PDGFR及c-Fos的表达与膀胱癌临床生物学特征的关系

目的探讨膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)组织中血小板源性生长因子受体(PDGFR)及癌蛋白c-Fos(c-Fos)的表达与BTCC的关系。方法应用免疫组化SP法检测43例BTCC组织、11例正常膀胱组织、14例癌旁组织中PDGFR及c-Fos的表达。结果PDGFR表达于胞膜、核膜和胞质;c-Fos表达于胞核和胞质。PDGFR和c-Fos在BTCC组织表达阳性率均显著高于正常和癌旁组织(P<0.05);两者在BTCC血管中的染色明显深于正常血管。c-Fos的表达在BTCC的分级中存在显著性差异(P<0.05)。结论PDGFR和c-Fos的表达可调控膀胱的多种组织,过度表达与BTCC的发生密切相关,并可能与肿瘤的血管形成相关。c-Fos的表达可反映BTCC细胞的增殖状态。     

膀胱移行细胞癌组织中E2F3、C-myc和Bcl-2的表达及其与膀胱癌相关性研究

目的:探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)组织及正常膀胱黏膜组织中E2F3基因及其下游相关基因C-myc和Bcl-2的表达情况,同时分析E2F3、C-myc和Bcl-2的表达与临床病理参数之间的关系及3个指标之间的相关性,初步揭示BTCC发生、发展的分子机制。方法:检测不同病理分期及组织分级的BTCC标本和正常膀胱黏膜中E2F3、C-myc与Bcl-2蛋白的表达情况,分析E2F3 mRNA在不同组织中的表达情况,探讨BTCC组织中E2F3、C-myc与Bcl-2蛋白的表达之间的关系及三者与临床病理参数之间的关系。结果:E2F3表达阳性率在膀胱移行细胞癌与正常膀胱黏膜中的差异有显著性(P<0.05),且与肿瘤分级和分期密切相关(P<0.01)。肿瘤组织中E2F3 mRNA阳性表达而正常黏膜中E2F3 mRNA呈阴性表达。C-myc及Bcl-2在移行细胞癌组及正常膀胱黏膜中的表达率均有显著性差异(P<0.01)。其中移行细胞癌组C-myc表达与病理分级、组织分期有关(P<0.01),Bcl-2的表达率只与病理分级相关(P<0.01)。结论:E2F3与膀胱癌的恶性程度密切相关,其不仅是膀胱癌的诊断与预后指标,而且为膀胱癌的基因靶向治疗提供理论依据。E2F3与靶基因C-myc和Bcl-2的表达密切相关,E2F3可能通过与C-myc及Bcl-2协同作用共同参与了膀胱移行细胞癌的发生、发展。     

膀胱移行细胞癌survivin与血管内皮生长因子表达相关性及其临床意义

目的：检测膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma，BTCC)中凋亡抑制蛋白survivin的表达，研究其与膀胱移行细胞癌临床特征的关系：同时研究survivin与血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性，探讨survivin在膀胱移行细胞癌发生发展中的作用及机制。方法：采用原位杂交技术，检测42例膀胱移行细胞癌组织及20例癌旁非癌组织和16例正常膀胱黏膜中survivin和VEGF mRNA的表达。结果：42例膀胱移行细胞癌组织中23例检测到survivin mRNA，其中21例VEGF表达阳性．2例VEGF表达呈阴性：19例未检测到survivin mRNA者VEGF的表达1例阳性，18例阴性。而在癌周非癌组织和正常膀胱黏膜未检测到survivin mRNA。survivin的表达与膀胱移行细胞癌的临床分期、病理分级相关，而且与膀胱移行细胞癌的浸润性生长有关。相关性检验示survivin与VEGF之间有相关性。结论：BTCC中survivin、VEGF mRNA表达均上调，共同参与BTCC发生和发展,VEGF与survivin有协同表达关系。     

