外周血miR-29a-3p、miR-365a-3p在活动性肺结核和结核潜伏感染者中的表达

目的探讨外周血miR-29a-3p、miR-365a-3p在活动性肺结核和结核潜伏感染者中的差异表达。方法收集深圳市南山区慢性病防治院结核病防治科门诊2012年1～10月诊治的活动性肺结核患者30例,及同期发现的结核潜伏感染者30例。采集全血,提取总RNA,利用定量PCR方法检测外周血miR-29a-3p、miR-365a-3p的表达。结果结核潜伏感染者外周血中miR-29a-3p（1.16±0.65）明显高于活动性肺结核患者的表达（0.71±0.32）,差异有统计学意义（P〈0.05）;外周血miR-365a-3p的表达在结核潜伏感染者（0.43±0.51）与活动性肺结核患者（0.32±0.71）之间差异无统计学意义（P〉0.05）;进一步分析发现,结核潜伏感染者外周血miR-29a-3p表达与结核菌特异性酶联免疫斑点数呈负相关（r=-0.42,P=0.02）。结论 miR-29a-3p在肺结核感染、发病中可能起到重要作用,可能成为诊断结核潜伏感染者的标志物。     

miRNA144-3p和miRNA146a-5p在结核性胸膜炎患者外周血中的表达

目的 探讨miRNA144-3p和miRNA146a-5p在结核性胸膜炎患者外周血表达及其临床意义.方法 收集住院初治结核性胸膜炎患者、结核潜伏感染者和健康对照各30例.采集外周血提取RNA,采用荧光定量PCR技术检测miRNA144-3p和miRNA146a-5p在各组患者外周血中的表达差异.结果 结核性胸膜炎患者外周血组miRNA144-3p表达显著低于结核潜伏感染者和健康对照外周血组(P＜0.05),而结核潜伏感染者和健康对照外周血组之间差异无统计学意义.miRNA146a-5p表达在三组之间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 miRNA144-3p可能参与结核性胸膜炎的发生、发展,且可能对结核性胸膜炎诊断有一定的临床意义.     

miR-365a-3p靶向调控JAK-STAT信号通路抑制三阴性乳腺癌细胞的恶性生物行为研究

目的 针对三阴性乳腺癌(TNBC)探究微小RNA(miRNA)-365a-3p对其恶性生物行为的影响并分析潜在的分子调控机制.方法 选取2018年6月至2019年12月该院收治的行外科手术切除治疗的TN-BC患者50例作为研究对象,收集TNBC组织和癌旁组织,并统计TNBC患者的肿瘤相关临床资料.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-365a-3p在组织和乳腺癌细胞中的表达水平,将miR-365a-3p模拟物(mim-ic)及阴性对照(NC)mimic转染至MDA-MB-453细胞后分别通过CCK-8实验、克隆平板形成、Transwell和划痕实验检测TNBC细胞的恶性生物行为.采用双荧光素酶报告基因实验预测miR-365 a-3 p靶通路,并对细胞质双面蛋白酪氨酸激酶(JAK)和信号传导及转录激活因子(STAT)蛋白进行定量检测.结果 TNBC组织及乳腺癌细胞系中miR-365a-3p表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且肿瘤越大、Ki67表达水平越高、浸润范围越深、存在淋巴结转移及TNM分期越差者miR-365 a-3 p表达水平越低,差异均有统计学意义(P<0.05).同时转染miR-365a-3p mimic后能显著抑制MDA-MB-468细胞株增殖、集落形成、迁移及侵袭能力.JAK与miR-365a-3p存在相同位点,且JAK-WT+miR-365a-3p共转染组荧光素酶活性与JAK-MUT+miR-365a-3p共转染组比较,差异有统计学意义(P<0.05);此外miR-365a-3p mimics明显抑制JAK、STAT蛋白水平,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-365a-3p与TNBC肿瘤不良进展有关,并通过抑制JAK-STAT信号通路抑制TNBC细胞的恶性生物行为.     

