缺血再灌注心肌中补体C3的表达与补体C1抑制剂的心肌保护作用

目的研究缺血再灌注心肌中补体C3的表达以及补体1抑制剂(C1INH,C1inhibitor)对缺血心肌的保护作用。方法结扎大鼠的冠状动脉左前降支30min,再灌注3h、72h造成缺血再灌损伤模型。实验分为假手术组、NaCl组和C1INH组(每组5只大鼠,n=5),观察C1INH对大鼠心功能、心肌梗死面积的影响,同时采用免疫组化和Western blot法检测缺血心肌补体C3的表达。结果与假手术组比较,再灌注3h及72h后,NaCl组和C1INH组鼠心功能下降,心肌的梗死面积增加,缺血心肌补体C3的表达增加。与NaCl组比较,再灌注72h后,C1INH组心功能改善,心肌的梗死面积减少[(36.28±0.99)%vs(50.58±0.24)%],差异具有统计学意义(P<0.05)。同时,C1INH组缺血心肌补体C3的表达减少。结论 C1INH通过抑制缺血心肌补体C3的表达而减少缺血再灌所致的心肌损伤,改善心功能。     

补体1抑制剂抑制缺血心肌细胞凋亡及其机制

目的:探讨补体1抑制剂(C1INH)对缺血再灌心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:复制大鼠缺血再灌注模型,C1INH进行干预,实验分为假手术组、NaCl组及C1INH组。TUNEL法检测心肌组织的心肌细胞凋亡情况。Western blot检测心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3及Cleaved caspase-3的表达情况。同时测定血浆Caspase-3的活性。结果:与对照组比较,C1INH干预组心肌细胞的凋亡明显减少(P<0.05)。同时C1INH干预组Bcl-2和Bax的表达比例更趋于正常化,Caspase-3及Cleaved caspase-3的表达及活性则明显减少(P<0.05)。结论:在心肌的缺血再灌中,C1INH,除了抑制补体激活,抑制炎症反应而对心肌细胞具有保护作用外,还能通过通过平衡Bcl-2和Bax的表达,抑制Caspase-3的活性及裂解而对抗心肌细胞的凋亡。     

大鼠肢体缺血再灌注致心肌损伤中过氧化物酶及肿瘤坏死因子-α的动态变化及意义

目的研究血浆及心肌局部炎细胞髓过氧化物酶（MPO）及炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在大鼠肢体缺血再灌注
后心血管系统损害中的动态变化及意义。方法应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血再灌注模型,按照缺血及再灌注不同时间
点随机分为9组：① 正常对照组(C);②缺血2、4 h组(I2,I4);③缺血4 h再灌注0.5、2、4、6、12、24 h组（R0.5,R2,R4,R6,R12,R24）。观察
各组大鼠血浆及心肌MPO、TNF-α水平的变化,以免疫组化法观察心肌组织TNF-α的表达。结果与C组比较,I2组血浆及心肌
MPO、TNF-α即开始明显上升;与I4组比较,血浆及心肌MPO分别于再灌注R0.5、R2组明显升高;R4组血浆TNF-α明显上升,R12组
心肌TNF-α明显下降;R24组血浆MPO、TNF-α明显下降（P<0.05）。R4血浆MPO、TNF-α及心肌TNF-α达到峰值;R6组心肌MPO
达到峰值。TNF-α免疫组化提示I4组大鼠心肌胞浆即可见较多棕色染色颗粒,R4组浆棕色染色颗粒继续增多,R24组明显减少。
结论炎细胞在心肌组织的聚集活化、全身及心肌局部炎性细胞因子的激活是肢体缺血期及再灌注期心肌损伤的重要病理学基
础,其中再灌注期心肌损伤与全身性炎性细胞因子激活关系更大。
     

新型补体抑制剂对大鼠肾移植缺血再灌注损伤的治疗作用

目的：观察新型补体抑制剂 APT070 对大鼠肾移植缺血再灌注损伤的治疗作用。方法：应用同基因大鼠肾脏移植模型，供肾移植前分别经观察药物 APT070、对照药物 APT898、相应蛋白多肽链及灌注液灌注，测定术后 1-7 d肾脏功能。结果：肾移植术后 1-2 d，APT070 灌注组移植肾功能明显好于对照组（P＜0.05）。结论：APT 070 作为一种可与肾脏组织结合的新型补体抑制剂，可减轻肾脏缺血再灌注损伤。     