P53在初发性、复发性膀胱肿瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨凋亡相关蛋白P53在不同人群、临床类型、病理分级的膀胱移行细胞癌（bladder transitional cell cancer，BTCC）中的表达，及其与影响膀胱肿瘤的预后因素（肿瘤数目、TNM分期、淋巴结转移、组织学分级等）的相关性。方法 应用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（S—P法），检测P—gP、Bcl-2、p53在100例随访3年的膀胱移行细胞癌中的表达，同时以30例肾移植手术受者或前列腺增生患者的正常膀胱组织作对照。结果 p53在正常组织、初发性膀胱癌、复发性膀胱癌中的表达分别为6．7％、36．9％、71．4％。p53的表达在复发组高于初发组（P〈0．05）。p53的表达率随膀胱移行细胞癌的病理分级的升高而逐渐增高（P〈0．05），p53基因表达与膀胱移行细胞癌的临床分期呈正相关（P〈0．05）。总体复发率为46．2％。p53的表达水平均与无复发生存率及复发间隔时间密切相关（P〈0．05）。结论：（1）检测P53可能对膀胱移行细胞癌的预测复发有意义；（2）P53的高表达可以作为膀胱移行细胞癌分化不良的标志。     

组织芯片技术检测肿瘤相关抗原在膀胱癌、癌旁组织中的表达

目的利用组织芯片技术检测人膀胱移行细胞癌（bladder transitional cell carcinoma,BTCC）组织、癌旁组织中肿瘤相关抗原（tumor-associated antigen,TAA）的表达．方法含40块不同病理分级的人膀胱癌和40块癌旁组织组合的组织芯片一张,含64块不同病理分级的人BTCC组织芯片一张．免疫组织化学Elivision法检测膀胱癌组织和癌旁组织中TAA的表达,并对不同病理分级BTCC组织中TAA的阳性表达率进行比较．结果膀胱癌TAA的阳性染色主要位于细胞膜,BTCC组织中的总表达率为72．5％（29／40）,癌旁组织中的总表达率为30％（12／40）,差异有统计学意义（P〈0．05）．96块不同病理分级的BTCC组织中,TAA的阳性表达率分别是：G164．3％（9／14）、G269．8％（30／43）,G374．4％（29／39）．两两比较,TAA在G1、G2和G3中的阳性表达无差异性,P〉0．05,差异无统计学意义．结论膀胱癌组织中TAA的阳性表达率显著高于癌旁组织,TAA的表达和BTCC病理分级无关．组织芯片技术是检测膀胱癌TAA的一种有效方法,具有高效、快捷的优点．     

膀胱移行细胞癌中粘蛋白MUC1的表达与肿瘤浸润性树突状细胞的分布

目的研究膀胱移行细胞癌中粘蛋白MUC1表达和肿瘤浸润性树突状细胞（TIDC）分布的变化，探讨二者在膀胱癌侵袭、转移及化疗耐药过程中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测MUC1和TIDC在膀胱移行细胞癌的表达和定位及MUC1在T-24细胞、BIU-87和耐药株BIU-87／A中的表达。应用流式细胞仪检测BIU-87、耐药株BIU-87／A及T-24细胞在阿霉素、长春新碱、顺铂3种化疗药物作用48h后的凋亡率：结果MUC1在各期膀胱移行细胞癌中均表达，表达模式各有特点，MUC1的染色分型同肿瘤的病理分级和临床分期密切相关（P〈0．001）。DC的数量同肿瘤病理分级呈负相关．随着病理分级的升高阳性细胞数明显减少（P〈0．005）。MUC1存BIU-87、T-24细胞膜、胞浆中均有浅棕色弱阳性表达，在BIU-87／A的胞膜、胞浆中均有深棕色强阳性表达，两者细胞平均光密度值差异有显著性（P〈0．01）。流式细胞仪检测BIU-87、T-24和BIU-87／A的自发凋亡率分别为1．15％、1．40％、0．90％，在阿霉素、长春新碱、顺铂3种化疗药物作用48h后．BIU-87的凋亡率分别为45．69％、47．70％、44．50％，T-24的凋亡率分别为43．79％、46．17％、44．50％，均有明显升高（P〈0．01），但两种细胞之间及3种化疗药之间差异无显著性（P〉0．05）。耐药株BIU-87／A在阿霉素、长春新碱作用48h后的凋亡率分别为19．88％、21．41％．均明显低于亲本细胞株BIU-87（P〈0．05）。结论MUC1的表达模式和TIDC数量的监测可以作为膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的判断指标。TIDC的减少可能是膀胱癌免疫逃逸和耐受的重要环节，肿瘤细胞表面高密度的MUC1可能参与膀胱移行细胞癌侵袭转移和化疗耐药机制。     

