不明原因复发性流产患者子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10基因的表达

目的探讨不明原因复发性流产(URSA)与子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10基因表达的关系。方法采用原位杂交技术,以HOXA-10反义核苷酸为探针检测51例URSA患者及38例正常生育(NF)组的分泌期子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10 mRNA的表达水平,并以灰度阳性单位(PU值)表示。结果NF组子宫内膜分泌早期HOXA-10mRNA表达的PU值腺体为(6.66±0.11),间质为(6.76±0.15);分泌中期分别为(10.95±0.90)及(11.46±1.08);分泌晚期分别为(11.05±1.12)及(11.54±1.10);蜕膜组织分别为(11.55±1.14)及(11.93±1.92);分泌中晚期及蜕膜组织的PU值显著高于分泌早期。URSA组不同时期子宫内膜及早孕蜕膜组织中HOXA-10 mRNA的表达水平基本一致,无明显的分泌中晚期及早孕期峰,并且分泌中晚期及早孕蜕膜组织的PU值明显低于NF同期组。两组各期腺体和间质的PU值无显著差异。结论子宫内膜HOXA-10基因在分泌中晚期及早孕蜕膜组织中的高表达可能和孕卵着床及妊娠维持密切相关,其表达缺陷可能是导致URSA发生的重要原因之一。     

HOXA11在人子宫内膜和早孕蜕膜中的表达及与不育的关系

目的检测HOXA11蛋白在正常月经周期子宫内膜、早孕蜕膜和不明原因不育子宫内膜组织中的表达,探讨HOXA11与不明原因不育及雌孕激素受体(ER、PR)表达的相关性。方法采用免疫组织化学和Western-Blot方法对38例正常子宫内膜、15例早孕蜕膜和19例不明原因不育子宫内膜组织中HOXA11、ER及PR的表达。结果HOXA11蛋白在子宫内膜腺上皮和基质细胞均有表达,以分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜表达量较高;在不育内膜的表达量显著降低(P<0.05);ER、PR在各组表达量的变化与HOXA11相同,即分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜的表达量较高,而在不育内膜的表达量显著下降(P<0.05)。结论HOXA11基因在着床期子宫内膜的分化、发育以及着床后妊娠的维持起一定作用;HOXA11表达量下降与ER、PR表达量降低相关;HOXA11表达下降或缺失可能是女性不明原因不育的原因之一。     

重组人肝细胞生长因子对心脏移植冠状血管内膜内皮型一氧化氮合酶的影响

目的探讨重组人肝细胞生长因子（rh-HGF）对大鼠心脏移植冠状血管内膜内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的影响。方法近交系健康雄性Wistar大鼠80只和雄性sD大鼠40只，建立腹腔异位心脏移植模型。实验分3组：同系移植组，异系移植包括对照组和实验组。分别于术后15、60d采集各组标本，沿冠状动脉切取心肌组织，进行免疫组织化学检测冠状血管内膜eNOS的表达，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测冠状血管内膜eNOS mRNA表达，以及观测冠状血管病理变化。结果实验组移植心脏冠状动脉内皮细胞完整，内膜轻度增厚，管腔轻度狭窄，病理改变明显轻于对照组。RT-PCR测定eNOS mRNA在移植心脏冠状动脉内膜的表达，实验组（1．81±0．25）、（1．57±0．24）均明显高于对照组（0．76±0．06）、（0．53±0．04）及同系移植组（0．82±0．06）、（0．89±0．10）表达（P〈0．01）。结论rh-HGF通过上调移植心脏冠状血管内膜eNOS表达，保护冠状血管内皮功能，以预防移植心脏血管病的发生。     

