HMGB1/TLR/NF-κB在狼疮性肾炎小鼠肾组织中的表达及意义

目的:探讨HMGB1/TLR/NF-κB在狼疮性肾炎小鼠肾组织中的表达及作用机制.方法:选取16周龄的雄性BXSB小鼠(狼疮性肾炎模型)和同周龄C57BL/6 小鼠(正常对照)作为研究对象,透射电镜观察肾组织的超微结构改变;RT-PCR检测肾皮质中HMGB1mRNA的表达变化;免疫组织化学和流式细胞术检测肾组织中HMGB1、NF-κB、TLR2和PCNA蛋白的表达变化.结果:(1) 16周时,BXSB小鼠血清中BUN水平明显升高;(2) 16周时,与正常的C57BL/6 小鼠相比,BXSB基底膜明显增厚,部分足突融合,内皮细胞下可见团块状电子致密物沉积;(3) 狼疮性肾炎模型组小鼠肾组织的肾小球中可见较多的PCNA阳性表达,肾小管上皮细胞核内也可见少量的表达;(4) 与对照组相比,BXSB小鼠肾组织中HMGB1mRNA及蛋白表达升高,HMGB1蛋白尤其在细胞增生明显而肥大的肾小球呈高表达,主要位于细胞浆和细胞外;而在C57BL/6小鼠肾脏组织中以小管细胞核表达为主;(5) 狼疮性肾炎模型组小鼠肾组织p-NF-κB和TLR2蛋白表达明显升高;(6) HMGB1蛋白与p-NF-κB蛋白表达呈显著正相关(r=0.833,P=0.000);p-NF-κB蛋白与TLR2蛋白表达呈显著正相关(r=0.765,P=0.001).结论:(1) HMGB1能促进肾小球固有细胞的增生,导致增生性肾小球肾炎形成;(2) HMGB1在小鼠狼疮性肾炎中的致炎作用可能部分通过结合其受体TLR2,激活NF-κB信号途径而实现的.     

NF-κB/REL激活的信号机制

NF-κB/REL蛋白是进化学上高度保守的一种免疫反应介质。多种不同的刺激信号都可激活核转录因子参与细胞的生长、分化、发育、凋亡、粘附及炎症反应。激活NF-κB的信号机制十分复杂。不同的刺激信号,不同的细胞种类,以及细胞不同的状态所涉及的NF-κB激活的具体信号通路有可能不同。随着一些IκB家族成员激酶的鉴定及其相关敲剔基因模型的建立,人们对NFκB激活的信号机制有了更深入、全面的认识。     

主动性Heymann肾炎中NF-κB p65在肾间质病变中的作用

目的 :探讨主动性Heymann肾炎 (AHN)肾间质内NF -κBp6 5的活化及意义。方法 :8- 10周龄Wis tar雌性大鼠 2 0只均分为 2组 ,肾炎组予皮下免疫Fx1A/CFA ;对照组予皮下注射CFA。免疫组化染色观察大鼠肾组织NF -κBp6 5的活化及其与肾组织病理改变、尿蛋白量和血清白蛋白水平变化的相互关系。结果 :肾炎组大鼠肾间质病变评分、肾小管 -间质NF -κBp6 5的活化均明显高于对照组 (P <0 0 1) ;肾小管NF -κBp6 5阳性数与尿蛋白水平和肾间质病变评分呈明显正相关 (r分别为 0 7138和 0 6 376 ,P <0 0 5 )。结论 :NF -κBp6 5的活化可能参与AHN的小管 -间质的病理损害过程     

NF-κB/IκB信号通路在乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中的表达

目的探讨核转录因子-κB(NF-κB)/IκB在乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)肾组织中的表达及其在HBVGN发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化染色法,检测42例HBVGN、20例原发性膜性肾病及5例正常肾组织中NF-κBp65、IκB-α蛋白的表达。结果NF-κBp65蛋白在HB-VGN组织中的表达,明显高于在原发性膜性肾病(P<0.01)及正常肾组织(P<0.05)中的表达,且细胞核和细胞质中都可检测到NF-κBp65的表达;相反IκB-α在HBVGN组织中的表达低于原发性膜性肾病肾组织(P<0.05)。结论HBVGN肾组织可能有IκB-α蛋白降解及NF-κB核转移。NF-κB/IκB可能参与了肾组织的病理损害过程。     

