鹿茸多肽对鱼藤酮致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其机制

目的:探讨鹿茸多肽对鱼藤酮诱导的神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的干预作用及相关机制。方法:用0.5μmol·L~(-1)的鱼藤酮作用于SH-SY5Y细胞建立帕金森病(PD)体外模型,设置空白组、模型组、鹿茸多肽高、中、低剂量(150,100,50 g·L~(-1))组及雷帕霉素组。通过苏木精-伊红(HE)染色,罗丹明123(Rh123)染色,2',7'-二氯荧光黄二乙酸酯(DCFH-DA)染色及免疫组织化学染色观察各组细胞中路易小体的数量、线粒体膜电位的变化、活性氧簇(ROS)含量及α-突触核蛋白(α-syn),蛋白激酶B(Akt),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达情况。结果:HE染色结果显示,与空白组比较,模型组中细胞数目减少、触角结构变钝,形态变圆,胞质内可见嗜酸性路易小体。与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中、低剂量组中细胞形态并无明显差异,但是胞质中路易小体较少;罗丹明123染色结果显示,与空白组比较,模型组中细胞线粒体膜电位明显升高(P0.05)。与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中、低剂量组中细胞线粒体膜电位均有所下降(P0.05);DCFH-DA染色结果显示,与空白组比较,模型组细胞中活性氧(ROS)含量明显增多(P0.05);与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中、低剂量组的活性氧(ROS)含量均下降(P0.05)。免疫组织化学结果显示,与空白组比较,模型组α-syn,Akt,mTOR蛋白表达明显增多(P0.05);与模型组比较,雷帕霉素组及鹿茸多肽高、中剂量组α-syn,mTOR蛋白表达均明显减少(P0.05),雷帕霉素组及鹿茸多肽高剂量组中Akt表达明显减少(P0.05)。结论:鹿茸多肽可能是通过抑制Akt/mTOR信号通路促进α-syn的降解,从而发挥神经元保护作用。     

大承气汤通过内源性抗菌肽mCRAMP对脓毒症小鼠肠屏障的保护作用及机制

目的 采用分子对接和体内动物实验探讨大承气汤对脓毒症小鼠肠屏障的保护作用及分子机制。方法 采用文本挖掘方法筛选大承气汤的活性成分，利用AutoDock Tools和Discovery Studio分子对接软件研究其关键活性成分与脓毒症主要作用靶点紧密连接蛋白-1（Claudin-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、抗菌肽（mCRAMP）、Toll样受体4（TLR4）和髓样分化因子88（MyD88）的相互作用。动物实验采用C57BL/6小鼠50只，每组10只，随机分成5组，分别为假手术组、模型组、大承气汤低、高剂量（4、8 g?kg^-1）组和乌司他丁（50 000 U?kg^-1）组。造模前、手术当天和术后，各组给予相应的药物进行干预。除假手术组外，其余各组小鼠均采用盲肠结扎穿刺法（CLP）制备脓毒症模型。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清D-乳酸水平，评估肠黏膜通透性；采用苏木素-伊红（HE）染色法观察回肠组织病理变化，评估肠黏膜损伤程度及炎症浸润；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠回肠组织Claudin-1和Occludin蛋白表达水平，评估肠机械屏障功能；采用ELISA检测小鼠回肠组织TNF-α和IL-6水平，评估肠道炎症水平；采用免疫组化法（IHC）观察回肠组织mCRAMP蛋白表达；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠回肠组织内mCRAMP、TLR4和MyD88的基因表达水平，探讨大承气汤对脓毒症小鼠肠屏障的保护机制。结果 分子对接结果表明，采用文本挖掘方法所筛选出的10个大承气汤活性成分中多数与脓毒症靶点具有结合活性，主要通过范德华力、氢键和其他共轭体系相连。动物实验结果表明，与模型组比较，大承气汤低、高剂量组小鼠血清D-乳酸水平显著降低（P<0.01）；回肠组织损伤、黏膜水肿减少，小肠绒毛完整性较好，炎症细胞浸润减少；回肠组织Claudin-1蛋白表达水平显著升高（P<0.01）；回肠组织IL-6水平显著降低（P<0.01）；回肠组织mCRAMP蛋白和mRNA表达水平显著升高（P<0.01）；回肠组织TLR4和MyD88 mRNA表达水平显著降低（P<0.01）；大承气汤高剂量组小鼠回肠组织TNF-α水平显著降低（P<0.01）和Occludin蛋白表达水平显著升高（P<0.01），大承气汤低剂量组小鼠回肠组织Occludin蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论 大承气汤对脓毒症小鼠肠屏障具有保护作用，其可减轻肠组织炎症水平，修复肠黏膜损伤，提高肠紧密连接蛋白水平，降低肠黏膜通透性，作用机制可能与内源性抗菌肽mCRAMP蛋白和基因表达的增加及其下游TLR4/MyD88炎症通路基因的下调有关。     

