子宫颈癌△Np63蛋白表达的临床病理学意义

目的探讨△Np63蛋白表达在子宫颈癌不同组织学类型中的临床病理学意义。方法43例子宫颈上皮内瘤变(cervi-calintraepithelialneoplasia,CIN)(包括15例CIN1,6例CIN2和22例CIN3),21例角化型和33例大细胞非角化型宫颈鳞状细胞癌(鳞癌)、40例腺癌、4例神经内分泌癌、4例腺鳞癌、2例移行细胞癌、2例玻璃样细胞癌和1例腺瘤样基底细胞癌的标本选自韩国高丽大学安岩附属医院和延边妇幼保健医院病理科,应用免疫组化染色方法检测△Np63蛋白在上述病变组织中的表达情况。结果△Np63蛋白在所有子宫颈鳞癌标本中呈阳性表达,而在所有腺癌则为阴性。随着CIN病变级别的增加,△Np63蛋白表达的分布范围也逐渐增多,而且在不同组织学类型的子宫颈癌中,合并鳞状细胞分化(associatedwithsquamousdifferentiationofuterinecervix)的病变区△Np63表达增强,但在腺性分化和神经内分泌分化的区域△Np63则不表达。结论△Np63蛋白检测对区分子宫颈癌组织学类型的具有重要意义,且对子宫颈腺癌的鉴别诊断是一个非常有用的指标。     

p63基因在肺癌组织中的表达

目的研究肺鳞状细胞癌、腺癌、大细胞肺癌、小细胞肺癌以及淋巴结或肺内转移性肿瘤标本组织中p63基因的mRNA转录因子和蛋白表达水平,探讨p63基因表达与其定位在3q 27-q29区域改变的关系.方法采用cDNA微阵列技术同时检测72例不同病理组织学类型的原发性肺癌(包括鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌、小细胞癌)和肺癌肺内转移及淋巴结转移灶内的p63基因mRNA水平.另外,利用组织芯片技术构建150例原发性肺癌石蜡包埋标本组织芯片,采用免疫组织化学LSAB法检测p63基因蛋白表达情况.同时应用比较基因组杂交(CGH)技术对70例原发性肺癌标本进行了3号染色体长臂改变的分析.结果p63mRNA转录因子在肺鳞状细胞癌标本表达明显增强,与腺癌、大细胞癌、小细胞癌相比增多10倍以上.肺癌转移灶内p63基因mRNA表达水平明显高于其相对应的原发性灶,差异有统计学意义(P＜0.001).免疫组织化学染色结果显示肺鳞状细胞癌阳性表达率为94.64%;腺癌是1.79%;4例大细胞肺癌中2例为阳性染色;但所有小细胞肺癌标本免疫组织化学染色均为阴性.pT1分期肺癌的p63基因蛋白表达阳性率与pT2分期肺癌相比有统计学差异(P＜0.05).比较基因组杂交结果发现肺鳞状细胞癌3号染色体长臂27-29区域有显著的扩增,腺癌表现为缺失.鳞状细胞癌p63基因的表达增强与3q27-q29区域的显著扩增有明显正相关性(P＜0.000 1),说明定位于3号染色体长臂27-29区域的p63基因的拷贝有明显的扩增.结论p63mRNA转录因子和蛋白在肺鳞状细胞癌较其他肿瘤表达显著增高,转移灶高于原发灶;肺鳞癌p63表达增强与3号染色体长臂3q27-q29区域的扩增显著相关.     

子宫颈癌ΔNp63蛋白表达的临床病理学意义

目的 探讨ΔNp63蛋白表达在子宫颈癌不同组织学类型中的临床病理学意义。方法 43例子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）（包括15例CIN1，6例CIN2和22例CIN3），21例角化型和33例大细胞非角化型宫颈鳞状细胞癌（鳞癌）、40例腺癌、4例神经内分泌癌、4例腺鳞癌、2例移行细胞癌、2例玻璃样细胞癌和1例腺瘤样基底细胞癌的标本选自韩国高丽大学安岩附属医院和延边妇幼保健医院病理科，应用免疫组化染色方法检测ΔNp63蛋白在上述病变组织中的表达情况。结果 ΔNp63蛋白在所有子宫颈鳞癌标本中呈阳性表达，而在所有腺癌则为阴性。随着CIN病变级别的增加，ΔNp63蛋白表达的分布范围也逐渐增多，而且在不同组织学类型的子宫颈癌中，合并鳞状细胞分化（associated with squamous differentiation of uterine cervix）的病变区ΔNp63表达增强，但在腺性分化和神经内分泌分化的区域ΔNp63则不表达。结论 ΔNp63蛋白检测对区分子宫颈癌组织学类型的具有重要意义，且对子宫颈腺癌的鉴别诊断是一个非常有用的指标。     

