补阳还五汤对多因素整合诱导“气虚血瘀”肺动脉高压大鼠的干预作用

目的:观察多因素诱导"气虚血瘀"型肺动脉高压大鼠肺组织中的肺血流动力学及肺血管重建,探讨补阳还五汤治疗"气虚血瘀"型肺动脉高压的作用机制。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分为空白对照组(C组)10只及造模组30只,均在SPF环境饲养;模型组进行"气虚血瘀"型肺动脉高压造模;再将造模组分为3组,每组10只;分别于制模后14 d,灌胃相应药物,连续用药15 d。肺动脉插管法测定平均肺动脉压(mPAP)、右心室收缩压(RVSP),计算右心肥厚指数(RVHI);处死动物后,观察各组大鼠肺组织病理改变并计算中膜厚度比(WT)和中膜面积比(WB)。结果:模型组大鼠肺动脉血管增厚,炎性浸润,WT,WB,mPAP,RVSP,RVHI高于空白对照组显著增加(P0.01);补阳还五汤组及硝苯地平组与模型组比较,均能改善肺动脉血管增厚、炎性浸润,降低WT及WB,mPAP,RVSP,MAP,RVHI(P0.01),但仍高于空白对照组(P0.01)。结论:补阳还五汤可以改善肺动脉高压大鼠的肺血流动力学、右心室肥厚程度及肺组织病理改变,能部分逆转肺血管结构重建,有效降低肺动脉高压。     

基于 PPAR-γ/NF-κB 信号通路探讨肺心汤对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠模型的作用及机制

目的 基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ/核因子κB(PPAR-γ/NF-κB)信号通路探讨肺心汤(黄芪、桃仁、红花、葶苈子、赤芍等)对野百合碱诱导肺动脉高压(PAH)大鼠模型的作用及机制。方法 将48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西地那非组(0.025 g·kg^-1)及肺心汤低、中、高剂量组(11.7、23.4、46.8 g·kg^-1)。采用单次腹腔注射野百合碱溶液(60 mg·kg^-1)构建PAH大鼠模型。造模1 h后开始灌胃给药,每日1次,连续28 d。检测各组大鼠的血流动力学及超声心动图指标：右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(m PAP)、右心肥厚指数(RVHI)、肺动脉加速时间(PAAT)、肺动脉射血时间(PET)、三尖瓣环缩期位移(TAPSE)、右心室舒张末期内径(RVIDd)和右心室前壁厚度(RVAWT);采用HE染色法观察肺小动脉病理改变;免疫荧光法检测大鼠肺动脉中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;ELISA法检测血浆白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水...     

苦豆碱对大鼠肺动脉高压的保护作用及其抗氧化机制

目的探究苦豆碱对野百合碱致大鼠肺动脉高压的作用及其机制。方法通过野百合碱60 mg/kg皮下注射建立肺动脉高压模型。模型建立后开始灌胃给予大鼠苦豆碱,持续21 d。在实验终点时检测大鼠平均肺动脉压力(m PAP)、右心室肥厚指数(RVHI)及肺小动脉病理变化;比色法检测SOD、MDA、GSH-Px、T-AOC、CAT水平;Western blot检测肺组织NADPH氧化酶2(NOX2)、NOX4蛋白表达。结果苦豆碱可以降低肺动脉高压大鼠的mPAP、RVHI,逆转其肺小动脉病理变化,降低其MDA及NOX2、NOX4表达,提高SOD、GSH-Px、T-AOC、CAT水平。结论苦豆碱可对抗野百合碱诱导的肺动脉高压,其机制可能与抗氧化作用有关。     

基于Notch信号通路探究葛根素对肺动脉高压小鼠治疗作用机制研究

目的 观察葛根素(puerarin, Pur)对肺动脉高压小鼠的治疗作用并探究其作用机制。方法 40只SPF级C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和Pur组(200 mg/kg)和Pur+DATP(Notch信号通路抑制剂)组,模型组、Pur组和Pur+DATP组小鼠建立缺氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension, HPH)模型,对照组小鼠在常规环境饲养,每周称量体质量。末次给药后2 h检测小鼠心功能和肺动脉血流变化,计算右心室肥厚指数(RVHI), HE染色观察肺血管重构情况,Masson染色观察肺血管纤维化情况,试剂盒检测肺组织SOD、MDA、GSH-Px、CAT和T-AOC水平,Western blot法检测肺组织Jagged-1、Notch-3、Hes-5蛋白表达水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠状态较差,肺动脉血流速度降低,右心室功能减弱,RVHI值升高,肺小动脉重构和胶原纤维沉积明显,肺组织SOD、GSH-Px、CAT和T-AOC水平降低,MDA水平升高,Jagged-1、Notch-3、Hes-5蛋白表达水平升高。与模型组比较,...     

