e抗原阴性的慢性乙型肝炎患者病毒基因变异与临床转归

目的研究HBeAg阴性的慢性乙型肝炎病毒的基因变化及其与临床转归的关系。方法应用基因测序的方法检测HBeAg阴性的慢性乙型肝炎、肝硬化患者乙型肝炎病毒1762、1764、pre-18963个位点的基因突变,分析肝炎、肝硬化的发生与各位点变异的关系。结果135例HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者中发生1762位点变异者9例,pre-1896位点变异者36例,1762、1764位点联合变异者27例,1762、1764、pre-1896位点联合变异者63例。45例肝硬化患者中发生pre-1896位点变异者27例,1762、1764位点联合变异者9例,1762、1764、pre-1896位点联合变异者共9例。结论山东地区HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒以BCP1762、1764、pre-1896位点联合变异为主,其中pre-1896位点的变异对于肝硬化的发生有重要意义。     

乙型肝炎病毒e抗原两种血清学检测方法的对比分析

乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）检测对于乙型肝炎的诊断、HBV复制状态和抗病毒治疗的评价具有重要意义。ELISA法成本低廉,目前仍在基层医院广泛应用;而MEIA法为一种较新的检测方法,可定量检测e抗原,更客观地反映其存在情况。本研究对482例慢性乙型肝炎患者的血清e抗原同时采用ELISA法及MEIA法进行了检测,以探讨两种方法的一致性,现将结果报告如下。     

干扰素α1b改善慢性乙型肝炎患者肝纤维化的疗效观察

目的：探讨应用干扰素α1b治疗慢性乙型肝炎（乙肝）患者改善其肝纤维化情况的疗效观察。方法：2005年3月-2008年2月期间门诊经病理确诊的慢性乙肝致肝纤维化患者96例,随机分为干扰素治疗组（46例）和对照组（50例）,两组均给予常规中药保肝降酶治疗,干扰素治疗组加用干扰素α1b（商品名运德素）50μg肌肉注射,隔日1次,疗程均为24周。观察两组患者症状、体征,肝功能指标如丙氨酸转氨酶（ALT）、胆红素（BIL）、白蛋白（A）和白蛋白/球蛋白比例（A/G）,以及肝纤维化指标血清透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ前型胶原（PCⅢ）和Ⅳ型胶原（CⅣ）的变化。结果：与对照组比较,干扰素治疗组治疗后腹胀、肝区疼痛、脾肿大、肝肿大等临床症状和体征明显改善（P〈0.05）,ALT[（55.7±20.2）U/Lvs.（133.4±56.3）U/L,P〈0.01]、BIL[（32.9±21.5）μmol/Lvs.（46.7±26.8）μmol/L,P〈0.01]水平下降明显,血清A[（41.8±7.5）g/Lvs.（37.9±7.8）g/L,P〈0.01]和A/G（1.8±0.6vs.1.7±0.3,P〈0.01）显著升高,HA[（101.8±50.2）ng/mlvs.（149.9±54.3）ng/ml,P〈0.01]、LN[（93.3±23.7）ng/mlvs.（122.1±37.4）ng/ml,P〈0.01]、CⅣ[（104.6±23.1）ng/mlvs.（107.3±34.7）ng/ml,P〈0.01]和PCⅢ[（190.7±59.0）ng/mlvs.（260.1±83.5）ng/ml,P〈0.01]等肝纤维化指标也明显下降,干扰素治疗组与对照组比较各检查指标差异均有显著性。结论：应用干扰素α1b治疗慢性乙肝致肝纤维化患者对改善患者临床症状、体征,促进肝功能恢复,改善其肝纤维化有显著疗效。     

还原型谷胱甘肽辅助治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床分析

目的：评价还原型谷胱甘肽辅助治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效。方法慢性乙型肝炎肝纤维化患者120例根据入院顺序分为治疗组与对照组各60例,两组都给予常规药物治疗,对照组给予苦参碱治疗,治疗组给予还原型谷胱甘肽片治疗,疗程1个月。结果治疗组的有效率为96.7%,对照组的有效率为80.0%,治疗组的有效率明显高于对照组（P＜0.05）。两组治疗前的血清ALT与AST含量对比差异无统计学意义,治疗后上述值都明显下降,与治疗前对比差异明显（P＜0.05）,同时组间对比差异也有统计学意义（P＜0.05）。结论还原型谷胱甘肽辅助治疗慢性乙型肝炎肝纤维化能有效提高治疗疗效,改善预后肝功能,值得推广应用。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者三年的疗效观察