子宫内膜、正常早孕和自然流产蜕膜组织中△Np63的表达

目的观察△Np63蛋白在自然流产蜕膜组织中的表达，探讨△Np63在胚泡植入和早期妊娠维持中的作用。方法收集自然流产的蜕膜27例组织（其中胚胎停止发育23例、习惯性流产1例及不全流产3例），正常早孕蜕膜66例，非妊娠期子宫内膜组织57例（其中增生期33例，分泌期24例），用SP免疫组化染色法观察△Np63的表达。结果△Np63广泛表达于腺上皮和间质细胞中。增生期和分泌期子宫内膜中△Np63主要表达在腺上皮，蜕膜组织中△Np63在间质蜕膜细胞中的有较强的表达。流产组△Np63蛋白阳性率为55．6％，明显低于增生期的90．9％、分泌期的87．5％及正常早孕组的86．4％（P〈0．05）。△Np63高表达率在分泌期组及流产组分别为16．7％和11．2％，明显低于增生期的63．6％和正常早孕组的57．6％（P〈0．01）。结论△Np63可能参与子宫内膜的生理周期变化，并与子宫内膜向早孕蜕膜组织转化及维持早孕关系密切。     

p63亚型及其与疾病的相关性

p63是p53家族成员的核转录因子,根据N端及C端的不同,已经发现TAp63α、TAp63β、TAp63γ、ΔNp63α、ΔNp63β、ΔNp63γ、ΔNp63δ、ΔNp63ε 8种亚型.p63的表达受到多种转录因子的调控,其mRNA的稳定性由RNPC1调节,蛋白的稳定性主要由HECT 家族成员Itch/AIP4、WW...     

RNAi抑制△ANp63表达对头颈鳞癌细胞增殖的影响

目的 研究 △△Np63促进头颈鳞癌细胞增殖及存活的作用及相关分子机制.方法 筛选高表达△Np63 的头颈鳞癌细胞系,采用RNAi方法分别抑制△Np63及P63表达.RT-PCR、Western印迹、MTT法、流式细胞术等检测细胞增殖和细胞周期等生物学行为改变;并检测相关周期调控蛋白的表达.结果 △Np63在FaDu细胞中高表达,定位于细胞核.抑制△Np63及P63表达后,FaDu细胞增殖能力明显下降(t=3.66,P＜0.01),发生G1期细胞周期阻滞;CDK抑制物P21及P27蛋白表达上调,P53表达上调.结论 △Np63对FaDu细胞增殖及存活发挥主导作用,△Np63通过抑制p21、p27的表达,促进肿瘤细胞的生长和增殖.

Abstract：

Objective To investigate the functional role of △Np63, the main isoform of P63, in promoting cell proliferation and survival in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC). Methods △Np63 overexpressing cell line was selected from several HNSCC cell lines. Specific △Np63 siRNAs and p63 siRNAs were individually transfected into FaDu cells for 48h and 72h which overexpressing △Np63. The expression levels of △Np63 mRNA and protein were analyzed by RT-PCR,Western blot and immunohistochemistry respectively.The cell proliferation was determined by MTT assay.The distribution of cell cycle was assessed by flow cytometry.The protein expression level of P21, P27 and P53 were detected by Western blot. Results △Np63 is highly expressed in FaDu cell line, especially located in the nucleus.The growth rate of FaDu cells transfected with △Np63-siRNA and p63-siRNA was significantly decreased(t=3.66,P＜0.01),and cell cycle mainly arrested in G1 phase. Further studies show that the down-requlation of △Np63 results in the overexpression of P53 and upregulation of CKIs , including P21 and P27 at protein levels. Conclusion △Np63 inhibit the expression of p21 and p27 to promote the proliferation of HNSCC cells , playing a role in maintenance of cell proliferation and survival.     

