山核桃叶总黄酮对人脐静脉内皮细胞衰老的干预作用

目的观察山核桃叶总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的保护作用,以探讨其抗衰老作用。方法体外培养HUVECs细胞株以AngⅡ诱导48 h复制衰老细胞模型。细胞分为空白对照组、模型组、山核桃叶总黄酮不同剂量(1、2.5、5μg/m L)组;采用MTS法检测细胞存活率,β-半乳糖苷酶检测内皮细胞衰老程度,流式细胞术分析细胞周期,硝酸还原酶法检测NO含有量。结果与空白对照组比较,模型组细胞存活率明显下降,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞率明显增加,细胞周期多停滞在G0/G1期,S期细胞比例减小,表明成功诱导了衰老模型;而给与山核桃叶总黄酮预处理后明显改善了细胞衰老状态,β-半乳糖苷酶阳性细胞率明显减少,G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例增加,NO浓度增加。结论山核桃叶总黄酮对AngⅡ诱导的HUVECs细胞衰老有明显的保护作用,具有抑制内皮细胞衰老,保护内皮功能的作用。     

不同浓度血管紧张素Ⅱ对人脐静脉血管内皮细胞衰老变化的影响

目的:观察不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)衰老及细胞存活率的变化情况。方法:体外培养HUVEC,随机分为对照组和含不同浓度AngⅡ组(10-8～10-5mmol/L)共5组,用含不同浓度AngⅡ的培养基孵育细胞48h,β-半乳糖苷酶染色法鉴定内皮细胞衰老状态;流式细胞技术分析细胞周期变化;分别用MTT法和CCK-8法检测细胞存活率变化情况。结果:AngⅡ培养细胞48h后,β-gal阳性染色率随着AngⅡ浓度的增加逐渐增多(P均<0.01);细胞周期多停滞于G0/G1期,S期细胞逐渐减少;细胞存活率明显下降;与对照组相比,10-8和10-7 mmol/L AngII组无明显差异(P>0.05),10-6和10-5 mmol/LAngⅡ组有统计学差异(P<0.05)。结论:AngII诱导HUVEC衰老并呈剂量依赖性的抑制细胞增殖,提示细胞衰老程度随AngII浓度增加而加重。     

含溶栓颗粒血清对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞VEGF的影响

目的探讨溶栓颗粒对受损血管内皮细胞保护的可能机制。方法用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）损伤人脐静脉内皮细胞（HUVEC）造模,用含大、申、小剂量溶栓颗粒的大鼠血清干预受损HUVEC,应用HE染色,观察细胞形态变化,免疫组化法观察血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果应用TNF-α 40ng／mL可以造成HUVEC损伤,表现细胞数量下降,皱缩、变形,分裂相细胞明显增加,VEGF表达明显增多。含大、中剂量溶栓颗粒的大鼠血清能减少VEGF表达,减少细胞有丝分裂。结论溶栓颗粒可以保护因炎性介质增加而受损的血管内皮细胞,这种保护作用可能与减少VEGF表达有关。     

二苯乙烯苷对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞衰老的保护作用

目的探讨二苯乙烯苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞衰老的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞后,AngⅡ诱导细胞衰老模型,MTS法检测细胞存活率,SA-β-gal染色分析细胞衰老程度,qPCR检测miR-34a mRNA表达,Western blot检测p53、PAI-1、SIRT1、E2F1蛋白表达。结果二苯乙烯苷干预后,细胞存活率、SIRT1蛋白表达显著升高(P0.05),β-gal阳性率及p53、PAI-1蛋白表达显著降低(P0.05)。同时,该成分对miR-34a、E2F1表达也有明显抑制作用(P0.05)。结论二苯乙烯苷对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞衰老具有明显保护作用,其作用机制可能与抑制miR-34a、E2F1表达及促进SIRT1蛋白表达有关。     

