组胺H2受体激动剂4—甲基组胺对阿糖胞苷抑制HL—60细胞增殖的负？…

在用４－甲基组胺（４－ＭＨ）激动ＨＬ－６０细胞上的组胺Ｈ２受体后,观察抗白血病药物阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）对ＨＬ－６０白血病细胞增殖抑制作用的影响。以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和集落培养为增殖指标,用ＮＢＴ还原试验检测细胞的分化,用ＨＰＣＬ和荧光分光光度法分别检测细胞内ｃＡＭＰ和Ｃａ＾２＋离子的变化。结果显示,ＨＬ－６０细胞上的组胺Ｈ２受体经４－ＭＨ激动后,Ａｒａ－Ｃ对其增殖的抑制作用明显减弱。     

银杏叶提取物对牛主动脉平滑肌细胞的增殖的影响

目的：观察银杏叶提取物（ＥＧＢ）对小牛主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响。方法：分别采用体外培养的的ＳＭＣ及经氧化修饰型低密度脂蛋白造成ＳＭＣ增殖,选用３～８代ＳＭＣ,（１）分为对照组和ＥＧＢ组。（２）分为对照组和ｏｘｌｄｌ（０．１ｍｇ／ｍｌ）组,在ｏｘｄｌ组中加入个浓度ＥＧＢ（０,５０,１００,２００,４００,４００μｇ／ｍｌ）,培养２４ｈ后用ＭＴＴ和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定细胞含量及其培养液中ＳＯＤ、ＬＰＯ、ＴＸＢ２、ＰＧＩ２。结果：ＥＧＢ后可使细胞ＭＴＴ含量和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量减少,其抑制作用与剂量相关。ｏｘｌｄｌ可使ＳＭＣ明显增殖,加用ＥＧＢ后可使ＳＭＣ增殖受到抑制。ＥＧＢ组与ｏｘｌｄｌ组相比,ＳＯＤ、ＰＧＩ２升高,ＬＰＯ、ＴＸＢ２降低。结论：ＥＧＢ可直接抑制ＳＭＣ增值,并呈剂量依赖型。ＥＧＢ抑制ｏ     

普罗布考对过氧化氢诱导平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨普罗布考（Ｐｒｏｂｕｃｏｌ）对Ｈ２Ｏ２诱导的平滑肌细胞（ＳＭＣＳ）增殖的抑制作用。方法：采用细胞计数法和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察０．１～１００μｍｏｌ／Ｌ Ｐｒｏｂｕｃｏｌ对新生牛血清（ＮＣＳ）和过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）促ＳＭＣＳ增殖的抑制作用。结果：１０μｍｏｌ／Ｌ及１００μｍｏｌ／Ｌ Ｐｒｏｂｕｃｏｌ作用９６ｈ,可抑制１０％ＮＣＳ刺激的ＳＭＣＳ增殖,而１,１０及１００μｍｏｏｌ／Ｌ Ｐｒ     

c—myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管？…

应用细胞培养、核酸斑点杂交、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０１）及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（     

EFFECT OF VERAPAMIL ONCa~（2＋） INFLUX ANDCVB3－RNA REPLICATION IN CULTURED NEONATALRAT HEART CELLS INFECTED WITH CVB3

ＥＦＦＥＣＴＯＦＶＥＲＡＰＡＭＩＬＯＮＣａ~（２＋）ＩＮＦＬＵＸＡＮＤＣＶＢ３－ＲＮＡＲＥＰＬＩＣＡＴＩＯＮＩＮＣＵＬＴＵＲＥＤＮＥＯＮＡＴＡＬＲＡＴＨＥＡＲＴＣＥＬＬＳＩＮＦＥＣＴＥＤＷＩＴＨＣＶＢ３ＹａｎｇＹｉｎｇｚｈｅｎ；（杨英珍），ＧｕｏＱｉ?..     

丙型肝炎病人PBMC对HCV合成肽增殖反应与干扰素疗效的关系

目的：探讨丙型肝炎病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）特异性抗原增殖反应与干扰素（ＩＦＮ）疗效关系。方法：用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究１１例经ＩＦＮ治疗与１３例未经ＩＦＮ治疗病人ＰＢＭＣ的增殖反应以及ＲＮＡ阴转和丙氨酸转氨酸产ＡＬＴ复常指标。结果：１１例经ＩＦＮ治疗与１３例未经ＩＦＮ治疗病人ＰＢＭＣ对ＨＣＶ合成肽ＣＰ９、ＮＳ４增殖反应相比，前者明显增强，差异有显著怀意义，且血清ＨＣ     