川芎嗪对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的:观察川芎嗪对野百合碱(MCT)引起的肺动脉高压大鼠肺动脉压力及肺血管重构的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为3组各10只。MCT组和治疗组建立大鼠肺动脉高压模型。对照组、MCT组以生理盐水灌胃,每天2 mL,每天1次,连续20天;治疗组以川芎嗪80 mg/(kg·d),每天灌胃1次,连续20天。检测平均肺动脉压力(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、肺血管增殖细胞核抗原(PCNA)和α-平滑肌肌动蛋(α-SMA)的表达。结果:对照组大鼠的mPAP低于MCT组(P0.01);治疗组、对照组大鼠的mPAP、RVHI较MCT组降低(P0.01);MCT组肺血管PCNA及α-SMA表达较治疗组、对照组增加。结论:川芎嗪可降低MCT引起的肺动脉高压大鼠肺动脉压力,减轻大鼠肺动脉重构。     

半边莲生物碱对肺动脉高压模型大鼠肺血管重构的影响

目的:观察半边莲生物碱对野百合碱(MCT)致肺动脉高压(PAH)模型大鼠肺血管及右心室重构的影响。方法:MCT一次性腹腔注射60 mg/kg体质量复制PAH模型大鼠,一周后给予半边莲生物碱灌胃,灌胃4周后,观察大鼠右心室肥厚指数(RVHI)、右心室质量指数(RVMI)以及肺小动脉形态学变化。结果:半边莲生物碱可显著降低PAH模型大鼠RVHI和RVMI以及肺小动脉管壁厚度,使管腔内径扩大。结论:半边莲生物碱早期干预后MCT致PAH模型大鼠肺小动脉和右心室的重构明显受到了抑制。     

中医综合疗法辅助肝动脉灌注治疗晚期原发性肝癌43例

目的：探讨肉苁蓉苯乙醇苷对高原肺动脉高压大鼠肺血流动力学的影响。方法：Wistar大鼠72只,随机分为正常对照组12只及造模组60只,正常对照组常压常氧SPF环境饲养;造模组模拟海拔5 000 m高原环境人工实验舱中饲养4周制备高原肺动脉高压模型。再随机将造模组分为模型组,大花红景天组（1.78 mL·kg^-1·d^-1）,肉苁蓉苯乙醇苷低中高剂量组（75 ,150,300 mg·kg^-1·d^-1）,每组12只。第5周开始正常对照组、模型组灌胃给予生理盐水,各治疗组按计量灌胃给药28 d,每日1次,给药体积10 mL·kg^-1。主动脉插管法测定平均动脉压（MAP）,直接法测定平均肺动脉压（mPAP）,右心室收缩压（RVSP）,计算右心肥厚指数（RVHI）,观察各组大鼠肺组织病理改变并计算中膜厚度比（WT）和中膜面积比（WB）。结果：模型组肺动脉血管增厚度,炎性浸润,WT,WB,mPAP,RVSP,RVHI较正常对照组显著增加（P<0.01）;大花红景天及肉苁蓉苯乙醇苷低中高剂量组与模型组相比均能改善肺动脉血管增厚、炎性浸润,降低WT及 WB,mPAP,RVSP,MAP,RVHI（P<0.01）,但仍高于正常对照组（P<0.01）。结论：肉苁蓉苯乙醇苷可以改善高原肺动脉高压大鼠的肺血流动力学、右心室肥厚程度及肺组织病理改变,具有一定治疗高原肺动脉高压的作用。     

