中国汉族人群冠心病候选基因变异及其临床关联的地域特征

目的 探讨冠心病候选基因单核苷酸多态性在中国汉族人群中的地域分布特征.方法 选择西安、十堰及宁波地区汉族人群中经冠状动脉造影证实的冠心病及正常对照为研究对象.采用苯酚-氯仿-异丙醇抽提外周血白细胞全基因组DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)及限制性片段长度多态性(RFLP)结合测序方法确定候选基因单核苷酸多态性(SNP).SNP位点选择ATP结合盒转运子(ABCAl-G596A),胆固醇酯转运蛋白(CETP-Taq1B),脂蛋白脂酶(LPL-Hind Ⅲ及LPL-Pvu Ⅱ).结果 入选西安、十堰及宁波三个地区中国汉族人群615例(西安、十堰及宁波地区分别220、209及186例),平均年龄(60±10)岁,男性占75.9%.西安地区人群糖尿病罹患率以及血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及甘油三酯(TG)水平显著高于十堰及宁波地区人群(均P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著低于后者[分别为(1.17±0.48)mmol/L,(1.25±0.33)mmol/L,(1.29±0.44) mmol/L,P=0.03];三个地区人群之间ABCA1-G596A及CETP-Taq1B基因型频率分布差异具有统计学意义(均P＜0.01),而LPL基因型频率基本一致(P＞0.05);4个SNP对三个地区人群TC及LDL-C影响差异无统计学意义.ABCA1-G596A基因变异均显著升高三个地区人群血浆HDL-C水平(P＜0.01),同时降低TG水平[西安:GG(2.4±1.3)mmol/L、GA(1.9±0.9)mmol/L、AA(1.6±0.8)mmoL/L,P＜0.01;十堰:GG(2.1±1.0)mmol/L、GA(1.9±0.8)mmol/L、AA(1.8±0.7)mmoL/L,P=0.03;宁波:GG(1.9±1.1)mmol/L、GA(1.8±0.9)mmol/L、AA(1.6±0.7)mmol/L,P=0.05];三个地区人群LPL-Hind Ⅲ(+/+)基因型携带者血浆TG均水平显著高于(-/-)携带者[西安:+/+(2.2±1.0)mmol/L、-/-(1.6±0.7)mmol/L,P=0.01;十堰:+/+(2.1±0.7)mmol/L、-/-(1.7±0.6)mmol/L,P=0.01;宁波:+/+(1.8±1.0)mmol/L、-/-(1.4±0.5)mmol/L,P=0.001],而对HDL-C的影响无统计学意义;CETP-Taq1B、LPL-Hind Ⅲ及LPL-Pvu Ⅱ基因变异对不同地区人群HDL-C及(或)TG的影响不尽一致.4个SNP对三个地区汉族人群冠心病发病的影响均无统计学意义.结论 不同地域中国汉族人群冠心病危险因素(环境因素和遗传因素)存在一定异质性;候选基因SNP可预测冠心病中间表型,但对临床表型缺乏显著影响,此联系独立于地域因素.     

ATP结合盒运体A1基因G596A变异对血脂的影响

目的探讨ATP结合盒转运体A1(ATP-bindingcassettetransporter1,ABCA1)基因G596A变异是否影响人群的血脂水平。方法对象选自中国西北地区汉族人267名,年龄(62±9)岁。以蛋白酶K消化、苯酚及氯仿抽提以及异丙醇沉淀的方法提取全基因组DNA。应用聚合酶链反应、限制性内切酶片段长度多态性结合测序的方法检测ABCA1基因单核苷酸多态性。结果该研究群体等位基因ABCA1-A和G的基因频率分别为51.6%和48.4%,符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ2=0.66,P>0.50)。在ABCA1G596A的GG、GA和AA的3种基因型中,高密度脂蛋白水平依次呈上升趋势,GG型(1.15±0.38)mmol/L与AA型(1.28±0.48)mmol/L差异无统计学意义(P<0.05);甘油三酯水平依次呈下降趋势,GG型(2.0±1.1)mmol/L与AA型(1.7±1.1)mmol/L差异有统计学意义(P<0.05)。结论ABCA1G596A变异可影响西北地区人群的血脂水平,GG型携带者可产生有益的临床血脂谱。     