NK细胞,LAK细胞抗弓形虫作用机理的研究

观察ＩＬ－２在小鼠抗弓形虫机理中的作用。方法：应用＾３Ｈ－尿嘧啶（＾３Ｈ－Ｕ）特异性标记弓形虫在小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍｏｕｓｅｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＭＰＭ）内的增殖实验及＾１２５Ｉ－尿嘧啶核苷（＾１２５Ｕ－ＵｄＲ）标记的细胞毒实验，观察ＩＬ－２的抗弓虫作用。结果ＩＬ－２对ＭＰＭ的抗弓形虫作用及对ＩＦＮ－γ诱导的ＭＰＭ抗弓形虫作用无明显影响；正常小鼠ＮＫ细胞杀伤弓形虫感染靶细胞的能     

三氧化二砷对NCI-H69肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨三氧化二砷（ＡＳ２Ｏ３）对肺癌细胞株ＮＣＩ－Ｈ６９的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：ＭＴＴ法观察不同浓度ＡＳ２Ｏ３作用不同时间后的ＮＣＩ－Ｈ６９生长的产殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单抗ＬＳＡＢ免疫组化染色－流式细胞仪检测ＰＣＮＡ阳性细胞百分比;ＦＴＩＣ－ＴＵＮＥＬ法－流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果：随ＡＳ２Ｏ３浓度增加和作用时间延长,ＮＣＩ－Ｈ６９肺癌细胞的细胞活度渐下降。随ＡＳ２Ｏ３浓度增     

浓缩轴UO2F2对脾淋巴细胞DNA合成影响的研究

研究了浓缩铀ＵＯ２Ｆ２对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾淋巴细胞ＤＮＡ合成的影响，结果发现：脾Ｂ淋巴细胞ＬＰＳ转化反应在浓缩铀ＵＯ２Ｆ２作用下细胞增殖受到明显抑制，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入显著减少，而脾脏Ｔ淋巴细胞ＰＨＡ转化反应在浓缩铀ＵＯ２Ｆ２注入１天时细胞增殖受抑，但到第２、３天时细胞增殖有所增加，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入显著高于对照组。     

超氧阴离子自由基致NIH3T3细胞DMA损伤与c—myc基因表达

目的 研究超氧阴离子自由基（Ｏ２．＾－）对ＮＩＨ３Ｔ３细胞ＤＮＡ的损伤及其脂质过氧化作用和对ｃ－ｍｙｃ基因表达的影响。方法 用黄嘌呤黄嘌呤氧化酶（Ｘ－ＸＯ）系统产生Ｏ２．＾－,测定ＤＮＡ－溴乙锭结合物荧光强度变化确定ＤＮＡ损伤程度以太代巴比妥酸法测定脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量,以细胞原位杂交法检测ｃ－ｍｙｃ基因表达。结果 高剂量Ｏ２．＾－能直接引起ＤＮＡ断裂损伤。Ｏ２．＾－能引起明显的ｃ－     

过氧化氢促肝卵圆细胞株WB—F344的增殖及转化作用

目的 探讨过氧化氢（H2O2）对肝卵圆细胞株WB－F344的促增殖及转化作用。方法 用H2O2直接作用于培养的WB－F344细胞,以MTT比色试验、^3H-TdB掺入液闪计数观察其对细胞的促增殖效应;经N－甲基－N‘－硝基－N－亚硝基胍（MNNG）启动的和未经MNNG启动的WB细胞用小剂量H2O2连续作用促其转化,以形态学观察、核型分析及甲基纤维素兰固体培养进行检测。结果 小剂量的H2O2一次作用具有明显的促进WB细胞增殖的效应,连续作用28d,可促进经MNNG启动的和未经MNNG启动的WB细胞发生转化,形态上呈现典型的转化细胞的特征;核型分析显示染色体数目改变,染色体结构畸变率明显升高;在甲基纤维素半固体培养基中形成克隆。结论 小剂量H2O2可诱使肝卵圆细胞增殖、转化,提示H2O2在肝癌发生中可能具有重要作用,抗氧化作用可能在肝癌的防治中具有一定的意义。     

