用双相免疫电泳法作二株无菌的溶组织内阿米巴抗原分析

一般免疫电泳法曾用于研究溶组织内阿米巴抗原结构,但未能对抗原进行定性或定量分析,故有局限性。本文则用双相免疫电泳法(2D-IEP)对无菌培养的2株溶组织内阿米巴抗原成分进行分析比较。实验选用2株无菌培养的溶组织内阿米巴;HT-31株是从台湾省1个阿米巴肝脓肿病人分离所得;HK-9株是从朝鲜的1例直肠镜检材料分离来的。这两株阿米巴都经过多年无菌培养。现取72小时的培养物,经离心、清洗、声波处理、最后透析制成抗原。用HT-31株和HK-9株提取物免疫家兔,经     

用无菌生长的Laredo株溶组织内阿米巴制备的家兔抗血清的抗原结合力的放射免疫分析

为了阿米巴病的血清诊断的需要和研究抗原株的变异性,作者在本文中报告了一种用成倍的抗体系统对家兔阿米巴抗血清的抗原结合力的放射免疫定量分析。以溶组织内阿米巴Laredo株为抗原,按Diamand法无菌培养。I~(125)标记的Laredo抗原是按照Aono等描述的测定法改良的。用Laredo抗原免疫家兔取得抗血清。抗血清用磷酸缓冲盐水(PBS)从1:25稀释至1:50再开始成倍稀释;同时将2%正常兔血清通过10个试管作成倍稀释。试验时将0.5毫升血清加0.3毫升pH7.8的PBS、0.1毫升0.1克分子二胺四乙酸、0.1毫升I~(125)标记抗原于37℃作用1小时,然后再置于4℃     

用同功酶电泳区分溶组织内、类溶组织内阿米巴及形态上相同的阿米巴

作者用薄层淀粉凝胶电泳获得的各种特异的同功酶谱来区分形态相同的阿米巴。所用的三种酶是E.c.5.3.1.9葡萄糖-磷酸异构酶(GPI),E.c.2.7.5.1磷酸-葡萄糖变位酶(PGM),E.c.1.1.1.40L-苹果酸盐:辅酶Ⅱ+氧化还原酶。受试的溶组织内阿米巴(Eh)株:Rustom(Ru)、Jawa(Ja)、Biswas(Bi)和Rahman(R_a)是1968年从医院病人中分离出的,7株Chattoni阿米巴(Ec)是从4种灵长类中分离出的。电泳基本上按照Wraxall和Cullforo法,电泳后按改良的Bagster及Parr法使酶显现,每批均用细菌和EhⅡ或Ⅲ组作标准。     

类志贺邻单胞菌与EPEC等菌属的抗原关系研究

从腹泻患者的粪便中分离到五株类志贺邻单胞菌(PS)、经血清学分型:两株为PSO_5,PSO_(23),三株为PS新的血清型。其中PSO_(23)与ShC_(13)有共同抗原。新的血清型中有1株与shA_3、shC_(17)和EPECO_(124)B_(17)有共同抗原。迄今为止,关于PS与EPEC的抗原关系尚未见报道。     

IFA诊断黑热病所用实验材料的检测效果评价

IFA虽已常规用于黑热病的诊断和流行病学调查,但对IFA试验中实验材料的选择可能给检测带来的影响及影响的程度等却无较系统的探讨。为此,我们比较了这些因素对检测结果的影响。 用3株杜氏利什曼原虫制备前鞭毛体抗原:(1)保存人株抗原:自四川南坪一例病人骨髓分离。前鞭毛体经NNN培养基培养10天,收集培养物制成抗原片后放-20℃中保存31个月。(2)新鲜人株抗原:自汶川     

应用戊二醛固定的鸡红细胞间接血凝试验作阿米巴病的血清学诊断

用戊二醛固定的鸡红细胞的间接血凝试验(GFC-IHA)对86例经粪检和琼脂扩散沉淀试验诊断为阿米巴病的患者血清和50例无症状带包囊者血清进行检测。抗原制备是用无菌培养的溶组织内阿米巴HM—1:IMSS株,在35.5℃培养3d后,收集,并用0.85%     

旋毛虫虫种的鉴定方法及生物学研究进展

自 18 3 5年发现旋毛虫至上世纪中叶一直认为旋毛虫病是由单一的虫种引起的 ,即旋毛形线虫 (Trichinellaspiralis ,Owen ,183 5 )。Nelson、Mukundi (1963 )和Nelson等 (1966)实验发现 ,一些不同的地理株其生物学特性有明显差异 ,对大鼠易感的虫株同样对家猪亦易感 ,而来自于肯尼亚灌木丛中一种野猪和阿拉斯加熊的虫株对大鼠和猪的感染性差。Gretillat、Vas siliades(1968)和Kruger等 (1969)用西非和南非野生动物虫株实验感染猪和犬的比较研究也得到了相似的结果。Kozar(1965 )用波兰虫株和肯尼亚虫株进行的实验感染中发现 ,肯尼亚虫株…     

