生长分化因子-9和卵母细胞体外成熟培养

人卵母细胞体外成熟培养(IVM)在辅助生殖技术中逐渐显示出重要的临床价值.但胚胎发育潜能差,妊娠率低,阻碍了其在临床上的广泛应用.某些细胞因子可能是卵母细胞体外培养的新研究途径,为研究生长分化因子-9(QDF-9)的现状及其在IVM中的作用,参考国内外近年来的研究,发现GDF-9能促进卵母细胞的正常生长及减数分裂,促进初级卵泡颗粒细胞继续生长、增殖,对卵泡的生长和分化起着重要作用,可能是卵母细胞体外培养研究的新途径.     

人未成熟卵母细胞体外成熟影响因素的探讨

随着阴道B超、胞浆内单精子注射(ICSI)技术的开展,未成熟卵母细胞体外成熟培养(IVM)已成为治疗不孕症的一种经济有效的新途径。向IVM培养系统添加促性腺激素、卵泡液、表皮生长因子、血管内皮生长因子、抑制素/激活素、人绒毛膜促性腺激素以及共培养系统有助于卵母细胞体外成熟。根据卵母细胞所处发育阶段选择不同的培养系统,探索卵母细胞的生长和成熟是未来的重要研究方向。     

人未成熟卵母细胞体外成熟影响因素的探讨

随着阴道B超、胞浆内单精子注射(ICSI)技术的开展,未成熟卵母细胞体外成熟培养(IVM)已成为治疗不孕症的一种经济有效的新途径.向IVM培养系统添加促性腺激素、卵泡液、表皮生长因子、血管内皮生长因子、抑制素/激活索、人绒毛膜促性腺激素以及共培养系统有助于卵母细胞体外成熟.根据卵母细胞所处发育阶段选择不同的培养系统,探索卵母细胞的生长和成熟是未来的重要研究方向.     

生长分化因子9在卵泡发育中的调控作用

生长分化因子9(GDF-9)是转化生长因子β(TGF-β)超家族成员之一,主要表达于卵母细胞,调节卵泡形成。GDF-9除了促进卵母细胞生长与分化外,还作为旁分泌因子促进颗粒细胞增生和卵丘膨胀,抑制颗粒细胞和卵泡膜细胞分化。综述了GDF-9的表达时间和定位,与垂体卵巢激素相互调节影响卵泡生成的生理作用,及在卵泡发育障碍性疾病发生中的可能机制。     

生长分化因子9在卵泡发育中的调控作用

生长分化因子9(GDF-9)是转化生长因子β(TGF-β)超家族成员之一,主要表达于卵母细胞,调节卵泡形成.GDF-9除了促进卵母细胞生长与分化外,还作为旁分泌因子促进颗粒细胞增生和卵丘膨胀,抑制颗粒细胞和卵泡膜细胞分化.综述了GDF-9的表达时间和定位,与垂体卵巢激素相互调节影响卵泡生成的生理作用,及在卵泡发育障碍性疾病发生中的可能机制.     

人脐带血清用于人未成熟卵母细胞体外成熟培养并获得妊娠的观察

目的:以人脐带血清作为卵母细胞体外成熟培养(IVM)培养液的主要成份开展IVM技术研究,旨在为IVM临床妊娠率的提高,IVM技术的进步探索一条新路。方法:47例、47个周期的PCOS患者接受了IVM技术的治疗。未成熟卵母细胞分别入IVM培养液Ⅰ(含人成熟卵泡液,卵泡液组)和IVM培养液Ⅱ(含脐带血清,脐带血清组)行体外成熟培养,分析人脐带血清对IVM结果影响。结果:脐带血组:15周期,160枚未成熟卵母细胞,体外成熟过程中,成熟率、优质胚率及临床妊娠率分别为93.75%(150/160)、50.00%(60/120)和40.00%(6/15),已分娩4例,另2例处于妊娠阶段;卵泡液组:32周期,未成熟卵母细胞349枚,成熟率、优质胚率分别为77.08%(269/349)和23.77%(53/223),胚胎移植31周期,获得7例临床妊娠,妊娠率为22.58%(7/31),目前已分娩4例,3例流产。成熟率和优质胚率方面,脐带血组高于卵泡液组。结论:人脐带血清作为IVM液的主要成份相对于人成熟卵泡液,将更加有助于未成熟卵母细胞的体外成熟培养、改善胚胎质量,并获得较好的妊娠结局。     

