水通道蛋白-1,5在干燥综合征小鼠下颌下腺中的表达

目的：探讨水通道蛋白-1和-5（AQP1、AQP5）在干燥综合征（Sjoegren syndrome，SS）小鼠下颌下腺中的表达及其意义。方法：选用BALB／c小鼠10只，用完全弗氏佐剂＋同种鼠下颌下腺抗原诱导、使之产生在临床表现、病理损害和免疫特征上都类似于人SS的动物模型．对照组10只均注射等体积的生理盐水。用免疫组化和Western印迹方法研究SS小鼠下颌下腺AQP1、AQP5表达的变化特点。结果：SS小鼠下颌下腺组织中AQP1和AQP5的表达量均显著减少（P〈0．01），主要分布在导管部位：AQP5在腺泡顶膜表达减少，而基侧膜的表达增强。结论：AQP1和AQP5表达量减少以及分布部位的异常改变，可能是SS患者口干的重要原因之一。     

水通道蛋白在干燥综合征患者唇腺中表达的实验研究

目的 :初步探讨水通道蛋白 -1和 -5 (AQP1、AQP5)在干燥综合征 (Sj grensyndrome ,SS)患者唇腺中的水代谢障碍发生机制 ,为SS涎腺的基因治疗提供理论依据。方法 :用免疫组化和Westernblot方法研究SS患者唇腺AQP1、AQP5表达变化特点。结果 :SS患者唇腺组织中AQP1和AQP5的表达量均显著减少 (P <0 .0 1) ,主要分布在导管部位 ,AQP5在腺泡顶膜表达减少 ,而基侧膜的表达增强。结论 :AQP1和AQP5表达量减少以及分布部位的异常改变是SS患者口干的重要原因之一。     

腺病毒介导CTLA4Ig对舍格伦综合征小鼠颌下腺AQP5表达的影响

目的：观察CTLA4Ig-重组腺病毒载体（Ad-CTLA4Ig）对SS颌下腺AQP5表达的影响。方法：采用完全弗氏佐剂＋同种鼠颌下腺抗原激发诱导小鼠舍格伦综合征（SS）。实验组在激发前30min予以Ad-CTLA4Ig腹腔注射,未转CTLA4IgcDNA的腺病毒载体（Adv）及SS作对照。比较各组动物颌下腺形态学改变,并采用Western blot分析SS小鼠颌下腺AQP5表达变化。结果：CTLA4Ig-重组腺病毒实验组颌下腺病理学改变不明显。并且删表达量明显高于对照组（P〈0．05）。结论：Ad-CTLA4Ig可正向调节小鼠颌下腺AQP5的表达,并可有效抑制小鼠合格伦综合征的发生。     

大鼠颌下腺上皮间紧密连接蛋白表达特点

目的：观察大鼠颌下腺上皮间紧密连接蛋白表达特点。方法：分离大鼠颌下腺,冰冻切片,免疫荧光染色检测 ZO-1、Occludin、Claudin-3和 Claudin-4等紧密连接蛋白的表达。结果：Claudin-3表达于涎腺腺泡上皮及导管上皮,与 Occludin 及 ZO-1共表达提示位于紧密连接处。Claudin-4只表达于导管,腺泡中不表达。结论：Claudin 在鼠颌下腺中表达具组织特异性。     

水通道蛋白对口干症的基因治疗

水通道蛋白在动植物细胞膜的跨膜水转运中起着重要作用。人们已成功地运用转基因的方法增加涎腺组织细胞胞膜上水通道蛋白的表达,并使实验动物的唾液分泌增加:这为口干症的治疗提供了一条新途径。但这一基因疗法仍存在着局部免疫反应、表达时间短暂、不能重复转染等缺点,人们对此也做出了种种改进。     

水通道蛋白对口干症的基因治疗

水通道蛋白在动植物细胞膜的跨膜水转运中起着重要作用。人们已成功地运用转基因的方法增加涎腺组织细胞胞膜上水通道蛋白的表达,并使实验动物的唾液分泌增加。这为口干症的治疗提供了一条新途径。但这一基因疗法仍存在着局部免疫反应、表达时间短暂、不能重复转染等缺点,人们对此也做出了种种改进。     

AQP6和AQP5在人下颌下腺上的免疫组化定位

目的检测水通道蛋白亚型AQP6和AQP5在人下颌下腺的分布情况。方法对源自10例行颈淋巴清扫术患者的正常颌下腺组织,通过免疫组织化学染色方法,标记确定人下颌下腺组织中AQP6和AQP5的分布情况。结果 AQP6在部分颌下腺腺泡细胞质中表达。AQP5在浆液性腺泡和粘液性腺泡顶膜以及分泌小管均有表达,而闰管和纹状管未见表达。结论 AQP6在部分颌下腺腺泡细胞中表达,与AQP5相协调,参与唾液中水和阴离子的分泌调节。     