不稳定型心绞痛患者血小板反应素-1基因 G1678A多态性分析

目的:探讨血小板反应素-1(TSP-1)基因G1678A(Ala523Thr)多态性与中国汉族人群不稳定型心绞痛(UAP)的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测110例UAP患者(UAP组)和319例非冠心病者(对照组)的TSP-1G1678A多态性。结果:TSP-1G1678A多态性AA、GA和GG基因型频率在UAP组和对照组的分布差异无统计学意义(AA,46.4%∶40.4%;GA,40.0%∶46.1%;GG,13.6%∶13.5%,均P>0.05)。A等位基因频率在UAP组(66.4%)和对照组(63.5%)分布差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:TSP-1基因G1678A多态性与中国汉族人群UAP无显著相关性。     

B族Ⅰ型清道夫受体基因外显子1多态性与冠心病、血脂水平的关系

目的 探讨B族Ⅰ型清道夫受体（SR-BⅠ）基因外显子1和内含子5单核苷酸多态性对中国天津地区汉族人群血脂水平和冠心病发病易感性的影响。方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法,测定370例冠心病患者和143例正常对照者SR-BⅠ基因外显子1的AluI酶切基因型及内含子5的ApaI酶切基因型,分析其与血脂水平、冠心病及冠状动脉造影结果的关系。结果 两组研究对象中内含子5均仅发现CC基因型。SR-BⅠ外显子1等位基因G、A频率在冠心病组和对照组分别为0.988、0.012和0.997、0.003。基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。外显子1 AluI酶切多态性基因型频率、等位基因频率组间比较均无显著性差异（P>0.05）。在冠心病组男性患者中,外显子1基因多态性变异组（GA＋AA基因型亚组）的血清高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AⅠ水平高于无变异组（GG基因型亚组）。结论 SR-BⅠ基因外显子1多态性可能与中国天津汉族人群冠心病发病易感性及冠心病病变严重程度无关,但冠心病患者SR-BⅠ基因外显子1 A等位基因可引起男性血清高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AⅠ水平升高。     

广西壮族人ABCA1基因rs2066715多态性与血脂水平及脑梗死的关系

目的探讨广西壮族人三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)基因rs2066715单核苷酸多态性(SNP)位点与血脂水平及脑梗死(CI)的关系。方法采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性技术检测252例壮族CI患者(CI组)和249例健康壮族人(对照组)的ABCA1基因rs2066715位点基因型,分析不同基因型与血脂、CI的关系。结果壮族人ABCA1基因rs2066715位点G、A等位基因频率在CI组为53.2%、46.8%,对照组为57.8%、42.2%;GG、GA和AA基因型分布在CI组为29.4%、47.6%、23.0%,对照组为33.7%、48.2%、18.1%。两组等位基因频率和基因型分布比较均无统计学意义。对照组AA型的HDL-C、载脂蛋白A1(ApoA1)和载脂蛋白B水平比GG和GA型显著降低(P<0.05);但基因型与CI的发病无关。结论壮族人ABCA1基因rs2066715位点A等位基因携带者HDL-C及ApoA1水平较低,但A等位基因突变与CI易感性无关。     

冠心病患者OX40配体蛋白基因多态性的研究

目的探讨中国重庆地区汉族人群OX40配体蛋白基因(TNFSF4)单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法提取262例冠心病患者和191例对照者的基因组DNA,采用Taqman实时荧光定量PCR法检测TNFSF4 rs3850641(A/G)单核苷酸多态性。结果重庆地区汉族人群中存在TNFSF4 rs3850641(A/G)单核苷酸多态性,冠心病组中基因型分布为:AA型70.5%,AG型22.0%、GG型7.5%;对照组基因型分布为:AA型69.8%,AG型20.8%、GG型9.4%。冠心病组和对照组之间的基因型频率和等位基因频率均无显著性差异(P>0.05)。结论 OX40L基因rs3850641(A/G)单核苷酸多态性与中国重庆地区汉族人群冠心病发病无关。     