黄芪甲苷对博来霉素肺纤维化模型小鼠miR-29b及其相关因子表达的影响

目的 基于微小核糖核酸29b(MicroRNA-29b,miR-29b)探讨黄芪甲苷对博来霉素肺纤维化模型小鼠的干预作用。方法 将40只小鼠随机分为空白组、模型组、miR-29b组、miR-29b阴性对照药组(简称NC组)和黄芪甲苷组,每组8只。博来霉素气道滴入建立肺纤维化模型。干预用药28天后取血清及肺组织,用HE和Masson染色法观察肺组织病理变化;碱水法检测肺组织羟脯氨酸含量; Elisa检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平; PCR检测转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、smad3蛋白(mothers against decapentaplegic homolog 3,smad3)、miR-29b基因表达;Western-blot检测TGF-β1、smad3蛋白、磷酸化smad3蛋白(phosphorylated mothers against decapentaplegic homolog 3,P-smad3)表达。结果 病理显示模型组出现肺纤维化改变,miR-29b组和黄芪甲苷组肺纤维化程度较轻。与空白组相比,模型组和NC组的羟脯氨酸升高、SOD含量减少,MDA和ROS含量增加,TGF-β1、P-smad3基因表达量明显升高,miR-29b基因表达量减少,TGF-β1、P-smad3蛋白含量升高(P 0. 05)。与模型组相比,黄芪甲苷组羟脯氨酸含量较低,SOD含量增加,MDA含量减少,miR-29b基因表达量增加,Smad3基因表达量减少,TGF-β1、P-smad3蛋白含量减少(P 0.05)。结论 黄芪甲苷可以减少肺组织羟脯氨酸含量,减轻胶原纤维沉积,具有抗纤维化作用,其作用机制可能与升高miR-29b水平,调节氧化应激反应和TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

基于JAK1/STAT3信号通路研究芪白平肺胶囊对COPD继发PAH大鼠的影响

目的：研究芪白平肺胶囊基于JAK1/STAT3信号通路对慢性阻塞性肺疾病（COPD）继发肺动脉高压（PAH）大鼠的影响。方法：将120只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、脾氨肽组、芪白平肺胶囊组,每组30只。建立COPD继发PAH大鼠模型。药物干预后观察大鼠的一般状态;检测大鼠肺功能指标;ELISA法检测大鼠血浆中白介素（IL）-1β、IL-6、γ-干扰素（IFN-γ）、血管内皮生长因子（VEGF）、结缔组织生长因子（CTGF）表达水平;右心导管法测定右心室压（RVSP）及平均肺动脉压（mPAP）;免疫组化检测肺组织中P-JAK1、P-STAT3蛋白含量;Western blot法检测肺组织中P-JAK1、P-STAT3蛋白表达水平。结果：与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6、IFN-γ、VEGF、CTGF表达水平及mPAP、RVSP显著升高（P<0.01）;肺功能指标FEV0.3、FEV0.3/FVC、FVC显著下降（P<0.01）;肺组织中P-JAK1、P-STAT3蛋白表达显著上调（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,脾氨肽组及芪白...     

芝麻素对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的:观察芝麻素(Ses)对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PH)大鼠肺血管重构的影响.方法:雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠48只适应性喂养1周,随机分为正常对照组、MCT组、Ses低、高剂量组(50,100 mg·kg-1),每组12只.MCT(60 mg·kg-1)皮下注射诱导PH大鼠模型.连续给药4周后,右颈外静脉插管测定大鼠右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(mPAP).分离大鼠右心室(RV)、左心室+室间隔(LV+S)并称重,剥离大鼠胫骨并测量其长度,计算RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值.HE染色观察肺小动脉病理学变化,Masson染色观察肺小动脉胶原沉积的变化.免疫组化检测肺动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.比色法测定肺动脉总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量.Real-time PCR和Western blot检测肺动脉collagen Ⅰ,NOX2及NOX4 mRNA和蛋白表达.结果:Ses连续给药4周后能明显降低MCT诱导的PH大鼠RVSP及mPAP,减轻RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值,降低肺动脉α-SMA,collagen Ⅰ表达、减轻肺血管及右心室重构.同时,Ses还能明显抑制肺动脉NOX2及NOX4的表达,降低其MDA含量及提高T-AOC水平.结论:Ses能够缓解MCT诱导的PH大鼠肺血管重构,其机制可能与抑制NOX2及NOX4的表达、进而降低氧化应激损伤有关.     

