HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV前C区的序列分析

为了解ＨＢｅＡｇ阴性慢性乙型肝炎患者中ＨＢＶ前Ｃ区突变株流行情况 ,本研究对 31例ＨＢｅＡｇ阴性慢性乙型肝炎住院患者血清ＨＢＶ前Ｃ区序列进行了分析 ,血清标本采自广西南宁市各大医院 ,按 2 0 0 0年全国第 10次病毒性肝炎和肝病学术会议修订的“病毒性肝炎防治方案”诊断。其中男性2 5例 ,女性 6例 ,年龄为 18～ 36岁。ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ检测应由美国Ａｂｂｏｔｔ公司酶联免疫试剂盒 ;按常规法提取血清中ＨＢＶＤＮＡ ,并用美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司ＤＮＡ试剂纯化 ;应用套式ＰＣＲ扩增ＨＢＶ…     

乙型肝炎患者HBV M和HBV DNA的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）血清学标志（ＨＢＶ Ｍ）与ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果的相关性与临床意义。方法 对４１４例乙型肝炎的ＨＢＶ Ｍ和ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果进行比较。ＨＢＶ Ｍ用ＥＬＩＳＡ定量分析法检测,ＨＢＶ ＤＮＡ用斑点杂交法检测。结果 急性、慢性乙型肝炎患者中ＨＢＶ ＤＮＡ的阳性率与乙型肝炎肝硬化患者的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异有显著性;ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异无显著性;ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｅＡｇ的滴度与ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率呈正相关关系。结论 ＨＢＶ ＤＮＡ是评价ＨＢＶ活动最理想的标志;抗－ＨＢｅ的出现不能作为ＨＢＶ复制停止的指标;ＨＢｓＡｇ的滴度和ＨＢｅＡｇ的滴度变化可作为临床评价病毒复制程度和     

慢性肝炎和肝癌病人血清中乙型肝炎病毒DNA的检测

为了了解慢性肝炎和肝癌病人患者体内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制与ＨＢＶ血清标志之间的关系，用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交方法对６１例慢性肝炎和４７例肝癌患者的ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、相关ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、表面抗体（抗－ＨＢｓ）、核心抗体（抗－ＨＢｃ）、相关ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）进行了检测。结果表明：ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、／抗－ＨＢｃ阳性的慢性肝炎和肝癌患者血清中的检出率分别为９０．５０％和５０．００％；在ＨＢｓＡｇ／抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性者的检出率分别为４５．４０％和７．１４％；在ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阴性者中的检出率分别为６０．００％和４０．００％；ＨＢｓＡｇ阴性、／抗－ＨＢｃ阳性或／抗－ＨＢｅ阳性或／抗－ＨＢｓ阳性者中的检出率分别为２０．００％和２２．２２％；在血清学指标全阴性时，慢性肝炎和肝癌患者血清中ＨＢＶＤＮＡ的检出率均为０。实验提示：无论是肝炎或肝癌，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ同时阳性时，ＨＢＶ复制最为活跃；在单独ＨＢｓＡｇ阳性时，ＨＢＶ有一定程度的复制；ＨＢＶ复制在肝癌细胞中受到一定程度的抑制。     

急性病毒性肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的变化

急性病毒性肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的变化上海第二医科大学附属宝钢医院传染科（２００９００）王功大，徐伯忠本文分析肝炎患者在发病期和恢复期外周血Ｔ细胞亚群的变化。检测对象均确诊为急性肝炎，其中抗ＨＡＶＩｇＭ（－）３０例，ＨＢｓＡｇ（＋）抗ＨＢｃ（＋）...     