原位杂交检测HOXA-10基因在人子宫内膜的表达

目的 :探讨正常生育妇女月经周期不同时期子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中HOXA-1 0基因的表达。方法 :采用原位杂交的方法。结果 :HOXA-1 0基因在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞均有表达 ;中晚分泌期的表达高于增殖期及分泌早期 ,且间质细胞的表达高于腺上皮细胞。结论 :( 1 ) HOXA-1 0基因在分泌中期子宫内膜高表达提示其可能在人胚胎着床过程中起某种作用。 ( 2 ) HOXA-1 0基因可能在人子宫内膜蜕膜化过程中有重要作用。     

重组蛇毒纤溶因子修饰聚氨酯人工血管的犬颈动脉置换实验

目的通过动物实验评价重组蛇毒纤溶因子（recombinant fibrinolytic enzyme factor II，rF II）修饰聚氨酯（polyurethane，PU）人工血管的植入效果。方法采用浸渍．沥滤法制备口径4mmPU微孔人工血管，扫描电镜观察血管管壁微孔大小和形态，用rF II修饰人工血管内腔。取20只体重（20&#177;1）kg的雄性杂种犬制作颈动脉2cm缺损模型，随机分为3组：rF II修饰PU组（n=8）、无rF II修饰PU组（n=6）和膨体聚四氟乙烯（expanded polytetrafluoroethlyene，ePTFE）组（n=6），植入相应人工血管以修复缺损。记录术后动物一般情况；计算术后30d和60d的血管通畅率；测量术后60d人工血管内径，并进行组织学检查和扫描电镜观察。结果制得的PU微孔人工血管内径（3．74&#177;0．06）mm，壁厚0．4～0．6mm，密度0．25g／cm^3，孔隙率79．8％，径向动态顺应性为8．57％／100mmHg。人工血管管壁内，微孔分布均匀，呈开孔结构。外层孔径为（140&#177;41）Ima，内层孔径为（100&#177;3）μm，外层／内层的厚度比约2：1，内腔表面孔径为（40&#177;16）μm。术后颈部切口愈合良好，动物均存活，无并发症发生。术后30d及60d血管通畅率：rF II修饰PU组分别为100％及66．7％，无rF II PU组为66．7％及33．3％，ePTFE组为66．7％及0，堵塞的人工血管在吻合处发现血栓。rFII修饰PU组、无rF II修饰PU组及ePTFE组植入前血管内径分别为（3．74&#177;0．06）、（3．74&#177;0．06）、（4．00&#177;0．03）mm；术后60d内径分别为（4．51&#177;0．05）、（4.31&#177;0．24）、（4．43&#177;0．12）mm；3组间植入前后比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。rF II修饰PU组组织学观察，植入15d有血浆蛋白在内腔表面沉积；30d后有少量细胞黏附；60d后新内膜形成。新内膜厚度随植入时间增加而变厚；植入后60 d rF II修饰PU组人工血管近端、中点及远端的新内膜厚度分别为（560&#177;22）、（78&#177;5）、（323&#177;31）μm（P〈0．05）。扫描电镜观察，rF II修饰PU组新内膜表面由扁长形细胞组成，其长轴顺着血流方向排列，与正常颈动脉内腔表面形貌相似。结论rF II修饰PU血管内腔可提高纤溶活性，减少血栓栓塞的发生，有利于提高植入血管的通畅率。     

酪氨酸激酶Syk在肝癌中的表达及与血管生成的关系

目的探讨酪氨酸激酶Syk在肝细胞性肝癌中的表达及对肿瘤微血管生成的影响。方法采用RT-PCR检测Syk mRNA在肝细胞性肝癌及癌旁正常组织中的表达,免疫组化SABC法检测标本中CD34的表达反映肿瘤的微血管密度（MVD）。结果24例癌旁正常组织中Syk mRNA均表达阳性,32例肝细胞性肝癌中Syk mRNA表达率为46.9％（15／32）,其中低分化组阳性表达率23．1％（3／13）,明显低于高分化组阳性表达率63．2％（12／19）（P〈0．05）。肿瘤微血管密度（MVD）检测：低分化组（Ⅲ级Ⅳ级为49．2±3.6,54±4.3）,明显高于高分化组（Ⅰ级Ⅱ级为13．6±4．5,32.3±3．2）与正常组织（5．9±1．7）,有显著统计学意义（P〈0．05）。Syk mRNA的表达与CD34的表达明显负相关（r=-0.97）。结论肝细胞性肝癌中Syk基因的缺失对癌组织血管的生成起重要的作用。     