冠心病患者OX40配体蛋白基因多态性的研究

目的:探讨中国重庆地区汉族人群OX40配体蛋白基因(TNFSF4)单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法:提取262例冠心病患者和191例对照者的基因组DNA,采用Taqman实时荧光定量PCR法检测TN-FSF4 rs3850641(A/G)单核苷酸多态性。结果:重庆地区汉族人群中存在TNFSF4 rs3850641(A/G)单核苷酸多态性,冠心病组中基因型分布为:AA型70.5%,AG型22.0%、GG型7.5%;对照组基因型分布为:AA型69.8%,AG型20.8%、GG型9.4%。冠心病组和对照组之间的基因型频率和等位基因频率均差异无统计学意义(P0.05)。结论:OX40L基因rs3850641(A/G)单核苷酸多态性与中国重庆地区汉族人群冠心病发病无关。     

三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因M883I多态性与冠心病的相关性研究

目的:探讨三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCAI)基因M883I多态性与冠心病及血脂水平相关性.方法:冠心病组358例(维吾尔族180例,汉族178例);对照组160例(维吾尔族65例,汉族95例).用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测维吾尔族和汉族冠心病组及对照组ABCA1基因M883I多态性.结果:在冠心病组和对照组中,维吾尔族各基因型频率和等位基因频率与汉族比较差异均有统计学意义(P=0.000).M883I多态性基因型频率及等位基因频率在两个民族冠心病组和对照组间分布差异均无统计学意义(P>0.05),不同基因型间的血脂水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论:ABCA1基因M883I多态性M等位基因频率在维吾尔族和汉族问有差异;ABCA1 M883I多态性与维吾尔族、汉族冠心病及血脂水平无明显相关.     

ABCA1启动子区及7外显子基因突变对汉族人群高密度脂蛋白胆固醇水平的影响

目的研究汉族人群ABCA1启动子区-565C/T及7外显子G1051A基因多态性对HDL-C水平的影响。方法应用连接酶检测反应法对519例冠心病患者(冠心病组)及541例同期住院或体检者(对照组)测试-565C/T及G1051A基因型,生化检测HDL-C水平,分析HDL-C水平与不同基因型的关系。结果 -565C/T的CC、CT、TT不同基因型的HDL-C水平分别为(1.19±0.81)mmol/L、(1.14±0.28)mmol/L和(1.12±0.28)mmol/L,无显著差异(P=0.44);G1051A的GG+GA、AA不同基因型的HDL-C水平分别为(1.18±0.61)mmol/L和(1.29±0.27)mmol/L,无显著差异(P=0.52);logistic回归模型分析显示,校正年龄、性别、吸烟后,A等位基因系冠心病保护性因素(OR=0.428,95% CI:0.227～0.603,P=0.009)。结论 ABCA1-565C/T及G1051A 2种单核苷酸多态性与HDL-C水平无相关性;G1051A的A等位基因系冠心病保护性因素。     

胱抑素C rs1064039位点单核苷酸基因多态性与冠心病的相关性研究

目的:通过研究胱抑素C基因(CST3)rs1064039位点单核苷酸多态性(SNP),揭示其与冠心病的相关性。方法:采用病例-对照研究,选择上海市静安区中心医院心内科疑似冠心病入院的汉族530例患者为研究对象,依据冠状动脉(冠脉)造影结果分为冠心病组(320例)及对照组(210例)。提取外周血白细胞基因组DNA,应用巢式PCR直接测序技术检测CST3rs1064039位点SNP,分析该位点的基因型及等位基因频率与冠心病的相关性,及其与血胱抑素C水平的关系。结果:汉族人群中CST3基因rs1064039位点存在G/A突变,存在GG、GA和AA 3种基因型,GG型为野生基因型,无论等位基因频率或者基因型分布在冠心病及对照组均无明显差异;CST3rs1064039位点野生型纯合子携带者血胱抑素C在全体人群和对照组中的水平明显高于突变型携带者,但这种差别在冠心病组消失。结论:汉族人群中CST3基因rs1064039位点的基因多态性与冠心病发病无直接相关性,而与血胱抑素C水平相关。     

