白芍水煎剂和总甙促干扰素诱生及抗病毒作用的研究

白芍总甙(TGP)有多种免疫调节作用,我们研究了白芍水煎剂/TGP的促诱生干扰素(IFN)及抗病毒作用,结果表明:白芍水煎剂10g/L及TGP10mg/L在试管内无直接诱生IFN作用。白芍水     

灰树花多糖促进干扰素诱生作用的研究

灰树花多糖以２０００，１００Ｏ，５００ｍｇ／ｋｇ／ｄ的剂量给ＮＩＨ小鼠灌胄７天，然后腹腔注射１２８０ＨＡＵ／ｍｌ的ＮＤＶ（新城鸡瘟病毒）０．５ｍｌ。６ｈ后放血，分离血清，以Ｌ９２９细胞、ＶＳＶ病毒检测鼠干扰素。结果发现，灰树花多糖能够促进ＮＤＶ诱生干扰素。各实验组、ＮＤＶ对照组和生理盐水对照组的干扰素活性分别为４４．５，４５．０，２９．０，１２．０和２．０Ｕ／ｍｌ，据此认为，灰树花多糖抗病毒感染的作用可能由干扰素系统介导，但也可能有其他机理参与。     

灰树花多糖促进干扰素诱生作用的研究

灰树花多糖以２０００，１０００，５００ｍｇ／ｋｇ／ｄ的剂量给ＮＩＨ小鼠灌胃７天，然后腹腔注射１２８０ＨＡＵ／ｍｌ的ＮＤＶ（新城鸡瘟病毒）０．５ｍｌ。６ｈ后放血，分离血清，以Ｌ９２９细胞、ＶＳＶ病毒检测鼠干扰素。结果发现，灰树花多糖能够促进ＮＤＶ诱生干扰素。各实验组、ＮＤＶ对照组和生理盐水对照组的干扰素活性分别为４４．５，４５．０，２９．０，１２．０和２．０Ｕ／ｍｌ，据此认为，灰树花多糖抗病毒感染的     

抗病毒免疫核糖核酸诱生γ—干扰素的实验研究

本文在小鼠模型系统中,通过实验证明,抗病毒免疫核糖核酸可以诱生γ-干扰素,并对诱生条件进行研究。     

古尼拟青霉诱生及促诱生干扰素的实验研究

本文报导古尼拟青霉诱生及促诱生干扰素的实验研究。以VSV为攻击病毒,人羊膜细胞FL株为测定细胞,结果显示古尼拟青霉提取液可诱导产生干扰素。一定浓度范围内,诱生能力随浓度增加而增强。诱生动态试验表明,2h即可出现较低效价干扰素,6h达最大值并持续到12h。如先用NDV-F处理FL细胞1h再加提取液,可将其诱生产量由4000IU/ml提高到8000IU/ml。     

余甘子促诱生人白细胞干扰素作用的研究

采用细胞病毒抑制法测定ＩＦＮ－α效价，对照观察了余甘子促诱生人白细胞干扰素的作用，结果表明，不同含量的余甘子液均有促诱生人白细胞干扰素的作用。其强度较黄芪弱，较板兰根略强。     

论干扰素的抗病毒作用

干扰素(interferon IFN)具有广谱抗病毒作用,但不能杀灭已经受到感染细胞内的病毒.因此,想通过IFN来彻底治愈慢性病毒性疾病如慢性乙型肝炎或丙型肝炎是不现实的;想通过加大剂量和延长疗程的治疗计划也应该慎重.     

云芝糖肽的干扰素诱生和促诱生效应

云芝糖肽(Polysaccharide-Peptide，Ps-P)是与日本产品Kredtin(Ps-K)相类似的云芝糖肽，它的产生菌属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科革盖菌属，学名为彩绒革盖菌(Corolus Versi-color)由杨庆尧从上海的柳树倒木上分离所得，现已证明所提取的糖肽成分能提高红细胞的免疫功能，并具有抗肿瘤和免疫调节作用。我们用Ps-P在体外进行了干扰素(IFN)诱生和促诱生试验，证明Ps-P是IFN-α的诱生剂，又是IFN-α和IFN-γ的促诱生剂，现报告如下：     