NF-κB超抑制物IκBαM重组腺病毒的构建

目的 在克隆IκBα基因并构建IκBαM的基础上，构建重组腺病毒AdIκBαM。方法 将IκBαM克隆至穿梭质粒，线性化后与骨架质粒共同转染BJ5183菌，构建重组腺病毒质粒。酶切及PCR法鉴定；将其线性化后转染293细胞，观察绿色荧光以确定转染结果，以Western blot法检测目的基因表达。结果 凝胶电泳及行酶切鉴定表明同源重组成功；一PCR产物测序证明确为lxBaM；以重组腺病毒质粒转染293细胞，见绿色荧光；感染293细胞得到大量病毒。结论 成功构建了IκBαM重组腺病毒，为进一步研究奠定了基础。     

NF-κB与神经退行性疾病

NF-κB 是一种具有多向转录调节作用的蛋白质.它分布广泛,并调节多种基因的转录调控,参与炎症反应、免疫应答以及细胞的增生、转化和凋亡等重要的生理病理过程.最近研究表明, NF-κB与中枢神经系统中神经细胞的生长、发育、塑型有关,并在急、慢性神经退行性变如脑损伤、脑缺血、癫痫、阿尔茨海默病及帕金森病等病理过程中起重要作用.     

NF-κB/IκB:重要的转录调节因子

核转录因子ｋａｐｐａ Ｂ（ＮＦκＢ）是一组重要的转录调节因子,可在免疫刺激剂等多种因素作用下激活而调节基因的转录,参与调节许多与免疫功能和炎症有关的基因。ＩκＢ（Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ＮＦκＢ）是其抑制分子,对其激活的调控起着关键作用。本文综述了ＮＦκＢ激活及调控的有关机理,为对其进一步研究提供理论依据。     

NF-κB参与Akt信号途径激活诱导的心肌肥大

目的：探讨NF-κB信号在Akt信号途径激活诱导的心肌肥大发生机制中所起的作用。 方法： 以缩窄SD大鼠升主动脉诱导的心肌肥大和心脏特异性表达的caAkt转基因小鼠为模型，采用EMSA检测心肌组织中NF-κB结合活性，应用Western blot方法分析心肌组织中phospho-Akt 和 phospho-IκBα的表达水平。 结果： ①缩窄大鼠升主动脉3周后，心脏重量/体重比值高于假手术组34.5%(P＜0.01) ，而且肥大心肌组织中p-Akt蛋白表达明显高于假手术组(P＜0.01)。②caAkt转基因小鼠心脏明显肥大，其心肌组织中NF-κB活性比野生型小鼠高567.86%(P＜0.01)，同时心肌组织中IκBα的磷酸化水平也明显高于野生型小鼠(P＜0.01)。 结论： NF-κB介入到Akt信号途径激活所致的心肌肥大发生发展过程中。     

NF-κB/Rel及其活化与信号转导

ＮＦκＢ／Ｒｅｌ属Ｒｅｌ蛋白家族,它参与一系列基因表达的调控。静息时,ＮＦκＢ／Ｒｅｌ蛋白二聚体与抑制蛋白ＩκＢ结合成三聚体而存留于胞浆。Ｒｅｌ蛋白家族包括：ＲｅｌＡ（Ｐ６５）,ＲｅｌＢ,ＣＲｅｌ,ＮＦκＢ１（Ｐ５０）,ＮＦκＢ２（Ｐ５２）。其中ＮＦκＢ包括Ｐ５０Ｐ６５二聚体。ＩκＢ蛋白包括ＩκＢα,ＩκＢβ,ＩκＢγ,ＩκＢδ,ＩκＢε和Ｂｃｌ３。胞外刺激通过不同的信号转导途径使ＩκＢ降解,ＮＦκＢ成为活化的二聚体发生核易位。与ＮＦκＢ活化有关的信号转导可能与下列途径有关：活性氧、酰基鞘氨醇、蛋白激酶、ＩκＢ激酶     