黄芩素对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制研究进展

<正>糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病微血管常见并发症之一,美国及西欧等国家统计资料表明DN已上升为终末期肾脏病(end stage renal disease,ESRD)首位病因。目前,我国DN发病率亦呈上升趋势。因此,进一步探索其发病机制及开发新的防治DN的药物意义深远。黄芩为唇形科植物Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根,味苦性寒,具有清热燥湿、泻火解毒功效,临床用于治疗呼吸道感染、急性菌痢、病毒性肝炎等。黄芩素是黄芩的主要活性成分之一,具有抗炎、抗变态反应、抗氧化应激、抗肿瘤、抗血栓形成和保护肝脏、心脑血管、神经元等多种生物学作用[1]。研究表明黄芩素对DN有一定的防治作用,笔者就近年来国内外的研究现状作一综述。     

基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨毛果鱼藤提取物抗痛风作用及机制

目的 通过网络药理学分析结合体内、外实验验证，探究毛果鱼藤对痛风的改善作用及机制。方法 利用数据库获取毛果鱼藤的化学成分及其候选靶标，通过蛋白质互作和网络分析，筛选毛果鱼藤治疗痛风的关键网络靶标和潜在活性成分，并进行生物功能富集及通路分析；小鼠腹腔注射次黄嘌呤复制高尿酸血症模型，观察毛果鱼藤醇提取物对高尿酸血症及正常小鼠尿酸水平的影响；大鼠足跖注射微晶型尿酸钠结晶，复制痛风性炎症模型，观察毛果鱼藤醇提物对痛风性炎症的影响；二甲苯诱导急性炎症模型，观察毛果鱼藤醇提物的抗炎作用；热板法、扭体法观察毛果鱼藤的镇痛作用。脂多糖诱导RAW264.7细胞复制体外炎症模型，观察毛果鱼藤醇提物对相关信号通路的影响。结果 通过构建毛果鱼藤-成分-痛风疾病靶点网络及分子对接分析，获得毛果鱼藤治疗痛风的12个关键网络靶标和15个潜在活性成分，发现其可以通过大黄素、白桦脂酸、美迪紫檀素等成分作用于Toll样受体4（TLR4）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）、核转录因子-κB（NF-κB）等靶点发挥抗高尿酸血症、抗炎、镇痛等作用。与正常组比较，模型组小鼠血清尿酸水平显著增高（P<0.01）、大鼠肿胀度显著增高（P<0.05，P<0.01）、小鼠耳廓肿胀度降低（P<0.05）、小鼠扭体次数显著减少（P<0.05，P<0.01）、小鼠热板痛阈显著提高（P<0.05），细胞中TLR4 mRNA水平、TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达及细胞上清中TLR-4、NF-κB水平显著升高（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，毛果鱼藤醇提物（20、10、5 g·kg^-1）可以显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平（P<0.01），抑制大鼠足跖肿胀（P<0.05，P<0.01），降低细胞中TLR4 mRNA水平，降低细胞中TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达及降低细胞上清中TLR4、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、NF-κB、白细胞介素-6（IL-6）的水平（P<0.05，P<0.01）。结论 毛果鱼藤醇提物具有明显的抗痛风作用，作用机制可能与其对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响有关。     