水疱性口炎病毒对肝癌细胞的选择性感染和溶解作用

目的 :研究水疱性口炎病毒 (VSV)对肝癌细胞感染和溶解的选择性。 方法 :将 VSV分别感染 5种经过或未经过干扰素预处理的肝癌细胞系 (Hep3B、Hep G2、SMMC- 772 1、BBEL- 74 0 2和 BEL- 74 0 4细胞 )、正常传代肝细胞 (L- 0 2细胞 )和正常原代培养肝细胞 ,应用标准噬斑测定技术滴定病毒在各类细胞中的产量 ,锥虫蓝染色排除试验检测细胞活力 ,亚甲蓝和伊红染色观察细胞溶解动力学。 结果 :0 .1pfu/细胞的 VSV与上述 5种肝癌细胞、正常传代和正常原代人肝细胞共同培养 18h后 ,各细胞 VSV的产量分别为 1.8× 10 9、1.5× 10 8、8.0× 10 7、5 .6× 10 8、7.7× 10 8、6 .5× 10 7、2 .3× 10 5pfu/ m l;而经 10 0 0 U/ m l干扰素预先处理后 ,上述细胞 VSV的产量分别降至 2 .4× 10 4 、3.8× 10 4 、6 .9× 10 5、4 .2× 10 3、8.3× 10 5、5 .3× 10 4 、<10pfu/ ml。无论是否经干扰素 α- 2 b(10 0 0 U/ m l)预处理 ,除正常原代培养肝细胞外 ,VSV感染后 2 4 h其他细胞被大量溶解。结论 :VSV可迅速感染并溶解肝癌细胞及正常传代肝细胞 ,干扰素虽能完全保护正常原代肝细胞 ,但仅能部分降低 VSV在肝癌细胞和正常传代肝细胞中的增殖和溶细胞速率。说明有干扰素存在时 ,VSV能够选择性地感染和溶解肝癌细胞 ,提     

T103A变异MxA蛋白抑制水泡性口膜炎病毒复制的体外研究

目的研究T103A变异MxA蛋白抑制水疱性口膜炎病毒(VSV)复制活性。方法将野生型、T103A变异MxA蛋白表达载体和对照质粒分别瞬时转染Wish细胞,24h后VSV感染细胞,48h后用MTT法检测各组细胞增殖;另取Wish细胞转染上述3种质粒,转染24h加入VSV感染细胞,24h后收集细胞采用RT-PCR检测VSV mRNA水平;Western blot检测各组MxA蛋白表达。结果野生型、T103A变异MxA蛋白均在Wish细胞有较好表达;MTT检测结果提示T103A变异组细胞增殖数显著低于野生型组(P<0.01);RT-PCR结果显示T103A变异组VSVmRNA水平显著高于野生型组(P<0.01),但与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论T103A变异MxA蛋白失去了抑制VSV复制活性。     

利福平抗黄热病毒感染的效果及初步机制

目的 检测利福平抗黄热病毒(YFV)感染的效果并初步探索其机制.方法 用不同浓度(0.04、0.2、1、5、25、125、625μmol/L)的利福平处理人肝癌细胞Huh-724 h,通过CCK-8检测利福平的细胞毒性并计算其细胞半数毒性浓度(CC50).YFV感染Huh-7细胞的同时加入不同浓度(0.04、0.2、1...     

VSV-G蛋白修饰的GFP逆转录病毒的构建及表达

目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)共转染,使含绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒经超速离心得以浓缩,进一步提高GFP逆转录病毒的细胞感染效率。方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞,并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因。收集该GP2-293细胞产生的重组假病毒液,并通过低温超速离心制备含GFP基因假病毒的浓缩液,测定浓缩前后含GFP基因假病毒液滴度,并分别感染NIH 3T3细胞、软骨细胞、成纤维细胞、骨髓基质干细胞等,荧光显微镜下观察GFP在上述细胞内的表达情况,流式细胞仪检测GFP基因的转染阳性表达率。结果GFP-GP2-293细胞转染VSV-G基因后产生的重组假病毒液滴度为7.36×104CFU/mL,浓缩40倍后其滴度可提高至1.82×106CFU/mL。用浓缩前后含GFP基因假病毒液分别转染NIH 3T3细胞,GFP阳性表达率可由44.21%升高至79.80%;转染兔软骨细胞和成纤维细胞、猪骨髓基质干细胞和脂肪干细胞后,均可见GFP阳性表达明显增强。结论逆转录病毒与VSV-G共转染GP2-293包装细胞可以制备出高滴度的假病毒液。浓缩病毒液的高转染率为其在组织工程种子细胞标记方面的广泛应用奠定了基础。     

培元通腑冲剂对腹腔内感染患者术后肠功能影响的临床研究

目的：研究培元通腑冲剂对腹腔内感染患者术后肠功能的影响。方法：120例急性弥漫性腹膜炎手术患者，根据其是否服用中药分为中药组和非中药组(对照组)，对照组予以常用胃肠动力药。分别观察这两组患者的肠鸣音恢复时间、排气时间、排便时间和术后48小时的腹腔引流量的改变。结果：中药组患者无明显的腹胀、腹痛、恶心、呕吐，腹腔内引流量较对照组均有减少。肠功能恢复时间较为对照组缩短。结论：培元通腑冲剂能较好的促进术后患者肠功能的恢复。减轻的腹腔内炎症，增强和促进胃肠蠕动，减少并发症的发生，有利于患者术后恢复。     

