汉坦病毒和恙虫病东方体复合感染的组织细胞培养研究

目的了解汉坦病毒（HV）和恙虫病东方体（Ot）在宿主体内共生情况.方法采用Vero E6细胞体外培养法研究HV、Ot在宿主细胞内共生特征.结果5组感染Vero E6细胞体外培养检测结果发现：先后、同时和单纯实验感染的5组细胞中,HV和Ot先后、同时接种感染组在细胞传至第3代时检测均见有HV和Ot的双重感染,阳性率随传代次数增加而增加.而HV和Ot单纯分别感染组细胞传第2代时即可检测到HV和Ot,阳性率亦随传代次数的增加而增加.在传代培养中单纯感染组的阳性率均显著高于先后和同时感染组.其结果均用PCR和RT-PCR进行了基因鉴定.结论研究结果提示HV和Ot可在同一宿主细胞内共生,在感染初期有相互抑制作用;对HV和Ot的流行病学有一定的理论意义.     

环泰山区域鼠类与人恙虫病东方体基因同源性和系统进化树分析

[目的]了解环泰山区域恙虫病东方体(Ot)流行株的基因型、遗传特征,探讨人、鼠间所感染Ot的基因同源性和系统进化情况。[方法]2006~2008年对在环泰山区域采集的鼠类和疑似恙虫病病人标本进行Ot-Sta56kDa基因片段检测,对阳性标本进行序列测定;对所测到的序列与GenBank中部分Ot参考序列进行序列同源性分析,绘制系统发生树。[结果]检测84份鼠脾标本,4份Ot基因阳性,阳性率为4.76%。其中,家鼠阳性率为1.79%,黑线姬鼠阳性率为10.71%(P>0.05)。4份病人焦痂标本3份Ot基因阳性。序列同源性分析显示,鼠脾标本08P、53P的核苷酸序列与Sdu-1型同源性为99.77%,与Taguehi和Oishi型的同源性均为95.98%,与Kanda和Kawasaki型的同源性均为95.74%;鼠类标本55P、56P的核苷酸序列与TA686型的同源性分别为86.27%和77.11%。3份病人阳性标本的核苷酸序列与鼠标本08P、53P同源性均为100.00%,与55P、56P的同源性仅为74.30%。系统发生树分析显示,08P、53P和3份病人阳性标本与Sdu-1型在同一分支,与Kawasaki、...     

山东省泰安市鼠类自然感染恙虫病东方体调查

目的 了解山东省泰安地区鼠类自然感染恙虫病东方体(Ot)的情况.方法 应用巢式PCR对山东省泰安地区采集的鼠类标本Ot-Sta56kDa基因片段进行检测,对阳性标本进行序列分析.结果 在泰安地区秋冬季捕获类鼠68只,阳性率为5.88%;不同鼠种间阳性率差异无统计学意义(Fisher X2=4.714,P=0.062).其中3只鼠胚胎标本均未检出Ot.序列同源性分析显示,2只鼠脾标本(08P,53P)的核苷酸序列与Sdu-1型的核苷酸序列同源性最高,为99.77%;其次,与Taguchi和Oishi型的同源性均为95.98%,与Kanda和Kawasaki型的同源性均为95.74%.而另2只鼠类标本(55P,56P)的核苷酸序列与TA686型的同源性最高,分别为86.27%和77.11%.系统发生树分析也显示.08P和53P与Sdu-1型在同一分支,它们又与Kawasaki、Kanda、Tagnchi和Oishi型共处于同一分支;而55P和56P与TA686型在同一分支.结论 山东省泰安地区鼠类存在Ot自然感染.该地区Ot的基因型较为复杂.不仅存在与临沂地区相同的Ot型,该型与日本的Kawasaki型相似;同时还存在与泰国的TA686型相似的Ot型.     

山东部分地区鼠类寄生恙螨及感染恙虫病东方体研究

目的 调查山东地区鼠体外寄生虫分布及种类组成及鼠类自然感染恙虫病东方体(ot)的情况.为传染病防治、媒介生物控制提供科学依据.方法 采用笼日法捕鼠,收集鼠体外寄生虫,应用巢式PCR对山东地区采集的鼠类标本Ot-Sta56kDa基因片段进行检测.结果 在山东省内的5市(县)中共捕获鼠类186只;采获鼠体外寄生革螨、恙螨451只,共1科3属5种.仅泰安地区黑线姬鼠脾组织中扩增出阳性结果,与血清型为Gilliam型的核苷酸序列同源性最高,为99.77％.结论 山东泰安地区鼠类存在Ot自然感染,通过对山东部分地区鼠体外寄生虫分布及种类组成调查;为该地区进一步研究鼠类传染病提供了依据.     