胃癌组织miR-125a-5p和miR-125a-3p表达及其与临床病理特征的关系

目的：探讨miR-125a-5p和miR-125a-3p在胃癌中的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法：采用茎环Real-time RT-PCR检测30例胃癌组织及其正常胃黏膜组织中miR-125a-5p和miR-125a-3p的表达并分析其表达与不同临床病理特征分组关系。结果：miR-125a-5p和miR-125a-3p在胃癌组织较癌旁正常组织表达均明显升高（P=0.012和P=0.025）,其中miR-125a-5p表达量约为miR-125a-3p表达量的30倍,但二者表达比值在胃癌组织及正常胃黏膜组织中差异未见显著性;扩大样本量后结果显示miR-125a-3p的表达在有无淋巴结转移组间差异存在显著性（P=0.001）;而miR-125a-5p的表达在不同分化程度组间差异存在显著性（P=0.003）。结论：正常胃黏膜及胃癌组织中均可以检测到miR-125a-5p和miR-125a-p的表达;miR-125a-5p和miR-125a-3p在胃癌组织和癌旁正常黏膜组织中的表达差异存在显著性,miR-125a-3p的表达在胃癌的不同淋巴结转移组间差异存在显著性;miR-125a-5p的表达在胃癌不同分化组间差异存在显著性。     

miR-30a-5p表达对结直肠癌发生及转移的影响研究

目的 探讨miR-30a-5p表达对结直肠癌发生及转移的影响。方法 采用HCT116细胞和裸鼠作为研究对象,按miR-30a-5p的转染情况分为miR-30a-5p模拟物组、miR-30a-5p抑制剂组和对照组。采用qRT-PCR法检测各组miR-30a-5p mRNA表达水平。采用划痕实验和Transwell实验分别观察细胞的迁移和侵袭能力。采用Western blotting法检测各组Vimentin、E-cadherin蛋白表达水平,并采用裸鼠成瘤实验进行进一步验证。结果 在HCT116细胞中miR-30a-5p mRNA表达量（0.29±0.02）较在NCM466细胞中表达量（0.76±0.12）明显更低,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,miR-30a-5p模拟物组细胞侵袭能力明显更弱（P<0.05）,而miR-30a-5p抑制剂组细胞侵袭能力明显更强（P<0.05）;与对照组比较,miR-30a-5p模拟物组细胞迁移能力明显更弱（P<0.05）,而miR-30a-5p抑制剂组细胞迁移能力明显更强（P<0.05）;与对照组比较,mi...     

彩色多普勒超声联合miR-151a-3p、miR-1285-3p对结核性胸膜炎患者的诊断价值

目的 研究彩色多普勒超声联合miR-151a-3p、miR-1285-3p对结核性胸膜炎患者的诊断价值。方法 选取2022年3月至2023年3月于河南省胸科医院就诊的100例结核性胸膜炎患者,记为TP组,选取健康对照组100例,记为CO组。对两组分别进行彩色多普勒超声及miR-151a-3p、miR-1285-3p检测,评估并分析两组检测结果。结果 与CO组相比,TP组PSV升高,RI降低(P<0.05);与CO组相比,TP组血清miR-151a-3p表达升高,miR-1285-3p表达降低(P<0.05);PSV与血清中miR-151a-3p呈正相关(r=0.937,P<0.001)、与miR-1285-3p呈负相关(r=-0.835,P<0.001),RI与血清中miR-151a-3p呈负相关(r=-0.951,P<0.001)、与miR-1285-3p呈正相关(r=0.835,P<0.001);彩色多普勒超声检测的AUC为0.729,血清miR-151a-3p检测为0.707,血清miR-1285-3p检测为0.629,三者联合为0.898。结...     

miR-30a-5p通过调节靶基因ARG1对急性缺血性脑卒中免疫应答的影响

目的:探讨miR-30a-5p通过调节靶基因精氨酸酶-1(ARG1)对急性缺血性脑卒中免疫应答的影响.方法:选取急性缺血性脑卒中患者60例为病例组,同期体检健康者60例作为对照组.RT-qPCR检测外周血候选miRNAs,miR-30a-5p及靶基因ARG1表达情况;将miR-30a-5p模拟物、阴性对照模拟物及mock转染到HL-60或RAW264.7细胞中,荧光素酶报告基因分析miR-30a-5p与ARG1的作用关系;RT-qPCR和Western blot检测ARG1 mRNA和蛋白的表达情况.结果:miR-30a-5p、miR-579-3p和Let-7e表达水平在病例组和对照组存在统计学差异(P<0.001),生物信息学预测miR-579-3p和Let-7e没有免疫调节相关的靶基因,而ARG1是miR-30a-5p潜在靶基因.荧光素酶报告基因实验证实ARG1是miR-30a-5p直接作用靶点,ARG1 mRNA在缺血性脑卒中外周血中明显上调(P<0.05).miR-30a-5p模拟物转染HL-60和/或RAW 264.7细胞24 h后,ARG1 mRNA和蛋白表达水平较mock和NC组明显降低(P<0.05).miR-30a-5p对LPS处理后的RAW 264.7细胞48 h后,miR-30a-5p模拟物组NO水平较mock和NC组明显升高(P<0.05).结论:miR-30a-5p及其靶基因ARG1是急性缺血性脑卒中重要的分子标志物之一,miR-30a-5p可能通过抑制靶向基因ARG1表达参与缺血性卒中免疫应答的病理生理过程.     

