转录因子FOXP3在宫颈鳞癌中表达的临床意义

目的 探讨转录因子FOXP3在宫颈鳞癌组织中的表达.方法 收集60例相关病例为研究对象,按病理诊断将其分为3组:即正常宫颈组织(对照组)、宫颈上皮内瘤样病变(CINⅡ-Ⅲ)组织(CIN组)、宫颈鳞癌组织(鳞癌组),每组各20例.将各组病理标本蜡块进行免疫组织化学染色及HE染色,检测转录因子FOXP3的表达,并结合临床、...     

FOXP3基因与自身免疫性疾病

自身免疫性疾病系由于机体免疫系统失衡,产生针对自身组织的免疫应答并导致自身组织、器官损害的一类疾病。调节性T细胞（Treg细胞）是一类具有独特免疫调节作用（低反应性与免疫抑制性）的T细胞,高表达CD25,主要分泌TGF-β、IL-10等细胞因子,通过抑制自身反应性T细胞的免疫反应,抑制T细胞的活化及促进某些抑制性细胞因子的分泌等,在外周免疫耐受的维持中发挥重要作用,从而影响自身免疫性疾病的发生与预后。FOXP3基因特异性表达于Treg细胞表面,是Treg细胞的标志物。该基因可以通过对Treg细胞及多种免疫细胞进行调控,从而影响自身免疫性疾病的发生、发展。该基因的单核苷多态性也与多种自身免疫性疾病的易感性相关。通过对该基因的研究,有望通过基因治疗为自身免疫性疾病带来希望。     

宫颈癌组织中FOXP3的表达及其意义

目的研究FOXP3在宫颈癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测70例宫颈鳞癌、30例宫颈腺癌及25例宫颈炎组织中FOXP3的表达情况。结果 FOXP3表达于淋巴细胞,定位于细胞核。每高倍视野下宫颈鳞癌及宫颈腺癌的FOXP3+淋巴细胞数分别为(60.03±28.72)及(27.17±14.08),均明显高于宫颈炎的FOXP3+淋巴细胞数(4.64±4.62,P<0.05);宫颈鳞癌的FOXP3+淋巴细胞数亦高于宫颈腺癌(P<0.05)。结论 FOXP3在宫颈癌组织中的表达增高,且在癌组织学分型上也存在明显差异。     

转录因子Foxp_3在免疫调节中的研究进展

Foxp3是forkhead/winged-helix家族转录因子中的一员,最近的研究表明其组成性表达于机体的CD4+CD2+5T调节细胞(CD4+CD2+5 Treg cell),是调节性T细胞的特征性标志,介导T调节细胞在胸腺的发育、外周表达及功能维持。Foxp3对于维持机体免疫耐受和免疫应答稳态具有非常重要的作用,对其进行深入研究,在X连锁的遗传性疾病(IPEX)、自身免疫性疾病、肿瘤和艾滋病的治疗以及移植耐受的诱导等方面具有广泛的应用前景。     

CD4+Treg细胞在不稳定型心绞痛中的变化及其意义

目的 研究Treg细胞在不稳定型心绞痛中(UA)的表达及其意义,并探讨Treg细胞在不稳定型心绞痛患者与健康人之间的差异.方法 流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞和CD4+FOXP3+T细胞分别占CD4+T细胞的比例,采用直接免疫荧光法,以winmdi29软件系统分析.结果 CD4+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例:UA组低于正常对照组(t= 8.43,P<0.01)差异有统计学意义;CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例:UA组明显低于正常对照组(t=14.67,P<0.01),差异有统计学意义.结论 Treg细胞数量在UA组中明显减少,提示不稳定型心绞痛患者的免疫系统存在异常.     

CD4^＋ Treg细胞在不稳定型心绞痛中的变化及其意义

目的研究Treg细胞在不稳定型心绞痛中（UA）的表达及其意义,并探讨Treg细胞在不稳定型心绞痛患者与健康人之间的差异。方法流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞和CD4＋FOXP3＋T细胞分别占CD4＋T细胞的比例,采用直接免疫荧光法,以winmdi29软件系统分析。结果 CD4＋FOXP3＋T细胞占CD4＋T细胞的比例：UA组低于正常对照组（t=8.43,P〈0.01）差异有统计学意义;CD4＋CD25＋T细胞占CD4＋T细胞的比例：UA组明显低于正常对照组（t=14.67,P〈0.01）,差异有统计学意义。结论 Treg细胞数量在UA组中明显减少,提示不稳定型心绞痛患者的免疫系统存在异常。     

TIM-3在肿瘤免疫及免疫治疗中的研究进展

随着免疫检查点分子的发现以及相关研究的不断发展,免疫检查点阻断治疗成为肿瘤免疫治疗的重点研究之一。免疫检查点T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)是属于TIM家族的跨膜蛋白,表达于多种免疫细胞和非免疫细胞,是免疫负调控的重要分子之一。TIM-3不仅能降低炎症反应、介导器官移植免疫耐受、抑制自身免疫性疾病,还可引起肿瘤发生免疫逃逸。其可通过与配体相互作用激活免疫负调控通路,抑制免疫细胞活化以至于下调了免疫系统对肿瘤的杀伤作用。通过阻断TIM-3与配体的结合可恢复免疫细胞抗肿瘤免疫活性,减小肿瘤灶大小,提高肿瘤清除率。本文简要综述了近年来TIM-3在肿瘤免疫以及肿瘤免疫治疗的相关研究。     

