间皮细胞在腹膜抗菌防御中的作用

目的探讨间皮细胞在腹膜抗菌防御中的作用。方法采用体外细胞培养模型，以间接免疫荧光技术和细胞瑞氏染色方法，观察了细菌脂多糖（ＬＰＳ）、金葡菌肠毒素和白细胞介素－１（ＩＬ－１）诱导大鼠腹膜间皮细胞粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达，及其对金葡菌粘附和单核细胞表面吞噬作用的影响。结果腹膜间皮细胞表达ＩＣＡＭ－１粘附分子，用ＬＰＳ、金葡菌肠毒素和ＩＬ－１刺激培养６小时可增加间皮细胞ＩＣＡＭ－１的表达，同时可增加细菌对间皮细胞的粘附率。单核细胞对粘附间皮细胞表面的调理与未调理细菌均能很好地吞噬，两者吞噬率比较无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结论炎症介质和炎性细胞因子通过刺激间皮细胞ＩＣＡＭ－１的表达增加，增强间皮细胞对细菌的粘附，为单核细胞吞噬粘附其表面的细菌提供一个适宜的环境     

腹膜上皮-间皮细胞转分化与腹膜纤维化

腹膜透析（PD）治疗终末期肾脏疾病（ESRD）已有30余年，现代PD史的前20年主要致力于PD管道的设计、手术技术及腹膜炎的预防，近10年则主要研究PD液的生物相容性，以减少其对腹膜形态及功能的影响。生物不相容性的PD液、腹膜炎症及腹腔积血可导致急慢性腹膜炎症并损伤腹膜，导致腹膜逐渐纤维化及血管再生，最后失去超滤功能。     

乳酸盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞功能的影响

目的研究乳酸盐腹膜透析液(L-PDF)对人腹膜间皮细胞(HPMC)功能的影响.方法分离HPMC作体外培养,以MTT试验测定HPMC增殖程度;采用ELISA法检测细胞培养液中白细胞介素-8(IL-8)和纤维连接蛋白(FN)的蛋白质水平;逆转录多聚酶链反应检测IL-8mRNA的表达;用Lowry方法检测细胞培养液内总蛋白.结果L-PDF抑制HPMC的增殖,且呈时间依赖关系.L-PDF刺激HPMC后,培养液中IL-8和FN蛋白质水平明显增高,并上调IL-8mRNA的表达.在恢复培养期间,若加用脂多糖(10mg/L)、金黄色葡萄球菌肠毒素(10mg/L)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α,10×10     

高浓度葡萄糖诱导人腹膜间皮细胞凋亡

实验小鼠腹膜透析 (ＰＤ)时 ,非生理性透析液 ,尤其是高浓度葡萄糖可损伤腹膜表层的间皮细胞 ,并引起小鼠死亡增多[1] ,但对于高浓度葡萄糖引起腹膜间皮细胞损伤的机制目前尚不十分清楚。虽然有学者经体外研究发现 ,高浓度葡萄糖可诱导体外培养的血管内皮细胞凋亡[2 ] ,但目前对高糖是否能诱导腹膜间皮细胞凋亡尚无定论[3 ,4] 。本研究以体外培养的人腹膜间皮细胞 (ＨＰＭＣ)为研究对象 ,探讨高浓度葡萄糖引起ＨＰＭＣ死亡的方式 ,揭示高浓度葡萄糖损伤ＨＰＭＣ的机制。1　材料和方法1.1　细胞台盼蓝 (ｔｒｙｐａｎｂｌｕｅ)染色检测间皮细…     

从网膜组织法培养人腹膜间皮细胞

腹膜结构与功能的稳定和维持是长期腹膜透析治疗的基础 ,腹膜间皮细胞是构成腹膜最大的细胞群体 ,对保持腹膜结构和功能稳定 ,防止腹腔感染和腹膜硬化等具有重要作用[1～ 4 ] ,腹膜透析时透析液长期与腹膜接触而损伤腹膜间皮细胞。因而探讨人腹膜间皮细胞生理功能及其在腹膜透析时的改变 ,对预防和减少腹膜透析相关性腹膜炎和腹膜硬化的发生 ,延长腹膜的使用寿命等具有重要意义。建立人腹膜间皮细胞培养体系 ,为体外研究人腹膜间皮细胞生理功能及其在腹膜透析时的改变提供了有效手段。早在 2 0世纪 80年代初 ,Ｗｕ等[5] 通过直接从患者腹水…     