恙虫病东方体与莫氏立克次体双重实时荧光PCR检测方法建立及其在鼠类检测中的应用

目的建立一种基于TaqMan-MGB探针技术的双重实时荧光PCR检测方法,用于鼠类携带恙虫病东方体和莫氏立克次体的检测工作开展。方法依据恙虫病东方体56-kDa蛋白基因序列设计恙虫病东方体引物及Taqman-MGB探针,参照文献合成莫氏立克次体引物及Taqman-MGB探针,建立恙虫病东方体及莫氏立克次体双重实时荧光PCR检测方法。结果利用本文建立的双重实时荧光PCR检测方法对288份鼠肺脏组织样品进行检测,检测结果与普通PCR检测结果一致。结论本文建立的双重实时荧光PCR检测方法,具有较好的特异性、敏感性及重复性,满足国境口岸鼠类携带恙虫病东方体及莫氏立克次体的监测检测工作需要。     

小盾纤恙螨经卵传递病原体研究

目的　探索快速取得大量小盾纤恙螨未食子代幼虫的方法 ,以适应研究恙螨经卵传递病原体的需要。方法　将小黑板放置在肾综合征出血热 (HFRS)及恙虫病疫区草地上 ,10min后取回计算螨数并鉴定螨种。该法可收集到大量小盾纤恙螨未食子代幼虫。 2 0～ 3 0只幼虫为 1批叮刺 1只小白鼠乳鼠以分离汉坦病毒 (HV)或叮刺 1只小白鼠以分离恙虫病东方体 (Ot)。结果　 2 4批恙螨幼虫叮刺乳鼠 ,分离到 5株HV ;6只小白鼠被恙螨幼虫叮刺 ,分离到 2株Ot。试验中所用幼虫未曾叮刺过 ,但鼠被这些幼虫叮刺后能感染上HV和Ot ,表明这些螨所带病原体系由母代螨经卵传递而来。结论　小黑板可采集到疫区草地上大量小盾纤恙螨未食幼虫 ,为研究恙螨经卵传递病原体提供了一种快速、简便、经济的方法。研究结果证明小盾纤恙螨可经卵传递HV和Ot,可作为HFRS和恙虫病的传播媒介。     

同一疫区汉坦病毒、恙虫病东方体共有宿主和媒介的分子流行病学研究

目的 了解汉坦病毒(HV)和恙虫病东方体(OT)在宿主和媒介体内的共生和自然感染情况.方法 采用现场流行病学调查,捕鼠166只、采螨3829只,用组织细胞培养和聚合酶链反应(PCR)技术从宿主和媒介体内分离和检测HV和OT病原体,以及HV-RNA、OT-DNA.结果 其中,捕获的105只黑线姬鼠中HV阳性3只,OT阳性2只,HV、OT同时阳性2只;41只褐家鼠中HV阳性2只,OT阳性1只,HV、OT同时阳性1只.从15份双重感染HV和OT阳性鼠体螨中分离到HV病原体2株,OT 2株,同时分离到HV和OT有1份.结论 HV和OT可同时自然感染并共生于宿主(鼠类)体内,而HV和OT能否同时感染媒介(恙螨)尚待证实.研究结果对HV和OT的流行和预防有重要的理论意义.     

阜阳市疑似恙虫病患者和恙螨及恙虫病鼠类中东方体分离及基因分型研究

目的分析从患者全血、恙螨、野鼠肝脾等标本中分离的恙虫病东方体,为进一步确立阜阳市为新疫源地提供依据。方法采集2009年-2010年每年9月-11月辖区内疑似患者抗凝血、野鼠、恙螨标本,利用小白鼠传代分离法,分离恙虫病东方体,通过巢式PCR方法检测,对其测序结果进行基因分型。结果患者新鲜血液或抗凝血标本在传至3代~4代以后,小白鼠肝脾组织标本核酸检测结果部分为阳性(全血PCR阳性59组,经小白鼠分离后15株阳性;恙螨20组,其中3组PCR阳性,经小白鼠分离后1株阳性;野鼠256只,其中7只PCR阳性,经小白鼠分离35组,其中1株阳性),取扩增产物进行序列分析,证实为恙虫病东方体kawasaki基因型。结论首次从秋冬型恙虫病东方体流行季节患者、野外优势鼠种黑线姬鼠以及小盾纤恙螨体内分离的病原体为恙虫病东方体,进一步从病原学上证实阜阳市为新的疫源地。     

