高效液相色谱法测定吲达帕胺的血药浓度

目的建立测定吲达帕胺血药浓度的方法。方法选择以乙腈(pH=2.8)磷酸缓冲液(32∶68)为流动相,格列吡嗪为内标,血浆样品以重蒸乙醚为提取溶剂,经DiamonsilC18(150mm×4.6mm,5μm)柱分离后,在紫外吸收波长240nm处进样40μL检测。结果吲达帕胺血浆样品在25～500ng/mL的范围内线性关系良好(r=0.9996,n=6),绝对回收率>67%,相对回收率>92%日内日间的RSD<6%。结论本法简便、准确、灵敏、重现性好,可用于吲达帕胺的药物动力学的研究。     

LC-MS/MS法同时测定拉考沙胺和吡仑帕奈的血浆药物浓度

目的 建立同时测定人血浆中2种第三代抗癫痫药拉考沙胺和吡仑帕奈血浆药物浓度的方法并应用于临床。方法 10例癫痫患者的血浆样品经乙腈沉淀蛋白并以乙腈-水(20∶80,V/V)稀释后，以氯氮平为内标，采用液相色谱-串联质谱法测定拉考沙胺、吡仑帕奈的质量浓度，再通过稀释倍数换算得血浆药物谷浓度。以Welch Ultimate XB-C₁₈为色谱柱，以10 mmol/L甲酸铵溶液为流动相A、甲醇-乙腈-异丙醇(0.2%甲酸)混合溶液(7∶1.5∶1.5,V/V/V)为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.4 mL/min，柱温为40℃，进样量为5μL；采用电喷雾离子源以多反应监测模式进行正离子扫描，用于定量分析的离子对分别为m/z 251.2→144.1(拉考沙胺)、m/z 350.2→219.2(吡仑帕奈)、m/z 327.2→270.0(内标)。结果 拉考沙胺、吡仑帕奈检测质量浓度的线性范围分别为0.001 25～0.125μg/mL(r>0.99)、0.037 5～3.75 ng/mL(r>0.99)，定量下限分别为0.001 25μg/mL、0.037 5 ...     

吲达帕胺控释片在Beagle犬体内的药动学和相对生物利用度

目的:研究健康Beagle犬口服吲达帕胺控释片的药动学和相对生物利用度。方法:采用两制剂、双周期交叉试验设计,用HPLC-MS法测定6只健康Beagle犬单次口服1.5 mg受试制剂(吲达帕胺控释片)和参比制剂(市售吲达帕胺缓释片)后血浆中吲达帕胺浓度,并绘制血药浓度-时间曲线;用统计分析软件计算药动学参数,进而计算相对生物利用度。结果:受试犬服用受试制剂和参比制剂后药时曲线相似,血浆中吲达帕胺的t1/2分别为(11.71±1.69)和(11.87±1.72)h;Cmax分别为(87.17±22.03)和(87.64±24.24)μg.L-1;Tmax分别为(6.67±0.52)和(6.83±0.75)h;AUC0~48 h分别为(1 200.31±577.16)和(1 162.53±463.85)μg.h.L-1;AUC0~∞分别为(1 276.73±619.22)和(1 250.20±507.63)μg.h.L-1。以AUC0~48 h计算,受试制剂的相对生物利用度F为(101.0±17.7)%。结论:吲达帕胺控释片具有与市售缓释片相似的缓释效果,主要药动学参数无显著差异,两个制剂生物利用度接近。     

国产与进口吲达帕胺缓释片在健康人体的药代动力学及生物等效性

目的评价国产和进口吲达帕胺缓释片(抗高血压药)在健康人体内的药代动力学与生物等效性。方法按自身对照随机交叉双周期试验设计, 20名健康志愿者单剂口服进口与国产吲达帕胺缓释片1．5 mg,用高效液相色谱-电化学检测法测定血浆中药物浓度。结果药代动力学参数如下。单剂量:Cmax分别为(19．2±6．3)和(18．1±5．6)ng·mL-1;tmax分别为 (12．3±2．1)和(12．7±1．9)h;AUC0→72分别为(528．2±264．0)和(514．5 ±210．2)ng·h·mL-1;F为(100．7±16．3)％。多剂量:Cmax分别为(34．5 ±10．7)和(36．0±11．9)ng·mL-1;Cmin分别为(16．0±5．8)和(17．2± 6．0)ng·mL-1;tmax分别为(10．7±1．8)和(10．8±2．3)h;AUCss分别为 (568．8±198．2)和(584．7±195．5)ng·h·mL-1;F为(104．2±12．5)％。结论 2种吲达帕胺缓释片具有生物等效性。     