乙型肝炎血清诱导人外周血单个核细胞凋亡的检测及意义

本实验选取我院10例健康献血员(男6例,女4例,年龄20～45岁,平均年龄3340±696岁,甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒标志皆阴性,肝功正常)。ＨＢＶ阳性血清来自本科一慢性乙型肝炎患者,该患者血清病毒标志检测为ＨＢｓＡｇ( )、ＨＢｅＡｇ( )、抗ＨＢｃ( )、抗ＨＢｃＩｇＭ( ),经ＨＢＶ定量ＰＣＲ检测,含ＨＢＶ498×104拷贝/ｍｌ,无菌采集血清后80℃冰箱冻存,用前经56℃30ｍｉｎ灭活补体。抽取健康献血员静脉血8ｍｌ(肝素抗凝),用淋巴细胞分离液按常规分离外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ),将ＰＢＭＣ调成1×106/ｍｌ浓度,每孔接种1ｍｌ于12孔培养板上…     

针对包装信号起始区的硫代反义核苷酸抗HBV的研究

目的筛选高效特异的抗ＨＢＶ反义核酸药物。方法针对ＨＢＶ包装信号ε起始区设计并合成硫代反义寡聚核苷酸（ｓ－ａｓＯＤＮ）片段，通过ＥＬＩＳＡ检测法、ＭＴＴ法、电子显微镜等观察，研究此ｓ－ａｓＯＤＮ对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ表达，以及对细胞毒性，细胞形态的影响。结果针对ε起始区的ｓ－ａｓＯＤＮ显著抑制ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ的表达，其中，对ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ的抑制率分别为３８．１％和５８．７％高于Ｓ基因起始区（３２．１％和３７．２％，Ｐ＜０．０１），对ＨＢｓＡｇ抑制率为８２％，低于Ｓ基因起始区（９３．４１％），在实验浓度下ｓ－ａｓＯＤＮ对细胞无毒性，对细胞形态无影响。结论ＨＢＶ包装信号区是反义核酸抗ＨＢＶ复制研究的重要的靶序列选择区域。     

肾综合征出血热肝脏损伤与肝炎病毒感染的临床分析

肾综合征出血热 (ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｆｅｖｅｒｗｉｔｈｒｅｎｅｌｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＨＦＲＳ)病毒具有泛嗜性感染特点 ,侵入机体后引起多器官组织结构及功能改变。为探讨ＨＦＲＳ肝脏损伤与肝炎病毒感染之间的关系 ,对我院收治的 2 6例ＨＦＲＳ患者进行临床分析如下。全部患者出血热特异性抗体ＩｇＭ阳性 ,诊断分型按 1997年防治方案标准。对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｃ中任何一项阳性者定为ＨＢＶ感染。按检测结果分组 :ＨＢＶ Ｍ阳性 10例 ,平均年龄 2 7.3 4岁。ＨＢＶ Ｍ阴性 16例 ,平均年龄 3 4.2 3岁 ,不同病期分别检测血…     

HBV DNA含量与HBV标志物表现形式的初步研究

1　资料与方法ＨＢＶ感染者 6 6例 ,诊断按 1995年北京会议标准 ,其ＨＢＶＭ表现形式为 :ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｃ均阳性 (大三阳 )4 2例 ,ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ阳性 (小三阳 ) 14例 ,仅抗ＨＢｃ阳性 10例。抗病毒治疗方法 :无环鸟苷 (湖北潜江制药厂 )每日 2 0 /ｋｇ体重、分两次静滴、15ｄ后给予干扰素 (深圳科兴公司 ) 30 0万Ｕ/支、隔日 1支 ,共 5 0支。ＨＢＶＭ检测采用ＥＩＡ法 ,斑点杂交试剂为北京医科大学肝病研究所产品 ,操作按说明书进行。ＨＢＶＤＮＡ定量测定采用信号引物能量转移ＰＣＲ法 (ＱＰＣＲ) ,统计…     

