机械通气动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征犬肺损伤的影响

目的观察机械通气动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)犬肺损伤的影响,评价机械通气参数对肺损伤的保护作用。方法36条健康杂种犬,按照随机数字表法分为正常对照组(N组)、模型组(M组)及机械通气A～D组。采用气管内盐酸吸入法建立ARDS模型,按下述方案机械通气。A组:小潮气量(6ml/kg)、低吸气流速(6ml·kg-1·s-1)、高通气频率(30次/min);B组:大潮气量(20ml/kg)、高吸气流速(20ml·kg-1·s-1)、高通气频率(30次/min);C组:大潮气量(20ml/kg)、高吸气流速(17ml·kg-1·s-1)、低通气频率(15次/min);D组:大潮气量(20ml/kg)、低吸气流速(10ml·kg-1·s-1)、低通气频率(15次/min)。分组机械通气后0、1、2和4h各时间点分别记录呼吸力学各值。4h后处死动物,取肺脏测肺湿/干重(W/D)比值;光镜下观察病理组织学变化,并进行弥漫性肺泡损伤(DAD)评分及高倍镜下中性粒细胞计数;流式细胞仪检测肺组织核转录因子κB(NFκB)p65活性。结果B组肺W/D比值为9.95±0.99,高于A组6.78±0.56、D组7.11±0.47(P均<0.01),但与C组9.22±1.19差别不大(P>0.05)。肺组织病理DAD评分:B组为(12.80±1.47)分,明显高于A组(7.67±1.20)分和D组(8.83±1.17)分(P均<0.01),但与C组(11.50±1.87)分比较差异无显著性(P>0.05)。B组NFκBp65表达为(33.56±2.85)%,较A、D两组〔(10.35±0.60)%、(10.79±1.02)%〕表达增强(P均<0.01),与C组(30.87±1.16)%间比较差异无显著性(P>0.05)。结论大潮气量、高吸气流速、高通气频率机械通气可导致严重的呼吸机相关性肺损伤(VILI),降低通气频率可适当减轻这类损伤;在大潮气量基础上,降低通气频率及吸气流速,对损伤的肺组织可起到一定的保护作用。     

动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征犬肺外炎症反应和肺外脏器功能的影响

目的 观察机械通气动态通气参数对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)犬肺外炎症介质水平及肺外脏器功能的影响.方法 36条健康杂种犬,按照随机数字表法分为正常对照组(N组)、ARDS模型组(M组)及机械通气A-D组6组.采用气管内盐酸吸入法建立ARDS模型,按下述方案行机械通气.A组(LVLYHR):小潮气量、低吸气流速、高通气频率;B组(HVHFHR):大潮气量、高吸气流速、高通气频率;C组(HVHFLR):大潮气量、高吸气流速、低通气频率;D组(HVIYLR):大潮气量、低吸气流速、低通气频率.分组机械通气后4 h后处死动物,留取血清用放射性免疫吸附法行IL-8和TNF-α检测;留取肝肾组织行病理学检查.数据处理运用方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 B组、C组血中IL-8和TNF-α含量显著高于M组、A组、D组(P<0.05),A组、D组和M组差异无统计学意义(P>0.05).N组与其他相比差异具有统计学意义(P<0.05).B组肝肾组织病理学改变最为严重,C组较B组稍有减轻.A组和D组的病理学改变较B、C组明显减轻,A组和M组改变接近.结论 大潮气量、高吸气流速、高通气频率机械通气可以使血清炎症介质水平升高,加重肺外器官的炎症反应;降低通气频率及吸气流速,对防治多器官功能衰竭有重要意义.     

小窝蛋白-1和NF-κB在机械通气肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的通过观察小窝蛋白-l(cav-1)及NF-κB p65、IL-8在大潮气量机械通气大鼠肺组织中的表达变化,探讨cav-1在通过对NF-κB信号转导通路的影响而导致对肺组织的损伤作用。方法将雄性SD大鼠随机分为三组:对照组、大潮气量通气0.5 h组(H-VT0.5h组)和大潮气量通气2 h组(H-VT2h组)。光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变;免疫组织化学染色法检测肺组织中cav-1的蛋白含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB p65的m RNA表达;计算肺湿/干重比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-8的含量,并对cav-1及NF-κB p65进行相关性分析。结果 H-VT2h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平及BALF中IL-8的含量均大于H-VT0.5h组,差异有统计学意义(均P<0.05);H-VT0.5h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 m RNA的表达水平以及BALF中IL-8的含量均大于对照组,但差异无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平与NF-κB p65 m RNA表达水平之间呈正相关(r=0.820,P<0.01)。结论 cav-1在机械通气导致肺损伤发生中可能起损伤作用。这种损伤作用可能与cav-1经过多种途径激活NF-κB炎症信号通路,使IL-8等细胞因子释放有关,最终导致炎症的加重和肺组织损伤。     