目的探讨拉米夫定（lamivudine,LAM）长期治疗HBeAg阳性和HBeAg阴性的两组慢性乙型肝炎（CHB）患者相关指标之间的关系。方法将63例入院诊断为CHB的患者分为HBeAg阳性CHB患者组（30例）及HBeAg阴性CHB患者组（33例）,拉米夫定100mg/d治疗,进行3年的随访观察,同时检测HBV血清标志物、HBV DNA、ALT、AFP等生化指标,并进行χ2检验来分析两组之间的关系。结果 63例CHB患者中,HBeAg阳性患者30例（47.6%）,HBeAg阴性33例（52.4%）。拉米夫定治疗两组患者间ALT复常率、HBV DNA阴转率、肝细胞癌发生率及HBsAg阴转率两组比较差异均无统计学意义;其YMDD变异率、肝硬化的发生率两组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。HBeAg阳性组YMDD变异率为43.3%,显著高于HBeAg阴性组的18.2%（χ^2=4.720,P〈0.05）;HBeAg阴性组肝硬化患者占37.0%,显著高于HBeAg阳性组的5.9%（χ^2=3.866,P〈0.05）。结论拉米夫定治疗HBeAg阳性CHB患者较HBeAg阴性患者更易发生YMDD变异,HBeAg阴性CHB患者较HBeAg阳性患者更易发生肝硬化。     

毕赤酵母及大肠埃希菌表达的重组乙型肝炎病毒e抗原在乙型肝炎病毒e抗体检测中的比较分析

目的 探讨毕赤酵母及大肠埃希菌表达的重组乙型肝炎病毒e抗原(recombinant hepatitis B e antigen, rHBeAg)在乙型肝炎病毒e抗体(hepatitis B e antibody, HBeAb)免疫检测中的应用.方法 用分子筛纯化两种rHBeAg,进行特异性和免疫反应性鉴定;分别用纯化后毕赤酵母表达的HBeAg(A)、大肠埃希菌表达的HBeAg(B)作为中和试剂,单克隆HBeAb为固相抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆HBeAb为探测抗体,用固相-液相竞争抑制法酶联免疫吸附实验检测HBeAb标准品及乙型肝炎病毒PCR阳性和阴性的临床标本.结果 (1)检测中国药品生物制品检定所HBeAb国家参考品结果 :试剂A:阴性符合率(-/-)15/15,阳性符合率(+/+)10/10;灵敏度参考品最低检出量(稀释度)1#= 1∶ 128,2#=1∶ 128,3#=1∶ 256.试剂B:阴性符合率(-/-)15/15;阳性符合率(+/+)9/10;灵敏度参考品最低检出量(稀释度)1#=1∶ 32;2#=1∶ 64;3#=1∶ 64;大肠埃希菌抗原的灵敏度明显低于毕赤酵母抗原;(2)对乙型肝炎病毒PCR阳性及阴性的临床标本进行检测:试剂A和试剂B对PCR阳性组的HBeAb阳性检出率分别为50.4%和51.6%,差异无显著统计学意义(P＞0.05);PCR阴性组的HBeAb阴性检出率,试剂A和试剂B分别为 91.2%和 86.7%,差异有显著统计学意义(P＜0.01).结论 毕赤酵母表达的HBeAg用于HBeAb的检测灵敏度及特异性均优于大肠埃希菌表达产物.     

蒙古族慢性乙型肝炎患者HLA-DRB1基因多态性与乙型肝炎病毒高复制状态的相关性研究

人类对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）普遍易感,除病毒本身毒力强弱、数量和环境因素外,宿主的遗传因素极有可能是影响乙型肝炎进展和预后的重要因素之一[1-3]。HBV感染者的肝细胞损伤并非由病毒本身引起,而是由免疫反应导致。研究发现人类白细胞抗原（human leucocyte antigen,HLA）Ⅱ分子可以增加巨噬细胞对免疫复合物的吞噬作用,     

慢性乙肝患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症活动度及纤维化的相关性研究

目的 探讨HBV DNA的表达与肝组织炎症活动度及纤维化的相关性。方法 应用定量PCR技术测定了170例慢性乙型肝炎(乙肝)患者的血清HBV DNA，同时应用肝穿刺活检对肝组织的炎症活动程度及纤维化活动度进行了观测。结果 慢性乙肝患者血清HBV DNA载量越高，其肝组织的炎症活动度越强，且HBV DNA阳性的慢性乙肝患者发生肝纤维化的比例明显增加。结论 HBV复制是启动慢性乙肝患者肝组织病变的一大因素。     