人端粒酶逆转录酶在膀胱肿瘤中的表达及其与预后的关系

目的检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)在膀胱肿瘤中的定量表达,探讨hTERT与膀胱肿瘤预后复发的关系。方法采用免疫组织化学法和高清晰彩色医学图文分析系统,对45例膀胱移行细胞癌(BTCC)组织标本中的hTERT的表达情况进行定量检测,并用13例正常膀胱组织标本作为对照。结果BTCC组织标本中均可见有hTERT的表达,正常膀胱组织中无表达。hTERT的表达强度与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、部位以及肿瘤的单多发等情况无关(P>0.05),而与肿瘤复发有关(P<0.05)。结论hTERT在膀胱肿瘤中表达上调,其活性与预后相关,可以作为检测肿瘤复发的指标。     

膀胱移行细胞癌中PAK1蛋白表达及其临床意义

目的探讨p21-激活激酶1（PAK1）基因在膀胱移行细胞癌中的蛋白表达及其临床病理学意义。方法运用免疫组化和TUNEL方法,结合组织芯片技术,检测PAK1基因在100例膀胱移型细胞癌和30例癌旁正常膀胱黏膜组织中的表达及其与细胞凋亡的关系。结果全部正常膀胱黏膜组织均呈PAK1蛋白阴性或低水平的表达。膀胱移行细胞癌中,有58％出现PAK1蛋白的过度表达;而且与肿瘤的病理分级和瘤体大小均有显著的相关性（P〈0．05）,其中78％分化差（G3级）和73％瘤体直径≥3cm的膀胱癌出现PAK1蛋白过度表达,其过度表达率明显高于分化较好（G1／G2级）（47％）和瘤体直径〈3cm（50％）的肿瘤。另外,PAK1蛋白表达与本组膀胱移行细胞癌的细胞凋亡指数负相关（P〈0．05）。结论膀胱移行细胞癌中PAK1蛋白表达上调可能部分地通过其抗细胞凋亡效应,在肿瘤的发生发展中起重要作用;PAK1过度表达与膀胱移行细胞癌的恶性组织学表型密切相关,可以作为评估该肿瘤恶性程度的分子标记之一。     

Expression and Prognostic Significance of Livin in the Progression of Bladder Cancer

It has been suggested that progression of bladder transitional cell cancer (BTCC) may be regulated at the molecular level by a typical pattern of expression of genes involved in apoptosis. Re-cently Livin, belonging to the inhibitors of apoptosis (IAP) family, has been found to be expressed in most solid tumors, where its expression is suggested to have clinical significance. In order to explore the significance of Livin expression in the development of BTCC, immunohistochemistry and RT-QPCR were used to detect the expression of Livin mRNA in tumor tissues and adjacent normal tissues of 30 cases of BTCC. The results showed that the positive rate of Livin expression in adjacent normal tissues and tumor tissues was 0 and 60% (18/30) respectively. The -△△CT value of Livin in BTCC tissues was 8.0454 (7.4264-8.6644) times of that in adjacent normal tissues. The expression of Livin mRNA had no correlation with tumor pathological grades and clinical stages. It was sug-gested that there was weak expression of Livin mRNA in adjacent normal tissues, but strong in tumor tissues.     