电离辐射对大鼠颌下腺钙离子激活型钾通道的影响

目的:通过研究电离辐射对大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK通道和IK通道开放的影响,探讨照射后唾液腺分泌功能降低的可能分子机制。方法:将大鼠随机分为对照组和照射组,对照射组大鼠的颌下腺区一次性15 Gy X线照射,对照组不照射。分别在照射后3 d、15 d和40 d取出大鼠颌下腺,胶原蛋白酶消化,从每只大鼠颌下腺消化液中挑选1个状态好的细胞,全细胞膜片钳技术研究大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK和IK1通道电流的变化。结果:1)在+80 mV时,相比对照组大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK通道电流密度,照射后3 d没有显著性差异,照射后15 d减少9.7%(P<0.05),照射后40 d减少13.8%(P<0.01)。2)在+80 mV时,相比对照组大鼠颌下腺腺泡细胞膜上IK1通道电流密度,照射后3d没有显著性差异,照射后15 d减少12.8%(P<0.05),照射后40 d减少17.1%(P<0.01)。结论:电离辐射所致的大鼠唾液腺分泌功能减退可能与辐射后大鼠颌下腺腺泡细胞膜上BK和IK1通道开放电流减少导致的K+外流减少有关。     

水通道蛋白5在唾液腺分泌中的作用及其临床应用

水通道蛋白5(AQP5)是一种能特异性跨膜转运水的蛋白,能显著增加细胞膜水通透性,参与水的分泌与吸收,并保持细胞内外的水平衡,在人体的外分泌功能中具有关键作用。近年来的研究发现,唾液腺分泌与AQP5的表达与定位有着不可分割的关系,临床上将AQP5作为治疗唾液腺分泌障碍的作用靶点取得了可观的治疗效果。本文就AQP5的结构、功能及其在唾液腺分泌中的作用及临床应用作一综述。     

失副交感神经支配对大鼠颌下腺分泌功能的影响

目的观察大鼠颌下腺失副交感神经支配后近远期分泌功能的变化,探讨失副交感神经支配调控颌下腺分泌、治疗口干的可能性。方法将20只雄性成年SD大鼠分为实验组（12只）和正常对照组（8只）。实验组行右侧鼓舌神经切除术,实验组左侧及正常对照组颌下腺均未处理。术后1、12和24周采用希尔默试验（Schirmer test）检测颌下腺的分泌功能。结果 进食刺激状态下实验组手术侧腺体的唾液流率明显低于非手术侧[(27.13±3.28)、(33.00±12.98)和(27.50±5.20) mm]和正常对照组[(30.25±3.86)、(28.00±3.46)和(27.00±4.32) mm](P＜0.05),证实术后颌下腺失去副交感神经支配。但在静息状态下,术后各时间点实验组手术侧腺体的唾液流率显著高于非手术侧[(1.91±0.62)、( 1.33±0.29)和(2.38±1.79) mm]和正常对照组[(1.90±0.34)、(1.53±0.46)和(1.48±0.39) mm](P＜0.05);非手术侧与正常对照组腺体唾液流率的差异无统计学意义。结论采用颌下腺失副交感神经支配治疗口干有一定的可能性。     

舍格伦综合征患者唇腺组织中骨桥蛋白的表达

目的：研究原发性舍格伦综合征（Primary SS）和继发性舍格伦综合征（Secondary SS）患者唇腺组织中骨桥蛋白（OPN）的表达。方法：经病理学检查确诊的SS患者40例,其中原发性SS患者15例,继发性SS患者25例,应用免疫组织化学方法检测患者唇腺组织中的OPN表达量,20例健康志愿者作为正常对照。结果：舍格伦综合征（SS）患者唇腺组织中OPN表达较正常健康人增强。SS患者唇腺组织中,OPN染色阳性率为65.38%,其中,原发性SS阳性率为73.3%,继发性SS阳性率为60.0%,与正常对照的10%比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但SS二类型之间比较无统计学意义（P〉0.05）。结论：OPN表达在SS患者唇腺组织中均明显增加,提示OPN可能参与了SS疾病的发生和发展过程。     

Caspase-8在原发性干燥综合征唇腺组织中的表达

目的探讨Caspase-8在原发性干燥综合征唇腺组织中的表达及意义,并分析它的表达与临床特征的相关性。方法采用免疫组化和Western blotting的方法检测55例原发性干燥综合征患者和15例健康者唇腺组织中Caspase-8蛋白的表达,测量吸光度值,采用SPSS 14.0软件包对两组结果进行统计学分析。结果原发性干燥综合征唇腺组织中Caspase-8在蛋白水平上有表达,与健康对照组相比明显升高(P<0.05),并与疾病的病程呈正相关,但与其他临床特征之间不存在明显相关性。结论 Caspase-8在原发性干燥综合征患者唇腺组织中高表达,且与疾病的病程相关,Caspase-8介导的细胞凋亡途径可能参与了原发性干燥综合征的发病过程。     

