白细胞介素—6反义基因对人肺癌细胞生长的抑制作用

目的通过体外实验证实白细胞介素－６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６,ＩＬ－６）为人肺癌细胞系ＰＧ自分泌生长刺激因子,本研究旨在进一步探讨ＩＬ－６对ＰＧ细胞体内生长的影响。方法构建ＩＬ－６反义基因表达载体,应用磷酸钙沉淀法导入ＰＧ细胞以降低内源性ＩＬ－６表达;应用ＲＮＡ斑点杂交检测ＩＬ－６反义ｍＲＮＡ表达;应用生物活性检测法测定ＩＬ－６分泌,裸鼠皮下接种检测细胞成瘤性。结果转染反义ＩＬ－６基因的细胞ＰＧＴＡＳ１、ＰＧＴＡＳ６、ＰＧＴＡＳ８、ＰＧＴＡＳ９能够表达较高水平ＩＬ－６反义ｍＲＮＡ,所分泌的有生物活性的ＩＬ－６降低;ＰＧＴＡＳ１、ＰＧＴＡＳ６、ＰＧＴＡＳ８、ＰＧＴＡＳ９细胞体外生长减慢;ＰＧ－ＴＡＳ６、ＰＧＴＡＳ８、ＰＧＴＡＳ９细胞体内成瘤延迟,生长减慢。反义ＩＬ－６对ＰＧ细胞生长的抑制作用与ＩＬ－６分泌量呈负相关。结论ＩＬ－６对ＰＧ细胞生长具有重要的调控作用,ＩＬ－６为ＰＧ细胞自分泌生长刺激因子。     

人参总皂甙对造血生长因子产生的影响

本文应用造血祖细胞体外培养术和白细胞介素（ＩＬ）生物活性检测术，观察经人参总皂甙（ＴＳＰＧ）刺激的小鼠脾细胞、腹腔巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的集落刺激因子（ＣＳＦ）、ＩＬ－２和ＩＬ－６生物活性。结果表明：ＴＳＰＧ刺激组的ＣＳＦ和ＩＬ－６活性均显著高于对照组，ＴＳＰＧ刺激的脾细胞培养上清液的ＩＬ－２活性明显高于对照组，而ＴＳＰＧ刺激的巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的ＩＬ－２活性与对照组无显著性差     

gp130单克隆抗体B-S12的生物学特性研究

研究ｇｐ３０单克隆抗体Ｂ－Ｓ１２的生学特性。方法用细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入的方法观察人多发性骨髓瘤细胞株ＸＧ－１和ＸＧ－２在抗ｇｐ１３０的单抗Ｂ－Ｓ１２与它们的Ｆａｂ片段和Ｆ（ａｂ’）２片段作用下，细胞增殖和生长情况；此外，也观察ｇｐ１３０单抗Ｂ－Ｐ８以及ＩＬ－６和ＩＬ－６Ｒ单抗Ｂ－Ｅ８和Ｂ－Ｒ６对Ｂ－Ｓ１２单抗在这２个细胞株上作用的影响。结果Ｂ－Ｓ１２可刺激ＸＧ－１和ＸＧ－２细胞增殖，并维持     

肺巨细胞癌不同转移亚克隆生长因子表达及反应性差异的探讨

目的研究肺巨细胞癌高转移亚系ＰＧｂＥ１和中度转移亚系ＰＧＬＨ７细胞之间部分生长因子的表达及反应性差异。方法利用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测了生长因子ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ｂＦＧＦ和ＡＮＧ及受体ＥＧＦＲ、ＩＬ－６Ｒ和ＩＬ－８Ｒ的表达状况;其次采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察了重组ＴＧＦα、ＴＧＦβ１和ＩＬ－６对此两个细胞生长的影响。结果ＰＧｂＥ１细胞中ＴＧＦα、ＥＧＦＲ、ＩＬ－６和ＩＬ－６Ｒ的表达水平明显高于ＰＧＨ７细胞,而ＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ、ＩＬ－８、ＩＬ－８Ｒ和ＡＮＧ的表达在两个细胞间无明显差别;重组ＴＧＦα和ＩＬ－６对两个细胞均具有生长刺激作用;ＴＧＦβ１具有双重效应。结论ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、和ＡＮＧ等生长因子可能以自分泌方式参与肺巨细胞癌的生长增殖调控,而ＴＧＦα和ＩＬ－６在肺巨细胞癌的转移中发挥更为重要的作用。     