α促黑素细胞激素对横纹肌溶解所致急性肾衰竭大鼠肾的保护作用

目的探讨α促黑素细胞激素（α—MSH）是否能减轻甘油诱导横纹肌溶解所致急性。肾衰竭（ARF）大鼠。肾组织中炎性反应和对。肾损害的保护作用。方法48只SD大鼠随机分4组：健康对照组：肌注生理盐水10ml／kg；ARF组;肌注50％甘油10ml／kg；α-MSH立即干预组：肌注50％甘油的同时腹腔注射α—MSH200μg／kg，12h后重复1次；α-MSH延迟干预组：肌注50％甘油6h后腹腔注射α—MSH200μg／kg，12h后重复1次。24h后处死大鼠，测Scr、BUN、肌酸激酶水平。。肾组织PAS染色光镜下行。肾小管坏死半定量评分。免疫组化ED-1染色半定量计数。实时定量PCR测。肾组织中单核细胞趋化因子（MCP）-1mRNA表达水平。结果与对照组相比，ARF组大鼠。肾组织内ED．1染色阳性细胞数（16．8±7．0比1．46＋1．24）、MCP-1的mRNA表达量（11．0±3．8比7．8±1．9）均显著增加（P均〈0．05）。α-MSH立即干预组ED-1染色阳性细胞数（9．5±8．2）和MCP．1的mRNA表达量（8．7±5．1）与ARF组相比均显著减少（P〈0．05）。α—MSH立即干预组Scr、BUN和。肾小管坏死评分均低于ARF组【分别为（152±76）比（333±60）μmol／L、（23．8±9．3）比（56．0±10．0）mmol／L和1．7±0．4比2．7±0．4，P均〈0．05]。而α-MSH延迟干预组与ARF组间各指标及各组间血IL．6和TNF—α差异均无统计学意义。结论甘油所致急性。肾衰竭大鼠。肾组织中巨噬细胞浸润及MCP-1表达增加，即刻注射α-MSH有一定的抑制。肾组织炎性反应、减轻。肾损害作用。     

特布他林对去甲肾上腺素和烧伤血清诱导大鼠神经胶质细胞血管内皮生长因子基因表达的影响

目的了解β2肾上腺素能受体激动剂特布他林对烧伤血清和去甲肾上腺素（NE）诱导神经胶质细胞血管内皮生长因子（VEGF）基因表达的影响。方法制备烧伤大鼠及正常大鼠血清。取出生1～3d乳鼠脑组织行原代神经胶质细胞培养，并在培养液中加入不同的刺激物，分为：（1）对照组：加入体积分数10％的正常大鼠血清；（2）NE1、NE2、NE3组：分别加入体积分数10％烧伤血清＋10、20、50μmol／LNE；（3）TBN1、TBN2、TBN3组：分别加入10、20、50μmol／L特布他林＋体积分数10％烧伤血清＋10、20、50μmol／LNE。采用蛋白质印迹法检测各组VEGF蛋白的表达；实时荧光定量PCR法检测VEGFmRNA的表达。结果对照组VEGF蛋白的表达处于较低水平，NE1、NE2、NE3组其表达随NE浓度的增大逐渐增加，而TBN1、TBN2、TBN3组的表达明显增加。对照组神经胶质细胞VEGF mRNA表达量[（5．72±0．12）拷贝数／g]较低，NEl、NE2、NE3组VEGF mRNA的表达[（13．26±0．03）、（10．37±0．04）、（14．87±0．55）拷贝数／g]均高于对照组（P〈0．01）。而TBN1、TBN2、TBN3组VEGF mRNA表达量[（13．39±0．19）、（15．77±0．11）、（16．00±0．07）拷贝数／g]也逐渐增加，除TBN1组外其余2组与各NE组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论特布他林可增强烧伤血清和NE诱导神经胶质细胞VEGF基因的表达。     