冠心病患者HSP70-2+1267A/G多态性与高敏C反应蛋白水平的相关性研究

冠心病（coronary artery disease,CAD）的病理基础是动脉粥样硬化,炎症是动脉粥样硬化的特征之一;研究发现炎症在冠状动脉粥样硬化斑块的发生、发展和粥样斑块的破裂过程中起重要作用,动脉粥样硬化被认为是一种慢性炎症的过程。热休克蛋白70-2（Hot Shock Protein,HSP）是HSP家族中重要的一员,     

单核细胞趋化蛋白-2518G/A基因多态性与冠心病的关系

目的研究单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）-2518G／A基因多态性对冠心病发病的影响。方法选取冠心病患者300例,正常对照组60例。冠心病患者分急性冠状脉综合征（ACS）组180例以及稳定型心绞痛（SAP）组120例。所有患者行冠状动脉造影（CAG）检查,采用Gensini评分。酶联免疫法测定MCP-1浓度,PCR-RFLP方法检测MCP-1-2518G／A位点多态性,研究MCP-1-2518G／A基因多态性与冠心病的相关性。结果（1）MCP-1-2518G／A基因多态性ACS组GG型基因和G等位基因频率分布较SAP组及正常对照组升高[GG型基因：ACS组（33．4％）,SAP组（24．2％）,对照组（15．0％）。P〈0．05;G等位基因频率：ACS组（51．1％）,SAP组（40．4％）,对照组（31．7％）,P〈0．05],ACS组AA型基因及A等位基因较SAP组及正常对照组降低[AA型基因：ACS组（31．1％）,SAP组（43．3％）,对照组（51．7％）,P〈O．05;A等位基因频率：ACS组（48．9％）,SAP组（59．6％）,对照组（68．3％）,P〈0．05]。（2）三种基因型间MCP．1浓度比较,GG型MCP-1浓度较AG型及AA型升高[GG型基因：（153±22）ng／L,AG型基因：（136±18）ng／L,AA型基因：（124±15）ng／L,（P〈0．05）]。（3）多元回归分析冠脉病变Gensini评分与低密度脂蛋白-胆固醇、空腹血糖、MCP-1GG型基因成正相关（P〈0．05）,高密度脂蛋白-胆固醇与冠状动脉狭窄程度呈负相关（P〈0．05）。结论MCP-1-2518G／A基因多态性与冠心病严重程度相关;MCP-1-2518G／A基因多态G等位基因能通过增强MCP-1表达参与冠心病发病。     

ATP-binding cassette transporter A1 locus is not a major determinant of HDL-C levels in a population at high risk for coronary heart disease

ATP-binding cassette transporter A1 (ABCA1) transports cellular cholesterol to lipid-poor apolipoproteins. Mutations in the ABCA1 gene are linked to rare phenotypes, familial hypoalphalipoproteinemia (FHA) and Tangier disease (TD), characterized by markedly decreased plasma high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) levels. The aim was to test if the ABCA1 locus is a major locus regulating HDL-C levels in the homogenous Finnish population with a high prevalence of coronary heart disease (CHD). Firstly, the ABCA1 locus was tested for linkage to HDL-C levels in 35 families with premature CHD and low HDL-C levels. Secondly, 62 men with low HDL-C levels and CHD were screened for the five mutations known to cause FHA. Thirdly, polymorphisms of the ABCA1 gene were tested for an association with HDL-C levels in a population sample of 515 subjects. The ABCA1 locus was not linked to HDL-C levels in the CHD families, and no carriers of the FHA mutations were found. The AA596 genotype was associated with higher HDL-C levels compared with the GG and GA genotypes in the women, but not in the men. The G596A genotypes explained 4% and the A2589G genotypes 3% of the variation in plasma HDL-C levels in women. The data suggest that the ABCA1 locus is of minor importance in the regulation of HDL-C in Finns.     

Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白基因多态性与高血压的相关性研究

目的探讨Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白(AT1 receptor-associated protein,ARAP1)基因的常见多态rs2787594,rs11795066,rs13298677和rs4837129与高血压之间的关联关系。方法选择503例高血压病例和490例年龄、性别相匹配的健康对照。所有个体均为中国北方汉族人。采用多聚酶链式反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法进行基因型鉴定。结果校正协变量前后,所有SNPs均与高血压无关联。单体型分析也没有发现与高血压关联的单体型。应用线性回归模型校正年龄和性别的作用,比较不同基因型个体的体重指数(BMI)、血糖和血脂水平的差异。rs2787594多态CC纯合子与升高的血糖水平显著关联(CC/TT+TC,6.09+0.24vs.5.54+0.08mmol/L,P=0.0296)。在显性模型中,rs11795066 A等位基因显著升高了个体的BMI水平(GA+AA/GG,24.81±0.29vs.24.07±0.19kg/m2,P=0.0331)。rs13298677多态G等位基因与较低的BMI水平(GG/GA+AA,22.84±0.74vs.24.37±0.16kg/m2,P=0.0438)以及TG水平(GG+GA/AA,1.34±0.06vs.1.50±0.05mmol/L,P=0.0413)显著关联。结论 ARAP1基因4个SNPs与高血压无显著关联,但与对照个体的血脂、血糖和BMI关联,该基因变异可能影响了我国人群血脂、血糖的代谢。     

血小板内皮细胞黏附分子-1基因多态性及血浆水平与严重冠脉粥样硬化病变的相关性

目的研究血小板内皮细胞黏附分子-1（PECAM-1）基因第3外显子C＋373G单核苷酸多态性及血浆可溶性PECAM-1（sPECAM-1）水平与严重冠状动脉粥样硬化的相关性。方法入选经冠状动脉造影诊断为三支病变的冠心病患者97例和冠脉狭窄〈50％的同期非冠心病患者89例。采用Pyrosequencing基因测序法检测PECAM-1第三外显子C＋373G单核苷酸多态性；采用酶联免疫吸附试验方法测定血浆中的sPECAM-1浓度。结果（1）冠心病组（CAD组）中GG型的比例显著高于对照组（26．3％：14．6％，P=0．047）。（2）CAD组sPECAM-1显著低于对照组[（61．14±34．57）p．g／L vs （33．62±38．58）μg／L，P〈0．001）。（3）在所有研究对象中，血浆sPECAM-1水平在各基因型中的分布具有一定的趋势[CC：（41．68±33．60）μg／L；CG：（47．17±38．15）μg／L；GG：（53．18±46．51）μg／L，P=0．433）。冠心病亚组中，sPECAM-1水平在基因型中的分布达到统计学上的差异[（CC：（23．64±16．90）μg／L；CG：（27．68±30．16）μg／L；GG：（53．97±54．90）μg／L；P=0．0123。结论PECAM-1 C±373G位点的突变是严重冠脉粥样硬化的一个遗传易患因子。sPECAM-1同冠心病具有一定的相关性。     

血管紧张素转换酶2基因G/A多态性与ACEI降压疗效差异的相关性

目的研究中国原发性高血压患者的血管紧张素转换酶2(ACE2)基因G/A多态性与血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)降压疗效的相关性。方法用贝那普利10-20mg/日对211例高血压患者进行为期6周的降压治疗,用PCR产物测序方法检测患者的ACE2基因多态性,分析其与收缩压、舒张压、脉压及平均动脉压在治疗前后变化的相关性。结果在男性高血压患者中,该基因多态性与降压疗效相关,治疗前后G等位基因携带者与A等位基因携带者平均动脉压的降幅分别为11.84±7.20mmHg和8.92±7.64mmHg(p=0.033),G等位基因携带者的疗效优于A等位基因携带者;在女性患者中未发现这种相关性。结论在男性高血压患者中ACE2基因G/A多态性对ACEI的降压疗效有一定的影响。     