肾上腺素α2受体调控MAPK通路对VILI大鼠肺部炎症的影响

目的:研究肾上腺素α₂受体调控的炎症信号传导MAPK通路对呼吸机所致肺损伤大鼠肺部炎症反应的影响。方法:30只SPF级雄性SD大鼠随机均分成5组:常规潮气量通气组（C,8 mL/kg,呼吸频率90次/min）,大潮气量通气组（H,20 mL/kg,呼吸频率50次/min）,大潮气量通气盐酸右旋美托咪啶处理组（D,参数设置同H组）,大潮气量通气育亨宾处理组（Y,参数设置同H组）,大潮气量通气+盐酸右旋美托咪啶+育亨宾处理组（D+Y,参数设置同H组）。观察肺部病理改变,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中的肿瘤坏死因子α、IL-1β、IL-6和IL-10,Western Blot方法检测各组肺组织中促分裂原活化蛋白激酶及其和磷酸化水平。结果:和C组相比,H组、D组、Y组和D+Y组大鼠肺组织病理改变,BALF中的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和MIP-2,以及肺部磷酸化ERK1/2均有明显增高。H组、Y组和D+Y组相比,D组肺组织和BALF中各项指标均显著降低。结论:α₂受体激动剂能通过调控MAPK通路显著减轻VILI所造成的肺部炎症反应,提示α₂受体在VILI所造成的肺部炎症反应中起到重要作用。     

脂氧素对机械通气所致肺损伤的实验研究

目的 研究脂氧素对机械通气致肺损伤的保护作用及相关保护机制.方法 36只健康雄性SD大鼠按随机数字表分组.采用大潮气量通气制作大鼠VILI模型.麻醉和气管切开及气管内插管后,对照组(Control组)保留自主呼吸;大潮气量组(HV组)采用大潮气量通气[潮气量(VT)30 mL/kg,呼吸频率(RR)40次/min];大潮气量组+脂氧素处理组(HV+LX组)于机械通气前5 min静脉注射脂氧素10 μg/kg,其余两组注射等量生理盐水.通气时间均为2 h.每组大鼠实验过程中监测血流动力学和动脉血气;通气2 h后处死大鼠取肺组织,测定肺湿/干质量(W/D)比值和髓过氧化物酶(MPO)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺泡灌洗液(BALF)中核转录因子(NF-κB)和白细胞介素-8(IL-8)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变并进行肺泡损伤评分(DAD损伤评分).结果 与Control组相比,HV组和HV+LX组的动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、平均动脉压(MAP)均呈下降趋势;动脉血pH值呈上升趋势.HV+LX组MAP显著高于HV组(P<0.05).与Control组相比,HV组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分、NF-κB、IL-8显著升高(P<0.05或P<0.01);与HV组相比,HV+LX组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分及NF-κB和IL-8显著降低(P<0.05或P<0.01).结论 脂氧素在大鼠机械通气模型中可减少肺泡蛋白质的渗出,可抑制肺组织中NF-κB、IL-8的产生,减少中性粒细胞在肺泡内的浸润和黏附,从而减轻大容量机械通气造成的肺组织损伤.     