miR-513a-3p在结肠癌中高表达并诱导细胞生长和迁移的机制研究

目的 观察miR-513a-3p在结肠癌组织与癌旁正常组织的表达差异,探讨miR-513a-3p诱导结肠癌(CRC)细胞生长和迁移的机制.方法 收集CRC患者30例作为研究对象,原位杂交和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测CRC组织与癌旁组织miR-513a-3p的表达水平.取人CRC细胞株HT-29和SW480培养后,转染miR-513a-3p类似物作为促进表达组,设置阴性对照组,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验两组细胞活力,Transwell法检测细胞侵袭情况,细胞划痕实验检验细胞迁移能力,Western blot法检测NF-κB和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平.结果 原位杂交检测结果显示,CRC组织miR-513a-3p阳性表达高于癌旁组织.qRT-PCR检测结果显示,CRC组织和癌旁组织miR-513a-3p 相对表达量分别为(0.37±0.09)和(1.01±0.16),差异有统计学意义(P＜0.01).与阴性对照组比较,促进表达组细胞活力在3、4 d中均升高(P＜0.01),促进表达组的HT-29和SW480细胞侵袭细胞比例升高(P＜0.01),促进表达组HT-29和SW480的细胞迁移能力增强.Western blot结果显示,与阴性对照组比较,促进表达组的HT-29细胞和SW480细胞 p-p65、p-IκBα、Wnt3a、Wnt5a 和 β-catenin 蛋白相对表达量均升高(P＜0.01).结论 CRC组织miR-513a-3p表达异常升高,过表达的miR-513a-3p促进CRC细胞生长、迁移和侵袭作用,其作用机制可能与NF-κB通路和Wnt/β-catenin通路激活有关.     

上调miR-378a-3p对血管瘤内皮细胞生长和侵袭能力的影响

目的 探讨微小RNA-378a-3p（miR-378a-3p）对血管瘤内皮细胞（HemECs）增殖、侵袭、迁移的影响以及可能的作用机制。方法 HemECs细胞随机分为对照组、miR-NC组及miR-378a-3p组;对照组为常规培养HemECs细胞,miR NC组和miR-378a-3p组HemECs细胞分别在脂质体（Lipofectamine RNAIMAX）的介导下转染阴性对照以及miR-378a-3p模拟物。荧光定量PCR（qPCR）检测miR-378a-3p的表达量,细胞计数（CCK 8）检测各组细胞的增殖,Transwell实验检测细胞的侵袭、迁移;在线数据库TargetScan预测以及双荧光素酶报告基因验证miR-378a-3p与驱动蛋白超家族2A（KIF2A）的靶向关系。 〖HTH〗结果〓〖HTK〗与对照组相比,miR-378a-3p模拟物能明显上调HemECs细胞中miR-378a-3p的表达量（P＜0.05）;上调miR-378a-3p的表达量抑制HemECs细胞增殖,降低其侵袭、迁移的能力（P＜0.05）;KIF2A是miR-378a-3p下游靶基因之一。结论 miR-378a-3p可能通过靶向KIF2A抑制HemECs细胞的增殖、侵袭及迁移。     

miR-30a-5p对肺癌细胞增殖与迁移的影响及其机制

研究miR-30a-5p 对非小细胞肺癌（NSCLC）增殖和迁移的影响,并探讨其调控机制。方法NSCLC A549细胞系分成两组,miR-30a-5p组和对照组,分别转染miR-30a-5p mimics和microRNA scramble,MTT实验及细胞划痕实验分别测定两组细胞增殖和迁移能力,实时聚合酶链反应（real time-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别测定两组泛素蛋白连接酶（UBE3C）mRNA 和蛋白质表达水平。结果培养48 h后,miR-30a-5p 组相对活细胞百分比低于对照组[（203.7±16.8）% vs（330.4±20.7）%（p =0.000）];培养72 h后,miR-30a-5p组相对活细胞百分比（258±30.2）%,对照组相对活细胞百分比（403.4±28.4）%,miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组（p =0.001）。细胞划痕实验示：miR-30a-5p组划痕愈合率为（23.2±2.7）%,对照组划痕愈合率为（89.2±4.8）%,miR-30a-5p 组划痕愈合率低于对照组（p =0.000）。real time-PCR显示,miR-30a-5p 组UBE3C mRNA 表达水平为（0.15±0.02）,对照组UBE3C mRNA 表达水平为（1.03±0.09）,miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平低于对照组（p =0.000）;Western blot显示,miR-30a-5p组UBE3C 蛋白表达水平为（1.57±0.26）,对照组UBE3C 蛋白表达水平为（5.32±0.42）,miR-30a-5p 组UBE3C 蛋白表达水平低于对照组（p =0.000）。结论miR-30a-5p抑制NSCLC 增殖和迁移,其机制与下调UBE3C表达有关。     

