三氧化二砷对人胃癌细胞系MGC803凋亡及耐药基因表达影响的实验研究

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞系MGC803的抑制和诱导凋亡作用及对MRP基因表达的影响。方法：选用人胃癌MGC803细胞系,运用体外细胞培养法,MTT法,流式细胞术检测As2O3对人其抑制和诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测MRPmRNA的表达。结果：As2O3对人胃癌MGC803细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、2．0μmol／L的As2O3可下调MRPmRNA的表达。结论：As2O3具有抗肿瘤作用,主要是通过诱导细胞凋亡实现的,其机制与下调MRPmRNA表达有密切关系。     

三氧化二砷对人胃癌细胞系MGC803凋亡及耐药基因表达影响的实验研究

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人胃癌细胞系MGC803的抑制和诱导凋亡作用及对MRP基因表达的影响.方法:选用人胃癌MGC803细胞系,运用体外细胞培养法,MTT法,流式细胞术检测As2O3对人其抑制和诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MRP mRNA的表达.结果:As2O3对人胃癌MGC803 细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系.不同浓度的As2O3均可诱导凋亡.1.0μmol/L、2.0μmol/L的As2O3可下调MRP mRNA的表达.结论:As2O3具有抗肿瘤作用,主要是通过诱导细胞凋亡实现的,其机制与下调MRP mRNA 表达有密切关系.     

三氧化二砷对人胃癌细胞诱导分化的实验

目的：在三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）诱导凋亡的基础上,探讨低浓度Ａｓ２Ｏ３对胃癌细胞诱导分化的作用。方法：以０．５μｍｏｌ的Ａｓ２Ｏ３处理人胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１和ＭＫＮ４５,观察癌细胞增殖情况;经流式细胞仪检测细胞周期;用免疫组化法检测部分基因表达变化。结果：Ａｓ２Ｏ３处理后：①癌细胞增殖减缓,传至１６代后停止增殖;②４８小时后开始,Ｇ１／Ｇ０期细胞比例增加,Ｓ期细胞比例减少;③ｐ５３和ｂｃｌ－Ｘ     

三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖及细胞周期的影响

[目的]探讨三氧化二砷（AS2O3）对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用及对细胞周期的影响。[方法]应用MTT方法检测三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪进行细胞周期解析及凋亡检测．[结果]三氧化二砷对胃癌BGC823细胞具有杀伤作用，且呈时间-浓度依赖性抑制肿瘤细胞的增殖．72h抑制细胞50％增殖的药物浓度约为3．3μmol／L，与对照组比差异显著（P=0．0048）；5μmol／LAs2O3作用24h，细胞形态学可见典型的凋亡细胞及M期阻滞；流式细胞仪进行细胞周期解析结果提示，G2/M期细胞由正常对照的25％增加到46．3％，出现了明显的G2/M期阻滞，亚二倍体凋亡细胞由4％增加到18％。[结论]三氧化二砷抑制胃癌细胞的增殖．诱导细胞周期阻滞及凋亡。     

三氧化二砷与重组人肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体协同诱导胃癌细胞凋亡的机制

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)和重组人肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(rhTRAIL)协同诱导胃癌细胞SGC7901凋亡的机制.方法 分别以As2O3、rhTRAIL及两者联合处理人胃腺癌细胞株SGC7901,用AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,用DiOC6荧光染色流式细胞术检测细胞线粒体跨膜电位(△Ψm),比色法测定细胞Caspase-8、9活性的变化,观察Caspase-8阻断剂(Z-IETD-fmk)与二硫基还原剂(DTT)对SGC7901细胞凋亡、ΔΨm和Caspase-8、9活性变化的影响.结果 As2O3和rhTRAIL均可以导致SGC7901细胞ΔΨm 随时间延长逐渐下降,两者联用可增加SGC7901细胞ΔΨm下降.Caspase-8阻断剂Z-IETD-fmk可减少rhTRAIL诱导的SGC7901细胞发生凋亡与ΔΨm下降,但不影响As2O3的上述作用.二硫基还原剂(DTT)可减少As2O3诱导的SGC7901细胞凋亡与ΔΨm下降,但不影响rhTRAIL的上述作用.As2O3可导致SGC7901细胞Caspase-9活性升高,这种作用可被二硫基还原剂部分取消,但不受Caspase-8阻断剂的影响;rhTRAIL可导致SGC7901细胞Caspase-8、9活性升高,这种作用可被Caspase-8阻断剂部分取消,但不受二硫基还原剂的影响.结论 As2与rhTRAIL通过不同机制激活SGC7901细胞凋亡的线粒体途径,两者联合增强了线粒体途径的激活,从而在诱导胃癌细胞凋亡方面形成协同作用.     