法舒地尔对腹膜透析大鼠腹膜间皮细胞转分化的影响

目的:观察Rho激酶(Rho-kinase)抑制剂法舒地尔对腹膜透析大鼠腹膜间皮细胞转分化的影响.方法:通过每日腹腔注射4.25％腹膜透析液建立腹膜透析大鼠模型.大鼠随机分为4组:正常对照组;腹膜透析模型组;法舒地尔5 mg组;法舒地尔10 mg组.4周后杀检大鼠,取脏层腹膜组织,分别用RT-PCR、Western杂交或免疫荧光方法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,同时用Western杂交检测Rho-kinase活性. 结果:法舒地尔呈剂量依赖模式显著抑制Rho-kinase活性.与正常组比较,腹膜透析模型组TGF-β1蛋白及mRNA表达显著上调,转分化指标α-SMA蛋白及mRNA表达明显上调(P＜0.01),E-cadherin蛋白及mRNA显著下调(P＜0.01),腹膜超滤量显著降低.法舒地尔干预后,TGF-β1蛋白及mRNA表达呈剂量依赖模式下调,α-SMA蛋白及mRNA表达呈剂量依赖模式下调,E-cadherin蛋白及mRNA表达呈剂量依赖模式上调,腹膜超滤量显著改善. 结论:Rho-kinase激活在腹膜透析大鼠腹膜间皮细胞转分化中起重要作用.法舒地尔可通过抑制TGF-β1信号通路,阻止腹膜间皮细胞转分化,从而改善腹膜透析大鼠模型腹膜结构和功能.     

腹膜透析液对小鼠腹膜间皮细胞超微结构影响的比较研究

作者通过模拟ＣＡＰＤ动物实验，应用扫描电镜观察比较了不同的腹透液对正常小鼠腹膜超微结构的影响，实验结果发现，随着注药时间延长，实验小鼠腹膜间皮细胞游离面微绒毛与间皮细胞的损害逐渐加重；三组腹透液对腹膜间皮影响是不相同的，Ｂａｘｔｅｒ腹透液对腹膜间皮损伤较严重，其中又以醋酸盐腹膜液为甚，注药后２１ｄ，乳酸盐和醋酸盐组均可见轻至中度的纤维素性粘连形成，停止注药后１０ｄ，腹膜间皮损伤基本恢复正常。本文结     

普罗布考对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞细胞因子表达的影响

腹膜透析(腹透)是治疗终末期肾病的有效方法之一,但长期腹透时,高糖腹透液可引起腹膜间皮细胞(PMCs)的严重损伤,其产生的促炎、促纤维化因子在病理过程中发挥重要的作用,最终导致腹膜超滤衰竭[1].腹透患者存在氧化应激状态,通过多种途径产生活性氧(ROS),对PMCs造成损害.本研究通过观察普罗布考对高糖作用下大鼠PMCsIL-18、IL-6、结缔组织生长因子(CTGF)及丙二醛(MDA)表达的影响,探讨普罗布考能否抑制上述指标的表达,改善PMCs损伤,延缓腹膜纤维化.     

腹膜平衡试验在调整腹膜透析方案中的作用

目的：探讨腹膜平衡试验（PET）在调整腹膜透析（PD）方案及提高PD效果中的作用。方法：根据PET结果,结合临床疗效及血清尿素氮、血肌酐、,对22例持续性不卧床腹膜透析（CAPD）患者的透析方案作适当调整。结果22例CAPD患者中因透析不充分,需调整PD方案的有8例;根据PET结果调整PD方案后,8例中有7例的透析已充,取得了满意的效果,结论PET是制定及调整PD方案的重要依据。     

腹膜透析过程中腹膜防御机理的研究

腹膜透析过程中腹膜防御机理的研究肖申，俞雨生关键词腹膜透析；腹膜炎；防御机理；巨噬细胞腹膜透析（ＰＤ）已成为当前治疗终末期肾衰重要的替代疗法之一，近年来，随着透析管连接装置的不断改进，腹膜炎的发病率已由１．４次／病人年降至０．８次／病人年以下。除去上...     

腹透液中人腹膜间皮细胞的原代培养

人腹膜间皮细胞 (ＨＰＭＣ)是腹膜表层主要的细胞群体 ,间皮细胞在腹膜透析 (ＰＤ)时对腹膜具有重要的保护功能。长期ＰＤ的患者 ,其腹膜间皮层微绒毛减少、脱落乃至间皮层消失[1] ,最终促进了腹膜纤维化的进展及腹膜失超滤的发生。建立间皮细胞的体外培养体系 ,对于开展ＰＤ领域的基础及临床研究 ,具有非常重要的意义。基于以上的认识 ,本研究建立ＰＤ流出液中原代培养ＨＰＭＣ的培养方法 ,并设法应用扫描电镜动态观察来自不同透龄培养的间皮细胞其形态学上的差异 ,以利用这种无创性的体外培养方法间接地判断ＰＤ患者体内腹膜间皮层的实际…     