黄芩素对IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应的影响

[目的]探讨黄芩素对白介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症反应的影响.[方法]将软骨细胞分为正常组(加入不含任何刺激物的培养基),IL-1β组(10 ng/mL的IL-1β),黄芩素低、中、高剂量组(12.5,25,50 μmol/L 黄芩素+10 ng/mL的IL-1β).MTT法检测细胞活力,硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-γ(IFN-γ)及IL-6含量,western blot检测核因子-κB (NF-κB p65)及p38 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平.[结果]低、中、高剂量组黄芩素能显著提高软骨细胞活力(P<0.05).与正常组比较,IL-1β组中细胞活力降低(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量提高(P<0.01),p-NF-κB p65及p-p38 MAPK表达量上调(P<0.01);与IL-1β组比较,黄芩素低、中、高剂量组中细胞活力提高(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量降低(P<0.01),p-NF-κB p65/NF-κB p65及p-p38 MAPK/p38 MAPK值下调(P<0.01);与低剂量组比较,中、高剂量组中细胞活力提高(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量降低(P<0.01),p-NF-κB p65/NF-κB p65及p-p38 MAPK/p38 MAPK值下调(P<0.01);与中剂量组比较,高剂量组中细胞活力提高(P<0.01),TNF-α,IFN-γ,IL-6及NO含量降低(P<0.01),p-NF-κB p65及p-p38 MAPK表达量下调(P<0.01).[结论]黄芩素能通过阻断NF-κB及p38 MAPK信号通路进而抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应,为临床OA的治疗提供理论依据.     

p38信号通路参与呼吸机所致肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达

目的 研究p38信号通路在呼吸机所致肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白BI(high mobility group box 1 protein,HMGB1)中的作用.方法健康sD大鼠24只随机分为3组:对照组(A组)不行机械通气,保留自主呼吸;常规通气组(B组)潮气量(Vt)为8mL/kg;大潮气量通气组(C组)Vt为40 mL/kg.机械通气4 h后处死动物,测定支气管肺泡灌洗液中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值(W/D)和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性.采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白和p38激酶活性变化,采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达.应用单因素方差分析进行不同组别间的比较.结果 通气4 h后,与A组相比,C组总蛋白水平(1.77±0.68)g/L、白细胞计数(106.55±28.17)×10~7 L~(-1)、肺W/D比值(7.16±1.02)、MPO活性(3.94±1.21)U/g、HMGB1蛋白(0.64±0.17)和mRNA(1.17±0.45)表达以及p38激酶活性(0.51±0.12)均明显增加(P<0.05),而B组上述各项指标的变化均无统计学意义(P>0.05).结论大潮气量机械通气可引起大鼠急性肺损伤,p38参与了机械牵张诱导肺组织HMGB1的表达.     

机械通气致肺损伤的防护

[目的]通过研究大潮气量机械通气引起的肺损伤(VILI),提出机械通气时通气机所致VELI的护理防护.[方法]将24只健康雄性SD大鼠随机等分为对照组与实验组,对照组小潮气量通气(VT=8mL/kg);实验组为致伤组大潮气量通气(VT=40mL/kg).通气时间均为4 h,每小时行1次动脉血气分析.通气后行支气管肺泡灌洗液(BAIF)中性粒细胞计数,血清和BALF中TNF-α、IL-1β含量测定.[结果]实验组大鼠氧合指数较对照组显著下降,BALF中性粒细胞计数、血清和BALF中TNF-α、IL-1β水平较对照组显著增加.[结论]大潮气量机械通气能引起明显的VILI,临床上对于机械通气的病人,应尽量避免大潮气量通气,加强对通气机所致VILI的护理防护.     

不同途径茶多酚对兔急性呼吸窘迫综合征肺保护的研究

目的观察茶多酚通过不同途径给药对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)动物模型的干预作用,初步探讨茶多酚对ARDS炎症反应的抑制效果及可能的作用机制.方法静脉注射油酸制备兔ARDS模型 ,40只大耳白兔被随机分为对照组(A组)、茶多酚高剂量(100 mg/kg)灌胃组(B组)、茶多酚低剂量(50 mg/kg)灌胃组(C组)、茶多酚高剂量(100 mg/kg)雾化组(D组)、茶多酚低剂量(50 mg/kg)雾化组(E组),每组8只.对照组采用单纯机械通气+常规治疗;其余给药各组制模后按不同途径给予相应药物,其余处理同对照组,4 h后结束实验.每小时进行一次血气分析,实验结束后处死动物,取左肺下叶中部约1 cm×1 cm×1 cm组织块,用体积分数为10% 的中性甲醛固定.免疫组化法测定核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)的阳性表达.结果雾化组机械通气4 h动脉血氧分压(PaO2)明显高于对照组和灌胃组,动脉血二氧化碳分压(PaO2)明显低于对照组和灌胃组,差异均有显著性(P均＜0.01),但雾化两组间比较差异无显著性;对照组和灌胃组肺组织病理学改变明显比雾化组严重,雾化两组之间改变基本相似;雾化组肺组织中NF-κB、TNF-α、IL-1的阳性高表达明显低于对照组和灌胃组,低表达明显高于对照组和灌胃组,差异均有显著性(P均＜0.05),雾化两组之间表达相似;对照组和灌胃组比较,上述指标差异均无显著性.结论茶多酚雾化吸入对ARDS肺有保护作用,可减少肺组织中NF- κB、TNF-α、IL-1的阳性表达,减轻ARDS肺病理改变,改善A RDS的临床表现;而茶多酚灌胃无上述作用.     