原发性肝癌与乙型肝炎病毒感染血清学标记的关系

为探讨原发性肝癌 (ＰＨＣ)患者与乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染标记组合的关系。我院于 1991年 1月～ 1999年 1月间 ,对6 89例ＰＨＣ的ＨＢＶ五项血清标记检测 ,现报告如下。资料和方法凡住院作血清ＨＢＶ标记检测者为分析对象 ,本组 6 89例(男 5 89,女 10 0 ) ,男女比例为 5 .89∶1。年龄 12～ 85岁 ,平均5 1.5 5岁。全部病例均采用放射免疫分析法 (ＲＩＡ)检测ＨＢＶ血清学标记 ,ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 -ＨＢｅ、抗 -ＨＢｃ试剂盒由潍坊 3Ｖ公司提供。γ -计数器为北京核仪器厂生产的ＦＴ- 6 30Ｇ微机多探头γ计数器。结　…     

1212例献血员乙肝六项指标和抗－HCVRIA

１２１２例献血员乙肝六项指标和抗－ＨＣＶＲＩＡ王绪玲，蒋光霞，康诵均，盛春永，刘合营为了确保供血质量，我们在筛选献血员时，对献血员血清ＨＢＶ六项指标（ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、ＨＢｃＡｇ和抗ＨＢｃ）和抗ＨＣＶ同时作了检测，现将结果...     

乙丙型肝炎病毒重叠感染时病毒的相互作用

目的　探讨乙、丙型肝炎病毒（ＨＢＶ、ＨＣＶ） 重叠感染时,病毒之间的相互作用。方法　检测３０ 例ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染患者血清病毒标志物的变化、ＨＢＶ前Ｃ区１ ８９６ 位点突变的发生比率及血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α、白细胞介素（ＩＬ）６ 含量。结果　与单纯ＨＢＶ或ＨＣＶ 感染者相比,重叠感染患者乙肝表面抗原（ＨＢｅＡｇ） 、ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ 阳性比率明显降低,乙肝ｅ 抗体（ 抗ＨＢｅ） 阳性比率明显升高,ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ ＩｇＧ 及抗ＨＣＶ 几何平均滴度也明显降低,部分患者ＨＢｓＡｇ 阴转。而ＨＢＶ前Ｃ区１ ８９６ 位点突变发生率及血清ＴＮＦα、ＩＬ６ 含量却明显高于单纯感染者。结论　ＨＢＶ、ＨＣＶ感染同一宿主时,存在相互干扰、抑制;ＨＢｅＡｇ 的消失、抗ＨＢｅ 的阳转既与ＨＣＶ对ＨＢＶ 复制的直接抑制有关,又与ＨＢＶ的前Ｃ区变异有关,且ＨＣＶ 的重叠感染可能是导致ＨＢＶ 前Ｃ区变异的原因之一,其作用机制可能与导致机体免疫压力升高有关     

甲、乙、丙、戊型肝炎的重叠及AFP水平的检测

我们从 2 0 74例甲、乙、丙、戊四型病毒性肝炎阳性病例中 ,筛选出 180例重叠的病例 ,并对这 180例进行了ＡＦＰ的检测 ,对甲、乙、丙、戊四型病毒性肝炎的重叠及重叠后ＡＦＰ浓度的变化进行探讨。1　病例选择及试剂方法　乙肝标志物阳性 176 0例 ,抗 ＨＣＶ阳性 112例 ,抗 ＨＡＶ阳性 130例 ,抗 ＨＥＶ阳性 72例 ,总计 2 0 74例中筛选出重叠的病例 180例。ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｅ ,抗 ＨＢｃ ,抗 ＨＡＶ ,抗 ＨＣＶ的检测采用深圳月亮湾公司生产的ＥＬＩＳＡ试剂盒 ,ＨＢｃＡｇ采用武汉市第七医院的ＥＬＩＳＡ试…     