吲达帕胺胶囊人体药动学和生物等效性研究

目的:建立人全血中吲达帕胺药物浓度的HPLC-UV测定法,研究健康受试者口服吲达帕胺试验胶囊和对照片的生物等效性并估算药动学参数.方法:20例健康男性志愿受试者单剂量随机交叉口服5mg吲达帕胺试验胶囊和吲达帕胺对照片,采用HPLC法(Inertsil ODS-3色谱柱,pH4磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇(55:40:5)与甲醇梯度洗脱,240nm波长检测)测定给药后不同时间的全血中吲达帕胺浓度,非房室模型估算药动学参数计算,并作方差分析和双单侧t检验.结果:受试者口服吲达帕胺试验胶囊和对照片后的Cmax分别为(331.1±39.2)和(358.4±42.9)ng·mL-1,Tmax分别为(3.2±0.9)和(2.7±1.0)h,t1/2(λz)分别为(17.2±2.8)和(18.3±3.1)h,AUC0-48h分别为(6 193.7±873.5)和(6 289.8±899.2)h·ng·mL-1,AUC0-∞分别为(7 311.8±1 232.3)和(7 529.4±1 323.2)h·ng·mL-1,MRT分别为(25.0±3.9)和(25.8±4.1)h.由两种制剂的AUC0-48估算,试验制剂的相对生物利用度(99.1±11.6)%.结论:建立的全血中吲达帕胺药物浓度的HPLC-UV测定法专属性强灵敏度适宜,测得试验胶囊与对照片生物等效,相应药动学参数准确.     

LC-MS/MS内标法测定人血浆中西地那非的浓度

目的:建立LC-MS/MS法检测人血浆中西地那非的浓度。方法:以地西泮为内标,血浆样品经MTBE液液萃取后,采用Waters XTerraMS C18(150mm×2.1mm,5μm)柱分离,流动相为甲醇:10mmol/L醋酸铵=85∶15(V/V),流速为0.30mL/min。然后采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,西地那非和内标地西泮的离子选择通道分别为:m/z475.3→58.1和285.5→154.0。结果:西地那非的线性范围为1.50～765.90ng/mL,最低检测浓度为1.50ng/mL,日内和日间变异均<15%。结论:本法适用于西地那非的人体药物代谢动力学研究。     

吲达帕胺缓释片对原发性高血压病人血管内皮功能的影响

目的:探讨临床常用抗高血压利尿剂吲达帕胺缓释片对轻、中度原发性高血压病人血管内皮功能的影响。方法:用高分辨率超声检测经吲达帕胺缓释片(1.5mg,po,qd或bid)或西拉普利(2.5mg,po,qd或bid)治疗8wk前后的高血压病人肱动脉血流介导的扩张值(FMD)和硝酸甘油介导的扩张值(NMD)的变化,同时测定血浆内皮素1(ET-1)和血管性假血友病因子(vWF)的浓度,并以17例健康者作为对照。结果:高血压病人FMD显著低于正常人(P<0.01),NMD无显著差异(P>0.05)。高血压病人ET-1和vWF浓度显著高于正常人(P<0.05)。高血压病人经西拉普利治疗8wk后FMD显著改善[(7.9±s1.7)%vs(5.4±1.2)%,P<0.01],同时ET-1浓度[(59±10)ng·L-1vs(67±10)ng·L-1,P<0.05]和vWF浓度[(121±26)%vs(140±29)%,P<0.05]均显著降低;病人经吲达帕胺缓释片治疗后,FMD显著改善[(7.7±1.4)%vs(5.8±1.9)%,P<0.01],ET-1浓度显著下降[(57±10)ng·L-1vs(69±11)ng·L-1,P<0.05],vWF浓度虽然也降低,但未达到统计学意义[(128±24)%vs(142±31)%,P>0.05]。直线相关性检验发现,FMD与收缩压呈显著负相关(P<0.05),ET-1浓度与收缩压及舒张压均呈显著正相关(P<0.05)。结论:轻、中度原发性高血压病人存在内皮依赖性舒张功能障碍,并有血浆ET和vWF因子浓度升高。血压的升高对内皮功能有一定影响。吲达帕胺缓释片能显著改善轻、中度原发性高血压病人内皮依赖性舒张功能,并使血浆ET浓度显著降低。     