Smad4与TGF-β1在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的：检测膀胱移行细胞癌（BTCC）中Smad4及TGF-β1表达，分析其与BTCC临床分期、病理分级、转移及复发的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测42例BTCC组织smad4和TGF-β1的表达。结合临床病理资料，分析Smad4，TGF-β1与BTCC的侵袭、血管生成、转移及复发间的关系以及Smad4蛋白表达与TGF-β1表达的相关性。结果：Smad4蛋白阳性表达染色位于细胞浆内，BTCC组中阳性率（33．3％）明显低于对照组（83．3％），且随BTCC临床分期及病理分级的升高而降低，肿瘤复发组低于无复发组，肿瘤转移组低于无转移组（P〈0．05）。TGF-β1蛋白在正常膀胱组织与BTCC组织中均有表达，其阳性表达率分别为100％和64．3％（P〈0．01）。BTCC中smad4蛋白与TGF-β1蛋白的表达均下调，且呈正相关（r=0．829，P=0．000）。结论：随肿瘤临床分期的升高、组织学分级的升高及肿瘤的转移复发，BTCC中Smad4蛋白与TGF-β1蛋白表达均明显下调。     

膀胱移行细胞癌中凋亡抑制因子survivin的表达及意义

目的研究凋亡抑制因子survivin在BTCC中的表达及其与肿瘤分级、分期、复发之间的关系.方法采用免疫组化法(ABC法),对52例BTCC和10例正常膀胱中survivin的表达情况进行检测,分析其在膀胱癌和非癌膀胱组织中的表达以及与肿瘤病理学分级、分期和患者复发情况的关系.结果survivin的表达随BTCC的病理分级、分期的增高而相应增高,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中表达率分别为60.0%、70.8%、100%,浅表性(Tis～T1)、浸润性(T2～T4)中表达率分别为43.5%、93.1%,初发BTCC、复发BTCC表达率为59.4%、90.0%(P＜0.05).结论细胞凋亡抑制因子surwivin在BTCC组织中表达上调,提示survivin可能通过抑制细胞凋亡,对BTCC的发生发展起重要作用;survivin随BTCC病理分级、分期增高而表达增高,并与肿瘤复发有关,survivin有可能作为判断分级、分期,监测复发的指标;survivin可能为膀胱癌基因治疗提供新的合理靶点.     

胃癌组织中TFF3和PDGFR的表达及临床意义

目的 检测TFF3和PDGFR在人的胃癌组织中的表达状况,分析二者表达的相关性及其与临床病理特征的联系,探讨TFF3和PDGFR在胃癌的发生、发展过程中的作用及二者可能的相互机制。 方法 采用免疫组织化学Elivision染色法,检测蚌埠医学院第一附属医院自2010年7月-2011年6月间,60例胃癌标本及每例标本所对应的癌旁正常组织中TFF3和PDGFR的表达情况,比较胃癌组织与癌旁正常组织中TFF3和PDGFR表达的差异,分析两者表达与临床病理特征的关系以及二者间的相互关系。 结果 TFF3阳性表达位于细胞质和细胞膜中,在胃癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁正常胃组织,差异具有统计学意义(P<0.05),TFF3的表达与TNM分期(P=0.007)及淋巴结转移(P=0.003)因素有关;PDGFR阳性表达位于细胞质中,在胃癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁正常胃组织,差异具有统计学意义(P<0.05),PDGFR的表达与TNM分期(P=0.001)、淋巴结转移(P=0.010)及有无突破浆膜层(P=0.004)等因素有关。胃癌组织中TFF3和PDGFR的表达呈正相关(r=0.348,P=0.007)。 结论 TFF3与PDGFR在胃癌组织中的表达呈正相关,提示它们之间可能存在某种协同机制,共同参与了胃癌的发生和发展。联合检测胃癌组织中TFF3和PDGFR的表达有助于对胃癌恶性程度和侵袭能力的判断。      