中药复方调控肝干细胞分化及机制的实验研究

目的研究中药复方牛黄、西洋参（简称牛黄参）含药血清对大鼠肝干细胞系WB-F344增殖、分化的影响,探讨益气解毒法体外诱导肝干细胞分化为肝细胞的内在机制。方法采用中药血清药理学方法,以不同浓度的牛黄参含药血清（5%、10%、20%）作用于WB-F344,以正常大鼠血清（5%、10%、20%）处理的WB-F344为空白对照组,以单纯培养体系处理的WB-F344为正常对照组;噻唑兰（MTT）比色法检测不同浓度含药血清对WB-F344增殖的影响;取增殖的最佳浓度,蛋白印迹法（western blot）检测含药血清对WB-F344细胞HGFR、EGF、EGFR、TGFβ1R、TGFβ2R表达的影响;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测含药血清对WB-F344肝细胞表面标志物白蛋白（ALB）的mRNA表达的影响。结果牛黄参含药血清能促进WB-F344的增殖（P〈0.01）,且10%为增殖的最佳浓度梯度;能刺激WB-F344细胞HGFR、EGF、EGFR、TGF-β1R、TGF-β2R的表达量上调（P〈0.01）;能促进WB-F344肝细胞表面标志物ALB的mRNA表达（P〈0.01）。结论牛黄参含药血清可以通过细胞因子体系对肝干细胞WB-F344的增殖、分化进行调节,为利用中药复方制剂调控肝干细胞,促进肝再生和肝损伤修复提供实验与理论基础。     

骨形态发生蛋白-4对肝干细胞增殖与分化的影响

目的:探讨骨形态发生蛋白-4(BMP-4)对大鼠肝干细胞系WB-F344的增殖及分化的影响.方法:采用50 ng/mL的基因重组BMP-4作用于WB-F344细胞,以BMP-4拮抗剂Noggin(200 ng/mL)阻断BMP-4的作用为对照.在实验不同时间点,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测BMP-4对WB-F...     

牛黄参含药血清对肝干细胞WB-F 344增殖和凋亡的影响

目的研究牛黄参含药血清对大鼠肝干细胞WB-F344增殖及凋亡的影响,探讨益气解毒法诱导肝干细胞的作用机制。方法采用中药血清药理学方法,以不同浓度的牛黄参含药血清（5%、10%、20%）作用于WB-F344,以正常大鼠血清（5%、10%、20%）处理的WB-F344为空白对照组,以单纯培养体系处理的WB-F344为正常对照组;四甲基偶氮唑盐（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测细胞的增殖,取药物血清的最佳增殖浓度,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经牛黄参含药血清干预后,MTT检测结果显示10%、20%浓度的牛黄参含药血清均能促进WB-F344的增殖（P〈0.01）,且10%为增殖的最佳浓度梯度;10%牛黄参含药血清作用的WB-F344细胞凋亡率与空白、正常对照组相比显著下降（P〈0.01）,且以10%牛黄参含药血清成分组效果最佳。结论牛黄参含药血清可在一定程度上促进WB-F344细胞的增殖,抑制其凋亡,这可能是益气解毒法作用于肝干细胞的机制之一。     

过氧化氢对大鼠肝卵圆细胞内游离钙含量的影响

目的研究小剂量(800nmol/L)过氧化氢H2O2诱导培养的大鼠肝卵圆细胞(WB细胞)胞质内游离钙犤Ca2 犦i含量的变化及其机制。方法以800nmol/LH2O2刺激WB细胞,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂,以激光共聚焦扫描显微镜测定不同条件下犤Ca2 犦i荧光值的改变以反映犤Ca2 犦i含量的变化。结果(1)小剂量H2O2可引起犤Ca2 犦i升高,约300s后达到高峰,800s后恢复正常,过氧化氢酶(CAT)可抑制此变化;(2)细胞在无钙外环境下,相同浓度的H2O2不引起犤Ca2 犦i变化;(3)钙拮抗剂心痛定(nifedipine)不能抑制犤Ca2 犦i荧光值的升高,而蒽-9-羧酸(A9C)则可抑制此变化。结论小剂量H2O2刺激WB细胞可诱使犤Ca2 犦i含量升高,其机制可能是H2O2引起细胞膜上非选择性阳离子通道开放使胞外Ca2 进入胞内,造成胞浆内犤Ca2 犦i含量增高。     

外源性和内源性结缔组织生长因子对大鼠肝脏前体细胞分化的影响

目的肝脏前体细胞(WB-F344)在不同的刺激下可以分化成肝细胞或胆管细胞。本研究旨在比较外源性和内源性结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对WB-F344细胞分化的影响。方法重组人CTGF直接刺激WB-F344细胞,MTT法观察CTGF对WB-F344细胞活性的影响;用Western blotting方法检测CTGF对WB-F344细胞分化的影响:包括肝系标志物甲胎蛋白(α-feto protein,AFP)、白蛋白和胆系标志物细胞角蛋白-19(CK-19)蛋白水平的变化。构建含CTGF全长编码基因的质粒(dl6-96-CTGF)转染WB-F344细胞,用G418筛选稳定表达CTGF的WB-F344细胞株,Western blotting方法同样检测上述标志物蛋白水平的变化。结果重组人CTGF作用于WB-F344细胞24h后,可以轻度抑制细胞活性,但剂量关系不明显。高剂量CTGF作用于WB-F344细胞24h后,可以明显改变WB-F344细胞表面标志物的表达:幼稚肝细胞标志物AFP的表达减少,而成熟肝细胞标志物白蛋白和胆管细胞标志物CK-19的表达均增加。成功构建CTGF全长编码基因的质粒,并用G418获得稳定转染CTGF全长质粒的WB-F344细胞株。稳定转染dl6-95-CTGF的WB-F344细胞,与转染dl6-95相比,AFP和CK-19表达均减少,白蛋白表达增加,但诱导程度没有外源性明显。结论与内源性结缔组织生长因子相比,外源性结缔组织生长因子可以明显改变肝脏前体细胞表面标志物的表达,具有诱导肝脏前体细胞向成熟肝脏细胞分化的潜能。     