NF-κB信号通路在骨及相关疾病中的作用的研究进展

NF-κB是一类核转录因子,可与其靶基因启动子区的DNA序列结合,而启动基因转录的功能。它们广泛参与胚胎发育、细胞增殖、细胞凋亡、免疫反应、炎症反应、病毒感染等过程。目前研究已经证实NF-κB信号通路在骨的发育和形成中具有重要的调控作用,NF-κB信号通路的阻断可导致骨发育异常或相关疾病的发生。NF-κB通过调控成骨细胞、破骨细胞、骨细胞和软骨细胞的增殖、分化和凋亡等生物学过程,调控骨的发育和重塑,并在骨相关疾病的发生中发挥重要的调控作用。     

姜黄素对MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠的作用及机制研究

目的:观察姜黄素(Cur)对狼疮性肾炎(LN)的作用及其可能的机制。方法:将30只10周龄的MRL/Lpr狼疮小鼠随机分为MRL/lpr组及Cur低、高剂量组(Cur-L和Cur-H组),对照组(NC组)为C57BL/6小鼠,每组10只。Cur-L组和Cur-H组分别给予100和200 mg/kg Cur灌胃处理,NC组和MRL/lpr组灌胃等体积的生理盐水,每天1次,连续12周。检测各组小鼠的尿蛋白变化,给药结束后HE染色观察肾组织形态学变化;检测血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和血清抗双链DNA(dsDNA)水平,以及血清和肾组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot检测肾组织中p-IκB、NF-κB、NLRP3和caspase-1的蛋白水平。结果:与MRL/lpr组比较,Cur组处理后小鼠尿蛋白含量显著降低,肾损伤有一定缓解,SCr、BUN及血清抗dsDNA水平显著降低,血清和肾脏中IL-1β、IL-6及TNF-α水平显著降低,肾组织中p-IκB、NF-κB、NLRP3和caspase-1的蛋白水平也显著低于MR...     

重组腺病毒ΔN IκBα的构建及其对A549细胞中NF-κB活性的抑制

目的: 探讨ΔN IκBα基因对NF-κB活性的调节作用.方法: 构建去除Ser32和Ser36磷酸化位点的IκBα重组腺病毒Ad-ΔN IκBα.A549细胞分为3组: 即LPS组、 Ad-LacZ+LPS组和Ad-ΔN IκBα+LPS组.LPS组单纯用内毒素(LPS)激活NF-κB; Ad-LacZ+LPS 组及Ad-ΔN IκBα+LPS 组在用LPS前2 d, 分别感染Ad-LacZ和Ad-ΔN IκBα.用Western blot、电泳迁移率变动分析(EMSA)和ELISA法分别检测LPS刺激后5 h, 细胞总蛋白中NF-κB的活性和培养上清中TNF-α及IL-6的含量.结果: Ad-ΔN IκBα+LPS组NF-κB的活性, TNF-α和IL-6的含量, 均显著低于LPS组及Ad-LacZ+LPS组.结论: 突变后的IκBα可明显抑制NF-κB活化, 减少TNF-α和IL-6的释放, 有望成为一种强有力的抗炎治疗制剂.     