HIV-1 假病毒的构建及对人原发性渗出性淋巴瘤细胞系的感染研究

目的:分离、克隆水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)的包膜糖蛋白(VSV-GP)编码基因,包装人类免疫缺陷病毒1型human immunodeficiency virus-1,HIV-1)假病毒,并研究其对人原发性渗出性淋巴瘤细胞系 BCBL-1 细胞的感染状况.方法:根据GenBank登记的VSV-GP基因核苷酸序列设计1对PCR引物,其5'端分别引入HindⅢ和BamH Ⅰ酶切位点.以质粒 pHCMV-G为模板,PCR扩增VSV-GP基因,经双酶切后定向克隆进真核表达载体 PcDNA3.1( )中,构建重组真核表达质粒 pVSV-GP.重组质粒经酶切鉴定、核酸序列测定和分析后与含包装和复制功能缺陷的 HIV-1 基因组重组质粒 pNL4-3.Luc.R-E-共转染人胚肾HEK 293T细胞.收获细胞进行Western blot,检测HIV-1 p24蛋白的表达;收获HIV-1假病毒感染 BCBL-1 细胞,进行虫荧光素酶(Luciferase)报告基因活性检测以及用ELISA的方法检测感染后细胞上清中 HIV-1 p24蛋白的含量.结果:PCR分离、克隆的 VSV-GP 序列全长1 536 bp,序列经过核酸分析证实;Western blot在 HIV-1 p24 蛋白预期位置检测到特异性条带;HIV-1 假病毒感染 BCBL-1 细胞后上清可以检测到HIV-1 p24蛋白,并且测得 Luciferase 活性值较对照组显著增高(P<0.05).结论:成功包装了 HIV-1 假病毒,并且该病毒可以感染 BCBL-1细胞.     

HeLa细胞中HCV NS5A的表达对干扰素敏感病毒VSV复制的影响

目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)NS5A的表达对水泡性口炎病毒(VSV)复制的影响.方法:将稳定转染的HeLa-NS5A和HeLa-NS5A-ΔISDR细胞在6孔培养板中培养24h后,加入人基因工程α2a型干扰素(rHuIFN-αt2a)至所需浓度.培养24h后加入VSV,继续培养相应时间.取培养上清液,按10-1稀释,50μL稀释液加入含Vero细胞的24孔培养板中.每孔加入含100 mL/L小牛血清的DMEM-7.5g/L羧甲基纤维素钠(CMC)1 mL.继续培养48 h后移走培养液,结晶紫染色,自来水轻柔洗净,记录噬斑形成单位(PFU).结果:干扰素(IFN)浓度为1×105 U/L,VSV对HeLa-NS5A细胞的致病变作用要比对HeLa-NS5A-ΔISDR细胞的致病作用更明显.在整个IFN浓度处理中,HeLa-NS5A细胞培养液中的病毒滴度是HeLa-NS5A-ΔISDR细胞培养液中的病毒滴度的2～5倍(P＜0.05).结论:NS5A能增强IFN敏感病毒的复制,HCVNS5A内的ISDR可能是造成IFN对HCV患者治疗效果的因素.     

新基因AY358935的生物信息学分析及功能预测

目的对新基因AY358935的功能性质进行生物信息分析,为深入研究该基因功能奠定基础。方法利用生物信息学分析软件,分析新基因AY358935及其编码蛋白的性质、定位、结构、表达谱等特征,并根据相关信息预测其生物学功能。利用Western blotting检测病毒感染早期AY358935的表达变化。结果AY358935基因进化保守,与马、小鼠、斑马鱼、非洲爪蟾的相似性分别为74%、60%、38%、33%。亚细胞定位于线粒体的可能性大。含有一个N末端信号肽序列和单次跨膜结构,多个磷酸化位点,二级结构主要是α螺旋和无规则卷曲。在正常组织和癌组织表达广泛,并受双链RNA依赖蛋白激酶的表达调控。AY358935蛋白表达在水泡性口炎病毒感染2h后即明显上调。结论初步预测AY358935为具有重要功能的小分子分泌蛋白,可能参与细胞增殖和抗病毒天然免疫调控。     

药物防治减压病的研究进展

减压病是在环境压力快速降低并发生不安全减压时,由溶解的惰性气体在血管或组织中形成气泡而引起一系列症状和体征,严重时可以威胁生命安全。目前,再加压吸氧治疗是减压病的主要治疗措施,但并不能满足重症减压病的治疗需求,仍需药物辅助治疗。然而,防治减压病的可选药物有限,且尚未发现特效药物。多年来,学界在不断探索用于治疗减压病的药物,已探索并研究的药物如抗血小板聚集药物、抗炎药物、抗氧化药物、气泡消融药物及中药等。其中,应用中药防治减压病可能会是减压病防治领域研究的新方向。本文就20世纪80年代至今减压病药物治疗的研究与进展情况进行综述。     

与时俱进,勇于创新——丁安伟教授谈中药学的科学研究与学科发展

就如何提高中药质量、建立科学规范且可被国际认可的中药质量标准及中药学科的发展趋势等采访了丁安伟教授。丁安伟教授认为，要提高中药质量，首先把好源头关，即中药材的质量，同时强调实施GAP、GLP、GCP、GMP及GSP等规范化管理是提高中药质量的根本途径。指标性成分、有效成分及有害物质的研究等已成为中药质量标准的主要研究内容。广泛使用现代先进实验技术和科研手段；多学科的协作研究；产、学、研的结合及中药研究国际化等将是中药学研究发展的趋势。