套式PCR应用于恙虫病东方体媒介、鼠类血块及脾脏标本的实验检测研究

目的 :检测恙螨幼虫体内及鼠类标本中恙虫病东方体携带情况 ,预测流行趋势 ,评价套式PCR反应的敏感性和特异性 ,以进一步开展分子流行病学研究。方法 :参照文献中恙虫病东方体Karp株Sta 58群特异性抗原基因序列 ,合成两对DNA引物 ;应用套式PCR检测现场鼠体表恙螨幼虫体内及鼠类标本的恙虫病东方体DNA ;PCR扩增产物通过 2 %琼脂糖凝胶电泳分析和12 %PAGE电泳分析 ,并用PGEM - 3Zf( ) /HaeⅢDNA作为核酸分子量参照物 ,证实扩增产物是恙虫病东方体Sta 58kDa群特异性抗原基因 88bp片段。结果 :从送检的 2 9份鼠血块和 112份脾组织中均检出阳性 1份 ;从 39份恙螨幼虫体内检出阳性 8份。实验感染小鼠后 3d ,其血块及脾组织均未检出恙虫病东方体 ;而在感染后 6和 9d ,能从血块及脾组织中检出恙虫病东方体。结论 :套式PCR具有很高的敏感性和特异性 ,是疫源地及现场流行病学调查的有效手段     

低山丘陵区鼠类调查及相关问题探讨

１９９１～１９９２年，笔者对日照市低山丘陵区村庄周围不同生境的鼠类进行了调查。其中１９９１年以河湖岸边鼠密度最高，为７．３７％；梯田最低，为１．５４％。黑线姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓａｇｒａｒｉｕｓ）占８３．９０％，河湖岸边、干沟等生境春季捕获的均为黑线姬鼠。为防病保粮，在低山丘陵区的重点生境（河湖岸边、干沟及石堰边等）开展灭鼠活动，可取得事半功倍之效，春季尤然。     

长江三峡宜昌地带鼠类种群数量变动及生态学研究

通过10年的鼠情监测,发现长江三峡宜昌地带鼠类种群密度野外与室内的变动趋势不一致。野外鼠类密度高峰在1983～1984年,达11.54～24.49%,其他年份在4～7.5%之间波动;主要影响因素是非密度制约因素,但密度制约因素亦有一定影响。室内鼠类种群数量变动的规律不明显,但密度普遍较野外高(1984年除外)。室内优势种为黄胸鼠、褐家鼠和小家鼠,野外是黄毛鼠和黑线姬鼠,但存在交替更换现象。黑线姬鼠、黄毛鼠、黄胸鼠、褐家鼠、小家鼠的孕鼠最高胎数分别为11、12、12、14和9。     

辽宁省家栖鼠种类组成与数量动态的研究

本文以1985～1991年城乡家栖鼠鼠情监测资料为主要依据,揭示了辽宁省城乡家栖鼠种类组成与数量的月变动及七年来年变动趋势。城乡1年内均有两个数量商峰,城市数量高峰为4～5月与9～10月,农村数量高峰为3～4月与10～11月。城市家鼠数量明显呈下降趋势,鼠密度被控制在1%以下;农村鼠密度也下降,但平均密度高于2%。     

厦门港区残存鼠群落结构的研究

目的 对厦门港区4种类型码头即集装箱码头，散货码头，煤码头和客运码头的残存鼠群落结构进行研究。以探索防制对策。方法 夹夜法。结果 集装箱码头和散货码头残存鼠群落结构相似。为自JuQing 褐家鼠 黄胸鼠；煤码头为臭JuQing 黄胸鼠 黄毛鼠；客运码头以臭JuQing为主。臭JuQing是港区的优势鼠种。结论 不同类型码头的残存鼠生物多样性指数各不相同。以集装箱码头最高。集装箱码头和散货码头鼠类群落间相似性指数最高。     

贵州省流行性出血热疫区鼠类调查报告

本文报道贵州省三种不同情况EHF疫区鼠类连续两年逐月自然监测结果。通过37012夹夜的捕鼠调查,进一步查明各疫区鼠类传染源种类、密度、带病毒率的季节性变化及其空间分布。为灭鼠防病提供了生物学依据。     

镇江口岸鼠形动物及体表寄生虫种群生态和肾综合征出血热抗原携带情况调查

目的 了解镇江口岸鼠形动物及体表寄生虫的种群生态和鼠肺组织中肾综合征出血热（HFRS）抗原携带情况。方法 将镇江口岸沿江60km岸线区域分为4类生态环境。设8个调查点，用夹日法和笼日法捕鼠，梳刷法采集鼠体表寄生虫，直接荧光法检验鼠肺HFRS抗原。结果 捕获鼠形动物640只，鼠密度7.41%。隶属3日4科7属9种。黑线姬鼠是草灌区，码头区的优势种；褐家鼠，小家鼠分别是生活区，仓库区的优势种，褐家鼠，小家鼠和大麝Ju的繁殖指数均高于2。鼠形动物的密度高峰在2-5月份。各鼠种的性比和成幼比变化较大，采集鼠体表寄生虫1619只，隶属4目11科19属28种。蚤类，蜱类，革螨，吸虱，恙螨的优势种分别是上海狭蚤，长角血蜱，JuQing赫刺螨，锯多板虱，小盾纤恙螨，总染虫率为50.31%。带虫指数为2.53。鼠体表寄生虫3月份出现高峰，9月份出现次高峰，革螨和吸虱的宿主特异性低，宿主范围宽，鼠肺组织HFRS抗原阳性率为2.50%。阳性鼠为黑线姬鼠。结论 镇江口岸各生态环境的鼠形动物及其体表寄生虫的种类繁多，种群生态特征明显，口岸存在姬鼠型HFRS疫源地，黑线姬鼠是宿主动物。     

