角蛋白,抗角蛋白自身抗体和银屑病

被作为上皮类型和分化阶段的分子标志－角蛋白，在银屑病患者表皮内明显地表现异常，并且这种异常改变不仅仅出现在皮损区域。最新研究提示屑病患者角朊细胞本身存在缺陷，它们较正常角朊细胞分化能力低下。直接以不同分子量的角蛋白作为对象的抗角蛋白自身抗体，也与银屑病有着明显的联系。有的角蛋白和抗角蛋白自身抗体可以作为判断银屑病的病情以及疗效、治愈标准的指标。深入研究银屑病患者角蛋白、抗角蛋白自身抗体的变化对进一     

天然抗角蛋白自身抗体产生细胞的检测

目的明确产生天然抗角蛋白自身抗体(anti-keratin autoantibody,AK auto Ab)的B细胞的类群和定位。方法取SPF级C57BL/6小鼠的腹腔细胞及脾细胞,进行体外培养,采用ELISA方法分析培养细胞分泌AK auto Ab的水平,ELISPOT方法分析分泌AK auto Ab的细胞数。结果腹腔细胞中分泌AK auto Ab的细胞数远多于脾细胞,其分泌的抗体滴度也显著高于脾细胞。结论AK auto Ab主要来源于腹腔B细胞,B1细胞可能是产生AK auto Ab的主要细胞。     

角蛋白、抗角蛋白自身抗体和银屑病

被作为上皮类型和分化阶段的分子标志——角蛋白,在银屑病患者表皮内明显地表现异常并且这种异常改变不仅仅出现在皮损区域。最新研究提示银屑病患者角朊细胞本身存在缺陷,它们较正常角朊细胞分化能力低下。直接以不同分子量的角蛋白作为对象的抗角蛋白自身抗体,也与银屑病有着明显的联系。有的角蛋白和抗角蛋白自身抗体可以作为判断银屑病的病情以及疗效、治愈标准的指标。深入研究银屑病患者角蛋白、抗角蛋白自身抗体的变化对进一步了解银屑病可能提供一些有益的启迪。     

抗角蛋白自身抗体研究现状与展望

抗角蛋白自身抗体（ａｎｔｉｋｅｒａｔｉｎａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｙ,ＡｋａｕｔｏＡｂ）的研究已经历了２０余年的时间,对其特性、意义与疾病的关系等方面的认识都有了长足的进步。随着对ＡｋａｕｔｏＡｂ研究的拓展和深入,特别是现代免疫学和分子生物学技术的迅速发展,使得一些更深层次的认识成为可能。这一领域的研究正面临着新的希望和挑战。本文回顾在ＡＫａｕｔｏＡｂ研究中取得的成果,并对今后的前景作一展望。一、抗角蛋白自身抗体研究现状（一）ＡｋａｕｔｏＡｂ在体内的天然存在及其意义　１９７０年,Ｋｒｏｇｈ等［１…     

银屑病患者抗角蛋白自身抗体的初步研究

银屑病患者表皮中角蛋白有异常表达,特别是角蛋白K16,它常在银屑病活动的早期即在皮损边缘处的基底层上表达^[1,2]。为了研究银屑病患者血清中是否存在针对角蛋白K16的自身抗体,以及该抗体与银屑病病情变化的确切关系,我们用间接酶联免疫测定法(ELISA)和免疫印迹法(IBT)分别检测银屑病患者血清中的抗角蛋白自身抗体(AKautoAB)和抗角蛋白K16自身抗体(AK16autoAB)的滴度。     

天然抗角蛋白自身抗体抗小鼠金黄色葡萄球菌感染的研究

目的 以高滴度天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)转基因小鼠为模型,分析AK auto Ab在抵御金黄色葡萄球菌感染中的作用.方法 取天然抗角蛋白自身抗体转基因小鼠及阴性对照小鼠,ELISA法检测小鼠腹腔冲洗液总IgM、抗角蛋白IgM抗体以及抗金黄色葡萄球菌IgM抗体水平:腹腔接种金黄色葡萄球菌制备感染模型,检测腹腔接种金黄色葡萄球菌后腹腔及肾脏菌落形成单位数量.测定菌负荷,流式细胞仪检测中性粒细胞比率、炎症因子浓度等.结果 ELISA检测发现,转基因小鼠腹腔冲洗液抗角蛋白IgM、抗金黄色葡萄球菌IgM水平高于阴性对照小鼠.差异有统计学意义(P<0.01);菌落形成实验显示,转基因小鼠腹腔及肾脏菌负荷低于阴性对照(P<0.01):流式细胞仪分析发现.转基因小鼠腹腔中性粒细胞比率、炎症因子浓度低于阴性对照(P<0.01).结论 AK auto Ab在小鼠体内对金黄色葡萄球菌感染具有良好的保护作用.     