不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓内NF-κB表达的影响研究

目的探究不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内核转录因子-κB(NF-κB)的表达的影响。方法将50%豚鼠全脊髓匀浆诱导的80只Wistar大鼠EAE模型采用随机数字表法分为4组,每组20只,A组为EAE模型组,B、C、D组为硫辛酸干预组,同时选取20只健康Wistar大鼠作为健康对照组(E组),B、C、D组大鼠在免疫第1天开始腹腔注射1 mL的50、100、200μmol/L浓度的硫辛酸进行干预(共21 d);A组和E组每日腹腔注射1 mL生理盐水。比较4组大鼠EAE的发病情况及干预的第7、14、21天的NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)水平。结果随干预时间的延长,A、B、C、D组大鼠神经功能评分先升高后降低,第14天达到高峰,A组大鼠的神经功能评分最高。且B、C、D组间随着硫辛酸浓度的升高,神经功能评分降低,潜伏期延长,发病率和死亡率降低;A、B、C、D组大鼠IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达先升高后降低,第14天达到高峰,E组大鼠的IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达最低,且B、C、D组随着硫辛酸浓度的升高,IL-2、NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达降低;IL-10水平先降低后升高,第14天达到最低值,E组大鼠的IL-10水平最高,且B、C、D组随着硫辛酸浓度的升高,IL-10水平升高。结论随EAE大鼠病情的进展,其神经功能降低,NF-κB阳性细胞及NF-κB mRNA表达升高;不同剂量的硫辛酸均可缓解EAE大鼠病情,且高剂量的硫辛酸作用效果较强,随着硫辛酸剂量的升高,EAE的发病潜伏期延长,NF-κB异常表达及机体炎症反应缓解显著。     

大承气汤对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB活性及其炎性细胞因子表达的影响

目的 研究大承气汤(Dachengqi Decoction,DD)对ARDS大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB活性及其炎性细胞因子表达影响,探讨大承气汤抗炎作用的分子机制.方法雄性Wistar大鼠65只,随机分为对照组(n=12)、ARDS模型组(n=21)、大承气汤治疗组(n=16)、地塞米松治疗组(n=16).对照组用0,5mL生理盐水替代大肠杆菌脂多糖(LPS)尾静脉缓慢注射;模型组LPS按1 mg/kg·0.5mL)腹腔注射,16 h后按5 mg/(kg·0.5 mL)经气管缓慢滴入,6 h后动脉血气分析验证造模成功,连续观察3 d;大承气汤治疗组造模成功后DD按生药2.31 g/(kg·d)连续灌胃3 d;地塞米松治疗组造模成功后开始腹腔内注射地塞米松2mg/,kg,连续治疗3 d.各组72 h后行动脉血气分析、病理学检验和评分观察疗效;运用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELLSA)检测血浆和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)和IL-10水平,评价全身和肺部促炎因子/抗炎因子平衡状态;BCA法测定PAN核蛋白浓度,蛋白免疫印迹法(western Blotting)检测肺泡巨噬细胞(pul-monary alveolar macrophage,PAM)核因子-κB(nucleus factor-κH;NF-κB)活性,评价叻对PAM炎性细胞因子转录活性影响.所有试验数据均用采用SPSS 13.0统计分析软件进行处理,计量指标以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用方差分析(LDS-t检验),以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 ①DD降低ARDS大鼠血浆TNF-α作用不显著[(510.97±76.20)pg/mL,(476.16±98.03)pg/mL,P>0.05],降低IL-1作用显著[(381.99±34.30)pg/mL,(300.69±50.99)pg/mL,P<0.05],但对IL-10水平无影响[(345.30±78.52)pg/mL,(345.916±67.72)pg/mL,P>0.05];DD显著降低ARDS大鼠BALF中TNF-α水平(130.94±33.51 pg/mL,(106.59±26.64)pg/mL,P<0.05)和IL-1水平[(82.5±25.36)pg/mL,(63.89±22.96)pg/mL,P<0.05],使IL-10水平显著升高[(77.09±26.05)pg/mL,(148.05±53.50)pg/mL,P<0.01].DD显著降低ARDS大鼠PAM核蛋白水平[(5.35±2.44)μg/μL(3.54± 2.01)μg/μL,P<0.05],对NF-κB活性(电泳条带光密度值×面积/参照物比值)具显著抑制作用[(1.45±0.71),(1.11±0.28),P<0.05].结论DD主要通过降低IL-1水平来调节ARDS大鼠全身促炎介质/抗炎介质平衡;对局部肺损伤的调节作用主要通过抑制前炎症介质(TNF-α)的生成,同时又显著降低IL-1水平和升高IL-10水平重新建立局部促炎因子/抗炎因子平衡.DD可以抑制ARDS大鼠PAM中NF-κB活性,从而抑制促炎介质(TNF-α,IL-1)的产生.DD这种多靶点双向调节作用在调节免疫平衡,保护靶器官免受过度损伤发挥积极作用.     