卵泡发育早期细胞因子对卵母细胞发育的调控

在卵泡内,卵母细胞及其周围颗粒细胞间的旁分泌作用对卵母细胞的发育和功能有重要作用.研究证实了源于颗粒细胞的酪氨酸激酶受体配体在卵母细胞生长过程中起重要作用.酪氨酸激酶受体配体和源于卵母细胞的生长分化因子-9以及骨生成蛋白-15间的相互作用表明卵母细胞和颗粒细胞在分子水平上存在复杂的作用.卵泡刺激素调控这些旁分泌作用并调节卵泡正常发育.促进卵母细胞发育的分子机制可应用于人的体外生长系统并改善生育.     

小鼠腔前卵泡体外培养方法的建立

目的建立可供毒理学研究的小鼠腔前卵泡体外培养方法。方法采用机械方法分离出生后12～14天(C57B1/6JxCBA/Ca)小鼠卵巢内直径为100～130μm的腔前卵泡,96孔板单个卵泡连续培养12天后诱导排卵16h,观察卵泡发育、激素分泌和卵子形成,并将体外卵母细胞的成熟情况(IVG)与体内卵母细胞的生长情况(IVM)进行比较,以判断体外培养方法是否成功。结果分离完整卵泡率为89.74%(376/419);培养12天卵泡存活率为96.81%(364/376),有腔形成率为48.94%(184/376);卵泡和卵母细胞直径显著增加。诱导排卵后卵丘细胞-卵母细胞复合体排出率为56.38%(212/376);培养卵泡经历从腔前卵泡到卵母细胞成熟和极体排出的形态学变化,也有部分卵泡不发生腔样结构改变。体外培养卵泡分泌E2和P激素与体内分泌特征一致。IVG组4.61%(10/217)卵母细胞不能恢复成熟[停止在生发泡期(GV期)],76.50%(166/217)停止减数分裂在生发泡破裂期(GVBD期),18.89%(41/217)卵母细胞停止在第2次减数分裂(MII期)(PB);而IVM组1.24%(3/241)的卵母细胞不能恢复成熟(停止在GV期),45.23%(109/241)停止减数分裂在GVBD,53.53%(41/241)卵母细胞停止在MII期(PB);卵母细胞染色体核型完整,无染色体数目和结构异常。结论本研究建立的小鼠腔前卵泡体外培养方法基本成功,可作为卵泡发育生理研究和毒理学研究的模型。     

添加两种不同培养成分对人未成熟卵体外成熟培养的影响

目的:研究添加两种不同培养成分对人未成熟卵母细胞体外成熟培养(IVM)的效果。方法:选择接受ICSI治疗的77名不孕患者共收集未成熟卵177枚,随机分A组(激素组)33例,添加0.075 IU/ml FSH及0.075 IU/ml LH至基础IVM培养液中;B组(成熟卵泡液组)44例,50%基础IVM培养液与50%人成熟卵泡液配成。将两组收集的未成熟卵母细胞放入不同培养液中培养48 h,每24 h倒置显微镜下观察卵母细胞的形态;对MII卵进行ICSI,ICSI操作后继续培养,ICSI后16～20 h进行受精观察,24及48 h分别进行卵裂观察及胚胎评分。结果:①B组未成熟卵母细胞48 h成熟率和MI期卵母细胞48 h成熟率显著高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),两组培养液GV期卵母细胞24和48 h成熟率比较差异无统计学意义(P>0.05)。②B组2PN卵裂率显著高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),两组2PN受精率及可利用胚胎率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人成熟卵泡液内可能含有一些未知的有利于卵母细胞成熟的因子,深入研究卵泡液的成分,进一步明确其促卵母细胞成熟机制对开发新的IVM培养液、改善IVM的临床结局有重要意义。     

生长分化因子-9与卵泡发育和卵巢早衰

生长分化因子-9是重要的卵母细胞源性生长因子。其在促进卵母细胞生长与分化以及颗粒细胞增殖、卵丘膨胀、抑制颗粒细胞和卵泡膜细胞分化的过程中起重要作用。卵巢早衰是病因不清又无有效治疗手段的复杂疾病。研究认为,卵巢内始基卵泡形成数目的减少、已形成的卵泡闭锁速度加快和对促性腺激素刺激不敏感是造成卵巢早衰的主要病因。生长分化因子-9参与了这一过程。     