白细胞介素6单克隆抗体的研制

采用纯化的工程菌表达产物白细胞介素６免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）在ＰＥＧ作用下进行融合,通过ＥＬＩＳＡ筛选并多次亚克隆,获得了１株能分泌抗ＩＬ－６单克隆抗体的杂交瘤细胞Ｉｃ－１．３．４．５。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ显示：抗体结合抗原的分子量与ＩＬ－６相符,为特异性抗ＩＬ－６抗体。亚类鉴定表明：该细胞分泌的单克隆抗体为ＩｇＧ１亚类,ｋａｐｐａ型。染色体数目为１００条左     

白细胞介素6在乙型肝炎自身免疫反应中的作用

在观察乙型肝炎特异性病毒抗原诱导乙肝患者淋巴细胞产生ＩＬ－６以及ＩＬ－６在乙肝自身免疫发生中的作用发现：ＨＢｃＡｇ可诱导患者产生ＩＬ－６，而ＨＢｓＡｇ则无此作用；ＩＬ－６可协同ＨＢｃＡｇ等促进乙肝患者自身抗体─—抗ＬＳＰ的形成，而且患者高活性水平ＩＬ－６与血清中抗ＬＳＰ抗体的滴应有一定相关性。ＩＬ－６在体外可增强患者非特异性ＩｇＧ形成，但不能促进抗ＨＢｓ形成。     

CAAT／增强子结合蛋白在IL—6调节血管紧张素原基因表达中的作用

目的血管紧张素原是血管活性多肽－血管紧张素Ⅱ的唯一前体，又是急期蛋白之一。因此，研究ＩＬ－６调节血管紧张素原基因表达对阐明人体感染时血浆血管紧张素Ⅱ水平增加致高血压有重要意义。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术检测了ＩＬ－６刺激的肝癌细胞Ｈｅｐ３Ｂ中血管紧张素原ｍＲＮＡ，并且进一步通过ＤＮＡ－蛋白质电泳泳动漂移、ＤＮＡ重组和瞬时转染技术分析了人血管紧张素原基因５′端侧翼序列－５６８位置的一个ＩＬ－６反应元件同源序列（ＨＡＧＩＬ－６ＲＥ）。结果ＩＬ－６使血管紧张素原ｍＲＮＡ明显提高，位于血管紧张素原基因启动子中的ＨＡＧＩＬ－６ＲＥ结合于转录因子ＣＡＡＴ／增强子结合蛋白（Ｃ／ＥＢＰ）；将多拷贝的ＨＡＧＩＬ－６同ＴＫ核心启动子连接，再与氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）基因融合，构成异源表达载体，转染ＨｅｐＧ２细胞，发现ＩＬ－６增强Ｃ／ＥＢＰα的作用活性。结论Ｃ／ＥＢＰ在ＩＬ－６诱导血管紧张素原基因表达中具有调节作用。     

肿瘤免疫抑制与治疗

肿瘤细胞能产生ＩＬ－１０、ＩＬ－６、ＴＧＥ２、ＰＧＦβ等多种免疫抑制物质,促进Ｔh２细胞及肿瘤细胞增殖,抑制Ｔh１、Ｍф、ＣＴＬ、ＮＫ细胞的分化与功能,引起宿主免疫功能高度抑制,肿瘤细胞Ｆas基因突变或缺失,可逃避ＣＴＬ的杀伤作用,肿瘤细胞还可表达ＦasL,并用以杀伤肿瘤浸润淋巴细胞。因此肿瘤细胞能在宿主体内存活与增殖,用多种细菌组成的联合菌苗,与小剂量多种细胞因子及足量抗人ＩＬ－１０、抗人ＩＬ－６抗体,ＰＧ拮抗剂等,配合手术、放疗或化疗协同治疗肿瘤,或许能有效地抑制肿瘤发展。     

抗人重组IL－1单克隆抗体的制备及初步鉴定

以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定；抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ｌｇＧｌ；免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带；ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α、ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无交又反应；放射免疫测定结果证实，３株抗体分别识别ＩＬ－１分子上两个不同的抗原决定簇。     