黄芪甲苷对特发性肺纤维化模型大鼠肺组织CD34表达的影响

目的:观察黄芪甲苷对特发性肺纤维化(IPF)模型大鼠肺组织CD34表达的影响,为其临床应用提供依据。方法:采用气管穿刺快速推注博来霉素法复制大鼠肺纤维化模型。将SPF级Wistar大鼠按照随机数字表法分为空白组,模型组,激素组,黄芪甲苷高、中、低剂量组,每组12只。造模后第2日起灌胃干预各组大鼠,于灌胃后第7、14、28天,采用免疫组化结合图像分析处理系统,比较CD34在各组大鼠肺组织中的表达。结果:模型组肺组织CD34的表达在7、14、28天较同期空白组增强(P0.05);黄芪甲苷组、激素组表达较同期模型组明显减弱(P0.01);黄芪甲苷高、中剂量组肺组织CD34的表达较激素组减弱(P0.05);低剂量组表达与激素组比较无差异(P0.05)。结论:黄芪甲苷可以抑制特发性肺纤维化模型大鼠肺组织CD34的表达,其干预效果与剂量及时间呈正相关。     

茶多酚对缺氧诱导的大鼠肺动脉高压及右心室肥厚的影响

目的:探讨茶多酚对缺氧诱导的大鼠肺动脉高压及右心室肥厚的干预作用。方法:24只SD大鼠随机均分为正常对照组、缺氧组和茶多酚组。缺氧前茶多酚组大鼠每日予茶多酚[200 mg/(kg·d)]灌胃,正常对照组和缺氧组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,随后茶多酚组和缺氧组大鼠置于常压低氧舱内间断缺氧4周(8 h/d,6 d/w)。4周后比较各组的平均肺动脉压(m PAP)、右心室肥厚指数(RVHI)及肺小动脉管壁厚度,比较肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡情况。结果:缺氧组大鼠的m PAP、RVHI及肺小动脉管壁厚度均比正常对照组显著升高(均P<0.01),且PASMCs凋亡明显减少(P<0.01);茶多酚组m PAP及RVHI与缺氧组相比均明显降低(P<0.05或P<0.01),肺小动脉管壁增厚程度减轻,而PASMCs凋亡明显增加(P<0.05)。结论:茶多酚能降低肺动脉高压大鼠的肺动脉压,促进肺动脉平滑肌细胞凋亡,改善右心室肥厚,具有抗肺动脉高压的作用。     

红景天苷对常压肺心病大鼠保护作用的研究

目的:研究红景天苷对常压慢性低O2诱发的肺动脉高压、肺心病的保护作用。方法:将SD大鼠50只随机分为正常对照组、低O2、低O2+红景天苷(低、中、高)组。采用图像分析、免疫组化技术,透射电镜等方法,检测各组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心指数、肺小动脉显微和超微结构,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。结果:低氧组mPAP、右心指数、肺小动脉显微结构指标:管壁面积/管总面积、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度、肺细小动脉中膜厚度较对照组明显升高,肺血管重建,肺小动脉Ⅰ型胶原表达增加。红景天苷可减轻上述改变,高剂量组尤为显著;但Ⅲ型胶原各组间无明显差别。结论:红景天苷可降低慢性低O2诱导的肺动脉高压,减轻肺血管结构重建,其机制与抑制肺动脉Ⅰ型前胶原增殖有关。     

黄芪甲苷对博来霉素诱导的小鼠特发性肺纤维化自噬和焦亡的影响

目的:探究黄芪甲苷对特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)小鼠自噬和焦亡的影响及其作用机制,为黄芪抗肺纤维化的研究治疗提供新思路。方法:C57bl/6小鼠随机分为4组,分别为假手术组、模型组、黄芪甲苷组和地塞米松组。小鼠模型行气管切开术,滴注博来霉素(BLM)诱导成模。黄芪甲苷组和地塞米松组每天分别灌胃黄芪甲苷(50 mg·kg-1)和地塞米松(0.125 mg·kg-1),假手术组和模型组每天予等量生理盐水。小鼠于14 d取材,通过组织病理学染色评估黄芪甲苷对IPF诱导的肺损伤的治疗作用,通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中,LC3Ⅱ,白细胞介素-1β(IL-1β),IL-18和半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)的水平以评估炎症反应程度和焦亡水平的表达水平。以苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)三色染色观察肺组织形态和胶原纤维的表达水平。免疫组化(IHC)及Western blot分析自噬和焦亡标记蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组肺组织炎症反应明显、胶原蛋白显著增加(P0.05),与模型组比较,黄芪甲苷组明显抑制肺组织炎症反应,下调胶原蛋白表达(P0.05)。IHC和Western blot检测结果均显示,黄芪甲苷能显著提高LC3Ⅱ蛋白表达(P0.05)同时抑制p62蛋白积累(P0.05),降低Caspase-1,IL-1β和IL-18蛋白表达(P0.05,P0.01)的表达水平。结论:黄芪甲苷治疗显着改善了BLM诱导的小鼠肺纤维化,其作用机制可能与抑制焦亡并增强自噬有关。研究表明黄芪甲苷在抑制肺纤维化方面具有的治疗潜力。     