LC-MS法测定人血浆中人参三醇二琥珀酸酯钠含量的方法学研究

目的:建立测定人血浆中人参三醇二琥珀酸酯钠的液相色谱-质谱联用法。方法:色谱柱为Shimadzu VP-C18柱(150mm×2.0mm,5μm);乙腈-10mmol/L乙酸铵水溶液(55∶45)为流动相,体积流量0.3mL/min;柱温40℃;内标物吲达帕胺。质谱条件为电喷雾离子源(ESI),选择负离子提取方式检测,人参三醇二琥珀酸酯钠和吲达帕胺的选择检测离子分别为m/z675.5([M-Na+H]+)、m/z364.1([M+H]+)。结果:人参三醇二琥珀酸酯钠线性范围为0.0304～101.3μg/mL,定量下限为0.0304μg/mL。准确度、精密度以及稳定性均符合有关要求。结论:本方法专属性强,灵敏度高,适用于人血浆中人参三醇二琥珀酸酯钠的药代动力学研究。     

吲达帕胺缓释片人体药动学和生物等效性研究

目的：研究吲达帕胺试验制剂（缓释片）和参比制剂（片剂）的人体药动学和生物等效性。方法：24名健康志愿者按随机双周期交叉试验设计,分别口服受试制剂（吲达帕胺缓释片）和参比制剂（吲达帕胺缓释片）1.5 mg,采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析方法测定吲达帕胺的全血浓度。利用DAS药动学程序计算其药动学参数和评价其生物等效性。结果：吲达帕胺试验制剂和参比片剂的主要药动学参数：C_max分别为（32.9±7.1）,（32.3±5.4）ng·mL^-1;T_max分别为11（5,15）,12（5,15）h;T_1/2ke分别为（15.0±2.2）,（14.9±2.1）h;AUC_0-t分别为（977.3±217.7）,（965.1±179.6）ng·h·mL^-1;AUC_0-∞分别为（1 028.6±237.1）,（1 015.3±193.7）ng·h·mL^-1;受试制剂相对生物利用度为（101.27±11.3）%。结论：经方差分析及双单侧t检验结果显示,受试的吲达帕胺缓释片与参比的吲达帕胺缓释片具有生物等效性。     

吲达帕胺缓释胶囊生物等效性及药物动力学研究

20名健康男性受试者单剂量和多剂量交叉口服国产吲达帕胺缓释胶囊(受试制剂)与进口吲达帕胺缓释片(参比制剂)。采用HPLC/MS法测定全血中吲达帕胺的浓度。单剂量口服受试和参比制剂后的Cmax分别为(29.1±5.4)和(33.0±6.0)ng/ml,Tmax分别为(12.0±4.7)和(15.0±5.8)h,AUC0-72h分别为(1106.9±293.3)和(1179.8±316.8)ng·ml-1·h。受试制剂的相对生物利用度为(95.1±13.5)%。多剂量口服两种制剂4d后达稳态,波动度分别为(41.5±15.0)%和(46.4±19.5)%。双单侧t检验结果表明,两种制剂具有生物等效性。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

高效液相色谱串联质谱法测定人体血浆中阿那曲唑的浓度

目的建立液质联用法来检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。方法血浆样品经MTBE萃取后,选用来曲唑为内标。色谱柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸(60∶40);流速为0.20 mL.min-1;采用ESI+MRM进行离子方式监测;源电压:3.6 kV;源温度:100℃;阿那曲唑和来曲唑的离子选择通道分别为:m/z294.69→225.41,286.25→217.60。结果阿那曲唑的线性范围为0.214~214 ng.mL-1,最低检测浓度为0.214 ng.mL-1,方法回收率在80%~120%,日内、日间RSD均<15%。结论本方法简单、灵敏,可以准确检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。     

LC-MS/MS快速测定大鼠血浆中HHY-002浓度

目的：建立用于测定治疗慢性心律失常药物HHY-002的大鼠血浆测定法。方法：流动相为乙腈-0．1％甲酸（65：35）,流速0．200mL／min,色谱柱Phenomenex LunaC18柱（150mm×2．00mm,5μm,5micron）,进样量为10μL,柱温35℃,以地西泮为内标。结果：HHY-002在1．98～1013．50ng／mL的范围内呈良好的线性关系（r=0．998）,最低定量限达1．98ng／mL,绝对回收率高于80％,日内和日间误差小于10％,方法回收率大于（81．4±4．5）％,符合生物样品分析要求。结论：建立的LC—MS／MS方法专属性强,灵敏度高,可用于HHY-002的体内定量分析。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中妥舒沙星的浓度