用热启动聚合酶链反应检测血清中乙型肝炎病毒DNA技术的建立和应用

建立了热启动聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的技术。ＰＣＲ所有反应成分被２次加样。先加Ａ液（含ｄＮＴＰｓ、一对引物和ＭｇＣｌ＿２）与一粒石蜡珠。７０℃加热后冷却至室温，使蜡珠先融化后凝固形成蜡盖封住Ａ液，然后在向其上加入Ｂ液（含耐热性ＤＮＡ聚合酶、ＨＢＶＤＮＡ模板和ＫＣｌ）并开始循环扩增。当反应管内第一次变性温度升至６０℃以上时，中隔蜡层融化，蜡上浮形成防蒸发屏障，Ａ、Ｂ两液则由于热分子运动而混匀，从而保证引物与靶基因在较高温度下严格退火以减少错导非特异性扩增和引物聚体形成。提高了ＰＣＲ的特异性和灵敏性，应用这种技术对７６例肝炎血清进行了检测，结果ＨＢＶＤＮＡ检出率为６８％，其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为１００％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢｅ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为７０％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢＣ（＋）血清检出率为８９％；抗ＨＢＣ（＋）血清检出率为对％；标记全阴性血清检出率为３３％。     

乙型肝炎患者表面抗原与抗体检测和分析

我们采用Ａｂｂｏｔｔ公司的ＩＭｘ自动免疫分析仪及其微粒子酶免分析法进行ＨＢ ｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｅ和抗 ＨＢｃ的检测 ;采用美国Ｂｉａｔｒｏｎｉｃｓ公司建立的Ａｍ ｐｌｉｓｅｎｓｏｒ法进行ＰＣＲ定量检测 ;采用ＰＣＲ产物直接测序。统计学方法 ,率采用ｘ2 检验 ;均数采用ｔ检验 ;相关性采用直线回归分析。共调查 317例 ,男 2 5 4例 ,女 6 3例 ,年龄 2～77岁 ,平均 (32 9± 14 7)岁 ,共检出ＨＢｓＡｇ与抗 ＨＢｓ同时阳性者 2 9例 ,总检出率 9 15 % ,其中无症状感染者 4 6 9% (3/6 4)、急性肝炎 0 (0 / 16 )、…     

血清CG、HA RIA在慢性HBsAg携带者中的应用价值

应用ＲＩＡ的方法对 40 2例慢性ＨＢｓＡｇ携带者进行了血清甘胆酸 (ＣＧ)、透明质酸 (ＨＡ)检测 ,旨在探讨慢性ＨＢｓＡｇ携带者肝脏功能的变化及其临床意义。资料和方法一、对象 :(一 )实验组 :按 1995年 5月北京第五次全国传染病寄生虫学术会议讨论修订的《病毒性肝炎防治方案 (试行 )》标准选择的慢性ＨＢｓＡｇ携带者 40 2例 (男 2 74,女 12 8) ,年龄 11～78岁 ,平均 39.5岁。检测ＣＧ、ＨＡ的同时均做了ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ·ＩｇＭ复合物ＲＩＡ。(二 )正常对照组 :10 3例 (男 83 ,女 2 0 ) ,年龄 19～ 5 2岁 ,平均 32 3岁。均系…     

戊型病毒性肝炎1 7例临床分析

我们对 17例急性、亚急性重症戊型肝炎进行了分析。1　材料和方法1.1　病例　 17例戊型病毒性急性和亚急性重型肝炎患者均为 1992～ 1996年间 30 2医院的住院病人。男 14例 ,女 3例。平均年龄为 5 0 .35岁 (2 1～ 6 8岁 ) ;6 0岁以上者 6人 ,占 35 .2 9%。急性重型5例 ,亚急性重型 12例。临床诊断和分型按 1995年北京全国传染病寄生虫病学术会议修定的标准。1.2　检测方法和试剂　乙型肝炎五项指标及抗 ＨＢＣＩｇＭ ,抗 ＨＣＶ、抗 ＨＥＶ、抗 ＨＥＶＩｇＭ、抗 ＨＡＶＩｇＭ、抗 ＣＭＶＩｇＭ、抗 ＥＢＶＩｇＭ、抗 ＨＤＩｇＭ及 ＨＤ…     