子宫腺肌病治疗前后miR-103a-3p、sICAM-1、miR-101-3p表达及临床意义

目的 探讨子宫腺肌病治疗前后miR-103a-3p、可溶性细胞间黏附分子(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)、miR-101-3p表达及临床意义。方法 选取承德市第三医院子宫腺肌病患者125例作为研究组,另选择同期月经正常、无痛经的健康体检者87例作为对照组。统计2组miR-103a-3p、sICAM-1、miR-101-3p, Spearman分析各指标与痛经强度、疗效相关性,绘制受试者工作曲线(receiver operating characteristic, ROC)及曲线下面积(area under the concentration-time curve, AUC)分析各指标对子宫腺肌病疗效预测价值。结果 治疗前研究组miR-103a-3p、miR-101-3p水平高于对照组,sICAM-1水平低于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组miR-103a-3p、miR-101-3p水平低于治疗前,sICAM-1水平高于治疗前(P<0.05)。治疗前、治疗6个月后研究组重度患者miR-103a-3p、...     

miR-125a-3p对动脉粥样硬化斑块及M1/M2巨噬细胞、MMP-9和VEGF的影响

  目的   探讨miR-125a-3p对大耳兔动脉粥样硬化斑块形成、M1/M2巨噬细胞、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）的影响。  方法  15只成年雄性健康日本大耳兔,随机分为3组,每组5只,对照组给予普通饲料喂养,动脉粥样硬化模型组给予牛血清白蛋白注射和高胆固醇饲料喂养,miR-125a-3p抑制剂干预组给予动脉粥样硬化兔注射miR-125a-3p干扰慢病毒载体。油红O染色后图像分析法测定斑块面积,免疫组化法测定MMP-9和VEGF,免疫荧光法检测斑块组织中M1标记物CD11c和M2标记物CD206。  结果  与动脉粥样硬化组相比,miR-125a-3p抑制剂组斑块面积百分比显著降低（P < 0.0001）。与对照组相比,动脉粥样硬化组MMP-9（P < 0.001）、VEGF（P < 0.01）和CD11c（P < 0.001）水平显著升高,CD206水平显著降低（P < 0.001）;与动脉粥样硬化组相比,miR-125a-3p抑制剂干预组MMP-9（P < 0.01）、VEGF（P < 0.01）和CD11c（P < 0.001）水平有所降低,CD206水平有所升高（P < 0.001）。  结论  抑制miR-125a-3p可减轻动脉粥样硬化斑块的形成,平衡M1/M2巨噬细胞,降低斑块组织中MMP-9和VEGF的表达,miR-125a-3p可能是治疗不稳定动脉粥样硬化斑块的新靶点。     

MicroRNA-122-5p与MicroRNA-199a-5p在EMS患者血清的表达及临床意义

目的 探讨microRNA-122-5p（miR-122-5p）与microRNA-199a-5p（miR-199a-5p）在子宫内膜异位症（EMS）患者血清的表达及临床意义。方法 前瞻性设计,随机选取2016年1月—2017年12月华北石油管理局总医院诊治的EMS患者90例（EMS组）及同期不孕症检查的患者70例（对照组）为研究对象。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测两组人群血清的miR-122-5p和miR-199a-5p的表达及白细胞介素-6（IL-6）的表达,并分析其与临床特征的相关性。构建受试者操作特征（ROC）曲线。结果 EMS组患者的血清及腹腔液中IL-6、miR-122-5p、miR-199a-5p的表达与对照组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,EMS组均增高。miR-122-5p的表达与IL-6水平（r?=0.578,P?<0.05）、miR-199a-5p表达（r?=0.721,P?<0.05）呈正相关。miR-199a-5p的表达与IL-6水平（r?=0.562,P?<0.05）呈正相关。miR-122-5p和miR-199a-5p检测EMS的敏感性分别为94.7%和92.1%,特异性分别为90.5%和88.6%。结论 血清miR-122-5p和miR-199a-5p在EMS患者中的表达增加,miR-122-5p与miR-199a-5p有成为诊断子宫内膜异位症的生物标志物的潜力。     