腹膜透析液对大鼠腹膜间皮细胞血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的观察不同浓度葡萄糖腹膜透析液(dextrose)、艾考糊精腹膜透析液(icodextrin)对大鼠腹膜间皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGFR1、VEGFR2、sF lt-1合成的影响。方法分离、培养SD雄性大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs),第二代细胞用于实验研究。实验分为5组,分别以不同腹膜透析液[1.50%dextrose(低糖组)、2.50%dextrose(中糖组)、4.25%dextrose(高糖组)、7.50%icodextrin组(糊精组)]进行刺激培养,无血清DMEM为阴性对照(对照组)。RT-PCR法检测VEGF及其受体VEGFR1、VEGFR2、sFlt-1 mRNA表达,Western印迹法检测RPMCs的VEGFR1、VEGFR2蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中VEGF及sFlt-1表达。结果各组均见VEGFR1、VEGFR2、sFlt-1 mRNA和蛋白表达。在核酸和蛋白水平,中糖组、高糖组VEGFR1表达明显高于低糖组、糊精组及对照组(P0.01,P0.05);中糖组、高糖组VEGFR2表达显著低于低糖组、糊精组及对照组(均P0.01);低糖组VEGFR2蛋白表达显著低于对照组(P0.01)。在核酸水平,中糖组、高糖组VEGF、sFlt-1表达明显高于对照组(P0.01);RPMCs培养上清液中,VEGF、sFlt-1蛋白表达强弱趋势与RT-PCR一致。结论正常培养的RPMCs表达VEGFR1、VEGFR2及sFlt-1。腹膜透析液,尤其是高浓度dextrose,能明显上调VEGF、VEGFR1及sFlt-1的表达,但下调VEGFR2的表达,提示其可通过调节VEGF受体从而调节VEGF系统,这可能是导致长期腹膜透析过程中腹膜血管增生的机制之一。icodextrin的生物相容性可能优于高浓度dextrose。     

清道夫受体A在机体防御系统中的作用

清道夫受体A(scavenger receptor A,SR-A)是清道夫膜受体蛋白家族成员之一,主要存在于单核-巨噬细胞和内皮细胞表面。近年研究发现,SR-A除了有内吞经修饰的血浆脂蛋白、促使动脉粥样硬化斑块形成外,它在抗原识别、内毒素清除、细胞粘附和调控炎性递质分泌等机体防御反应中起重要作用,现作一综述。 1 SR-A的分类、结构和分布 SR-A是一种完整的三聚体膜糖蛋白。Kodoma et al于1990年首先鉴定和克隆出两种类型的SR-A,将其分为SR-AI,SR-AⅡ两种亚型,M,分别为220000和95000,后者又称为Macrosialin,与小鼠的CD68为同类物质。最近Laan et al又发现了一种具有胶原结构的SA-A,称之为MARCO     

血管紧张素Ⅱ对大鼠腹膜间皮细胞表达纤维连接蛋白的影响及其作用机制

目的：观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）纤维连接蛋白（FN）表达的影响，以及有丝分裂原活化蛋白激酶通路（mitogen—activated protein kinases，MAPKs）在AngⅡ诱导FN表达中所起的作用。方法：酶消化法于大鼠大网膜中分离间皮细胞，以AngⅡ刺激后，分别应用realtime．PCR及Western印迹法检测FN的表达情况。应用Western印迹法观察AngⅡ（1μmol／L）对MAPK通路的主要信号传导蛋白ERK1／2、p38MAPK和JNK活化的影响，并分别应用ERK1／2、p38MAPK和JNK的抑制剂以及AngⅡ的Ⅰ型受体（AT1）阻断剂进行干预，Western印迹法观察上述抑制剂对AngⅡ诱导FN表达的影响。结果：AngⅡ促进RPMCs表达FN，活化ERK1／2和p38MAPK信号传导通路，而不影响JNK通路的活化。ERK1／2通路抑制剂PD98059及AT1受体阻断剂（losartan）可明显抑制AngⅡ诱导的FN表达增加，而p38MAPK和JNK抑制剂对FN的表达无影响。结论：AngⅡ促进RPMCs合成FN增多。AT1受体和ERK1／2通路介导了AngⅡ诱导RPMCs表达FN。     

腹膜透析在终末期肾衰竭一体化治疗中的作用

文章介绍了一体化治疗的概念,重点分析腹膜透析(和血液透析)在终末期肾衰竭患者中应用的优缺点,并对腹膜透析应用和发展的近况以及腹膜透析相关的技术和方法进行了详细的介绍。     