化痰软坚中药对大鼠离体灌流颌下腺唾液分泌作用的研究

目的中草药能通过增加唾液的分泌而缓解口腔干燥症状。本试验研究临床常用化痰软坚类促唾液分泌功能。方法成年wistar大鼠,用苯巴比妥钠麻醉后,外科分离颌下腺,转移至37℃恒温浴槽。使用蠕动泵(Cole-Palmer)进行灌流,氨甲酰胆碱(CCh)对照灌流,用缓冲液洗脱后,单独用含中药的缓冲液灌流,和中药与CCh联合灌流,通过对分泌速率的统计学分析,观察中药对颌下腺唾液分泌的影响。结果化痰软坚类中药,单独灌流,几乎不能或仅能少量促进唾液分泌,而灌流同时加入CCh,能明显促进唾液的分泌,唾液分泌曲线呈快速升高后有一轻微的下降过程。结论化痰软坚类中药对离体唾液腺具有促分泌作用。中药促唾液分泌实验研究将会为中药治疗口干症状及相关疾病的临床应用提供依据。     

正常大鼠颌下腺上皮细胞极性培养

目的为了探索简便、有效的涎腺上皮细胞的体外培养方法。方法采用自制鼠尾胶原胶为底物．在培养液中加入一些促进上皮细胞生长分化的刺激物，对出生一天的Wistar大鼠颌下腺上皮细胞进行原代培养。通过相差显微微镜、光镜及透射电镜对上皮细胞的生长及分化进行观察和研究。结果培养的大鼠颌下腺上皮细胞呈多层生长且为极性分化，保留了腺泡导管分泌单位的三种上皮成份。结论本研究所采用的方法是一种简便、可行、有效的涎腺上皮细胞的体外培养方法，其中自制胶原胶是本研究培养成功的关键。     

Acute irradiation effects on morphology and function of rat submandibular glands

In this study the morphologic and functional changes were compared after irradiation (single dose, 15 Gy) of rat submandibular salivary glands. Before and 1-10 days after local irradiation of the gland region, samples of submandibular saliva were collected after stimulation by pilocarpine. At the same time-points and also 3 h postirradiation submandibular glands were carefully extirpated and prepared for histocytologic examination (LM, TEM). Maximal increase of the lag phase and decrease of the flow rate were observed 3 days after irradiation, while [K+] and [Na+] increased and decreased, respectively, from days 1 and 3 after irradiation. Morphologic changes were observed from the third hour after irradiation, were maximal 3 days after irradiation and had partially recovered by day 10. Three hours and 1 day after irradiation degranulation of convoluted granulated tubes (CGT) was observed. Three days after irradiation the most striking morphologic changes in serous and mucous cells were distension of the cisternae of the RER, degeneration of mitochondria and vacuolization of the cytoplasm. Fibril-like condensations of electron dense material in the mucous granules were observed 3 h, 1 and 6 days after irradiation. Regranulation of CGT cells was observed from day 6. From this study it is concluded that changes in salivary gland function can be observed before major morphologic changes occur. Functional changes persist after the morphologic changes seem to have virtually returned to normal.     

Cell death and cell proliferation in the regeneration of atrophied rat submandibular glands after duct ligation

BACKGROUND: The present study aimed to clarify the proliferation and apoptosis of parenchymal cells during regeneration of rat submandibular glands following atrophy. METHODS: Atrophy of the right submandibular gland of rats was induced by excretory duct ligation at the hilum with metal clips, which were removed 1 week (day 0) after ligation. The right submandibular glands were collected from 0 to 14 days after removal of the clips and investigated using immunohistochemistry for proliferating cell nuclear antigen (PCNA) as a marker of proliferating cells, terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP-digoxigenin nick end labeling (TUNEL) as a marker of apoptotic cells, and transmission electron microscopy (TEM). RESULTS: After 1 week of ligation, there were many remaining ducts and a few acini in the atrophic glands. At day 3 after discontinuing the ligation, newly formed acini appeared and thereafter increased in number and maturity. Many residual and newly formed acinar cells showed positive reaction to PCNA especially at days 4 and 5. The PCNA-positive duct cells decreased in number with the regeneration. A few TUNEL-positive acinar and duct cells were identified during regeneration. Mitosis and apoptosis of parenchymal cells were also identified by TEM. CONCLUSIONS: During regeneration of the submandibular gland after atrophy, both residual and newly formed acinar cells proliferate actively. There is also apoptosis of parenchymal cells; however, the significance of apoptosis is low.