超极化停搏对离体兔心肌补体C3a表达的抑制作用

目的观察离体兔心脏超极化停搏对心肌组织补体C3a蛋白质表达的影响情况.方法日本大耳白兔32只,随机分为3组,每组均为8只.剩余8只在心率平衡10min后取标本作为缺血前对照.空白对照组(K组);St.ThomasⅡ组(S组);Pinacidial组(P组).离体兔心Langendorff模型灌注充氧K-H液,心率稳定10min后,K组以4℃的K-H液灌注心脏,S组灌注4℃ St.ThomasⅡ(K 16mmol·L-1)停跳液,P组灌注含Pinacidial(50μmol ·L-1)的4℃ St.ThomasⅡ(K 5mmol·L-1)停跳液.全心缺血40min,复灌60min.采用免疫荧光法对比观察缺血/再灌注前、后心肌组织补体C3a蛋白质表达的变化.结果与平衡10min比较,再灌注后60min各组心肌细胞胞浆荧光着色均增强,但P组明显低于K组与s组(P《0.01).结论超极化停搏可抑制离体兔心肌组织缺血/再灌后补体蛋白质的表达.     

缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠TNF-α和IL-1β表达影响

目的探讨缺血后处理(IP)对局灶性脑缺血再灌注(I/R)大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法将110只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)10只、I/R组和IP组各50只,后两组根据再灌注时间每组又分为6、12、24、48、72h等5个亚组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑I/R模型,后处理方法为大脑中动脉阻闭2h后,再灌注15s-缺血15s,反复3次。对各组进行神经行为学评分,TTC染色测定脑梗死体积,免疫组化法检测脑组织TNF-α和IL-1β蛋白表达,原位杂交法检测TNF-α和IL-1βmRNA的表达。结果 I/R组大鼠可见神经行为学的缺失及缺血侧大脑半球的梗死,与之相比,IP组大鼠脑梗死体积明显减小、神经行为学评分改善(t=2.683～5.657,P<0.05)。TNF-α、IL-1β蛋白及mRNA在sham组额顶叶有微弱表达,其在I/R组和IP组的表达于再灌注6h时开始升高,24h达高峰。与I/R组各相应亚组比较,IP组TNF-α和IL-1β蛋白及mRNA表达均明显降低(t=2.333～7.814,P<0.05)。结论 IP可显著下调TNF-α和IL-1β的表达,缩小I/R大鼠的脑梗死体积,提示IP可抑制I/R的炎性反应,从而发挥神经保护作用。     

缺血预处理对再灌注心肌肿瘤坏死因子-α、白介素-6的影响

目的观察缺血预处理对家兔心肌缺血再灌注期(MIR)血清及心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的影响,并探讨其心肌保护机制。方法24只家兔随机分为3组,每组8只:空白组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和缺血预处理组(IP组)。IP组阻断冠状动脉左前降支(LAD)5min,恢复血流10min后,再行缺血30min,再灌3h;IR组仅单纯缺血30min,再灌3h;C组仅分离血管,不阻断血流。各组分别于缺血前5min(I0)、缺血30min(I1)、再灌注1h(R1)和3h(R2)取颈内静脉血,IP组于缺血5min,再灌注10min时(IP)加抽一次血样,3组实验结束取心肌组织,批量测定血清及心肌组织中TNF-α、IL-6浓度,光镜下观察心肌病理结构变化。结果IP组血清TNF-α于IP时点迅速增高(P<0.01),I1~R2恢复至基值;IR组I1~R2增高,分别是I0的1.61、1.50倍。IP组血清IL-6在I1时有增高趋势,但无统计学意义(P>0.05),R1、R2与I0比无变化;IR组于R1迅速增高,R1、R2分别是I0的1.56、1.74倍。IP组心肌TNF-α、IL-6高于C组(P<0.01),显著低于IR组(P<0.01)。光镜下IP组心肌水肿与白细胞浸润程度较IR组明显减轻。结论IP对TNF-α、IL-6合成分泌的调控可能是IP保护再灌注心肌的又一个机制。     