商陆皂苷对脂多糖诱导的小鼠乳腺炎的影响

目的:探究商陆皂苷对脂多糖诱导的小鼠乳腺炎的效果及作用机制。方法:将BALB/c雌性小鼠随机分成正常组、模型组、地塞米松组(DEX,5. 0 mg·kg-1)和商陆皂苷给药组(50,25,12. 5 mg·kg-1),采用脂多糖(LPS)诱导产后雌小鼠(BALB/c)乳腺炎模型,分析小鼠乳腺组织的病理情况和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性水平;测定乳腺组织中炎症因子的含量及氧化应激水平;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)评估商陆皂苷对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白的影响。结果:与正常组比较,模型组的乳腺组织中有充血和瘀血等典型的乳腺炎变化,MPO水平升高,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平显著升高(P0. 01);与LPS模型组比较,各商陆皂苷组能够显著改善小鼠乳腺组织的炎性损伤,降低嗜中性粒细胞的分泌,降低MPO的活性,促炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6的表达水平也明显下调,;升高超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)酶活力,同时降低丙二醛(MDA)的水平(P0. 05,P0. 01),降低TLR4/NF-κB信号通路蛋白的表达(P0. 05,P0. 01)。结论:商陆皂苷对脂多糖诱导的小鼠乳腺炎损伤有保护作用,其可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路蛋白的表达有关。     

黄芩素对帕金森病的神经保护作用

黄芩素是从传统中药黄芩的干燥根中提取的黄酮类化合物,具有抗炎和抗氧化作用。随着其作用机制的不断研究,近些年发现黄芩素在帕金森病等神经系统退行性疾病的临床症状改善和神经保护方面也有一定的效果。目前研究发现其神经保护机制与抗炎,抑制氧化应激,保护线粒体,拮抗谷氨酸神经毒性,神经生长因子样作用以及抑制α-synuclein聚集等密切相关。该文从黄芩素对帕金森病的神经保护方面进行综述。     

基于TLR2/TLR4探讨脑心通胶囊干预“脑损及心”的作用机制

目的 采用急性脑缺血后引起心肌损伤模拟“脑损及心”病理过程,以Toll样受体（TLR）2/TLR4为切入点,探讨脑缺血状态下脑心通胶囊干预“脑损及心”的作用机制。方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、脑心通胶囊组和金纳多组。采用大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立小鼠脑缺血模型。通过对小鼠神经行为学评分、脑梗死面积、神经元损伤、细胞凋亡、离子钙结合适配器分子1（Iba-1）阳性小胶质细胞比率及血清中氨基端前脑钠素（NT-proBNP）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）及乳酸脱氢酶（LDH）进行分析,评价脑心通胶囊对小鼠脑缺血后心脑损伤的药效作用。通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠大脑和心脏中TLR2/TLR4蛋白的表达水平。结果 与假手术组比较,模型组小鼠脑梗死面积与神经行为学评分,细胞凋亡率、Iba-1阳性小胶质细胞比率、血清中NT-proBNP、CK-MB及LDH含量显著上升（P<0.01）。与模型组比较,脑心通胶囊能够显著降低小鼠脑梗死面积与神经行为学评分,细胞凋亡率、Iba-1阳性小胶质细胞比率（P<0.01）及血清中NT-proBNP与CK-MB含量（P<0.05）。Western blot结果表明,在脑缺血状态下,脑心通能够明显降低小鼠大脑组织中TLR2（P<0.05）及心脏组织中TLR2与TLR4的表达水平（P<0.05,P<0.01）。结论 脑缺血后会引起心肌损伤,反映“脑损及心”的病理过程,脑心通胶囊可显著改善脑缺血后脑损伤和心肌损伤,实现“脑心同治”,而TLR2/4是脑心通胶囊干预“脑损及心”的作用途径之一。     