颐年降压饮含药血清对自发性高血压大鼠内皮细胞增殖及PPAR-γ mRNA表达的影响

目的观察颐年降压饮含药血清对体外原代培养的自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensiverats,SHR)内皮细胞增殖及PPAR-γmRNA表达的影响。方法取SHR主动脉内皮细胞进行原代培养,取3代后内皮细胞用于实验,SD大鼠40只随机分为正常血清对照组和颐年降压饮高、中、低剂量组,给与高脂饮食喂养,分别灌服生理盐水和高、中、低剂量颐年降压饮(分别含生药5.2 g/mL、2.6 g/mL、1.3 g/mL),给药20天麻醉后开始收集血清,经灭活后作用各组内皮细胞。MTT法检测不同浓度血清作用各组2、4、8、16、24、48 h细胞活性;RT-PCR法检测作用4、8、16、24 h内皮细胞PPAR-γmRNA表达情况。结果MTT检测OD值发现,4、8 h颐年降压饮高、中、低剂量组OD值均高于正常血清对照组,差异有统计学意义(P0.05),而颐年降压饮3剂量组间差异无统计学意义(P0.05);16 h颐年降压饮中剂量组OD值上升低于其他组,差异有统计学意义(P0.05);24 h各组OD值均下降,但颐年降压饮高、中剂量组下降比低剂量、正常血清对照组明显,差异有统计学意义(P0.05);48 h各组OD值继续下降,颐年降压饮高剂量组比正常血清对照组下降更明显(P0.05)。RT-PCR检测不同血清作用内皮细胞4 h时,各组PPAR-γmRNA表达差异无统计学意义(P0.05);8 h时颐年降压饮高剂量组PPARγmRNA表达明显低于其他各组(P0.05);16 h颐年降压饮各剂量组PPAR-γmR NA表达比正常血清对照组高(P0.05),其中颐年降压饮高剂量组PPARγmR NA表达最高,与其他组比较,差异有统计学意义(P0.01);24 h各组PPAR-γmR NA表达有所下降,但颐年降压饮低剂量组PPAR-γmRNA表达仍高于正常血清对照组(P0.05)。结论颐年降压饮对内皮细胞增殖呈双向调节作用,或许与调节PPAR-γmR NA表达有关。颐年降压饮所具有的上调及维持PPAR-γmRNA表达作用,可能是该方药具有保护血管内皮功能,降低血压的机制之一。     

桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:研究桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·mL-1),每天2次,按10 mL·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清.MTT法考察桃红四物汤含药血清(终浓度为5％,10％,15％)预处理对H2O2诱导细胞活力减少的作用;显微镜观察细胞形态学变化;以丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及AO/EB染色考察桃红四物汤含药血清对HUVECs凋亡及抗氧化能力的影响;Western blot法检测细胞Caspase-3的表达.结果:与空白血清对照组比较,经400 μmol·L-1H2O2刺激后细胞活性显著降低,含药血清组可显著提高SOD活力、降低MDA和LDH含量,并抑制Caspase-3表达.AO/EB染色及相差倒置显微镜也观察到桃红四物汤含药血清能降低H2O2诱导的细胞凋亡.结论:桃红四物汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用.     

天麻钩藤饮加减对妊娠期高血压疾病患者RSS系统的影响

目的观察天麻钩藤饮加减对妊娠期高血压疾病(HDCP)患者RSS系统的影响。方法将160例HDCP患者随机分为治疗组和对照组各80例。对照组给予硫酸镁注射液静脉滴注;治疗组在硫酸镁注射液治疗基础上加用天麻钩藤饮加减治疗。于两组治疗前和治疗72 h后比较血压、24 h尿蛋白定量及血清肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平变化。结果两组治疗后收缩压和舒张压与治疗前比较均明显下降,差异均有统计学意义(P0.01)。治疗后,治疗组收缩压和舒张压显著优于对照组,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.01)。两组治疗后24 h尿蛋白定量与治疗前比较均明显下降,差异均有统计学意义(P0.01)。治疗后,治疗组24 h尿蛋白定量显著优于对照组(P0.01)。治疗后,治疗组血清肾素活性(PRA)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)下降明显(P0.01)。结论在硫酸镁解痉药物治疗基础上应用天麻钩藤饮加减治疗HDCP能够显著改善患者血压和24 h尿蛋白定量,其作用可能与降低血清PRA和AngⅡ水平有关。     

芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞PCNA表达的影响

目的通过观察芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨芎芍胶囊促内皮细胞增殖的分子机制。方法利用血清药理学方法制备芎芍胶囊含药血清,在体外干预培养HUVEC。MTT法检测芎芍胶囊对HUVEC增殖的影响,采用RT-PCR法测定PCNA的mRNA表达,ELISA法检测培养液中PCNA的蛋白含量。结果芎芍胶囊低、中、高剂量含药血清均有促进HUVEC细胞增殖的作用(P0.01);RT-PCR和ELISA法检测结果显示芎芍胶囊各剂量含药血清均有显著地促进PCNA的mRNA表达和蛋白表达的作用(P0.05),并具有明显的剂量依赖性。结论芎芍胶囊促进HUVEC增殖的作用机制可能与上调PCNA的表达密切相关。     

三棱含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用研究

目的 研究三棱含药血清对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）损伤的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和三棱组,制备空白血清及含药血清。建立LPS诱导的HUVEC损伤模型,设置对照组、模型组、5%空白血清组和三棱含药血清（1%、3%、5%）组,采用MTT法检测三棱含药血清对细胞活力的影响;采用荧光显微镜分析各组细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）和活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;采用ELISA法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)活性和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-17、组织因子...     

降压宝蓝片含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:探讨降压宝蓝片含药血清对过氧化氢(H₂O₂)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法:体外培养HUVECs,分为空白组、模型组、降压宝蓝片含药血清低、中、高浓度组(含量血清体积分数为5%,10%,15%),显微镜下观察细胞形态,用噻唑蓝(MTT)法检测HUVECs活力,微板法检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性及一氧化氮(NO)的含量,ELISA法检测内皮素-1(ET-1),组织型纤溶酶原激活物(tPA),组织型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的含量。结果:与空白组比较,模型组细胞活力显著降低,上清液中LDH活性明显增高,ET-1和PAI-1含量显著增加,NO和tPA含量显著下降(P<0.01);与模型组比较,降压宝蓝片中、高浓度组细胞活力显著升高,LDH活性显著减低,ET-1和PAI-1含量显著减少,NO和tPA显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:降压宝蓝片含药血清对H₂O₂诱导的HUVECs损伤具有显著地保护作用。     

芪丹通脉片对缺氧内皮细胞保护作用研究

目的:观察芪丹通脉片(Qidantongmai Tablet,QDTMT)对缺氧内皮细胞的保护机制.方法:原代培养、鉴定人脐静脉内皮细胞,制备QDTMT含药血清并干预传代内皮细胞,将内皮细胞根据不同处理因素随机分为3组:空白对照组、生理盐水组、QDTMT组,MTT法检测各组细胞活性.结果:经Ⅷ因子免疫荧光抗体鉴定,原代培养后获得人脐静脉血管内皮细胞系.MTT检测结果示,与空白对照组相比,缺氧使生理盐水组和QDTMT组细胞增殖受到抑制;QDTMT组缺氧内皮细胞增殖明显增加,与生理盐水组相比差异显著(P＜0.05).结论:QDTMT的缺氧内皮保护作用可能和它促进缺氧后内皮细胞增殖有关.     