FOXP3基因多态性在广西壮族女性人群中的分布

目的探讨FOXP3单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)在广西壮族女性人群的分布频率,并与其他人群比较分析基因遗传异质性。方法运用iMLDR技术和DNA测序检测200例广西壮族女性人群中的rs2280883和rs3761549基因型和等位基因频率,并与PubMed数据库公布的千人基因组计划人群进行比较。结果在广西壮族女性人群中,rs2280883主要以TT基因型(71.5%)为主,rs3761549主要以GG基因型(62.5%)为主。rs2280883基因型和等位基因与非洲人群、美国人群、欧洲人群和南亚人群分布频率差异有统计学意义(P<0.05)。rs3761549基因型与非洲人群、美国人群、欧洲人群和南亚人群分布频率差异有统计学意义(P<0.05);rs3761549等位基因与美国人群、欧洲人群和南亚人群分布频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论在广西壮族女性人群中,FOXP3存在rs2280883和rs3761549多态性,并且与其他种族地区(非洲、美国、欧洲和南亚)存在基因遗传异质性。     

FOXP3在急性丙型肝炎患者中的表达及其临床意义

目的:通过研究急性丙型肝炎病毒(HCV)感染患者外周血中FOXP3的表达,初步探讨其在急性丙型肝炎发病机制中的临床意义。方法:选择急性丙型肝炎患者与健康人各21例,用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+T细胞的数量;ELISA试剂盒检测患者和正常对照组外周血培养上清中Th2型细胞因子(IL-10)和Th1型细胞因子(IL-2)的表达;RT-PCR检测FOXP3的mRNA表达。结果:在急性HCV患者外周血中CD4+CD25+T细胞约占CD4+T细胞(28.2±2.1)%,显著高于正常人外周血中CD4+CD25+T细胞(2.7±0.7)%(P=0.032);急性HCV组外周血CD4+CD25+T细胞高表达FOXP3;急性HCV组外周血单个核细胞(PBMC)培养上清主要分泌IL-10,而IL-2分泌无显著变化。结论:急性HCV感染者Th1免疫抑制可能与外周血CD4+CD25+T细胞高表达FOXP3有关。     

CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在不明原因复发性自然流产中的作用

 【目的】 检测不明原因复发性自然流产(URSA)患者外周血及蜕膜的CD4+ CD25high T细胞和FOXP3的表达,探讨CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在母胎免疫耐受中的作用&;#65377;【方法】 选择从2005年9月至2006年6月就诊的154例URSA患者根据就诊时的妊娠状态分成未孕组129例,早期流产组25例;正常早孕要求人工终止妊娠的妇女组50例及正常未孕女性组42例为对照组&;#65377;收集所有研究对象的外周血及由于计划外妊娠要求行人工流产者和已确认胚胎停育的URSA患者行清宫术后的新鲜蜕膜组织,采用流式细胞仪分析外周血及蜕膜组织CD4+ CD25+ 调节性T细胞及其亚群的比例及FOXP3表达&;#65377; 【结果】 ①外周血及蜕膜中CD4+ CD25high T细胞的比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞高于正常未孕妇女及URSA流产组, 差异有统计学意义(P < 0.01),URSA未孕患者外周血CD4+ CD25high T细胞也显著低于正常未孕女性及URSA流产患者(P < 0.01);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞低于正常早孕妇女蜕膜(0.62 ± 0.27 vs. 1.41 ± 0.31, P < 0.01)&;#65377;②外周血及蜕膜中FOXP3表达比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例为(95.6 ± 3.6),高于正常未孕妇(92.1 ± 3.4)及URSA流产患者,差异有统计学意义(P < 0.01;P < 0.05);URSA未孕组患者外周血中FOXP3的表达与正常未孕妇女及URSA流产组之间相比无统计学差异(P > 0.05);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例低于正常早孕妇女蜕膜,差异有统计学意义(94.3 ± 3.1 vs. 97.1 ± 2.2, P < 0.01)&;#65377;【结论】 CD4+CD25high T细胞在维持正常妊娠中发挥重要作用,URSA的发生与CD4+CD25high T细胞的减少有关,URSA患者CD4+ CD25high T细胞比例下降与FOXP3表达的降低有关&;#65377;     

哮喘患儿CD4+CD25+调节性T细胞及FOXP3的表达

目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘儿童外周血中的比例改变,并探讨其临床意义.方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测急性发作期哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg及其调控基因FOXP3的表达,并与健康对照组进行比较.结果:急性发作期哮喘患儿外周血CD4和CD25双阳性细胞所占比例与健康对照组无明显差异(P>0.05),而CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显低于健康对照组(P<0.01).结论:哮喘患儿外周血CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显减少,可能与哮喘的发病机制有关.     