补体C3aR在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的表达

【摘要】 目的 观察脊髓缺血再灌注损伤(SCIR)过程中大鼠脊髓C3aR的表达水平及细胞定位,探讨C3a-C3aR 信号通路在SCIR病理过程中的作用。方法 使用体重为250g— 300g的雄性成年SD大鼠,参照Zivin法构建大鼠 SCIR模型。将54只大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=9),单纯缺血组(I组,n=9)和缺血再灌注组(IR组,n=36), 缺血再灌注组又依据再灌注时间不同分为再灌注12h组(IR12H组,n=9)、再灌注24h组(IR24H组顶=9)、再灌注48h 组(IR48H组,n=9)和再灌注3d组(IR3d组,n=9) o观察动物行为学改变并进行运动功能评分,评估模型是否制备成 功;采用ELISA法检测SCIR过程中大鼠血浆C3a分子的表达水平;制备大鼠脊髓组织冰冻切片,采用双重标记的免疫 组织荧光染色法检测SCIR过程中大鼠脊髓组织C3aR的表达变化及细胞定位。结果 大鼠脊髓缺血lh及再灌注lh、 6h、12h、24h和48h后出现明显的运动功能障碍;IR组大鼠血浆C3a含量较Sham组显著升高(P<0.05),其中,IR24h 组大鼠血浆C3a含量最高;IR组大鼠脊髓组织C3aR表达上调,主要在神经元和小胶质细胞上表达。SCIR过程中脊髓组织小胶质细胞大量激活,小胶质细胞上高表达C3aR是C3aR表达上调的主要原因。结论 SCIR过程中C3a-C3aR信 号通路激活,C3a在血浆中表达升高,C3aR在脊髓组织中表达上调,C3a-C3aR信号通路可能在SCIR病理进程中发挥着 诱导炎症反应加重脊髓损伤等作用。     

羟乙基淀粉对兔缺血-再灌注心肌 MPO 和 ET-1的影响

目的：观察羟乙基淀粉对兔缺血-再灌注损伤心肌髓过氧化物酶（MPO）、内皮素-1（ET-1）水平的影响。方法将36只新西兰大白兔随机分为乳酸林格氏液组（A组）、白蛋白组（B组）、羟乙基淀粉组（C组）,每组12只。 A、B、C组于再灌注前15 min分别经颈内静脉缓慢注入6．0 ml/kg乳酸林格氏液、5％人体白蛋白6．0 ml、6％羟乙基淀粉6．0 ml,观察期间经耳静脉输注复方乳酸钠10 ml/（kg＆#183; h）,于缺血前、缺血30 min,再灌注60 min、180 min 4个时点采血,检测血清乳酸脱氢酶（ LDH）、肌酸磷酸激酶（ CPK）、白细胞介素-8（ IL-8）和ET-1的浓度。再灌注180 min时处死大白兔测心肌梗死面积及 MPO活性。结果3组血清LDH、CPK、IL-8和ET-1水平随再灌注时间延长而逐渐升高,但C组增高的程度明显低于A、B两组（P＜0．05）;3组缺血区MPO活性均较非缺血区明显升高,升高程度A组＞B组＞C组（P＜0．05）;C组的心肌梗死面积显著小于A、B两组,B组梗死面积小于A组（P均＜0．05）。结论羟乙基淀粉可能通过抑制IL-8及ET-1的生成和释放,而降低缺血区MPO活性,对缺血-再灌注损伤的心肌组织具有保护作用。     

血府逐瘀汤对肾缺血-再灌注损伤大鼠TNF-α、IL-1和IL-6的影响

目的:研究血府逐瘀汤对肾缺血—再灌注损伤(RIRI)大鼠肾肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素—1(ΙL-1)和白介素-6(1L-6)的影响。方法:36只大鼠,随机分为对照组、模型组和用药组。除对照组外,其它组制作RIRI模型;用药组在造模前3h及造模后6h、12h给血府逐瘀汤灌胃,模型组和对照组用等量蒸馏水灌胃;再灌注24h,下腔静脉取血查BUN、Cr,处死大鼠,取肾标本检测相应指标。结果:模型组血BUN、Cr,肾组织TNF-α、IL-1和IL-6含量均明显高于对照组;用药组与模型组相比,血BUN、Cr,肾组织TNF-α、IL-1和IL-6水平明显下降。结论:血府逐瘀汤具有防治大鼠RIRI的作用,其对TNF-α、IL-1和IL-6等细胞因子的调控可能是重要的机制之一。     

乌司他丁对缺血再灌注大鼠心肌肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-10基因表达的影响

目的:研究乌司他丁对大鼠缺血后心肌局部细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)表达的影响.方法:持续性结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌缺血损伤模型,用乌司他丁进行干预.实时定量PCR检测干预后心肌组织的TNF-α和IL-10的mRNA,ELISA法检测TNF-α和IL-10蛋白水平.结果:...     