黄芩素通过调控cAMP-PKA-NF-κB/CREB通路改善人脑小胶质细胞的炎性反应北大核心CSCD

该文旨在研究黄芩素(baicalein,BAI)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脑小胶质细胞(HMC3)的影响,从抑制炎性反应的角度,并基于调控cAMP-PKA-NF-κB/CREB通路,阐释BAI用于治疗缺血性脑卒中的潜在作用机制,对中药治疗脑缺血疾病具有借鉴意义。该实验首先筛选了BAI的安全用药浓度,再采用LPS诱导HMC3细胞24 h的方法制作细胞炎性模型,将分组设定为control组,model组,BAI高、中、低剂量(5、2.5、1.25μmol·L^(-1))组。分别测定细胞提取物中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量以及细胞上清液中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的含量,用Wes-tern blot法观察蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(phosphory cAMP-response element binding protein,p-CREB)、核因子-κB p65(nuclear factor kappaB p65,NF-κB p65)的表达,用Hoechst 33342/PI染色法观察LPS诱导后细胞凋亡的情况。在机制探讨过程中采用BAI高、低剂量作为给药组。实验结果显示,BAI在10μmol·L^(-1)及以下的浓度对正常培养的HMC3细胞无影响;200 ng·mL^(-1)的LPS诱导24 h后可以降低HMC3细胞的SOD酶活力并提高MDA的含量,BAI在5、2.5、1.25μmol·L^(-1)的浓度下均能显著提高SOD酶活力,并在5μmol·L^(-1)的浓度下均能显著降低MDA含量;细胞形态结果显示,BAI可以改善因LPS诱导所致的HMC3细胞向M1型转变;ELISA检测的结果显示,BAI能使细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、cAMP的含量显著降低;Western blot结果显示,BAI能够提高PKA和p-CREB的蛋白表达,降低NF-κB p65的表达;Hoechst 33342/PI染色结果显示,BAI能够减少HMC3细胞的凋亡情况。以上结果表明,BAI对LPS诱导的HMC3细胞具有保护作用,能够抑制炎性反应和改善细胞凋亡的情况,这可能与调控HMC3细胞上cAMP-PKA-NF-κB/CREB通路有关。     

4＇-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究

目的探讨4’-甲醚-黄芩素（4-MS）对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法，体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度（10、20、40mg／L）的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用，呈剂量依赖，作用72h后其增殖抑制率分别为（14.14±0.75）％、（34.34±2.99）％、（61.11±2.99）％（P〈0.01）；4-MS作用72h后细胞内Ca^2＋浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0，与对照组相比差异有显著性（P〈0.05）。40mg／L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为（2.36±0.19）％、（4.22±2.44）％、（7.34±0.56）％，明显高于对照组（P〈0.01）。20、40mg／L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01，明显低于对照组（P〈0.01）。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖，诱导凋亡，其机制与提高细胞内Ca^2＋浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。     

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??Many neurodegenerative diseases are closely linked with neuroinflammation, microglia is one of the important participants, which plays an important role in physiological and pathological states. Therefore, inhibiting the excessive activation of microglia will be the potential drug targets of control neuroinflammation. Recent studies have found resveratrol in the central nervous system have a neuroprotective effect, which related to the inhibition of microglia activation and control of neuroinflammation. In this study, its possible mechanisms will be reviewed.     