血管紧张素Ⅱ诱导A549细胞趋化因子的分泌

目的 通过研究人重组血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人肺腺癌A549细胞核转录因子-κB(NF-κB)和趋化因子白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨机械通气肺损伤的致病机制.方法 人肺腺癌A549细胞株以2.0×105/mL接种在12孔细胞培养板内,随机(随机数字法)将细胞分为4组(n=24):(A)对照组不加药物;(B)AngⅡ1 h组培养液中加入终浓度为1×10-6mmol/L的AngⅡ刺激1 h;(C)AngⅡ2 h组培养液中加入终浓度为1×10-6 mmol/L的AngⅡ刺激2 h;(D)AngⅡ4 h组培养液中加入终浓度为1×10-6 mmol/L的AngⅡ刺激4 h.收集细胞培养上清液,用ELISA法测定IL-8含量;提取细胞总RNA,采用逆转录PCR技术检测Ⅱ-8 mRNA的表达水平;提取细胞核蛋白,用凝胶电泳迁移率法检测NF-κB的活性,Western Blot法检测NF-κB p65亚基的水平.采用方差分析检验总体差异,组间两两比较使用q检验.结果 ELISA法测得AngⅡ1 h组细胞培养上清液中IL-8含量(135.35±28.93)pg/mL较对照组(29.59±8.36)pg/mL显著增高(P＜0.01);AngⅡ2 h组IL-8含量(357.12±57.21)pg/mL较AngⅡ1 h组显著增高(P＜0.01);AngⅡ4 h组IL-8含量(1732.13±261.73)pg/mL较AngⅡ2 h组显著增高(P＜0.01),4组总体差异具有统计学意义(F=58.41,P＜0.05).PCR检测AngⅡ1 h组IL-8 mRNA的表达(Au·mm)水平(0.49±0.08)较对照组(0.13±0.03)显著增高(P＜0.01);AngⅡ2 h组IL-8 mRNA的表达(Au·mm)水平(0.71±0.10)较AngⅡ1 h组显著增高(P＜0.01);AngⅡ4 h组IL-8 mRNA的表达(Au·mm)水平(0.88±0.11)较AngⅡ2 h组显著增高(P＜0.05),4组总体差异具有统计学意义(F=19.08,P＜0.05).凝胶电泳迁移率法测得AngⅡ1 h组NF-κB的活性(Au·mm)(139.76±11.72)较对照组(70.37±6.57)显著增高(P＜0.01);AngⅡ2 h组NF-κcB的活性(Au·mm)(198.90±18.95)较AngⅡ1 h组显著增高(P＜0.05);AngⅡ4 h组NF-κB的活性(388.73±26.27)(Au·m)较AngⅡ2 h组显著增高(P＜0.01),4组总体差异具有统计学意义(F=23.15,P＜0.05).Western blot法检测AngⅡ1 h组NF-κB p65的水平(Au·mm)(73.97±5.34)较对照组(33.05±6.23)显著增高(P＜0.01);Ang Ⅱ2 h组NF-κB p65的水平(Au·m)(168.72±8.40)较AngⅡ1 h组显著增高(P＜0.01);AngⅡ4 h组NF-κB p65的水平(254.63±12.26)较AngⅡ2 h组显著增高(P＜0.01),4组总体差异有统计学意义(F=16.33,P＜0.05).结论 AngⅡ可通过激活人肺腺癌A549细胞的NF-κB系统,显著上调趋化因子IL-8的表达,引起中性粒细胞的浸润和活化,造成急性肺损伤,其作用呈时间依赖性,这可能是机械通气肺损伤的致病机制之一.     