黄芪甲苷对特发性肺纤维化模型大鼠肺组织碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响

目的:观察黄芪甲苷对特发性肺纤维化(IPF)模型大鼠肺组织碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)表达的影响,为其临床应用开发提供依据。方法:气管穿刺快速推注博来霉素法复制大鼠肺纤维化模型。将SPF级Wistar大鼠按随机数字表法分为空白组,模型组,激素组,黄芪甲苷高、中、低剂量组,每组12只。造模后第2日起,各组给予不同干预,分别于灌胃后第7、14、28天,采用免疫组化结合图像分析处理系统,比较b FGF在大鼠肺组织中的表达。结果:模型组肺组织b FGF的表达在7、14、28天较同期空白组增强(P0.05);黄芪甲苷组、激素组表达较同期模型组明显减弱(P0.05);黄芪甲苷高、中剂量组肺组织b FGF的表达较激素组减弱(P0.05);低剂量组表达与激素组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:黄芪甲苷可以抑制特发性肺纤维化模型大鼠肺组织b FGF的表达,其干预效果与剂量呈正相关。     

基于AKT/GSK3-β/SNAIL 通路探讨黄芪甲苷对心力衰竭心肌纤维化小鼠的保护作用

目的基于AKT/GSK3-β/SNAIL 通路探讨黄芪甲苷对心力衰竭（Heart Failure,HF）心肌纤维化小鼠的保 护作用。方法将40 只雄性C57BL/6J 小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲苷组（80 mg·kg-1）、曲西瑞宾 组（1 mg·kg-1,AKT 抑制剂）及黄芪甲苷（80 mg·kg-1）+SC79（5 mg·kg-1,AKT 激动剂）组,每组8 只。采用主动 脉弓缩窄术复制心力衰竭小鼠模型。模型复制前,曲西瑞宾组给予腹腔注射给药,每日1 次,连续1 周;模型 复制成功后,黄芪甲苷组给予灌胃给药,每日1 次,连续4 周;黄芪甲苷+SC79 组采用腹腔注射联合灌胃给 药,模型复制前腹腔注射SC79（5 mg·kg-1）每日1 次,连续1 周,模型复制成功后以黄芪甲苷（80 mg·kg-1）灌 胃,每日1 次,连续4 周。采用心脏彩超检测小鼠心功能,采集左心室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短 率（LVFS）;采用Masson 染色法检测小鼠心肌组织纤维化情况;采用天狼星红染色法检测小鼠血管及间质内胶 原纤维沉积情况;采用Western Blot 法检测小鼠心脏组织CD31、α-SMA、AKT、GSK3-β、pGSK3-β、SNAIL 蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF、LVFS 水平显著降低（P＜0.01）,心肌纤维化面 积显著增加（P＜0.01）,血管周围及间质的胶原纤维沉积显著增加（P＜0.01）,CD31 蛋白表达水平明显下 降（P＜0.05）,α-SMA、AKT、GSK3-β、pGSK3-β、SNAIL 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。与模型组比 较,黄芪甲苷组和曲西瑞宾组的上述各项检测指标均得到明显逆转（P＜0.05,P＜0.01）,黄芪甲苷+SC79 组的 指标变化均不明显（P＞0.05）。结论黄芪甲苷可能通过AKT/GSK3-β/SNAIL 通路抑制内皮间质转化,从而抑 制心肌纤维化,改善心力衰竭。     

黄芪对低氧性肺动脉高压大鼠肺组织血栓素A_2及肺血管结构的影响

目的:探讨黄芪对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺腺泡内肺动脉结构重建及肺组织血栓素(TXA2)的影响。方法:雄性Wistar大鼠21只,随机分为3组,每组7只。对照组:室内空气正常饲养;低氧组:在常压低氧舱内(10±0.5)%饲养;治疗组:缺氧+黄芪(12g/kg)。低氧30天分别用右心导管法测定肺动脉平均压(mPAP),放射免疫法测定肺组织中TXA2含量,计算MA、PMA、NMA比例及肺中、小肌型动脉相对中膜厚度(RMT)与相对中膜面积(RMA)。结果:低氧组mPAP、RVHI、TXA2含量较对照组明显升高(P<0.01或P<0.05),治疗组较低氧组明显减少(P<0.05)。低氧组肺小动脉肌化程度、RMT(%)、RMA(%)较对照组明显增多(P<0.01),治疗组较低氧组明显减少(P<0.01)。结论:慢性低氧可引起大鼠肺血管结构重建,黄芪注射液可降低肺组织TXA2含量,可部分逆转肺血管结构重建,降低肺动脉高压。     