海康灵含药血清在体外对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

 目的观察海康灵含药血清(HKL-serum)对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞过氧化氢(H₂O₂)损伤模型。通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,检测HKL-serum对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。结果同造模组比较,10%,15%HKL-serum能减轻H₂O₂引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率,减少LDH的释放量。结论结果显示,HKL-serum对SH-SY5Y神经细胞损伤具有明显的保护作用。     

异甘草素对氢过氧化枯烯所致神经母细胞瘤损伤的影响

目的 研究异甘草素(ISL)对氢过氧化枯烯(cumenehydroperoxide,CHP)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y氧化损伤的影响.方法 ISL处理体外培养的SH-SY5Y细胞24 h后,添加不同浓度的CHP继续培养24 h,进行细胞形态观察、细胞活力和细胞凋亡检测、细胞内活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量测定.结果 CHP引起并促进人神经母细胞瘤SH-SY5Y氧化损伤,ISL可拮抗CHP所致的细胞的凋亡,降低CHP所致的ROS水平和MDA含量的增高.结论 ISL抑制脂质过氧化物的产生并降低细胞凋亡率,对人神经母细胞瘤SH-SY5Y氧化损伤有保护作用.     

没食子酸丙酯对H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响及其作用机制

目的 探讨没食子酸丙酯（propyl gallate,PG,赤芍801）对H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）氧化损伤的影响及其作用机制。方法 将SH-SY5Y细胞均分为对照组、H2O2模型组、PG1组、PG2组和PG3组,对照组常规加入DMEM/F12培养液培养;H2O2模型组加入H2O2 200 μmol·L-1;PG1组加入PG 20 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1;PG2组加入PG 40 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1;PG3组加入PG 80 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1。比较5组SH-SY5Y细胞的增殖活性,细胞培养物上清中8-OHdG,细胞内ROS、LDH释放量,Hoechst 33258染色结果、细胞周期变化情况及Caspase-3酶活性。结果 H2O2模型组细胞存活率显著低于对照组,细胞培养物上清中8-OHdG水平显著高于对照组,ROS水平显著高于对照组,LDH释放量显著高于对照组,具有非常显著性差异（P＜0.01）;PG1组、PG2组和PG3组细胞存活率均显著高于H2O2模型组,细胞培养物上清中8-OHdG水平均显著低于H2O2模型组,ROS水平均显著低于H2O2模型组,LDH释放量均显著低于H2O2模型组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;PG可显著改善SH-SY5Y细胞凋亡情况,且具有剂量依赖关系;H2O2模型组G0/G1期百分率显著高于对照组,S期、G2/M期和PI均显著低于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;PG2组、PG3组G0/G1期百分率显著低于H2O2模型组,S期、G2/M期和PI均显著高于H2O2模型组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;H2O2模型组Caspase-3酶活性显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;PG2组和PG3组Caspase-3酶活性显著低于H2O2模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PG在一定剂量范围内对H2O2诱导的SH-SYSY神经细胞损伤具有明显的保护作用,其保护效应可能与清除ROS,减轻DNA氧化损伤,抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。     

地黄饮子对能量障碍致SH-SY5Y细胞内质网应激的保护作用

目的:以葡萄糖剥夺致能量代谢障碍SH-SY5Y细胞为模型,探讨地黄饮子药物血清通过调节蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase r-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,e IF2α)通路改善能量代谢障碍致SH-SY5Y细胞内质网应激的作用机制。方法:以成人临床用药量10倍剂量对SD大鼠灌胃给药,制备地黄饮子药物血清。SH-SY5Y细胞葡萄糖剥夺处理6 h后,分别以0,1.25%,2.5%,5%,10%地黄饮子含药血清孵育。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PERK,e IF2α磷酸化水平,B淋巴细胞瘤-2(Bcell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)表达水平。Annexin V/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:与模型组比较,地黄饮子药物血清能显著提高葡萄糖剥夺SH-SY5Y细胞的存活率(P0.01),明显减少PERK和e IF2α磷酸化激活(P0.05,P0.01),提高Bcl-2水平和降低Bax表达量(P0.05,P0.01)。抑制能量代谢障碍SH-SY5Y细胞凋亡率(P0.01)。结论:地黄饮子可以减少PERK/e IF2α通路的激活,抑制能量代谢障碍致内质网应激造成的细胞凋亡。     