益赛普对大鼠心肌缺血再灌注损伤中炎症相关细胞因子含量的影响

目的:探讨益赛普(etanercept)对结扎冠脉左前降支所致大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用以及对炎症细胞因子的影响.方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min,再灌注120 min复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,取心肌组织,HE染色观察大鼠心肌组织形态的变化,酶联免疫吸附法检测心肌组织中的肿瘤坏死因子-α(tu...     

392例甲型H1N1流感患者血清补体C3、C4和CH50的变化

目的探讨甲型H1N1流感患者病程初期血清补体C3、C4和CH50的变化及临床意义。方法采用免疫透射比浊法及脂质体免疫测定法分别检测369例轻症甲型H1N1流感（轻症组）和23例重症甲型H1N1流感（重症组）患者病程5d内血清中补体C3、C4水平及总补体活性（CH50）。结果轻症组C3值为（1.10±0.18）g/L,重症组为（1.10±0.19）g/L;轻症组C4值为（0.29±0.08）g/L,重症组为（0.29±0.08）g/L;76%的患者病程早期CH50出现轻微上升,15%出现明显下降;轻症组CH50值为（48.84±19.38）U/ml,重症组为（57.48±13.25）U/ml（P=0.036）。结论甲型H1N1流感患者病程早期血清C3和C4水平均在正常较高水平,CH50多轻微上升,部分明显下降。重症甲型H1N1流感CH50水平较轻症升高,有一定预警意义。     

血清补体C3、C4、C1q水平与SLE病情活动程度的关系探讨

【摘要】 目的 探讨人体血清补体C3、C4、C1q水平与系统性红斑狼疮（SLE）病情活动程度之间的关系。方法 将2017年3月～2018年4月于西安交通大学第二附属医院住院的63例SLE患者按照美国风湿病学会1997年推荐的SLE分类标准分为皮损组10例、初诊组20例、未缓解组33例,另选择45例健康体检者为正常对照组。比较各组血清补体C3、C4、C1q水平,并分析血清补体C3、C4、C1q水平与SLE活动程度之间的关系。结果 皮损组、初诊组和未缓解组SLE患者血清补体C3、C4水平均明显低于正常对照组（P＜0.05）;而初诊组和未缓解组SLE患者的血清补体C1q水平高于正常对照组（P＜0.05）;皮损组SLE患者的血清补体C1q水平和正常对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;皮损组SLE患者血清C1q水平与正常对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 血清补体C3、C4、C1q水平可在一定程度上判断SLE病情活动程度,定期检测补体C3、C4、C1q的水平并监测其变化程度是判断SLE情活动程度的重要指标。     

降钙素基因相关肽对缺血及再灌注心肌的保护作用

作用家兔急性心肌缺血及再灌注模型观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对心外膜电图、心肌自由基代谢、心肌梗塞面积和心肌超微结构的影响。结果表明，心肌缺血和再灌注可导致心外膜电图出现特征性缺血改变，其ＳＴ段由０．６±０．４ｍＶ分别升高到１２．５±５．４和４．８±２．６ｍＶ（Ｐ均〈０．０１）；心律失常发生率分别为４０％和６２．５％；心肌组织ＳＯＤ活性由２３０±４０Ｕ／ｇ组织（ＭＣ）分别降低到１２０±５０     

等容血液稀释和维拉帕米对缺血再灌注心肌的保护

在犬的急性心肌缺血再灌注模型上，观察右旋糖酐４０等容血液稀释和维拉帕米注射液以及二者联合应用对心肌缺血再灌注损伤的防治作用。２４条犬随机分为４组：Ⅰ组（对照组，ｎ＝６）、Ⅱ组（稀释组，ｎ＝６）、Ⅲ组（维拉帕米组，ｎ＝６）、Ⅳ组（稀释加维拉帕米组，ｎ＝６）。结果：①血液流变学指标改变：Ⅱ、Ⅳ组在血液稀释或给予维拉帕米后，血液流变学指标和Ⅰ、Ⅲ组相比明显改善（Ｐ＜０．０５）；②心功能改变：再灌注后，Ⅰ组心功能指标明显恶化（Ｐ＜０．０５），Ⅱ组和Ⅲ组左室内收缩压力峰值（ｐＬＶＳ），左室内舒张末期压力（ｐＬＶＥＤ），左室内压力最大上升速率（＋ｄｐ／ｄｔ（ｍａｘ）），左室内压力最大下降速率（－ｄｐ／ｄｔ（ｍａｘ））与Ⅰ组相比明显改善（Ｐ＜０．０５）；Ⅳ组心功能指标则进一步好于Ⅱ、Ⅲ组（Ｐ＜０．０５）。提示：①右旋糖酐４０等容血液稀释能明显改善左心收缩和舒张功能，维拉帕米只能显著改善左室舒张功能；②二者合用能进一步改善左室收缩和舒张功能，缩小梗死范围     