无症状、无体征乙肝病毒携带者CG测定的临床意义

为了探讨甘胆酸在无症状、无体征乙型肝炎病毒表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)阳性血清中的水平及临床意义 ,我们随机检测了14 2例乙肝五项查体者的血清甘胆酸 (ＣＧ) ,现将结果报告如下。资料和方法一、资料一 )正常对照组 :4 2人 (其中五项全阴者 30人 ,仅抗 -ＨＢｓ阳性者 12人 ) ,年龄 18～ 5 6岁 ,肝肾功能 (ＴＢ、ＤＢ、ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＢＵＮ、Ｃｒ等 )检查正常。(二 )无症状、无体征乙肝病毒携带者 10 0人 ,其中大三阳 (ＨＢｓＡｇ +ＨＢｅＡｇ +抗 -ＨＢｃ +) 6 0人 ,小三阳 (ＨＢｓＡｇ +抗 -ＨＢｅ +抗 -ＨＢｃ +) 4 0人 ,年龄 12～ 5 0…     

318对青年婚前检查乙型肝炎三系调查

为了解龙泉市男女青年婚前检查中发现的乙型肝炎 (乙肝 )的发病情况 ,特将 1 998年全年中来妇幼保健所进行婚检的 31 8对男女青年乙肝三系的检查中ＨＢｓＡｇ、大三阳 (ＨＢ ｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｃ)、小三阳 (ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｅ、抗 ＨＢｃ)男女青年分别进行统计 ,以针对性进行健康婚育指导 ,现报告如下。龙泉市妇幼保健所婚检科把 1 998年全年来所进行婚前检查男女青年共 31 8对 ,全部进行乙肝三系检查。ＨＢＶＭ检测试剂盒为上海荣盛生物技术有限公司产品 ,均按各盒说明书操作。结果发现 ,男性青年ＨＢｓＡｇ阳性 3例 ,阳…     

抗HBsAg人IgG表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

目的 尝试将１株来源于人源性噬菌体抗体库的抗ＨＢｓＡｇ人Ｆａｂ,转换成完整的抗ＨＢｓＡｇ人ＩｇＧ。方法 采用重叠ＰＣＲ方法,在抗ＨＢｓＡｇ人Ｆａｂ和Ｖκ的ＶＨ基因的５’端接上人工合成的人κ链的前导序列,构建表达完整ＩｇＧ１的真核表达载体,转染ＧＨＯ（ＤＨＦＲ＾－）细胞,用ＥＬＩＳＡ、ＲＴ－ＰＣＲ和免疫印迹检测抗ＨＢｓＡｇ人ＩｇＧ的表达。通过ＤＨＦＲ／ＭＴＸ体系及金属离子诱导提高Ｉｇ表达。结果：获得     

病毒性肝炎合并溶血性贫血3例分析

我们对 3例不同型病毒性肝炎继发溶血性贫血 (溶贫 )进行了血液学、骨髓片及血清病毒标志物的检测。以进一步认识溶贫的发病机理 ,有助于临床及时诊断和治疗。病例 1 :男性 ,37岁 ,因乏力 ,腹胀 ,尿少 2月余 ,加重半个月 ,发热 4天入院。体检 :皮肤、巩膜黄染 ,贫血貌 ,腹水症(++++)。实验室检查 :ＡＬＴ 50Ｕ Ｌ ,ＡＳＴ 1 35Ｕ Ｌ ,ＢＩＬ因多次抽血均溶血未测得结果。血清ＥＬＩＳＡ法测得ＨＢｓＡｇ(+) ,抗 ＨＢｅ(+) ,抗 -ＨＢｃ的抑制率为 98% ,抗 -ＨＣＶ(+) ,ＰＣＲ法测得ＨＣＶＲＮＡ(+)。ＲＦ(+) ,ＩｇＭ增高。ＣＴ、Ｂ超检查为…