丁香脂素对谷氨酸钠诱导的SH-SY5Y细胞兴奋性损伤的保护作用

目的:基于谷氨酸钠诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞损伤构建的模型,观察从枫香槲寄生中提取得到丁香脂素的保护,并探讨其作用机制。方法:采用谷氨酸钠构建SH-SY5Y细胞损伤模型,实验分为正常组,损伤模型组(谷氨酸钠50 mmol·L~(-1),谷氨酸钠50 mmol·L~(-1)+DMSO),丁香脂素组(6. 25,12. 5,25μmol·L~(-1)),通过细胞计数法,细胞形态学观察,Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测、活性氧(ROS)检测、线粒体膜电位以及蛋白免疫印迹法(Western blot)等方法,评价丁香脂素对谷氨酸钠诱导的神经兴奋性损伤的神经保护活性。结果:与正常组比较,模型组的细胞存活率明显降低(P 0. 01),ROS显著升高(P 0. 01),线粒体膜电位显著降低(P 0. 01),聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP),PARP1蛋白表达显著降低(P 0. 01),细胞的凋亡率显著增大(P 0. 01);与模型组比较,丁香脂素组(6. 25,12. 5,25μmol·L~(-1))呈浓度依赖性增加细胞的存活率(P 0. 01),减少ROS的积累(P 0. 01),显著恢复线粒体膜电位的变化(P 0. 01),显著上调PARP,PARP1蛋白(P 0. 01),显著降低细胞凋亡率(P 0. 01)。结论:提示丁香脂素对谷氨酸钠诱导的SH-SY5Y神经细胞的兴奋性损伤具有显著的保护活性,其作用机制可能是通过抗氧化应激,修复线粒体功能及DNA损伤等通路来显著降低谷氨酸钠诱导的神经细胞凋亡。     

芦丁对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的:研究芦丁对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤模型,实验分为空白组,MPP+损伤模型组,芦丁干预组。模型组用1 mmol·L-1MPP+处理细胞48 h,干预组在MPP+损伤基础上,给予不同质量浓度芦丁(50,100,200,300 mg·L-1)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;Hoechst 33342染色观察细胞核形态变化;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针标记法观察细胞内活性氧(ROS)的变化;流式细胞仪检测线粒体膜电位;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞色素C(Cyt-C)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组中细胞活性显著降低(P0.01),Hoechst 33342染色下可见细胞胞体变小、核皱缩,细胞ROS显著升高(P0.01),线粒体膜电位显著降低(P0.01)。Western blot结果表明,模型组Cyt-C含量升高(P0.01),p-ERK1/2水平降低(P0.01)。与模型组比较,预先4 h给予不同浓度的芦丁(100,200,300 mg·L-1)能明显改善SH-SY5Y细胞的活性(P0.05,P0.01),抑制ROS升高(P0.01),并恢复线粒体膜高能电位(P0.05)。Western blot结果显示,芦丁能够抑制MPP+引起的Cyt-C蛋白升高(P0.01)和p-ERK1/2蛋白降低(P0.05,P0.01)。结论:芦丁对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有显著的保护作用,其机制可能与抗氧化应激有关。     

排风藤生物碱对H2O2致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的：探讨排风藤生物碱成分对H2O2所致人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞系氧化损伤的保护作用。方法：体外培养的SH-SY5Y细胞加入10、20、30、40、50μg/mL的排风藤生物碱成分孵育24h后,加入800μmol/L H2O2作用8h,MTT法检测细胞存活率。结果：排风藤生物碱成分氯仿部位3、正丁醇部位及沉淀部位能够明显提高H2O2损伤的SH-SY5Y细胞存活率,其中正丁醇部位效果最为明显,与模型组相比细胞存活率提高了39.59%。结论：排风藤生物碱成分对H2O2所致SH-SY5Y细胞氧化应激损伤具有明显的保护作用。