三氧化二砷诱导恶性肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

三氧化二砷已广泛应用于白血病和各种实体瘤化学治疗的基础研究和临床实践中。近年来国内外多项研究证实三氧化二砷诱导凋亡是其杀伤肿瘤的主要机制,其分子机制尚未得到系统阐明,本文就其抗凋亡作用机制的研究进展作一综述。     

舒林酸对胃癌细胞凋亡的调控作用

 流行病学研究发现，经常服用非甾体类抗炎药（NSAIDs）者，其结、直肠肿瘤的发病率下降将近50％。动物实验研究表明NSAIDs对许多动物诱发性肿瘤如结肠癌、膀胱癌有明显的化学预防作用，临床上非甾体类抗炎药舒林酸可使家族性腺瘤性息肉病患者的肠道息肉消退。对于胃癌，这方面的研究较少，其作用机制也不清楚。本实验将舒林酸设置不同的作用浓度和作用时间，于人胃癌细胞株BGC-823共培养，观察舒林酸对胃癌细胞凋亡的调控作用，探讨其作用机制。     

三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖及细胞周期的影响

[目的]探讨三氧化二砷（AS2O3）对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用及对细胞周期的影响。[方法]应用MTT方法检测三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪进行细胞周期解析及凋亡检测．[结果]三氧化二砷对胃癌BGC823细胞具有杀伤作用，且呈时间-浓度依赖性抑制肿瘤细胞的增殖．72h抑制细胞50％增殖的药物浓度约为3．3μmol／L，与对照组比差异显著（P=0．0048）；5μmol／LAs2O3作用24h，细胞形态学可见典型的凋亡细胞及M期阻滞；流式细胞仪进行细胞周期解析结果提示，G2/M期细胞由正常对照的25％增加到46．3％，出现了明显的G2/M期阻滞，亚二倍体凋亡细胞由4％增加到18％。[结论]三氧化二砷抑制胃癌细胞的增殖．诱导细胞周期阻滞及凋亡。     

死亡受体Fas在TRAIL 联合三氧化二砷诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的： 探讨Fas在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)与三氧化二砷 (arsenic trioxide,As2O3)联合诱导人胃癌细胞凋亡过程中的作用。方法：采用体外培养人低分化胃腺癌细胞SGC-7901,分别以Fas正义、反义寡核苷酸转染SGC-7901细胞获得Sense、Antisense细胞。以0.5 μg/ml As2O3+0.2 μg/ml TRAIL分别处理未转染细胞、Sense组细胞以及Antisense组细胞,采用MTT法检测24、48、72 h后细胞增殖情况;倒置显微镜观察联合作用48 h后细胞集落形态;DAPI染色法、流式细胞仪技术检测48 h时细胞凋亡率;Western blot法检测48 h细胞中Fas、FADD以及Parp表达情况。结果：与未转染组和Sense组细胞比较,转染Fas反义寡核苷酸后,降低了TRAIL与As2O3联合抑制细胞增殖、促进凋亡的作用 (P<0.05),48 h时效果最为明显;荧光显微镜下可见死亡细胞明显减少;Western blot结果显示细胞中Fas、FADD表达降低,Parp活化程度降低 (均P<0.05)。结论：Fas在TRAIL与As2O3联合抑制人胃癌细胞增殖、促进细胞凋亡过程中起重要作用。     

三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用

目的研究三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用。方法癌细胞株Ｅ８７１２和ＥＣ１７１贴壁生长,在电镜观察的基础上,用碘化丙啶（ＰＩ）染色和ＴＵＮＥＬ将凋亡细胞反映在流式细胞仪（ＦＣＭ）上。结果经三氧化二砷２μｍｏｌ／Ｌ作用后,电镜下见部分细胞核染色质凝聚,呈半月形;ＦＣＭ细胞ＤＮＡ检得亚Ｇ１细胞峰;部分Ｇ１期细胞ＴＵＮＥＬ标记呈阳性。结论结果表明,三氧化二砷能诱人食管癌细胞株的凋亡,此药对食管癌等实体瘤的治疗有诱入的应用前景。同时表明,ＦＣＭ具有敏感、特异性强及定量等优点     

凋亡素-2配体联合三氧化二砷对急性髓系白血病细胞生长和凋亡的影响

目的：探讨凋亡素．2配体(Apo2L)联合三氧化二砷(As2O3)诱导急性髓系白血病(AML)细胞凋亡的作用。方法：分离25例AML患者的骨髓单个核细胞,每例分为4组进行观察：空白对照组、Apo2L组、As2O3、组、Apo2L As2O3组,共同培养12h、24h和48h。通过MTT比色法测定细胞生长抑制率及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：Apo2L和As2O3可协同降低AML细胞活力,诱导细胞凋亡,其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论：Apo2L与三氧化二砷具有协同作用,能高效杀灭白血病细胞。Apo2L是一种有望应用于临床的新型生物制剂。     