慢性乙型肝炎患者肝细胞内HBcAg分布与血清病毒学指标的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎患者肝细胞内HBcAg分布规律与血清病毒学指标的相关性。方法对958例慢性乙型肝炎患者的血清学、病毒学、免疫组织化学等资料进行对比分析。结果在肝细胞内HBcAg不同分布类型之间,血清HBeAg阳性率及HBV DNA载量均存在显著性差异（χ2值分别为364.01和417.41,P〈0.001）。其中,此两项指标以HBcAg核型和混合型分布组最高,HBcAg阴性组最低,而HBcAg浆型分布组的HBeAg阳性率及HBV DNA载量则介于上述两组之间。结论 HBcAg在受染肝细胞内的分布与血清病毒学指标之间具有明显的相关性,随着HBcAg分布态势由受染肝细胞核向细胞浆漂移到最终不能检测到,HBeAg阳性率及HBV DNA载量呈逐渐降低的趋势。     

慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化无创性血清诊断指标研究进展

我国乙型肝炎病毒（HBV）感染相关的肝硬化和肝细胞肝癌是引起肝病患者死亡的主要原因。有效的抗病毒治疗能够延缓患者肝纤维化的进展,肝纤维化分期对治疗方案的制定至关重要。肝组织活检仍是诊断肝纤维化的金标准,但其为有创性操作,应用受限。用可靠的无创性血清标志物来评估肝纤维化程度能降低肝组织活检的需求,本文就无创性血清标志物作一综述。     

维持性血液透析患者感染乙型和丙型肝炎的分析

目的为了评价血液透析（血透）患者乙型和丙型肝炎（HBV、HCV）感染状态及对临床情况和肝功能的影响。方法对62例血透患者应用ELISA法和RT-PCR法检测抗-HCV和HCVRNA，采用斑点杂交法和固相放免法检测HBV标志，并检测肝功能和血浆蛋白电泳。结果62例患者中，抗-HCVIgM阳性27例（43．6％），抗-HCVIgG阳性29例（46．8％），HCVRNA阳性34例（54．8％），三项任一项阳性37例（59．7％），5例（8．1％）HBsAg阳性，其中HBeAg和HBVDNA阳性3例。结论向透患者中HCV感染严重，临床情况及预后差，检测血浆蛋白和电泳较肝功能酶学能更好地作为肝炎诊断和反映病情的指标。     

血清HBsAg、HBcrAg和HBV DNA预测慢性乙型肝炎肝脏病理状态的评价

目的评价血清乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒核心相关抗原（HBcrAg）和乙型肝炎病毒DNA（HBV DNA）预测慢性乙型肝炎（CHB）患者肝脏不同病理学分级和分期的有效性。 方法共选取CHB患者211例,其中HBeAg阳性和阴性分别为125例和86例。血清HBsAg、HBeAg和HBcrAg分别采用化学发光微粒子免疫法和化学发光酶免疫法检测,血清HBV DNA采用实时荧光定量PCR检测。 结果HBeAg阳性患者,血清HBsAg、HBcrAg和HBV DNA与肝脏病理学分级和分期均呈显著负相关（P均< 0.05）;HBeAg阴性患者,血清HBcrAg和HBV DNA与肝脏病理学分级和分期均呈显著正相关（P均< 0.01）。Bayes逐步判别分析显示,HBeAg阳性患者,仅血清HBsAg符合判别肝脏不同病理学分级和分期的方程纳入自变量的标准（F > 3.84）,Fisher判别函数预测肝脏病理学分级G1、G3和分期S1、S4的正确率分别为62.7%、58.8%和63.8%、69.6%;HBeAg阴性患者,血清HBV DNA和HBcrAg分别符合判别肝脏不同病理学分级和分期的方程纳入自变量的标准（F > 3.84）,Fisher判别函数预测肝脏病理学分级G1、G3和分期S1、S4的正确率分别为79.3%、66.7%和71.7%、75.0%。 结论血清HBsAg对HBeAg阳性患者以及血清HBV DNA和HBcrAg分别对HBeAg阴性患者的肝脏病理学分级G1、G3和分期S1、S4有显著的预测意义。     

乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原双阳性乙型肝炎病毒高载量孕妇孕晚期应用替比夫定行母婴阻断的疗效

目的评价妊娠晚期对乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）和HBV e抗原（HBeAg）双阳性的高HBV载量孕妇应用替比夫定行HBV感染母婴阻断的疗效。 方法选取2007年7月1日至2017年6月30日于首都医科大学附属北京地坛医院产科门诊进行系统产前检查的慢性HBV感染孕晚期（妊娠28周）孕妇及其分娩婴儿作为研究对象，分析血清HBsAg和HBeAg双阳性、肝功能正常、HBV DNA≥ 1 × 10⁶拷贝/ml，且获得完整随访资料的孕妇共250例，向患者充分告知HBV母婴阻断孕期抗病毒用药的利弊，根据知情自愿原则，按照患者是否服用替比夫定，分成替比夫定组（150例）及对照组（100例）。替比夫定组孕妇自孕28周起口服替比夫定600 mg/d，至分娩后42 d止。对照组孕妇则不应用抗病毒药物。检测两组受试者在孕28周和分娩时血清HBV DNA载量；观察替比夫定组孕妇服药后出现的不良反应。两组孕妇的婴儿出生后均接受主、被动联合免疫；在出生6 h内、1月龄和6月龄时肌内注射乙肝疫苗各10 μg，均于出生后6 h内和1月龄时肌肉注射乙肝免疫球蛋白各200 IU。检测婴儿出生后6 h内（于主、被动免疫前抽股静脉血）和7月龄血清HBsAg阳性率及HBV DNA载量。 结果服药后分娩前替比夫定组孕妇平均HBV DNA载量显著低于对照组，差异有统计学意义（t = 31.07、P < 0.001）。替比夫定组与对照组婴儿出生6 h内血清HBV DNA阳性率（0.00% vs. 17.00%）差异有统计学意义（χ² = 27.36、P < 0.001）；新生儿7月龄时，替比夫定组HBV DNA载量均低于检测下限，对照组婴儿HBV DNA阳性率为10.00%。经Fisher精确检验，对照组婴儿宫内感染率显著高于替比夫定组（12.00% vs. 0.00%），差异有统计学意义（P < 0.001）。替比夫定组使用随访期间未发现严重不良反应，且该组婴儿未发生出生缺陷。 结论随着分娩前孕妇血清HBV DNA载量升高，HBV宫内感染的危险性增加。肝功能正常、HBsAg及HBeAg双阳性，HBV DNA高载量孕妇孕晚期应用替比夫定抗病毒治疗可显著降低妊娠晚期孕妇血清HBV DNA载量，有效阻断HBV宫内感染，对母婴均具有良好的安全性。     

阿德福韦酯耐药慢性乙型肝炎患者HBsAg变异分析

目的探讨阿德福韦酯耐药慢性乙型肝炎患者相关S抗原变异、疫苗逃逸相关变异以及部分已知特异性T细胞表位变异情况。 方法收集2007年12月至2011年9月于首都医科大学附属北京地坛医院收治的阿德福韦酯治疗失败的慢性乙型肝炎患者70例,并随机选择ADV治疗非耐药患者70例作为对照。采用PCR产物直接测序法获得患者HBV反转录酶区与S抗原序列。应用PCR产物直接测序法与焦磷酸测序法明确阿德福韦酯耐药情况。比较阿德福韦酯耐药患者与无阿德福韦酯耐药患者耐药相关S抗原变异、疫苗逃逸相关变异以及HBV特异性T细胞表位变异情况。 结果ADV耐药组与对照组患者人口学等指标差异无统计学意义。本组患者中42例rtA181T耐药变异关联的HBsAg变异均为sW172^*。在rtA181T/ sW172^*变异患者体内,该变异株在病毒准种中所占平均比率为（42.6 ± 22.1）%（12.2%~100%）。与非ADV耐药组患者相比,ADV耐药组患者发生HBsAg疫苗逃逸变异（χ² = 12.8736、P = 0.0003）以及T细胞抗原表位变异（χ² = 4.8344、P = 0.0279）几率显著升高。 结论我国ADV耐药患者rtA181T变异关联的HBsAg变异主要为sW172^*变异,HBsAg抗原疫苗逃逸变异以及T细胞抗原表位变异与ADV耐药相互影响,相关机制尚待进一步研究。     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者HBV前C/BCP突变/准种与HBeAg和HBV DNA的关系