存活素基因表达与膀胱癌细胞增殖活性的关系

目的:探讨存活素基因在膀胱移行细胞癌中的表达,以及存活素基因表达与癌线胞的凋亡和增值活性的关系。方法:应用Western blot定量分析检测存活素蛋白在128例膀胱移行细胞瘤组织中的表达水平,原位DNA片段末端标记法检测肿瘤细胞的凋亡指数(Al),Ki-67单克隆抗体检测肿瘤细胞的增殖活性(Ki-67LI)。结果:Wstern blot分析结果表明在肿瘤组织中可检测到存活素的高表达,而正常膀胱组织中无存活素蛋白的表达。存活素蛋白的表达水平在肿瘤的临床分期和病理分级间差异具有显著性(P<0.05)。Spearman秩和相关检验提示存活素蛋白的表达水平与肿瘤的增值活性呈正相关(P<0.001),而与肿瘤细胞的AI无明显的相关性(P>0.005).结论:存活素蛋白表达在膀胱移行细胞癌的恶性进展中起重要作用,可作为评估膀胱移行细胞癌的恶性程度和预后的指标。     

HMGA2和E-cadherin在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其意义

目的：探讨HMGA2和E-cadherin在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与临床分期、病理分级及预后的关系。方法：选取健康人正常膀胱组织5例、膀胱移行细胞癌组织49例。49例膀胱移行细胞癌组织分为非肌层浸润组（41例）、肌层浸润组（8例）;低级别组（24例）、高级别组（25例）。应用免疫组织化学方法检测正常膀胱组织和膀胱移行细胞癌组织中HMGA2和E-cadherin蛋白的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果：5例正常膀胱组织中HMGA2呈阴性表达、E-cadherin呈阳性表达;在49例膀胱癌组织中HMGA2阳性表达率为41%、E-cadherin的阴性表达率为43%;其中在非肌层浸润组(Tis~T1)、肌层浸润组(T2)膀胱癌组织中HMGA2的阳性表达率分别为34%和75%,HMGA2在肌层浸润组阳性表达率显著高于非肌层浸润组 (P<0.05);E-cadherin阴性表达率分别为37%和75%,E-cadherin在肌层浸润组阴性表达率显著高于非肌层浸润组 (P<0.05);在低级别、高级别肿瘤中HMGA2的阳性表达率分别为25%和56%,HMGA2在高级别组阳性表达率显著高于低级别组 (P<0.05),E-cadherin阴性表达率分别为25%和60%,E-cadherin在高级别组阴性表达率显著高于低级别组 (P<0.05);术后随访18~40个月,随访42例膀胱癌患者中复发18例。在复发组与未复发组中HMGA2的阳性表达率分别为56%和25%,HMGA2在复发组阳性表达率显著高于非复发组 (P<0.05);E-cadherin阴性表达率分别为67%和33%,E-cadherin在复发组阴性表达率显著高于非复发组 (P<0.05)。结论：HMGA2、E-cadherin的异常表达与膀胱移行细胞癌的恶性程度有关联,可以作为检测膀胱移行细胞癌临床分期、病理分级及预后的重要指标。     

蛋白激酶A调节亚基1α在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：研究蛋白激酶A调节亚基1α(cAMP-dependent protein kinase type I-alpha regulatory subunit,PRKAR1α)mRNA及蛋白在非小细胞肺癌中的表达并分析其临床意义。方法：应用实时荧光定量PCR、免疫组织化学测定79例非小细胞肺癌癌组织及癌旁正常肺组织内PRKAR1α mRNA和蛋白的表达情况,结合相关临床资料进行统计学分析。结果：PRKAR1α在非小细胞癌、肺腺癌、肺鳞癌的阴性表达率分别为58.2%,77.8%,32.4%。与癌旁正常肺组织相比,PRKAR1α在肺腺癌组织内mRNA及蛋白水平呈现低表达,差异有统计学意义(P<0.05);而肺鳞癌组织PRKAR1α mRNA及蛋白水平与正常癌旁肺组织相比差异无统计学意义(P>0.05)。与肺鳞癌相比,肺腺癌PRKAR1α阳性表达率明显下降(P<0.001);与TNM分期I~II比较,III~IV PRKAR1α阳性表达率明显降低(P=0.025);有淋巴结转移者PRKAR1α阳性表达率低于无淋巴结转移者(P=0.011)。不同年龄、性别、肿瘤分化及大小、是否吸烟组间PRKAR1α阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。结论：PRKAR1α在非小细胞肺癌不同组织病理学分型中具有差异表达;在肺腺癌内呈现低表达,与肺癌分期、淋巴结转移相关,可能成为临床诊断、治疗肺腺癌新的分子靶标。     