黄芪注射液对肺纤维化小鼠肺组织上皮-间质转分化的影响

目的观察黄芪注射液对肺纤维化小鼠肺组织上皮-间质转分化(EMT)的影响,研究其对肺泡上皮细胞EMT过程的干预作用及可能机制。方法将30只实验小鼠随机平均为纤维化组、黄芪组、PBS对照组。纤维化组小鼠气管内灌注博莱霉素3 mg/kg;PBS对照组小鼠于气管灌注等量PBS;黄芪组小鼠给予气管灌注博莱霉素3 mg/kg,并且于实验造模后10 d腹腔注射黄芪注射液5 m L/kg,连续给药2周。实验第24天处死小鼠,肺组织切片行Masson染色观察肺组织病理改变,碱裂解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,ELISA法检测小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,Western blot法检测肺组织中上皮细胞标志物E-cadherin和间质细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达量。结果与纤维化组比较,黄芪组小鼠肺组织肺纤维化病理损伤明显减轻,胶原沉积减少;黄芪组小鼠肺组织中HYP含量和α-SMA蛋白表达量均明显低于纤维化组(P均<0.05),E-cadherin蛋白表达量明显高于纤维化组(P<0.05);黄芪组血清TNF-α和TGF-β1水平均明显低于纤维化组(P均<0.05)。结论黄芪注射液能下调TNF-α和TGF-β1表达,抑制肺泡上皮细胞EMT现象,从而改善博来霉素诱导的小鼠肺纤维化病理改变。     

黄芪甲苷对肾纤维化小鼠Toll/MyD88依赖性通路的作用研究

目的观察黄芪甲苷(astragaloside IV)对单侧输尿管结扎(UUO)小鼠肾组织纤维化程度的影响,探讨其作用机制。方法将雄性C57BL/6小鼠50只随机均分为假手术组,模型组,黄芪甲苷高、中、低剂量(50、30、10 mg/kg)组。除假手术组外,其余各组小鼠均行UUO术,从手术当天黄芪甲苷各组ig给药,连续14 d。检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,HE和Masson染色下光镜观察肾组织病理和胶原的沉积;免疫组化和Western blotting方法从蛋白水平观察各组肾脏中Toll/MyD88依赖信号通路相关分子(TLR4、TLR2、MyD88、TRAF-6、NF-κB、TNF-α、IL-6)的表达。结果模型组小鼠患侧肾脏的纤维化程度、病理损害最明显;Toll/MyD88依赖信号通路相关的分子的表达量最多。而随着黄芪甲苷组药物剂量的增加,小鼠肾脏损伤有明显改善,该信号通路相关因子(TLR4、TLR2、MyD88、TRAF-6、NF-κB)蛋白表达水平也在相应减少,且对该信号通路末端炎症因子TNF-α和IL-6的表达有抑制作用。结论黄芪甲苷可能通过抑制Toll/MyD88依赖信号通路及炎症因子TNF-α和IL-6的释放来改善小鼠UUO所致的肾纤维化。     

黄芪甲苷对肺纤维化小鼠VEGF/VEGFR2信号通路的影响

目的探讨黄芪甲苷对肺纤维化小鼠的影响及其机制是否与VEGF/VEGFR2信号通路有关。方法 80只雌性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、泼尼松组、黄芪甲苷组,每组20只。除空白组外,其它3组均采用鼻腔滴注博来霉素建立肺纤维化模型,在造模后第1天起,各组给予相应药物进行灌胃治疗,连续给药14天。在造模后的第7天、28天,分两批进行取材,用HE染色、Masson染色分别观察各组小鼠的肺泡炎及肺纤维化程度;采用RT-PCR法检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)mRNA表达。结果与模型组比较,第7天、28天黄芪甲苷治疗组小鼠的肺泡炎及肺纤维化程度减轻,肺组织的VEGF、VEGFR2 mRNA表达下降(P0.01或P0.05)。结论黄芪甲苷可通过降低VEGF、VEGFR2基因表达水平,来发挥抗肺纤维化的作用。