城市特殊环境与居民环境鼠类生态比较研究

本文首次对城市特殊环境与居民环境鼠类生态作了比较研究。结果发现,物种构成、鼠类群落多样性和均匀度因地区、环境不同而异,但褐家鼠(Rattus norvegicus)、小家鼠(Mus musculus)是共同的优势种。鼠密度总体水平在两种环境的差异亦因地区不同而异,如吉林省和内蒙包头市的特殊环境鼠密度显著低于居民环境(P<0.001),湖北省则相反(P<0.001);吉林省特殊环境与居民环境鼠密度基本呈同步起伏,湖北省两者很不相同。不同鼠种在不同地区、环境的密度水平及时间变动曲线也不一致。吉林省特殊环境与居民环境的褐家鼠密度水平相近,基本呈同步起伏;湖北省特殊环境显著高于居民环境,二者时间变动曲线很不相同。吉林省居民环境小家鼠密度显著高于特殊环境(P<0.001),二者基本呈同步起伏;湖北省恰恰相反。两省特殊环境的褐家鼠、小家鼠密度变异性均比居民环境大。褐家鼠、小家鼠性比在不同地区各异,总体上雌性比越高则鼠密度水平越高,小家鼠雌性比与密度总体上呈显著正相关(r=0.563,P<0.05),而褐家鼠无显著相关性。本文还报道了包头市特殊环境鼠类分类调查等结果。特殊环境建筑面积与居民环境比为1∶13;居民环境鼠类分布特点:凉房鼠密度为住房的11倍。     

吉林省鼠疫自然疫源地达乌尔黄鼠的生态学研究

目的研究吉林省鼠疫自然疫源地乌尔黄鼠的生态学变化规律。方法依据《吉林省鼠疫自然疫源地现状调查实施方案及工作指南》对吉林省鼠疫自然疫源地达乌尔黄鼠种群的年龄结构、雌雄比和数量变化、雌性繁殖状况进行观察。结果2龄鼠占多数，4龄鼠较少，未发现大龄鼠，种群性比，雄：雌为1：0．98。雌鼠妊娠率94．32％，平均胎鼠数为7．67个。结论达乌尔黄鼠生态学各项指标变化差异略微，种数的数量年际动态基本是恒定的。     

类志贺邻单胞菌生态学调查研究

对类志贺邻单胞菌进行了生态学调查。调查自然水体标本398份,检出Ps99株细菌,平均检出率24.87%。本菌在水中一年四季均能检出,但夏秋较冬季检出率高。通过对动物的调查,证明该菌具有较广泛的天然宿主。在整个人群中的检出率为14.7%,腹泻病人检出率(13.15%)与正常人群比较无显著性差异(χ²=0.40,P>0.05),但农村高于城市,少儿高于成人,使用全部50个O抗原诊断血清进行血清型研究,可分型率71.08%,分布于42个血清O型,菌型极为分散。     

塔里木盆地啮齿动物体外寄生虫群落结构及其聚类分析

目的 掌握塔里木盆地啮齿动物体外寄生虫群落组成、结构和分类。方法 根据地理区划和生境类型选择调查点，按样方法捕获啮齿动物，对体外寄生虫进行单独鉴定，采用群落生态学技术方法，计算各鼠类、蚤类群落的组成和结构参数，并采用聚类分析的方法，对该地区啮齿动物体外寄生虫群落进行分类。结果 在塔里木盆地共捕获啮齿动物7种351只，检获体外寄生蚤10种683只，蜱类3种321只，螨621只，虱29只，构建7个鼠类、蚤类群落；子午沙鼠体外寄生蚤的蚤指数、丰富度和多样性3项指标均较高，对该地区啮齿动物体外寄生虫群落的构成和稳定起到了积极作用，三趾跳鼠体外寄生虫群落与子午沙鼠存在一定的互补性，对维持塔里木盆地蚤类群落结构亦具有重要的作用。结论 经聚类分析可将塔里木盆地7种啮齿动物体外寄生虫群落聚类为4个类型：（1）短耳沙鼠、小林姬鼠、灰仓鼠和小家鼠体外寄生虫群落；（2）三趾跳鼠体外寄生虫群落；（3）大耳跳鼠体外寄生虫群落；（4）子午沙鼠体外寄生虫群落。