NF-κB信号转导途径与炎症性疾病

核因子κB广泛存在于胞浆中,通常以p65-p50二聚体的形式存在,与抑制物IκB结合而呈非活性状态。NF-κB信号转导途径能被TNF-α、IL-1、神经生长因子等多种因素激活。激活后NF-κB信号转导途径能够调节包括生长因子、转录因子、细胞素、趋化因子、抗凋亡蛋白等在内的基因转录。NF-κB信号转导途径参与了炎症、细胞凋亡、免疫反应等病理过程。其与炎症性疾病关系密切,深入了解NF-κB信号转导途径,有助于阐明某些炎症性疾病的发病机制以及为某些炎症性疾病提供新的治疗靶点。     

SUMO化修饰对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响

目的 探讨小泛素相关修饰物(SUMO)修饰对高糖诱导的肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响.方法 体外培养正常大鼠肾小球系膜细胞,设对照组、不同浓度高糖干预组和渗透压对照组,用免疫共沉淀检测SUMO1,SUM02/3蛋白与IκBα蛋白的相互作用;免疫印迹检测IκBα、NF-κB P65蛋白表达.结果 高糖特异性地减弱肾系膜细胞SUMO2/3与IκBα蛋白间的相互作用(P＜0.05);高糖呈浓度-时间依赖性促进IκBα泛素化降解(P＜0.05),同时上调NF-κB P65表达(P＜0.05).结论 高糖特异性减弱IκBα的SUMO化修饰,可能介导了肾系膜细胞、NF-κB信号的激活,参与了糖尿病肾病的发病.     

Akt/NF-κB信号途径在免疫复合物诱导肾系膜细胞增殖中的作用

目的 :观察免疫复合物 (IC)能否诱导体外培养的肾小球系膜细胞 (MC)增殖及其Akt/NF κB信号在其中的作用。方法 :实验设对照组、刺激组及Akt1正义 (SODN)、错义 (MSODN)与反义寡核苷酸 (ASODN)组。寡核苷酸组 :以lipofectin分别介导Akt1SODN、MSODN、ASODN转染MC 8h ;对照组和刺激组 :以lipofectin作用MC 8h。然后刺激组和寡核苷酸组均用聚合IgG(aggregatedIgG ,AIgG ,一种标准的IC模型 )刺激 ,对照组用等量的单体IgG刺激。用MTT比色法检测细胞的增殖 ,流式细胞术分析MC的细胞周期 ,RT PCR分析mRNA的表达 ,Westernblot检测蛋白的表达 ,电泳迁移率变动实验 (EMSA)检测NF κB的活性。结果 :IC可诱导MC中NF κB的活化 ,上调细胞周期蛋白cyclinD1的mRNA及蛋白表达 ,促进MC进入S期。Akt1ASODN可抑制Akt1蛋白的表达 ,抑制IC诱导的MC中NF κB活性 ,抑制cyclinD1mRNA及其蛋白的表达 ,进而抑制IC促进MC进入S期和增殖。Akt1SODN、MSODN则无上述抑制作用。结论 :IC可通过Akt/NF κB信号途径 ,介导体外培养的MC增殖。提示Akt/NF κB信号途径 ,可作为干预IC诱导MC过度增生的一个新的治疗靶点。     

NF-κB在重症社区获得性肺炎中的作用

核因子-κΒ(nuclear factor kappa B,NF-κB)是一种重要的转录调控因子,可与多种基因启动子区域的固定核苷酸序列结合而启动基因转录功能,它参与机体的炎症、免疫反应、细胞凋亡及其他应激反应等.近年来研究发现,NF-κΒ的过度活化与重症社区获得性肺炎的发生、发展密切相关,对NF-κΒ进行调控将成为治疗重症社区获得性肺炎的重要手段.     

NF-κB在不同时期糖尿病大鼠肝中的表达

目的研究NF-κB在糖尿病大鼠肝中的表达。方法取不同时期糖尿病大鼠的肝组织,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察。结果NF-κB在糖尿病肝脏组织中表达增高,且随着病程的延长而增加。结论NF-κB在糖尿病的发生发展及其并发症中起了一定作用。     

NF-κB在急性胰腺炎中的研究进展

NF-κB(转录因子核因子-κB)是一类主要参与机体炎性分子表达调控的转录分子，在急性胰腺炎中，其表达也受到很大的影响，苓主要对近几年NF-κB在急性胰腺炎中的研究作一综述。