MiR-30a-5p通过泛素水解酶22抑制人宫颈癌细胞上皮-间质转化功能

【目的】研究microRNA-30a-5p（miR-30a-5p）对人宫颈癌Hela细胞上皮-间质转化功能的影响及其相关机制。【方法】宫颈癌Hela细胞株分别转染目的mir的模拟物和阴性对照模拟物,分别以30a-5p组、NC组命名并标记细胞。同时,以未经过处理的Hela细胞作为对照（Control组）。分别用逆转录-聚合酶链反应法检测各组宫颈癌细胞的miR-30a-5p含量。Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力。Western-blot法检测3组细胞神经-钙粘素（N-cadherin）、α-连环蛋白（α-Catenin）和泛素水解酶22（USP22）表达水平。运用生物信息学方法预测miR-30a-5p的靶基因。采用Western blot法检测USP22过表达对miR-30a-5p抑制EMT的拮抗作用。双荧光素酶实验检测miR-30a-5p与USP22的关系。建立皮下移植瘤模型观察miR-30a-5p的体内作用。【结果】30a-5p组宫颈癌细胞miR-30a-5p的表达水平明显上调,表达水平为Control组的853.82（862.26~843.11）倍（P＜0.01）。30a-5p组侵袭细胞数量8.17（8.32~8.03）明显低于Control组（P＜0.01）。30a-5p组细胞N-cadherin蛋白的细胞内含量明显下降,α-Catenin蛋白的细胞内含量明显上升,USP22蛋白表达量明显降低。合并USP22过表达处理的30a-5p组宫颈癌细胞中N-cadherin蛋白表达量明显升高,α-Catenin蛋白表达量明显降低。双荧光素酶检验结果显示USP22为miR-30a-5p的下游靶基因（P＜0.01）。30a-5p组皮下移植瘤明显小于Control组（P＜0.01）。与Control组肿瘤组织相比,30a-5p组肿瘤组织miR-30a-5p的相对含量升高,USP22蛋白含量降低,N-cadherin蛋白的含量降低,α-Catenin蛋白含量升高。【结论】miR-30a-5p在宫颈癌Hela细胞中,可能通过靶向识别下游靶基因USP22,进而抑制其翻译。最终实现对宫颈癌细胞EMT过程的抑制。     

尿液中miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p检测在前列腺癌中的诊断及临床意义

目的:建立尿液miRNA检测板,作为诊断前列腺癌（PC）的无创性生物标志物。方法:采用miRNAs芯片分析对照1组（6名）及PC1组（18例）中miRNAs表达,并进一步利用qRT-PCR对20名对照2组及59例PC2组（GS2 6组22例,GS2 7组19例,GS28组18例）尿液、血清标本进行差异基因的进一步验证。应用受试者工作特征（ROC）曲线分析组合诊断模型的准确真实性。结果:获得在PC1组中20个miRNAs差异表达谱,与对照1组相比,miRNA-24-3p及miRNA-222-3p显著表达下调（T=5.79、4.59,均P＜0.05）,用于PC诊断检测。在扩大样本量的PC患者尿液及血清样本中,根据GS分组的GS26、GS27及GS28组中,与对照2组相比,miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p表达水平也都显著下调（t=3.89,P＜0.05）,ROC分析联合诊断模型具有较高的准确度（曲线下面积为0.93,OR=1.37,95% CI:0.92~1.76,P＝0.02）。结论:在尿液、血清样本中建立了miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p组合模型,可作为诊断PC的无创性生物标志物。     

泼尼松对结核性胸膜炎ADA及细胞因子IL-6和IFN-y的影响

目的：观察泼尼松对结核性胸膜炎患者胸腔积液腺苷脱氢酶（ADA）及细胞因子IL-6和IFN-1表达水平及疗效的影响。方法：随机将40例结核性胸膜炎患者分为激素治疗组和常规治疗组,两组均接受常规抗结核化学治疗。激素治疗组加用泼尼松30mg／d,连用7d。分别于治疗前和治疗7、14d采用ELISA法测定患者胸腔积液中IL-6和IFN-y表达水平,酶比色法测定ADA水平。结果：40例患者经治疗后胸腔积液ADA、IL-6和IFN-y水平均有不同程度的降低,激素组降低程度均大于常规组（P〈0．05）。治疗6个月后．激素组完全有效13例、部分有效5例、无效2例;常规组完全有效10例、部分有效7例、无效3例;激素组疗效好于常规组（P〈0．05）。常规组胸膜厚度为（1．43±0．20）mm,粘连7例;激素组胸膜厚度为（1．09±0．13）mm,粘连2例;两组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：早期增加激素治疗能有效降低结核性胸膜炎患者IL-6、IFN-y、ADA水平,治疗效果满意。     

MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的 探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系.方法 采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清m...