ARDS患者肺泡动脉氧分压差与死腔分数检测在病情判断和短期预后评估中的应用价值

目的　研究急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者肺泡动脉氧分压差[P(A-a)O2]和死腔分数（VD/VT）在病情判断和短期预后评估中的应用价值。方法　收集2018年7月～2020年7月咸阳市第一人民医院84例急诊ARDS患者作为研究对象,根据ARDS病情将84例患者分为A组（轻度,28例）,B组（中度,30例）及C组（重度,26例）。比较三组急诊患者入院后P[(A-a)O2]和VD/VT水平,记录28天病死率,分析[P(A-a)O2]和VD/VT判断急诊ARDS病情程度和死亡风险的价值。结果　A,B,C三组VD/VT水平依次为0.49±0.07,0.54±0.10,0.59±0.08;P（A-a）O2（mmHg）水平依次为160.67±56.32,234.45±80.98,348.29±135.74。C组患者VD/VT和P(A-a)O2水平显著高于A,B两组,B组VD/VT和P(A-a)O2水平显著高于A组,差异均有统计学意义（F=9.381,26.389,均P<0.05）。84例患者中死亡28例,28天病死率为33.33%。P(A-a)O2判断重度ARDS的AUC为0.794（SE=0.071,95%=0.655～0.934）,敏感度和特异度分别为0.769和0.690。入院4天时VD/VT预测ARDS死亡的AUC为0.824（SE=0.066,95%=0.694～0.953）,敏感度和特异度分别为0.857和0.607。结论　P(A-a)O2, VD/VT与急诊ARDS病情程度和28天病死率相关,P(A-a)O2有助于判断病情程度,而入院4天时VD/VT水平对预测ARDS死亡准确性较高。     

p38丝裂素活化蛋白激酶/核转录因子-κB转导通路在脓毒症所致内皮细胞凝血功能障碍中的作用

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶/核转录因子-κB(p38MAPK/NF-κB)是否参与了脓毒症所致的内皮细胞凝血功能障碍.方法 选取22例脓毒症患者血浆刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),以8名健康人血浆刺激HUVEC 60 min作为阴性对照,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为阳性对照.用酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)、免疫荧光法检测p38MAPK和NF-κB的磷酸化.结果 脓毒症患者血浆TNF-α水平(ng/L)明显高于健康对照者(155.68±89.74比5.00±0.47,P<0.01).与20%的健康人血浆比较,用20%的脓毒症患者血浆刺激HUVEC后,组织因子(TF,μg/L)于180 min时达高峰(5.87±0.14比1.25±0.11,P<0.01),血管性血友病因子(vWF,μg/L)于120 min达到高峰(9.59±0.07比3.59±0.06,P<0.01)并随后下降.用20%的脓毒症患者血浆刺激HUVEC后p38MAPK和NF-κB发生活化,p38MAPK的活化早于NF-κB(2 min比5 min);加入p38MAPK特异性抑制剂SB239063后,NF-κB的磷酸化和核移位受阻.结论 p38MAPK/NF-κB转导通路在脓毒症引起的凝血功能障碍中具有一定的作用.     

右美托咪定抑制脓毒症患者炎症反应的可能机制及剂量相关性研究

目的 探讨右美托咪定镇静治疗脓毒症患者炎症反应的可能机制及剂量相关性.方法 选择2017年11月至2018年10月在大连医科大学附属第二医院ICU入住的75例脓毒症需要机械通气治疗的患者,将其分为低剂量组、高剂量组和对照组,每组25例.低剂量组和高剂量组患者起始分别给予0.5 μg/kg和1.5 μg/kg右美托咪定镇...     