目的探讨HBeAg阳性慢性乙型肝炎（eP-CHB）HBV前C/BCP突变/准种及其与HBeAg、HBV DNA水平的关系。 方法采用断面研究对2016年1月至2018年12月就诊于首都医科大学附属北京佑安医院的220例eP-CHB患者进行前C/BCP突变检测，其中24例患者进行前C/BCP区扩增、克隆，同步检测血清HBeAg和HBV DNA水平，分析前C/BCP突变/准种的发生情况及其与HBeAg和HBV DNA水平的关系。 结果220例eP-CHB患者中，HBV前C/BCP总突变率为70.0%（154/220），前C/BCP共同突变率为18.2%（40/220），前C突变率为30.9%（68/220），BCP突变率为57.3%（126/220）。HBV DNA≥ 5 lgIU/ml患者上述4种突变检出率均高于HBV DNA< 5 lgIU/ml者，其中前C/BCP总突变和BCP突变患者差异有统计学意义（χ² = 5.809、P = 0.016，χ² = 5.081、P = 0.024）。HBeAg水平越低（< 500 COI、500～1 000 COI和> 1 000 COI共3组患者比较），以上4种突变检出率越高，差异有统计学意义（χ² = 31.738、17.291、16.263、22.164，P均< 0.001）。HBV DNA≥ 5 lgIU/ml患者中，HBeAg水平越低，以上4种突变检出率越高，差异亦均有统计学意义（χ² = 40.503、19.654、16.727、29.119，P < 0.001）。准种检测中，前C区高突变组患者HBeAg水平低于低突变组，差异有统计学意义（t = 2.230、P = 0.017），前C、BCP高突变组与低突变组间HBV DNA水平差异无统计学意义（t = 0.624、P = 0.462，t = 0.893、P = 0.317）。 结论eP-CHB患者中仍存在广泛的前C/BCP突变。高HBV DNA、低HBeAg表达者，前C和BCP突变的发生率较高；前C区突变株在准种中比率高者更影响HBeAg的表达。推测前C/BCP突变可能是eP-CHB出现低HBeAg、高HBV DNA，并导致抗病毒治疗停药后易复发的原因。     

乙肝相关性肝癌术前乙型肝炎病毒DNA载量与围手术期并发症的关系

目的:探讨乙肝相关性肝癌(HCC)患者术前乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量与围手术期并发症发生的关系。方法:收集2010年1月—2014年12月行根治性手术治疗的HCC患者共374例资料,按照术前HBV DNA载量分为低载量组(1.0 E+04 IU/m L)和高载量组(≥1.0E+04 IU/m L)。比较两组患者术后肝功能变化情况、并发症及住院时间,并分析并发症与临床病理因素的关系。结果:两组患者各项血清肝功能指标术后均呈先升后降的趋势,但高载量组各项指标上升的幅度及峰值均大于低载量组(部分P0.05)。与低载量组比较,高载量组术后肺部感染(18.9%vs.5.2%)、胆汁漏(15.4%vs.2.3%)、总并发症发生率(19.9%vs.10.6%)增高、术后住院时间(13.70 d vs.10.09 d)延长低(均P0.05)。多因素分析提示,术前HBV DNA载量(OR=0.865)、肝功能Child-Pugh分级(OR=0.731)及肿瘤大小(OR=0.535)是引起手术并发症的独立危险因素(均P0.05)。结论:术前高HBV DNA载量的HCC患者围术期并发症增加及术后住院时间明显延长,术前HBV DNA载量是引起手术并发症的独立危险因素。     

核苷（酸）类似物应答不完全慢性乙型肝炎患者HBV多聚酶区耐药基因分析

核苷（酸）类似物的应用开启了慢性乙型肝炎（CHB）治疗新的里程碑,使大多数久治不愈CHB患者的病情得到了有效的控制。然而,随着核苷（酸）类似物疗程的延长,病毒变异和耐药成为临床棘手的问题。笔者对初次治疗应用恩替卡韦（ETV）12个月以上,或拉米夫定（LAM）初治失败后加用或改用其他核苷（酸）类似物序贯或联合治疗病毒学应答不充分的21例患者的HBV多聚酶区（P区）的耐药基因进行了研究和分析,以期进一步了解和研究核苷（酸）类似物治疗HBV变异和耐药的相关问题,为探索减少HBV变异和耐药的有效方法提供依据。