酵母双杂交系统筛选FOXP3的相互作用蛋白

目的 利用酵母双杂交系统筛选与人FOXP3相互作用的蛋白.方法 应用酵母双杂交系统,将成功构建的酵母诱饵表达载体pGBKT7-FOXP3,与转化了成人肝cDNA文库的酵母菌Y187接合,筛选与FOXP3相互作用的蛋白,通过一对一的回复性杂交实验排除假阳性,并对阳性克隆进行序列测定和生物信息学分析.结果 经过酵母双杂交共获得最终确认3个阳性克隆,测序后经生物信息分析为肿瘤蛋白D52、分裂因子3b及未知蛋白.结论 成功应用酵母双杂交系统筛选出与FOXP3相互作用的3个蛋白,它们可能与Treg细胞的发育分化及其功能有关.     

FOXP3和GITR在口腔扁平苔藓中的表达及意义

目的 研究FOXF3、GITR在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达及其意义.方法 采用免疫组化方法检测30例OLP组织和15例口腔正常黏膜(NOM)组织中FOXP3、GITR的表达.结果 NOM组FOXP3和GITR均阴性表达;OLP组FOXP3和GITR表达分别较NOM增加(P相似文献   

实时荧光定量RT-PCR检测人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA的表达

目的：建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应（real-time fluorescence quantitative RT-PCR）检测人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA的方法,并研究其与CD4＋CD25＋Treg细胞活性相关性。方法：提取人外周血单个核细胞总RNA,将mRNA逆转录成cDNA,以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR检测29例哮喘患儿及24例同龄对照FOXP3 mRNA的相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性;同时采用流式细胞技术检测CD4＋CD25＋Treg细胞含量,分析两者相关性。结果：哮喘患儿组CD4＋CD25＋Treg细胞百分率明显低于同龄对照组,P〈0.01;FOXP3 mRNA的表达也显著降低,P〈0.05;FOXP3和β-actin的融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为82.4℃和87.8℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。结论：应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术检测FOXP3 mRNA表达水平简便易行、结果稳定可靠。初步结果证实,外周血CD4＋CD25＋Treg细胞数量和FOXP3 mRNA表达有相同的趋势,存在一定的相关性。     

乙肝患者外周血单个核细胞FOXP3 mRNA表达检测方法的建立及应用

目的:比较乙肝患者与健康人外周血单个核细胞(PBMC)中 FOXP3 mRNA表达水平差异. 方法:利用实时荧光定量RT-PCR的方法检测25例慢性乙肝患者以及11名健康人PBMC中FOXP3 mRNA的水平. 结果:乙肝患者PBMC中FOXP3 mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01),且与血清中的病毒含量呈正相关(r=0.70,P＜0.01),而与谷丙转氨酶(ALT)水平无关(r=0.06,P＞0.05). 结论:慢性乙肝患者FOXP3表达水平可能是HBV感染持续的一个因素.     

Screening of FOXP3-interacted proteins by yeast two-hybrid technique

Objective： To screen the proteins interacting with the Treg specification factor forkhead box protein P3 （FOXP3） by yeast two-hybrid system, Methods： Human FOXP3 gene was amplified by nest RT-PCR from peripheral blood mononuclear cells （PBMC） and inserted into plasmid pGBKT7 to construct the bait vector, then the self-activation and toxicity of the bait vector in host yeast strain AH109 were observed. Thereafter, a human liver cDNA library was screened by the bait vector. The positive clones were selected out by nutrient-deficient culture and back-hybridizing. The sequences from the candidate positive clones were blasted and analyzed by bioinformatics methods. Results： The constructed bait vector encoding FOXP3 was found no self-activation and toxicity in yeast AH109. Three proteins which interacted with FOXP3, including tumor protein D52, splicing factor 3b subunit 1 and hypothetical protein, were identified. Conclusion： Three new candidate proteins interacting with FOXP3 are selected out by this yeast two-hybrid system and library, which may facilitate the further study of FOXP3 in Treg.     

CD25及FOXP3在支气管哮喘小鼠中的表达以及地塞米松的干预作用

目的 分析哮喘小鼠模型肺组织及骨髓中CD25及FOXP3的表达,以及地塞米松的干预作用.方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照、哮喘及地塞米松干预组,通过HE染色观察肺组织的病理变化,应用Western blot、RT-PCR方法检测肺组织FOXP3及CD25的表达,RT-PCR方法检测哮喘及地塞米松干预组肺及骨髓FOXP3 mRNA表达.结果 哮喘及地塞米松干预组肺组织FOXP3表达强于正常对照组(P<0.05),地塞米松干预促进FOXP3表达(P<0.05);哮喘及地塞米松干预组肺组织CD25表达强于正常对照组(P<0.05),而两组之间无明显差异(P>0.05);哮喘及地塞米松干预组肺组织及骨髓细胞均有FOXP3 mRNA表达,且地塞米松组强于哮喘组(P<0.05).结论 哮喘小鼠肺内CD25及FOXP3表达增强,地塞米松会促进其表达;哮喘小鼠骨髓有F10XP3表达,地塞米松促进其表达.