Survivin和bFGF基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨Survivin和bFGF基因在膀胱移行上皮细胞癌（BTCC）中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化S-P法，检测46例BTCC和10例正常膀胱组织中Survivin和bFGF基因的表达。结果：Survivin和bFGF基因在正常膀胱移行上皮细胞中不表达，两种基因在正常膀胱移行上皮细胞和BTCC中的表达之间差异有统计学意义（P〈0．01）；两种基因的阳性表达水平与BTCC中的病理分级、临床分期正相关（P〈0．05）；两种基因在BTCC中的表达水平之间正相关（P〈0．01）；两种蛋白在BTCC中的表达水平与BTCC的复发率正相关（P〈0．01）；两种蛋白在BTCC中的表达水平与BTCC无病生存率正相关（P〈0．05）。结论：Survivin和bFGF异常表达在BTCC发生、发展、转移、复发等过程中起着重要作用。联合检测能更好地判断BTCC的预后和制定合理治疗方案。     

膀胱移行细胞癌组织中S期激酶相关蛋白2的表达及临床意义

目的:探讨膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell cancinoma,BTCC)组织中S期激酶相关蛋白2(S-phase kinaseassociated protein 2,Skp2)的表达与临床病理的关系。方法:用免疫组织化学S-P法检测63例BTCC和15例正常膀胱组织中Skp2的表达情况。结果:Skp2在BTCC和正常膀胱组织中的阳性率分别为47.6%和6.7%,差异有统计学意义(P0.01)。Skp2阳性率在膀胱肿瘤病理分级和临床分期中差异均有统计学意义(P0.01)。结论:Skp2可能参与BTCC的发生、发展,检测Skp2的阳性率有助于BTCC的诊断、恶性程度及预后判断。     

细胞周期调控因子P16、Rb和cyclin D1在膀胱癌中表达的意义

目的：探讨细胞周期调控因子P16-cyclin-Rb的通路与膀胱癌关系。方法：应用免疫组织化学方法检测P16、Rb和cyclin D1在膀胱癌和正常膀胱组织中表达。结果：P16和Rb在膀胱癌中表达显著低于正常组织，而且与肿瘤分级、分期密切相关，但与肿瘤复发无显著相关性；cyclin D1在膀胱癌中表达显著高于正常组织，但与肿瘤分级、分期和复发之间无显著相关性。膀胱癌中三种蛋白总异常率为97．2％，其中同时两种或三种蛋白异常率达61．1％，肿瘤复发率也增高。膀胱癌中P16与Rb和cyclin D1分别呈负相关表达。结论：P16-cyclin-Rb的通路异常与膀胱癌的发病机制密切相关，同时检测三者有助于更好了解膀胱癌生物学行动。     

Caspase-3蛋白在膀胱移行细胞癌的表达及其意义

目的:通过检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在正常膀胱黏膜组织和膀胱移行细胞癌的表达,探讨其在膀胱移行细胞癌发生、发展中的意义.方法:采用免疫组织化学(S-P法),对10例正常膀胱黏膜组织及46例膀胱移行细胞癌组织的Caspase-3蛋白表达情况进行检测.结果:膀胱移行细胞癌组织的Caspase-3蛋白表达阳性率(47.83%)明显低于正常膀胱黏膜组织(90.00%)(P<0.01),Caspase-3蛋白表达与膀胱移行细胞癌组织学分级有明显关系(P<0.01),但与其临床分期无明显关系(P>0.05).结论:Caspase-3的表达降低在膀胱癌的发生中起着重要作用.