雄激素对前列腺癌细胞PAR基因表达的影响及其机制

目的观察在前列腺癌特异性高表达的癌基因前列腺雄激素调节基因（PAR）对雄激素的反应及其机制，探讨通过抑制PAR基因治疗雄激素非依赖性前列腺癌的可能性。方法用细胞计数检测双氢睾酮对LNCaP、PC3细胞增殖的刺激效应，以逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测双氢睾酮对LNCaP、PC3细胞PAR基因mRNA表达水平的影响及双氢睾酮和其拮抗剂联合作用对LNCaP细胞PAR基因mRNA表达水平的影响。结果低浓度（0．001～1nmol／L）双氢睾酮刺激可促进LNCaP细胞增殖，且刺激效应随双氢睾酮浓度升高而增强，在0．1nmol／L浓度时达最大，细胞计数为（27、54±0．71）×10。爪／孔，为对照组（16．13±1．03）×10。爪／孔的（170．74±0．78）％；同时使PAR基因mRNA表达水平上调在0．1nmol／L浓度时最高，为对照组的（272．42±8．24）％，P〈0．05）；高浓度（10、100nmol／L）双氢睾酮则抑制其增殖和PAR基因表达，在10nmol／L和100nmol／L浓度，细胞计数分别为（12．02±0．41）×10。／孔、（11．13±1．92）×10^4／孔（P〈0．05）；PAR基因mRNA表达水平分别为对照组的（76．64±2．47）％和（52．97±1．07）％，（P〈0．05）。这一调节效应可以为氟他胺所阻断。双氢睾酮对PC3细胞生长及PAR基因mRNA表达无明显影响（P〉0．05）。结论PAR可能是雄激素．雄激素受体通路下游的前列腺癌特异性癌基因，有望成为雄激素非依赖性前列腺癌基因和药物治疗的潜在靶点。     

单侧膈神经切断对幼猪肺内表皮生长因子及角质细胞生长因子基因表达的影响

目的研究膈神经切断后幼猪肺内表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）mRNA及角质细胞生长因子（keratinocyte growth factor,KGF）mRNA表达的变化及其意义。方法健康雄性幼猪36只,按手术时日龄10、30和50d分为三组,每组12只,再随机分为实验组（膈神经切断,n=6）和对照组（n=6）。实验组于颈部将左侧膈神经切断,对照组仅行左侧膈神经暴露。分别于术后2周处死动物,采用RT-PCR方法对肺组织中EGF及KGF mRNA的表达水平进行检测分析。结果RT-PCR的融解曲线示EGF、KGF和内参基因GAPDH分别在80.0、84.5和89.0℃附近各有一单峰,融解温度均一。单侧膈神经切断术后2周,10d和30d实验组幼猪肺内EGF mRNA相对表达水平分别为3.53±0.36和1.73±0.29,KGF mRNA的相对表达水平为4.71±0.42和2.77±0.29,均较相同日龄对照组（EGF mRNA表达水平4.60±0.41、2.18±0.24和KGF mRNA表达水平6.05±0.42、3.58±0.31）低,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;50d实验组幼猪肺内EGF及KGF mRNA的表达水平（0.72±0.15和1.83±0.22）与对照组（0.74±0.18和2.09±0.23）比较差异无统计学意义（P〉0.05）。对照组间比较显示幼猪肺内EGF及KGF mRNA的表达水平差异有统计学意义（P〈0.01）,随幼猪年龄增长肺内EGF及KGF mRNA的表达水平下降。结论单侧膈神经切断将导致术时日龄〈30d幼猪肺内生长因子表达水平的下降,进而影响肺组织的正常发育,提示年龄较小的患儿应慎行膈神经移位术。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。