抗白细胞介素—6受体单克隆抗体的制备

用白细胞介素－６（ＩＬ－６）依赖性人多发性骨髓瘤细胞株ＸＧ－１作为免疫原，我们成功地制备获得一株分泌抗人ＩＬ－６受体单克隆抗体的杂交瘤，命名为ＳＩ１５。夹心ＥＬＩＳＡ和位点竞争试验表明，ＳＩ１５和抗人ＩＬ－６受体单克隆抗抗Ｍ１９识别ＩＬ－６受体上的同一位点，对ＩＬ－６受体的生物活性无影响。     

人参总皂甙诱导造血生长因子生成的实验研究

为探讨人参“补气生血”的现代生物学机理，采用造血祖细胞体外培养，造血生长因子生物活性检测等技术，研究人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对造血生长因子的诱导生成作用。结果表明，经ＴＳＰＧ诱导分别制备的脾细胞、巨噬细胞、成纤维细胞和骨髓基质细胞的培养上清对髓系造血祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ）的体外集落增殖均有显著刺激作用。ＴＳＰＧ也能促进脾细胞、成纤维细胞和巨噬细胞分泌ＩＬ－６；刺激脾细胞产生     

重组人IL-18和IL-18-GFP融合蛋白的表达及其生物学活性的研究

目的在大肠杆菌中表达重组人ＩＬ－１８（ｒｈＩＬ－１８）及ｒｈＩＬ－１８－绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）融合蛋白并测定其生物活性。方法构建原核表达质粒ｐＥＴ２８ａ／ｈＩＬ－１８及ｐＴｒｃ９９／ｈＩＬ－１８－ＧＦＰ,并分别转化大肠杆菌ＢＬ２１。用ＩＰＴＧ诱导重组蛋白的表达,超声裂菌上清中的ｒｈＩＬ－１８用镍金属螯合层析柱进行纯化,ｒｈＩＬ－１８－ＧＦＰ用抗ＧＦＰ亲和层析柱及ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－１００分子筛柱纯化。以人的外周血单核淋巴细胞测定两重组蛋白的生物活性。结果表达的ｒｈＩＬ－１８及ｒｈＩＬ－１８－ＧＦＰ均具有促进Ｔ细胞增殖,增强ＮＫ细胞细胞毒作用及诱导外周血单核淋巴细胞合成ＩＦＮ－γ的能力,ｒｈＩＬ－１８－ＧＦＰ还具有ＧＦＰ的绿色荧光特性,可对Ｐ８１５细胞进行标记。结论表达并纯化的ｒｈＩＬ－１８及ｒｈＩＬ－１８－ＧＦＰ具有生物活性,可用于进一步的功能研究。     

一组抗人重组IL－6单克隆抗体的制备及鉴定

以基因重组的人ＩＬ－６免疫了Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，利用小鼠杂交瘤技术，建立了２０余株分泌抗人重组ＩＬ－６单克隆抗体的杂交瘤，并对其中的Ｃ＿（９２）、Ｃ＿（９７）、Ｃ＿（２０３）、Ｃ＿（２２０）进行了较系统的鉴定，其抗体类别均为ＩｇＧ，亚类分别为ＩｇＧ＿（２ａ）、ＩｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ａ）和ＩｇＧ＿（２ａ）。它们均特异性地识别ＩＬ－６，而与多种其它因子和无关蛋白无交叉反应。免疫转印结果显示，各单抗均能识别分子量为１７ｋＤ的ＩＬ－６单一条带，并具有中和ＩＬ－６生物活性的效应。     

人参总皂甙对造血生长因子活性及其mRNA表达的影响

目的　探讨人参“补气生血”的现代生物学机理。　方法　采用核酸分子原位杂交和造血生长因子生物活性检测等技术,研究人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对造血生长因子活性及其ｍ ＲＮＡ表达的影响。　结果　ＴＳＰＧ能显著促进小鼠骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）、腹腔巨噬细胞（ＰＭ）和脾细胞（ＳＰＣ）的粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白细胞介素－６（ＩＬ－６）ｍ ＲＮＡ的表达,经ＴＳＰＧ诱导制备的ＢＭＳＣ、ＰＭ和ＳＰＣ条件培养上清液含有较高的爆式红系集落刺激活性（ＢＰＡ）、粒－巨噬细胞集落刺激活性（ＧＭ－ＣＳＡ）和巨核细胞集落刺激活性（ＭＫ－ＣＳＡ）。　结论　ＴＳＰＧ促进血细胞生成的机理与其诱导造血生长因子的基因表达有密切关系。     

尿中白细胞介素-6测定与系膜增殖性肾炎病理改变相关分析

尿中白细胞介素－６测定与系膜增殖性肾炎病理改变相关分析目的：探讨尿中ＩＬ－６测定在系膜增殖性肾炎（ＭｓＰＧＮ）病理诊断、病程监测中的意义。方法：应用生物活性法测定３０例ＭｓＰＧＮ患儿及１５例非系膜增殖性肾炎（Ｎ－ＭｓＰＧＮ）患儿尿中ＩＬ－６活性，同时...     