银杏叶提取物在大鼠肝移植缺血再灌注损伤中的预处理效用

目的:探讨银杏叶提取物对大鼠移植肝缺血再灌注损伤模型的预处理效用.方法:采用Kamada's袖套法建立大鼠缺血再灌注原位肝移植模型.将大鼠随机分成假手术组(SO组)、生理盐水对照组(NS组)、银杏叶提取物预处理组(EGb组).各组分别观察移植肝再灌注后2 h、6 h和24 h肝组织中TNF-α、IL-1含量及血清ALT和AST含量和肝组织学变化.结果:SO组与NS组血清ALT和AST含量,肝组织TNF-α和IL-1活性明显升高(P＜0.01),肝细胞形态学发生异常变化.EGb预处理组,上述指标的异常变化均明显减轻,与NS组比较差异有显著性意义(P＜0.01).结论:银杏叶提取物可通过抑制Kuffer氏细胞激活减少释放TNF-α和IL-1始动因子并调控缺血再灌注因子水平达到保护供肝作用.     

缺血及二氮嗪预适应对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨缺血及二氮嗪预适应对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用及机制.方法 Wistar大鼠30只,建立离体心脏灌注模型,分成3组,每组10只:(1)缺血再灌注组(I/R组):心脏平衡灌流30 min后,缺血30 min,再灌注1 h.(2)缺血预适应组(IPC组):心脏平衡灌流10 min,经2次缺血再灌注.(3)二氮嗪预适应组(DPC组):心脏平衡灌流10 min,给予2次含二氮嗪(100μmol/l)的K-H液灌注5 min再复灌不含二氮嗪的K-H液,缺血30 min,再灌注1 h.各组取心尖肌做冰冻切片行过氧化物酶体增生激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)免疫组织化学染色,电镜标本对心肌线粒体行Flameng评分.结果 IPC组、DPC组PGC-lα表达明显增高,与I/R组比较差异有统计学意义,但IPC及DPC两组间差异无统计学意义(P＞0.05).Flameng评分:IPC组(0.44±0.13)、DPC组(0.47±0.10)、I/R组(1.78±0.14);IPC及DPC两组与I/R组比较差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 缺血及二氮嗪预适应对心肌线粒体有保护作用,这一作用可能与PGC-1α激活及高表达有关.     

白介素-1受体拮抗剂对缺血再灌注心肌的保护作用及其机制探讨

目的　探讨急性心肌梗死 (AMI)再灌注过程中白介素 - 1β(IL 1β)的变化及重组人白介素 - 1受体拮抗剂 (rhIL 1ra)对缺血再灌注心肌的保护作用及其机制。方法　 (1)用ELISA法测定了 8名健康人和 2 2例接受急诊经皮冠脉介入治疗 (PCI)并且梗死相关血管 (IRA)血流达心肌梗死溶栓 (TIMI) 3级的AMI患者血浆IL 1β水平的动态变化。 (2 )在兔心肌缺血 5 0min再灌注 4h的模型上 ,观察不同剂量rhIL 1ra(A组 :rhIL 1ra 10mg/kg ;B组 :rhIL 1ra 2 0mg/kg ;C组 :rhIL 1ra 4 0mg/kg)对心肌梗死面积、心肌髓过氧化物酶 (MPO)活性、心肌细胞凋亡程度 (TUNEL、AnnexinⅤ和DNA 梯形图法 )及凋亡相关基因Bcl 2 /Bax的表达。结果　 (1) 2 2例AMI患者再灌注前血浆IL 1β(2 8pg/ml±9pg/ml)已明显高于健康对照组 (2 0 pg/ml± 11pg/ml,P <0 0 5 ) ,IRA再通后 12h血浆IL 1β水平达高峰 (86 pg/ml± 14pg/ml) ,至术后 2 4hIL 1β血浆水平 (5 6 pg/ml± 15 pg/ml)仍明显高于再灌注前 (2 8pg/ml± 9pg/ml,P <0 0 1)。 (2 )兔AMI对照组与rhIL 1ra各组之间心肌缺血面积差异均无显著意义 ,但各rhIL 1ra组梗死心肌面积均小于对照组 ,组间差异呈剂量依赖性 (47%±7% ,34%± 8% ,31%± 6 %比 6 1%± 11% ,分别P <0