腹腔镜在老年人腹膜后肿瘤诊治中的作用

目的探讨腹腔镜在老年病人腹膜后肿瘤疾病诊治中的价值。方法自2000年6月至2004年3月,收治12例老年腹膜后肿瘤病人,行腹腔镜腹腔探查和腹膜后肿瘤活检,其中2例术中同时行肠粘连松解术。结果12例患者均完成腹腔探查和术中肿瘤活检。术中分别取出1～3枚0．4-1．0cm大小的肿瘤组织,行术中冰冻和术后病理检查。5例病人根据快速冰冻病理结果终止手术,7例病人完成肿瘤切除手术。结论腹腔镜可以对老年腹膜后肿瘤疾病的病人进行诊断和分类。减少盲目的剖腹手术。     

腹膜间皮细胞表达βig-h3与胃癌病理及腹膜转移相关因素的关系

目的:探讨胃癌患者腹膜间皮细胞中ig-h3表达与胃癌生物学行为及腹膜转移相关因素的关系.方法:术中收集75例胃癌和14例胃良性疾病患者下腹前壁腹膜组织,同时收集胃癌患者腹水或腹腔冲洗液,免疫组织化学染色方法检测腹膜间皮细胞中ig-h3含量,RT-PCR方法检测腹水或腹腔冲洗液中CEA mRNA含量,同时进行腹腔冲洗液细胞学(peritoneal lavage cytological,PLC)和病理学检查.结果:29例胃癌和1例胃良性疾病患者腹膜组织ig-h3免疫组织化学染色结果呈阳性,差异具有统计学意义(P=0.030).75例胃癌病例中,13例伴有肉眼腹膜转移,20例腹腔脱落癌细胞呈阳性;32例CEA mRNA阳性.ig-h3阳性率在浸润较深(T4)(P=0.016)、腱状及多彩弥漫的浆膜类型(P=0.037)、肉眼腹膜转移阳性(P=0.002)、腹腔脱落癌细胞阳性(P=0.005)及CEA mRNA阳性组(P=0.027)的患者腹膜组织中表达明显升高,差异具有统计学意义.结论:腹膜间皮细胞中ig-h3表达可作为反映胃癌生物学行为的指标之一,与胃癌腹膜转移密切相关.     

新多聚糖碳酸氢盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞凋亡及纤维化相关因子的影响

目的:比较新研制的多聚糖碳酸氢盐腹膜透析液(PDF)与常用乳酸盐PDF对人腹膜间皮细胞(HPMC)凋亡及间质纤维化相关因子的影响。方法:体外培养HPMC细胞,使用新型PDF与不同葡萄糖浓度的传统乳酸盐PDF(1.5%、2.5%、4.25%)处理细胞,通过实时荧光定量PCR法检测细胞凋亡因子Bax、胱天蛋白酶3(Caspase-3)及Bcl-2、转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)的mRNA表达量,ELISA法测定细胞分泌TGF-β1量,免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白Bax、Caspase-3、抑制凋亡蛋白Bcl-2和FN的表达量。结果:不同PDF刺激HPMC细胞一定时间后,1.5%、2.5%、4.25%传统PDF中葡萄糖浓度越高,Bax、Caspase-3、TGF-β1和FN增高越明显,抑制凋亡因子Bcl-2下降越显著,而新型PDF影响较小。含2.5%、4.25%葡萄糖的PDF刺激后,纤维化相关因子TGF-β1、FN明显高于阴性对照组和新型PDF组(均P0.05)。结论:新型多聚糖碳酸氢盐PDF对腹膜间皮细胞凋亡信号活化低于传统乳酸盐PDF,其腹膜间皮细胞纤维化程度低,有很好的临床应用前景。     

高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞生长和基质合成的影响

持续性不卧床腹膜透析（ＣＡＰＤ）时腹膜间皮层直接浸泡于含葡萄糖１．５０％～４．２５％的透析液中，为了探讨高浓度葡萄糖对腹膜间皮细胞生长和基质合成的影响，我们建立了人腹膜间皮细胞（ＨＭＣ）培养体系。ＨＭＣ在含葡萄糖浓度≥１．００％的培养基中生长时，￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入量较在０．１０％或不加葡萄糖的培养基中生长时明显降低。当介质中葡萄糖浓度≥０．５０％时ＨＭＣ培养上清的纤维连接蛋白（ＦＮ）水平明显增高。葡萄糖引起的细胞增殖抑制和ＦＮ分泌增加均呈时间与剂量依赖关系。用甘露醇代替葡萄糖进行试验得到相似结果，但其抑制细胞增殖的作用明显弱于相同渗量的葡萄搪。上述结果表明，周围介质中高浓度的葡萄糖对ＨＭＣ生长和基质合成具有直接影响。反复或长期使用高糖透析液引起的ＨＭＣ修复和代谢障碍可能参与了ＣＡＰＤ相关性腹膜硬化的发生。