白介素—6对甲状腺细胞功能调控的研究

目的：研究白介素－６（ＩＬ－６）对甲状腺细胞生长和分化功能的调节作用。方法：采用Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）甲状腺培养细胞,分别以非同位素标记的细胞增殖分析法和放免法,检测ＩＬ－６对甲状腺细胞的生长、ｃＡＭＰ和甲状腺球蛋白（Ｔｇ）分泌功能的影响。结果：在１０＾－３～１０＾３Ｕ／ｍｌ的浓度范围内,ＩＬ－６不影响甲状腺细胞的生长功能,但此因子能够剂量依赖性地抑制甲状腺细胞基础和ＴＳＨ诱导的ｃＡＭＰ和Ｔｇ的生成。结论：ＩＬ－６在甲状腺分化功能的调节中发挥重要作用。     

白细胞介素6在Graves病的发病及骨代谢中的作用

采用白细胞介素 ６依赖性细胞株ＭＨ６０· ＢＳＦ增殖反应ＭＴＴ法，测定了 ５３例 Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）培养上清中ＩＬ－６水平。结果未治疗组、治疗未缓解 组 ＩＬ－６水平高于缓解组和对照组（Ｐ＜ ０． ０１），后两者间无差异（Ｐ＞ ０． ０５），ＩＬ－６与血清游离三 碘甲状腺原氨酸（ＦＴ３）、游离甲状腺素（ＦＴ４）、甲状腺微粒体抗体（ＴｍＡｂ）、甲状腺球蛋白抗体 （ＴｇＡｂ）、骨钙素（ＢＧＰ）呈正相关，与桡、尺骨密度均值（ＢＭＤ）呈负相关。提示ＩＬ－６在ＯＰ发病与骨 代谢中起作用。ＩＬ－６可作为ＧＤ患者治疗效果的判定和预后以及预防骨质疏松症（ＯＰ）发生的重要 指标。     

外周血单个核细胞在狼疮性肾炎病人体内高效表达IL-6的观察

为了确定狼疮性肾炎（ＬＮ）病人体内是否存在内源性ＩＬ－６表达增高及其来源，作者应用ＥＬＩＳＡ法检测５８例ＬＮ病人的血清及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＩＬ－６蛋白的含量，用原位杂交方法结合ＩＢＡＳ２．０图像分析系统，检测其中２０例ＬＮ病人ＰＢＭＣ在未受任何刺激时ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强度，并分析三者之间的关系。结果表明该三者水平在ＬＮ病人体内均异常增高，活动期尤其明显，三者之间互呈直线正相关。提示ＬＮ病人ＰＢＭＣ内源性过度表达和合成ＩＬ－６是其外周血ＩＬ－６水平增高的原因之一，异常增高的循环ＩＬ－６对狼疮性全身性病理损害，尤其对肾损害具有重要的作用。此外，血清ＩＬ－６过高还提示ＬＮ处于活动期，对临床指导治疗有一定意义。     

抗人重组IL—1单克隆抗体的制备及初步鉴定

以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株 ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定，抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ＩｇＧ１，免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带，ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α，ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无     

病毒性肝炎患者血清IL—6和T细胞亚中的关系

采用ＭＴＴ比色法和抗体致敏的红细胞花环试验（间接法）检测了９１例病毒性肝炎患者血清ＩＬ－６和Ｔ细胞亚群。结果显示，病毒性肝炎患者血清ＩＬ－６活性均明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１）；以重型肝炎为最高；且与肝细胞损害程度呈正比（Ｐ〈０．０１）；ＣＤ４＾＋细胞、ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋均明显降低，与血清ＩＬ－６呈负相关；ＣＤ８＾＋细胞明显增高，与血清ＩＬ－６呈正相关（Ｐ〈０．０１）。表明，血清ＩＬ－６与