四逆散含药血清诱导大鼠肝脏干细胞分化及其调控机制

目的: 研究四逆散含药血清对大鼠肝脏干细胞分化的影响并探讨其治疗肝病的作用机制。方法: 采用HPLC-MS-MS法,梯度洗脱,测定血清中四逆散的有效成分;以四逆散含药血清处理WB-F344细胞后,采用CCK-8法观察细胞增殖情况,血糖仪检测细胞培养液葡萄糖含量,乳酸测定试剂盒检测细胞中乳酸含量,荧光素荧光素酶法检测ATP含量,蛋白质印迹法观察表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR)、纤维母细胞生长因子受体（fibroblast growth factor receptor, FGFR)、转化生长因子受体(transforming growth factor beta receptor type Ⅰ, TGF-βRⅠ)、肝细胞生长因子受体(hepatocyte growth factor receptor,HGFR)蛋白表达情况。结果：在四逆散血清中,检测到以原型入血芍药苷、橙皮苷等成分,并检测到橙皮素葡萄糖醛酸等部分代谢物。各浓度含药血清作用WB-F344细胞48 h后,对细胞均无毒性作用,10%含药血清显示出较好的促进细胞增殖的效果。随着药物血清作用时间的延长,WB-F344细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量降低,ATP生成增加,EGFR、FGFR、TGF-βRⅠ、HGFR蛋白表达水平上升。结论：四逆散含药血清能够促进肝脏干细胞WB-F344的增殖并诱导其分化,分化机制可能与影响数种细胞因子受体的表达有关。     

肝素联合肝干细胞经脾移植治疗SD大鼠急性肝损伤

目的:探讨肝素联合肝干细胞(WB-F344细胞)经脾移植对大鼠急性肝损伤的治疗作用.方法:构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体,体外培养、扩增WB-F344细胞,携带GFP基因的慢病毒转染WB-F344细胞.通过腹腔注射四氯化碳(CCl4)建立大鼠急性肝损伤模型,造模后24 h分别将1 mL含2×107个肝干...     

大鼠肠上皮细胞系IEC-6的恶性转化研究

目的建立N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG）、佛波酯（12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate,PMA）对大鼠肠上皮细胞系IEC-6的恶性转化模型。方法通过克隆形成率实验确定MNNG、PMA对IEC-6细胞转化浓度,对IEC-6细胞进行分阶段多次干预。用软琼脂集落形成实验和裸鼠体内致瘤实验鉴定细胞恶性转化程度。结果经MNNG、PMA多次处理IEC-6细胞至24次后,细胞生长速度加快,排列紊乱,失去接触抑制,出现复层生长,并可在软琼脂上生长,且呈剂量反应关系,但在第24次之前的细胞则不能在软琼脂上生长。转化细胞在裸鼠体内形成瘤,病理组织学证实为低分化肠上皮细胞癌。结论MNNG、PMA具有使IEC-6细胞发生恶性转化的能力。     

不同品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型的比较研究

目的 对不同品系大鼠肝卵圆细胞增殖模型进行比较,筛选建模效率较高的大鼠品系.方法 选择F344、Wistar和SD大鼠各10只,经2-乙酰氨基芴灌胃和四氯化碳腹腔注射建立肝脏卵圆细胞增殖模型,组织学和免疫组织化学检测鉴定.荧光激活细胞筛选法分选并纯化各品系大鼠肝脏卵圆细胞,分析Thy-1.1~＋细胞百分率,观察Thy-1.1~＋细胞培养结果.结果 成功建立三种品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型.流式细胞仪分选结果显示,F344、wistar和SD大鼠Thy-1.1~＋细胞百分率分别为（9.46±0.99）%、（2.46±0.37）%和（1.46±0.12）%;各品系大鼠间Thy-1.1~＋细胞百分率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.细胞培养观察发现,与Wistar和SD大鼠比较,F344大鼠分选得到的肝脏卵圆细胞生长状态好且纯度较高.结论 在用于建立肝脏卵圆细胞增殖模型最为常见的三种品系大鼠中,F344大鼠所建模型的肝脏卵圆细胞活化效率最高.