生长分化因子-9与卵泡发育和卵巢早衰

生长分化因子-9是重要的卵母细胞源性生长因子。其在促进卵母细胞生长与分化以及颗粒细胞增殖、卵丘膨胀、抑制颗粒细胞和卵泡膜细胞分化的过程中起重要作用。卵巢早衰是病因不清又无有效治疗手段的复杂疾病。研究认为,卵巢内始基卵泡形成数目的减少、已形成的卵泡闭锁速度加快和对促性腺激素刺激不敏感是造成卵巢早衰的主要病因。生长分化因子-9参与了这一过程。     

生长分化因子-9与卵泡发育

GDF-9属于TGF-β超家族,是卵母细胞产生的一种旁分泌因子,在卵巢组织中,GDF-9特定在卵母细胞中表达。除了原始卵泡外的所有卵泡发育时期中均检测GDF-9mRNA。已有实验表明:GDF-9可以诱导原始卵泡募集并促进初级卵泡向小窦前卵泡期过渡,能够刺激卵丘细胞膨胀和产生透明质酸,诱导分化。由于GDF-9具有潜在的诱导原始卵泡生长发动以及促进初级卵泡及以后阶段生长与分化的作用,对GDF-9的深入研究必将增进对卵泡发育的进一步了解,指导临床生殖内分泌疾病的治疗。     

卵母细胞体外成熟技术的临床应用进展

卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)是将处于不同时期的未成熟卵母细胞体外培养成熟的技术,临床不同来源的未成熟卵母细胞在胚胎发育潜能、妊娠率和活产率等方面存在差异。IVM作为一种有效治疗手段可应用于治疗多囊卵巢综合征、卵巢高反应及低反应患者、癌症患者生育力保存等,该技术已在全世界应用并有数千名健康婴儿出生。临床IVM技术的改进主要包括IVM培养基的改良、培养环境及操作流程的优化。目前,随着体外受精(IVF)效率的提高和培养体系的改进,自然周期或温和刺激可能更适合于进行IVF治疗的女性。新的治疗方案提出将自然周期/温和刺激IVF与IVM结合,温和刺激IVF联合IVM治疗方案不仅有望成为目前标准治疗的可行替代方案,而且可能是潜在的一线治疗选择。     

褪黑素在卵母细胞发育中的作用及体外成熟培养中的应用

褪黑素是一种广谱抗氧化剂,不仅可以通过与特异性受体结合产生一系列的生物学效应,而且可以直接穿过生物细胞膜进入细胞内,清除细胞内活性氧簇,降低氧化应激反应.另有研究证实,褪黑素可通过其抗氧化作用促进卵母细胞发育成熟,提高卵母细胞的发育潜力.近年来,褪黑素抗氧化作用逐渐成为研究的重点.然而在体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)的培养基中添加褪黑素促进卵母细胞成熟,提高卵母细胞的发育潜力的机制还不清楚.综述褪黑素在卵母细胞发育中的作用及在卵母细胞IVM中的应用.     

生长分化因子-9与卵泡发育

GDF-9属于TGF-β超家族,是卵母细胞产生的一种旁分泌因子,在卵巢组织中,GDF-9特定在卵母细胞中表达.除了原始卵泡外的所有卵泡发育时期中均检测GDF-9 mRNA.已有实验表明:GDF-9可以诱导原始卵泡募集并促进初级卵泡向小窦前卵泡期过渡,能够刺激卵丘细胞膨胀和产生透明质酸,诱导分化.由于GDF-9具有潜在的诱导原始卵泡生长发动以及促进初级卵泡及以后阶段生长与分化的作用,对GDF-9的深入研究必将增进对卵泡发育的进一步了解,指导临床生殖内分泌疾病的治疗.     

生长分化因子9和骨形态发生蛋白15与PCOS

生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)是转化生长因子β家族的两个成员,主要由卵母细胞产生,通过旁分泌作用调节周围颗粒细胞的多种功能.研究发现,其参与卵泡发育的整个过程,对卵泡的形成和生长发育、排卵以及黄体功能都具有重要调节作用,其功能异常可能导致卵泡发育障碍.多囊卵巢综合征(PCOS)是典型的卵泡...     