二烯丙基硫化物对百草枯中毒大鼠的抗炎机制

目的 探讨二烯丙基硫化物(DAS)对急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺泡巨噬细胞(AM)中核转录因子-κB (NF-κB)蛋白的影响.方法 将45只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(NS)、PQ中毒模型组及DAS治疗组,每组15只.将百草枯溶液(70 mg/kg)一次性灌胃制备中毒模型;对照组灌胃等量生理盐水.制模后分别经腹腔注射DAS 100 mg/kg(DAS治疗组)、等量生理盐水(模型组和对照组),定时每日1次,共14 d.各组分别于制模后3、7、14d随机各组处死5只大鼠.根据不同时间将各组动物用3.6％水合氯醛腹腔注射麻醉,解剖胸腔暴露肺,行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液测定肺泡灌洗液中蛋白含量并分离培养肺泡巨噬细胞(AM);用免疫细胞化学方法测定AM中NF-κB的表达.结果 ①大鼠原代巨噬细胞的分离培养:采用差速贴壁的方法分离纯化肺泡巨噬细胞,30 min可以见到较多的巨噬细胞贴壁.②支气管肺泡灌洗液蛋白含量测定:NS组和PQ组比较,支气管肺泡灌洗液中蛋白含量3 d(261.6±17.16) μg/mL vs.(673.4±151.9) μg/mL;7 d(265.6±18.37) μg/mL vs.(581.3 ±134.58)μg/mL;14 d(253.8 ±11.43) μg/mL vs.(589.07 ±33.85) μg/mL,均P＜0.05.PQ组和DAS组比较支气管肺泡灌洗液中蛋白含量3d (673.4±151.9) μg/mL vs.(342.9±39.03) μg/mL;7d(581.3±134.58) μg/mL vs.(383.7 ±7.37) μg/mL,P＜0.05;14 d(589.07±33.85) μg/mL vs.(282.9±15.59) μg/mL,P＜0.05.③免疫细胞化学结果NS组和DAS组肺泡巨噬细胞质有极少量NF-κB p65阳性表达;PQ组细胞核中有较多NF-κB p65阳性表达;DAS治疗组中NF-κB p65阳性表达较模型组明显减少,吸光度积分值NS组与PQ组比较,PQ组与DAS组比较,差异均有统计学意义,P＜0.05.结论 DAS能下调PQ中毒大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB的达,减少支气管肺泡灌洗液中蛋白量,故DAS具有一定抑制炎症介质释放,减少炎性渗出的作用.     

Ang 1-7对雨蛙素刺激的胰腺腺泡AR42J细胞p38 MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的探讨血管紧张素1-7(Ang 1-7)干预雨蛙素(caerulein,CAE)刺激的胰腺腺泡细胞AR42J后,p38MAPK/NF-κB信号蛋白的表达变化。方法将AR42J细胞随机分为3组:对照组、雨蛙素组(10 nmol/L,CAE组)、Ang1-7组(10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L Ang 1-7+10 nmol/L雨蛙素)。对照组为正常生长的AR42J细胞,CAE组用10 nmol/L的雨蛙素刺激AR42J于2 h、6 h、12 h、24 h及48 h收集细胞,Ang 1-7组为不同浓度Ang 1-7作用30 min后再用雨蛙素刺激24 h收集细胞,Western blot技术检测各组细胞中ACE2、Mas受体、p38 MAPK、p-p38 MAPK及NF-κB的蛋白表达。结果 AR42J细胞中可见ACE2-Ang 1-7-Mas受体轴表达;与对照组相比,CAE组ACE2和Mas受体的表达呈先增多后减少的趋势,均于24 h达高峰(P0.05);p38 MAPK、p-p38 MAPK及NF-κB的表达亦是24 h达峰值(P0.05);Ang 1-7(10-7mol/L、10-6mol/L及10-5mol/L)上调Mas受体的表达,下调p38 MAPK、p-p38MAPK、NF-κB蛋白的表达,Ang 1-7的浓度为10-5mol/L时,后三者的表达水平与CAE组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论雨蛙素刺激的AR42J细胞中,Ang 1-7可通过Mas受体抑制p38MAPK/NF-κB信号通路的活性。