高滴度天然抗角蛋白自身抗体转基因小鼠模型的建立

目的 建立天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)的转基因小鼠模型。方法 将转基因表达质粒显微注射法转入CBA×C57BL/6小鼠受精卵,导入假孕雌鼠输卵管后培育子代小鼠;PCR鉴定子代小鼠基因型;ELISA法分析转基因小鼠体内AK auto Ab水平的变化。结果 共获得12系转基因阳性的Founder小鼠,其中9系传至第3代;3系转基因小鼠体内的AK auto Ab水平显著增高。结论 成功建立AK auto Ab的转基因小鼠,获得了血清AKautoAb水平增高的动物模型。     

能与SLE患者血清总IgG抗体识别的噬菌体抗原表位模拟肽的研究

目的：从噬菌体随机肽库中，筛选能与SLE患者血清总IgG抗体特异结合的SLE相关抗原表位的噬菌体模拟肽，并寻找对SLE敏感性和特异性均高的模拟肽。方法：制备SLE患者血清总IgG抗体，以此作为筛选配基，按“吸附一洗脱一扩增”的淘洗过程，对噬菌体随机12肽库进行3轮免疫筛选，随机挑取噬菌体克隆并进行初步鉴定，最后取混合阳性克隆检测SLE患者和正常人血清，分析其与SLE反应的敏感性和特异性。结果：经3轮免疫淘洗后，特异结合的噬菌体富集增加近100倍。随机挑取的11个噬菌体克隆，经鉴定均能与总IgG抗体产生特异性反应，阳性率100%。混合的阳性克隆与SLE反应的敏感性和特异性分别为80%、和67％。结论：利用SLE患者血清总IgG抗体筛选噬菌体随机肽库，能获得多种SLE相关抗原表位的噬菌体模拟肽，因其对SLE的敏感性和特异性均高，故有潜在的诊断价值，有望利用该技术开发SLE特异性IgG抗体检测试剂盒.     

血清抗角蛋白自身抗体滴度消长对皮肤烫伤的影响

作者对家兔血清抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)滴度低下(实验组)及滴度正常(对照组)的皮肤烫伤进行了对比观察,并对烫伤后分界性炎症、表皮修复、表皮角朊细胞胞浆AK auto Ab含量进行检测。结果显示,实验组损伤明显、结痂较晚,分界性炎症出现较迟、程度较轻,表皮修复迟缓、愈合较慢,而角朊细胞胞浆内IgG AK auto Ab含量较低。提示,正常滴度的血清AK auto Ab在皮肤烫伤发展及修复的过程中,可能对机体起着重要的保护作用。     

抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体对噬菌体随机12肽库的免疫筛选

目的 从噬菌体随机多肽库中筛选出能与肿瘤坏死因子-α特异性结合的短肽分子。方法 采用肿瘤坏死因子-α作为配基,免疫亲和筛选以融合蛋白形式在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ表达的随机12肽文库,按“吸附-洗脱-扩增”的淘洗过程,经过3轮免疫筛选后,随机挑取噬菌体克隆用双抗体夹心ELISA及斑点ELISA测其特异性,并用混合的阳性噬菌体克隆分别与SLE患者和正常人血清反应,以斑点ELISA法分析其诊断系统性红斑狼疮的价值。结果 经过3轮免疫筛选,特异性结合的阳性噬菌体克隆富集增加近100倍,第3轮筛选后随机挑选7个阳性噬菌体克隆,经双抗体夹心ELISA和斑点ELISA检测,有5个克隆能与肿瘤坏死因子α特异性相结合,其中A值最高的5个克隆混合后与SLE患者血清结合率明显高于正常人,差异有显著性。结论 噬菌体随机肽库技术可以应用于分析、鉴定肿瘤坏死因子α的表位,继而为获得亚单位表位水平的诊断试剂和抗肿瘤坏死因子α的短肽疫苗提供依据。