卵母细胞体外成熟调节的研究进展

虽然已有一定数量的未成熟人卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后得到的正常后代,但其发育潜能显然不如体内成熟的卵母细胞好,这主要是由于对灵长类动物卵母细胞胞质成熟及卵母细胞获得发育能力方面的分子机理和生理生化过程知之甚少,现有的IVM条件不足以维持卵母细胞的胞质成熟.所以,改良IVM培养基的有效成分,积极探索卵母细胞IVM的条件,成功建立IVM、IVF和体外胚胎培养(IVC)程序,对生殖生物学及生殖工程的发展具有重要意义.就未成熟卵母细胞的IVM调节因素的研究进展进行综述.     

未成熟卵体外成熟技术在卵巢高反应患者IVF-ET中的应用

目的:探讨未成熟卵体外成熟(IVM)技术在卵巢高反应患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值。方法:在IVF-ET促排治疗中,对双卵巢卵泡数过多,有可能发生卵巢过度刺激综合征(OHSS)或继续治疗可能发生重度OHSS的患者,根据其意愿即刻停药,全部取卵改行IVM治疗12个周期(A组)或取部分小卵泡改行IVM治疗,同时保留部分卵泡继续行IVF-ET常规治疗18个周期(B组)。小卵泡体外培养成熟后,通过卵胞浆内单精子注射(ICSI)获得受精卵并行胚胎移植或冷冻。统计分析未成熟卵的成熟率、卵母细胞的受精率、胚胎的发育情况及临床结局。结果:两组30个取卵周期,共获未成熟卵240个,经IVM、ICSI和体外培养后,成熟率、受精率、正常卵裂率及优质胚胎率分别为61.25%(147/240),77.55%(114/147),92.98%(106/114)和29.25%(31/106)。A组8例行IVM新鲜胚胎移植(8周期)4例临床妊娠,A、B两组有8例行IVM解冻胚胎移植(9周期)3例临床妊娠,已有3例分娩。A组12例无OHSS发生,促性腺激素用量少于B组,B组18例中3例有OHSS风险而取消胚胎移植。结论:对常规IVF促排周期中卵巢高反应患者及时改行IVM,可以避免周期取消及OHSS的发生,减少促排卵药物的使用量,同时获得较好的临床妊娠率。     

生长分化因子-9与卵泡发育

GDF-9属于TGF-B超家族，是卵母细胞产生的一种旁分泌因子，在卵巢组织中，GDF-9特定在卵母细胞中表达。除了原始卵泡外的所有卵泡发育时期中均检测GDF-9 mRNA。已有实验表明：GDF-9可以诱导原始卵泡募集并促进初级卵泡向小窦前卵泡期过渡，能够刺激卵丘细胞膨胀和产生透明质酸，诱导分化。由于GDF-9具有潜在的诱导原始卵泡生长发动以及促进初级卵泡及以后阶段生长与分化的作用，对GDF-9的深入研究必将增进对卵泡发育的进一步了解，指导临床生殖内分泌疾病的治疗。     

多囊卵巢综合征患者卵泡液的拉曼光谱分析及其对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的探究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)患者与非PCOS患者卵泡液中的差异性代谢物及其对小鼠卵母细胞体外成熟(in vitro maturation, IVM)和体外受精(in vitro fertilization, IVF)胚胎发育的影响。方法本研究的临床资料采取回顾性队列研究的研究方法获取;动物实验采取随机对照试验。收集2019年6月至2020年6月期间在上海集爱遗传与不育诊疗中心第一次接受IVF或卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)周期的女性患者的卵泡液。根据是否为PCOS患者, 分为PCOS组(n=71)和非PCOS组(n=70), 回顾性分析两组患者的临床资料, 并利用深度学习的拉曼光谱分析技术检测两组患者卵泡液的代谢谱差异。后续进行实验性研究, 在PCOS患者和非PCOS患者卵泡液中进行小鼠GV期卵母细胞IVM培养, 收集两组成熟的鼠卵母细胞进行IVF, 进一步探讨卵泡液中差异性代谢物对鼠卵成熟及胚胎发育的影响。结果 PCOS组患者卵母细胞成熟率[82.19%(8...