼠脾细胞凋亡及细胞周期的影响.方法:选择ICR小鼠,采用流式细胞术检测脾细胞凋亡率及细胞周期等.结果:5种补益方中,四君子汤、六味地黄丸、生脉散、金匮肾气丸能拮抗CPP引起的脾细胞增殖抑制;六味地黄丸、四君子汤能拮抗CPP引起的脾细胞凋亡;5种补益方均能拮抗CPP所致的脾脏萎缩.结论:5种补益方均有不同程度的改善CPP所致脾脏损害的作用,其中以四君子汤、六味地黄丸效果较佳.     

蜈蚣对心肌缺血性损伤小鼠NO及iNOS的影响

目的 :探讨中药蜈蚣对心肌缺血性损伤小鼠一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (i NOS)的影响。方法 :采用脑垂体后叶素造成小鼠心肌缺血性损伤模型。将健康小鼠分为四组 ,分别是空白组、模型组、蜈蚣小剂量组(2 .5 g/ kg)、蜈蚣大剂量组 (5 .0 g/ kg)。缺血 2 0 m in后取血观察乳酸脱氢酶 (L DH ) ,检测心肌组织一氧化氮 (NO) ,免疫组化法检测心肌一氧化氮合酶 (i NOS)。结果 :蜈蚣治疗后 L DH降低 ,NO、i NOS明显升高。结论 :蜈蚣可显著提高 NO及 i NOS的表达 ,这可能与蜈蚣保护血管内皮细胞功能有关。