中国汉族人群PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性与冠心病的关系

目的本研究探讨过氧化物酶增殖激活物受体辅助激活因子1α（peroxisome prolifemtor-activatedreeeptor γ coactivator-1,PGC-1α）基因rs3774923单核苷酸多态性与中国汉族人群冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）发病的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法对675例冠心病患者和636例对照组患者进行检验,分析PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性的基因型和等位基因频率的分布情况。结果PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性三种基因型（GG型,GA和AA型）在冠心病组的分布频率分别为60．0％,30．2％和9．8％,在对照组分别为58．2％,35．2％和6．4％,两组PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性的基因型比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。PGC-1α基因rs3774923单核苷酸等位基因（G等位基因,A等位基因）分布频率在冠心病组为75．1％和24．9％,在对照组为75．9％和24．1％,两组PGC-1α基因rs3774923单核苷酸多态性的等位基因频率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。Logistic回归分析校正性别、年龄、体质量指数、吸烟、原发性高血压、高脂血症、糖尿病等冠心病的易患因素后,PGC—1α基因rs3774923单核苷酸多态性与冠心病的发病不存在相关关系（P〉0．01）。结论PGC-1基因rs3774923单核苷酸多态性与冠心病的发病不存在相关关系。     

2型糖尿病合并冠心病患者冠脉病变与糖化血红蛋白水平的关系

目的探讨2型糖尿病（T2DM）合并冠心病（CAD）患者糖化血红蛋白（HbA1c）水平与冠脉病变特点的关系。方法 289例T2DM合并CAD患者,按照HbA1c水平分为两组,A组103例（HbA1c〈7%）,B组186例（HbA1c≥7%）,对两组患者冠脉造影结果进行Gensini积分并对比分析。结果 B组患糖尿病史、吸烟比例和微量白蛋白尿阳性率均高于A组,空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、血尿酸水平也高于A组;从冠脉病变看,三支病变、弥漫性病变、冠脉C型病变,B组显著高于A组,且B组冠脉病变Gensini积分较高（P〈0.01）,HbAlc水平与Gensini积分呈正相关（P〈0.01）。结论 T2DM合并CAD患者HbAlc水平高,其冠脉病变呈现复杂和严重的临床特点。因此,T2DM合并CAD患者应尽早积极有效地控制血糖水平,对于冠心病的防治甚为重要。     

非绝经期女性冠心病患者血脂分析研究

目的研究分析非绝经期女性冠心病患者的血脂特点。方法选择2007年6月至2008年6月以冠心病或可疑冠心病住院的非绝经期女性患者157例。根据冠状动脉造影结果将其分为对照组（A组）和冠心病组（B组）。B组患者再根据病变血管Gensini评分法分为B1组、B2组和B3组。回顾分析A、B两组血脂变化特点。结果冠心病组甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（IDL-c）、载脂蛋白（apo）B、脂蛋白Lp（a）水平明显高于对照组（P〈0．05）,B1、B2、B3组血脂异常主要表现为TG、LDL-c和Lp（a）增高[（1．16±0．40）mmol／L、（1．85±0．93）mmol／L和（1．94±0．98）mmol／L,（2．43±0．60）mmol／L、（3．27±1．13）mmol／L和（3．70±1．13）mmol／L,（201±154）mg／L、（268±129）mg／L和（277±136）mg／L,P〈0．05]。结论非绝经期女性冠心病患者TG、LDL-C、apoB、Lp（a）水平明显升高,随着冠脉病变的加重,TG、LDL-C、Lp（a）明显升高,推测其为非绝经期女性冠心病患者的危险因素。