天麻钩藤饮加味治疗肝火亢盛型高血压病疗效观察

观察天麻钩藤饮加味治疗肝火亢盛型高血压病的临床疗效。84例病人随机分为治疗组和对照组,治疗组给予天麻钩藤饮治疗,对照组服用硝苯地平缓释片,观察疗效。两组患者治疗前后血压比较,治疗前组间比较P〈0.05;治疗后组间比较P〉0.05。两组患者治疗前后症状疗效改善比较,治疗组总有效率为94.6%,对照组总有效率为67.8%,组间比较 P〈0.05。天麻钩藤饮加味治疗,在改善高血压病人症状方面效果优于对照组,提高了患者的生活质量。     

天麻钩藤饮治疗偏头痛探源

本文通过1例临床偏头痛病例的治疗,探讨了天麻钧藤饮治疗偏头痛的疗效。     

痰瘀同治方药物血清对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响

目的观察痰瘀同治方对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响,探讨其促血管生成作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞模型,大鼠连续5 d灌胃不同剂量的痰瘀同治方(78.0、39.0、19.5 g/kg)制备各剂量药物血清,采用MTT法检测细胞活力来反应其增殖能力,用细胞划痕实验观察给药后细胞迁移能力。结果与正常组比较,490 nm处吸光度痰瘀同治方高、中剂量组内皮细胞增殖能力明显增强(P0.01),增殖率分别为49.78%、33.92%;内皮细胞迁移能力也有提高,划痕区相对距离明显减少(P0.01),细胞迁移率分别增加11.36%、11.62%。结论痰瘀同治方对人脐静脉内皮细胞有促进增殖和迁移的作用。     

糖痹康对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:观察糖痹康大鼠含药血清对高糖造成人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用。方法:以CCK-8法观察不同浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞活力的影响;根据实验结果选择葡萄糖浓度为5.55mmol/L组为正常组,葡萄糖浓度为25mmol/L组做为模型组。然后制备正常组,弥可保组,糖痹康组的大鼠含药血清,将含药血清作用于高糖损伤的人脐静脉内皮细胞,分为正常组、高糖模型组、高糖弥可保组、高糖糖痹康低、中、高剂量组,并通过测定培养液中丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)含量与超氧化物歧化酶(SOD)活力,探讨糖痹康对血管内皮细胞损伤的保护作用。结果:与高糖模型组比较,糖痹康含药血清能减少细胞MDA、LDH释放量,提高SOD活力及NO含量。结论:糖痹康对高糖损伤的血管内皮细胞有一定的保护作用,间接的起到对周围神经的保护作用。     

天麻钩藤饮对缺血性脑卒中患者的影响体会

目的：分析天麻钩藤饮对缺血性脑卒中患者的影响。方法：对入选的60例患者给予天麻钩藤饮,并对其进行观察与分析。结果：60例患者神经功能缺损改善总有效率为93．33％,中医症候疗效有效率为96．67％。结论：天麻钩藤饮可以明显提高,临床治疗效果,改善患者中医症状。     

天麻钩藤饮联合倍他司汀治疗眩晕临床研究

目的:观察天麻钩藤饮联合倍他司汀治疗眩晕的临床效果。方法:将68例眩晕患者随机分为对照组与治疗组,每组34例;对照组常规给予倍他司汀治疗,治疗组在对照组的基础之联合天麻钩藤饮治疗;共治疗4周,观察比较2组临床疗效及复发、不良反应率情况,观察比较2组治疗前后中医证候积分变化。结果:总有效率治疗组为94.12%,对照组为76.47%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组主要证候眩晕、头痛、视觉障碍、猝倒、颈部活动功能、体位改变等评分及总积分均较治疗前明显降低(P<0.05),且治疗组各项评分均低于对照组(P<0.05)。复发率治疗组为3.13%,对照组为22.22%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不良反应率治疗组为2.94%,对照组为11.76%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:天麻钩藤饮联合倍他司汀治疗眩晕疗效确切,可显著缓解患者临床症状,降低复发率。     

天麻钩藤饮治疗肝阳上亢型高血压

目的:探讨天麻钩藤饮治疗肝阳上亢型高血压的临床疗效。方法:对86例肝阳上亢型高血压患者分别给予天麻钩藤饮治疗与硝苯地平缓释片治疗,比较两组的降压疗效与中医症候疗效。结果:实验组总有效率为93.02%,对照组总有效率为74.42%,两组降压疗效经比较(x2=8.234,P0.05)。结论:天麻钩藤饮治疗肝阳上亢型高血压具有较好的临床疗效,值得临床推广运用。