在墨西哥阿米巴病的血清流行病学

在墨西哥选择32个地区对67668名1—98岁的人群进行溶组织内阿米巴病的血清流行病学调查,同时观察此病与社会经济水平、居住条件、年龄、性别和地理环境的关系。以无菌培养的溶组织内阿米巴HMI:IMSS株作抗原,将冻干抗原-20℃贮存,用     

鼠类流行性出血热病毒带毒情况调查

<正> 近年来,我国已证实各不同来源的流行性出血热(EHF)病毒株在形态学上是一致的[1],但临床表现和流行病学特点常不尽相同。说明各病毒株的型别与特性可能存在差异。陈伯(木义)等用35个EHF-MCAb对国内外不同来源的20株EHF病毒抗原进行分析,发现家鼠型EHF病毒的抗原决定簇明显多于野鼠型EHF病毒[2]。因此对各地不同类型的EHF病毒株进     

病毒与溶组织内阿米巴的致病力

溶组织内阿米巴有致病和不致病二型。这二型根据Sargeaunt等介绍的同功酶电泳方法是很容易鉴别的,也曾发现溶组织内阿米巴被病毒寄生,但至今未曾发现病毒的存在与阿米巴的致病力相关。检查了3株溶组织内阿米巴的培养物并测定了它们的酶谱,有2株为致病型,1株为非致病型。致病株无菌培养于TPS-1培养基中,非致病株则培养于有克氏锥虫的TPS-1培养基中。     

血吸虫22kDa表皮膜相关抗原特异性IgE抗体的诱生与其自身特性有关

最近,Webster等(1997年)的研究显示,人体感染日本血吸虫(菲律宾株)和曼氏血吸虫(Kenya株)所诱生的抗体IgE应答主要针对天然22kDa抗原。但宿主IgE为何主要识别22kDa抗原的原因尚不清楚。 Webster等(1996年)曾克隆编码曼氏血吸虫22kDa抗原的基因,并发现该基因与已克隆的曼氏血吸虫22.6kDa表皮膜蛋白基因(Sm22.6)完全一致。以后的研究进一步     

华支睾吸虫代谢抗原用于免疫诊断的试验研究

有人报道用华支睾吸虫成虫代谢抗原检测兔体内抗体取得了较满意的结果。本文应用了无血清1640培养液内活虫培养的代谢产物作为抗原与华支睾吸虫全虫抗原进行比较,评价代谢抗原在检测华支睾吸虫抗体中的价值。一、材料与方法(一)抗原制备1.代谢抗原:自人工感染华支睾吸虫囊蚴的猫肝脏中无菌取出华支睾吸虫成虫,用含双抗的无菌生理盐水漂洗后,分别装于100ml 含有1640培养液的三角烧     

新疆不同地区杜氏利什曼原虫抗原制备及应用研究

目的用从新疆不同地区分离得到的利什曼原虫前鞭毛体提取抗原,观察ELISA法检测黑热病病人和疫区健康人血清抗体时的敏感性和特异性,为制备ELISA诊断试剂盒和进一步提高这种检测方法的敏感性和特异性,提高黑热病现场流行病学调查结果的准确性和可靠性提供实验依据。方法(1)抗原提取:收集新疆不同地区分离得到的利什曼原虫前鞭毛体,常规方法提取抗原,滴定出抗原工作浓度。(2)检测:用提取的3株抗原,测定黑热病病人和疫区健康人血清抗体。结果3株抗原检测24份肺结核病人血清,均为阴性;3株抗原分别检测60份非疫区健康人血清801株和951株的检测结果均为阴性,901株检测出1份阳性(临界值);3株抗原分别检测131份黑热病病人血清,阳性率分别为:901株(80.9%)、801株(92.3%)、951株(89.9%)。801株明显高于901株。3株抗原分别检测334份疫区健康人血清,901株(10.5%)明显高于801株(6.0%)和951株(5.1%),有显著差异。按不同地区人群阳性率比较,3株抗原检测巴楚县人群阳性率有显著差异,901株(18.8%)与951株(8.5%)有显著差异,乌什县人群阳性率无显著差异;按不同年龄组的人群阳性率比较,3株抗原在每个年龄组的阳性率无显著差异。结论利什曼原虫前鞭毛体抗原有较好的稳定性,耐热性极好;901株、801株抗原的敏感性、特异性较好,可做为新疆血清流行病学调查所用的抗原株;801株的特异性更好,可用于黑热病的特异性抗体的检测及研究。     