抗氧化剂对三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡作用的影响

目的 :探讨细胞内抗氧化剂与氧化砷 ( As2 O3 )诱导细胞凋亡的关系。方法 :采用 HL-60细胞为体外模型 ,采用流式细胞术观察不同抗氧化剂对氧化砷诱导细胞凋亡的影响。结果 :自由基清除剂超氧化物歧化酶( SOD)、过氧化氢酶 ( CAT)、维生素 C ( V-C)和巯基化合物乙酰半胱氨酸 ( CYS)可拮抗氧化砷诱导的细胞凋亡 ;砷制剂主要诱导 HL -60细胞 G2 -M期细胞凋亡 ;氧化砷对端粒酶有微弱抑制作用。结论 :砷制剂与细胞内巯基及自由基清除酶等抗氧化剂结合 ,致使酶活性下降 ,细胞抗氧化能力下降 ,可能是砷制剂诱导细胞凋亡的机理之一。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡中Caspase3的变化

目的：观察三氧化二砷（As2O3)诱导K562细胞凋亡过程中Caspase3 活性的变化。方法：K562细胞分别用浓度为0．5umol/L,1umol/L,2umol/L,5umol/L的As2O3处理不同时间＊（0,6h,12h,24h,47h,72h),用流式细胞仪检测K562细胞凋亡率,荧发光光度计检测Caspase3活性,结果：1umol/L-5umol/L的As2O3可诱导K562细胞凋亡,As2O3学在2umol/L以上时作用更明显,K562细胞凋亡过程中Caspase3活性明显升高,结论：As2O3可诱导K562细胞凋亡,以2umol/L以上的浓度作用更明显,Caspase3活化参与了As2O3诱导K562细胞凋亡的过程。     

三氧化二砷对恶性淋巴瘤细胞株凋亡的研究

目的 研究不同浓度的三氧化二砷对恶性淋巴瘤细胞株的影响。方法 采用细胞染色方法观察细胞凋亡的形态,原位末端标记法（TUNEL)检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞的DNA含量的形态,原位末端标记法（TUNEL）检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞的DNA含量和bcl－2蛋白的表达。结果 0．5μmol/L-2.0μmol/L三氧化二砷抑制B淋巴瘤细胞株Raji细胞生长,出现细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪检测Raji细胞亚C1期细胞明显增多,bcl－2蛋白的表达明显降低,呈现剂量时间依赖效应。0．5μmol／L－4．0μmol／L三氧化二砷对T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞无明显作用。结论 三氧化二砷抑制恶性B淋巴瘤细胞生长和促进细胞凋亡的作用。     

三氧化二砷联合维甲酸治疗骨髓增生异常综合征

目的：探讨三氧化二砷联合维甲酸(ATRA)治疗MDS的疗效。方法：31例MDS患者均采用三氧化二砷联合维甲酸等治疗。结果：RA RAS组有效率87．1％,RAEB RAEB-T组有效率42．9％。结论：三氧化二砷是一种治疗MDS的有效药物,尤其是在RA的治疗中有显著效果。     

胃癌及癌前病变中c－Ha－ras癌基因点突变的研究

采用高敏感和特异的ＰＣＲ技术及寡核苷酸探针检测ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子的Ｇ→Ｔ突变，６６例胃粘膜组织中（包括胃癌、不典型增生、肠化生，浅表性胃炎及正常胃粘膜），点突变７例，胃癌占６例，达２８．５７％（６／２１），不典型增生１例，占５．５６％（１／１８）．初步提示ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变有可能发生于胃癌变的早期。应用ＰＣＲ结合斑点杂交技术检测ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因有可能与胃癌病理和临床研究相结合，提供早期诊断胃癌的分子生物学指标。     

ras基因的表达与胃癌细胞生物学特性的相关研究

为研究ｒａｓ基因在胃癌中的表达，采用组织化学、免疫化学和自动图像分析方法，检测了５４例胃癌切除标本的ｒａｓ基因表达、癌细胞核形态参数和ＤＮＡ含量及倍体分布类型。发现胃癌细胞ｐ２１表达水平随着ＤＮＡ含量不断增多、倍体成倍增加而逐渐下降。表明ｒａｓ过度表达主要出现在细胞表型发生明显转化之前。此外，发现胃癌细胞ｐ２１的表达水平与癌细胞核形态参数、癌肿大小、有无淋巴结转移均无关。     

人细胞毒T淋巴细胞杀伤胃癌细胞及诱发凋亡的实验研究

目的　测定特异性细胞毒 T淋巴细胞 (CTL )对胃癌细胞的体外杀伤活性及观察形态学改变。方法　用分离胃腺癌患者的癌细胞经丝裂霉素 C处理后 ,作为抗原与抗CD3单克隆抗体、重组白细胞介素 - 2刺激患者自体外周血单个核细胞 ,体外诱导 CTL,用 MTT比色法测定 CTL 对自体癌细胞、人胃癌细胞株 (BGC- 82 3和 MGC- 80 3)的体外杀伤活性。将 CTL与 BGC- 82 3共同温育 ,通过透射和扫描电镜观察杀伤靶细胞的形态改变。结果　 CTL对自体胃癌细胞有特异性杀伤作用 ,可使靶细胞凋亡或溶解坏死。结论　体外混合细胞培养诱导出的 CTL,对靶细胞有明显的杀伤作用