非小细胞肺癌p63基因的表达及其与3号染色体位点变化的关系

目的　探讨非小细胞肺癌 p6 3基因的蛋白表达水平及其与定位在 3号染色体 2 7～ 2 9区域改变的关系。 方法　应用比较基因组杂交 (CGH)技术对 70例原发性肺鳞状细胞癌和肺腺癌标本进行染色体不平衡性分析。采用组织芯片技术构建12 2例原发性非小细胞肺癌石蜡包埋标本组织芯片 ,并采用免疫组织化学方法检测p6 3蛋白表达情况。比较 p6 3蛋白表达及其与 3号染色体末端改变的关系。结果　CGH分析结果发现 ,30例鳞状细胞癌 2 4例出现 3q2 7～ 2 9区域DNA拷贝数目的增加 ,4 0例腺癌仅 8例发现 3q2 7～ 2 9区域DNA获得。p6 3免疫组化染色结果显示 :5 0例 (84 75 % )鳞状细胞癌免疫组化染色为阳性 ;3例大细胞肺癌中 2例 (6 6 6 6 % )为阳性反应 ;腺癌中仅有 1例 (1 6 7% )为阳性。p6 3蛋白的阳性表达率与患者的年龄、性别、肿瘤的分级、肿瘤的转移以及生存率无关 (P >0 0 5 )。p6 3免疫组化阳性率与 3q2 7～ 2 9区域的改变比较结果显示 :p6 3免疫组化阳性反应与 3号染色体长臂 2 7～ 2 9区域的DNA扩增呈正相关 (P <0 0 1)。结论　p6 3基因的扩增与肺鳞状细胞癌发生和发展有密切的关系     

p63蛋白在食管磷状细胞癌中的表达及意义

目的检测p63蛋白在食管癌组织中的表达情况,并探讨其与食管癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化检测p63蛋白在53例食管磷癌及癌旁组织中的表达情况。结果p63蛋白在食管癌组织中的阳性表达率为71.7%（38/53）,而在癌旁食管组织中的阳性表达率为35.8%（19/53）,两者比较有显著性差异（P〈0.01）。p63蛋白的表达与食管磷癌分化程度密切相关（P〈0.05）,其在低分化磷癌中的阳性表达率（89.5%）显著高于在高分化磷癌中的阳性表达率（46.2%）。p63蛋白的表达与食管磷癌的TNM分期、淋巴结转移、浸润深度均无明显相关性（P〉0.05）。结论p63蛋白在食管磷癌组织中呈高表达,表明其可能参与食管磷癌的发生发展。     

子宫颈不典型不成熟鳞化免疫组化表达的意义

目的探索子宫颈不典型不成熟鳞状化生（atypical immature metaplasia,AIM）的生物学行为。方法采用SP法免疫组化技术检测p63、CK5、Ki-67及p16在14例AIM中的表达;对照7例不成熟鳞化（immature metaplasia,IM）,7例低级别鳞状上皮内病变（LSIL）,3例高级鳞状上皮内病变（HSIL）和7例鳞状细胞癌（SCC）。结果p63和CK5在AIM和IM阳性率〉75％,p63在AIM与LSIL和HSIL中的表达差异有显著性（P〈0．05）,与SCC差异无显著性。AIM与IM中Ki-67总平均指数及分布幅度相近,AIM（43．23％）略高于LSIL（36．95％）,较明显低于HSIL（68.5％,P〉0．05）,从Ki-67阳性细胞分布范围比较,AIM与LSIL及HSIL有重叠。p16在AIM表达6例强阳性、6例局灶阳性、2例阴性,7例SCC及3例HSIL全呈强阳性,3例LSIL强阳性,4例局灶阳性。结论p63和CK5佐证AIM形态特征。p63与Ki-67同样表达在异型细胞阳性。p16阳性表达与Ki-67和p63相结合,具有LSIL和HSIL的诊断价值,但p16阴性和Ki-67低表达,不排除AIM向良性转化可能。AIM是属于子宫颈上皮表现为一异质性病变。     

联合检测TTF1、CK5/6、p63和napsinA在肺鳞癌和腺癌鉴别诊断中的价值

目的 探讨TTF1、CK5/6、p63和napsinA联合检测在肺鳞状细胞癌和腺癌鉴别诊断中的价值.方法 应用免疫组化EnVision法分别检测30例肺鳞状细胞癌和30例肺腺癌中TTF1、CK5/6、p63和napsinA的表达.结果 CK5/6、p63、TTF1和napsinA在肺鳞状细胞癌中的阳性率分别为96.7%、100%、20%和0,同时在肺腺癌中的阳性率分别为10%、20%、86.7%和90%.单个标志物中,CK5/6阳性和napsinA阴性对肺鳞状细胞癌与腺癌的鉴别诊断具有较高的特异性和敏感性;联合标志物检测中,p63和CK5/6共同表达阳性与TTF1和napsinA共同表达阴性在肺鳞状细胞癌的诊断中具有较高的特异性.结论 TTF1、CK5/6、p63和napsinA联合检测可鉴别肺鳞状细胞癌和腺癌,p63和CK5/6共同阳性表达与TTF1和napsinA共同阴性表达更加支持肺鳞状细胞癌,而非肺腺癌,反之亦然.