应用白细胞粘连抑制试验评价侵袭性阿米巴病的细胞免疫

作者用无菌培养的溶组织内阿米巴HK-9株和NIH株混合培养48小时的虫体,经4℃冷却10分钟使阿米巴由管壁附着处脱落,450g离心10分钟,弃上清液,把沉淀物悬浮于冷的0.25M蔗糖溶液,用蔗糖液及磷酸缓冲液清洗并冻干。以蒸馏水裂解虫体,通过50,000g离心提取抗原成分,再用磷酸缓冲液透析4℃过夜,此液蛋白质浓度调节到6mg/ml。该抗原可用作凝胶扩散试验。而白细胞粘连抑制试验的抗原,则用TC_(109)媒质透析。通过凝胶扩散试验测定病人体液免疫反应。白细胞粘连抑制试验采用Rutherford等方法,将脱纤维血液与大分子葡聚糖混合,380g离心5分钟收集白细胞,并用消毒蒸馏水溶解残存红细胞后用生理盐水和     

鼠疟原虫裂殖体或特异性抗原的保护性单克隆抗体

本文报道了用杂交瘤技术制备约氏疟原虫裂殖体特异性抗原的单克隆抗体。取约氏疟原虫免疫BALB/c小鼠的脾细胞与一株P_3-NS1/1-Ag4-1骨髓瘤细胞融合,融合细胞分入组织培养基中选择培养,10天后,用间接免疫荧光法(IIF)检测培养上清液中的约氏疟原虫特异性抗体,进行初筛。在143份培养中发现38份阳性,其中20个培养中有受染红细胞膜的抗体,另18份有原虫的抗     

肝片吸虫成虫体外培养代谢抗原的研究

作者用肝片吸虫成虫体外培养法,制成代谢抗原,并用琼脂免疫扩散试验及酶联免疫吸附试验(ELISA)测定该抗原与实验感染的兔、大鼠、羊血清的血清反应;同时研究了抗原组分及其与不同宿主血清的各种反应。抗原制备:(1)全代谢抗原:从实验感染的羊胆管内移取肝片吸虫成虫约100条,在无菌条件下放入装有21199培养基的连     

JMH血型抗原研究进展

正JMH血型抗原是1984年发现的,抗原名取自于先证者John Milton Hagen(约翰·密尔顿·哈根)名字。该系统当时只发现有1个抗原,后来陆续共发现了有5个抗原。到2019年国际输血协会(ISBT)重新确认该系统有7个抗原。本文就JMH抗原在近几年来研究的新进展,做一简略介绍。1基因JMH抗原的基因位点在15号染色体长臂2     

溶组织内阿米巴的半乳糖特异性粘连凝集素对长爪沙鼠阿米巴肝脓肿的保护作用

以长爪沙鼠为阿米巴肝脓肿实验动物模型,取7～9wk龄的雄性长爪沙鼠,用无菌培养的溶组织内阿米巴、以抗溶组织内阿米巴的单克隆抗体作亲和层析纯化其半乳糖特异性凝集素抗原,用10μg凝集素乳化于福氏完全佐剂中,作腹腔内或皮内注射进行免疫,继于2wk和4wk用10μg加福氏不完全佐剂各加强免疫1次,另设对照,只注射福氏完全佐剂或不完全佐剂。免疫后6wk,免疫组与对照组长爪沙鼠肝内注射5×10~5个无菌培养的溶组织内阿米巴(HMI-IMSS株)滋养体,攻击后2wk剖杀沙鼠检查肝脓肿。     

用人和猴的血孢子虫抗原检验人疟原虫萤光抗体的灵敏度

为了观察疟原虫(恶性疟、P.fieldi、P.cynomolgi langur和Hepatocystis kochi)抗原进行萤光抗体试验(IFA)时的交叉反应,作者用以下方法制备4种抗原玻片:用P.fieldi和P.cynomolgi虫株实验感染切脾的南非小猴,在裂殖增殖前8天内感染上升期采血制成薄的抗原涂片(原虫密度为每个高倍视野5个以上)。恶性疟抗原取自带虫的人体胎盘,将胎盘的母体面纵切开,在无菌的pH7.2磷酸缓冲盐水中榨出内容物,将血—磷酸缓冲盐水混合液以2,500转/分离心10分钟,弃去上清液,然后将沉积的细胞混悬     

阿米巴病的细胞免疫反应

对阿米巴抗原的细胞间质免疫反应的研究极少,曾报道用淋巴细胞转化试验、移动抑制因子和皮肤试验等,前法在急性病例大都阳性,后两法阳性甚少。研究对象为9例急性阿米巴肝脓肿患者,1例化脓性肝脓肿患者和1例肝癌患者。6名正常人作为对照。阿米巴肝脓肿的诊断是以临床表现、特有的脓肿脓液和抗阿米巴化疗后好转为依据。以无菌培养的溶组织内阿米巴Hk-9株为抗原(所用浓度为100