目的 建立快速、灵敏测定人体血浆中妥舒沙星浓度的高效液相色谱-串联质谱方法。方法 采用Agilent EclipsePlus C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,3.5μm）,乙腈（含0.1%甲酸）-5 mmol.L 1甲酸铵水溶液（36∶64）为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL.min 1,柱温40℃。采用多重反应监测（MRM）对妥舒沙星（m/z 405.2→387.2）和内标环丙沙星（m/z 332.2→314.2）的测定。结果 妥舒沙星的线性范围为6-2 000 ng.mL 1,回归方程为y=0.183 5x＋1.461 9×10 4,r=0.996 2,最低定量下限为6 ng.mL 1（S/N〉5）,日内、日间RSD均〈10%,高（1 800 ng.mL 1）、中（750 ng.mL 1）、低（15 ng.mL 1）浓度标准血样的平均回收率分别为97.5%,103.3%,105.9%。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于妥舒沙星的临床血药浓度监测和药动学研究。     

小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS同时测定方法的建立及在药动学研究中的应用

目的：建立同时测定小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS法,并研究小型猪皮肤外用二丙酸倍他米松乳膏后,二丙酸倍他米松及倍他米松的药动学特征。方法：血浆样品经酸化后以乙醚-环己烷（4∶1）提取,LC-MS/MS分析,以Hedera ODS-2（150 mm×2.1 mm,5μm）为分析柱,流动相为5 mmol·L-1醋酸铵水溶液（含0.1%乙酸）–甲醇,梯度洗脱。二丙酸倍他米松、倍他米松及内标布地奈德的监测离子对分别为m/z 563.2（[M＋CH3COO]-）→483.1、m/z 451.2（[M＋CH3COO]-）→361.0和m/z 489.3（[M＋CH3COO]-）→357.1。对小型猪外用二丙酸倍他米松乳膏后其血浆中二丙酸倍他米松及代谢物倍他米松的浓度进行测定,并计算主要药动学参数。结果：二丙酸倍他米松血药浓度在26.85~644.4 ng·L-1范围内线性关系良好,倍他米松血药浓度在10.62~637.2 ng·L-1范围内线性关系良好。结论：本方法专属性强、简便、灵敏,可用于血浆样本中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的测定及药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中丹参素钠的浓度

目的建立液质联用色谱法（HPLC-MS/MS）测定SD大鼠血浆中丹参素钠的浓度。方法血浆样品采用液液萃取方法进行预处理。色谱柱为Diamonil C18柱（4.6mm×200mm,5μm）;流动相为甲醇-水（含0.01‰甲酸）=（80：20）;流速为1.0ml/min;质谱条件：采用ESI离子源,负离子检测,选择MRM测定丹参素钠和酮洛芬197→135m/z和253→209m/z。结果丹参素钠在10.6～1060ng/ml检测浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9996）,最低定量限为10.6ng/ml,日内和日间精密度的RSD〈7.8%,回收率在99%到102%之间。结论该方法灵敏度高、快速、简单、准确,适用于血浆样品中丹参素钠的含量测定以及临床前实验研究     

LC-MS/MS法测定人血浆中西替利嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法测定人血浆中西替利嗪浓度的方法。方法:以甲醇沉淀蛋白处理血样后进样分析。其中,色谱柱为AllureC18,流动相为2mmol·L-1醋酸胺+0.5%甲酸水溶液∶甲醇=65∶35,流速为0.3mL·min-1,内标为格列齐特;采用电喷雾离子化源,检测方式为正离子多离子反应监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z389.2→m/z201.3(西替利嗪)、m/z324.1→m/z127.2(格列齐特)。结果:西替利嗪血药浓度在2.0～1000.0ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995);方法回收率≥97.2%,日内RSD≤2.4%,日间RSD≤11.1%,平均提取回收率>96.7%。结论:本方法简便、灵敏、准确可靠,可用于测定人血浆中西替利嗪的浓度及其药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中瑞格列奈浓度

目的:以往测定人血浆中瑞格列奈多采用LC-MS法和LC-MS/MS法,方法灵敏度高,但是由于试验成本较高无法普及,故研究建立人血浆中瑞格列奈浓度测定的HPLC方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(10mmol/mL,pH4.0)(78:22,V/V);流速1mL/min,检测波长245nm,柱温34℃,进样量20μL。结果:血浆中杂质不干扰样品的测定;瑞格列奈血药浓度在2.0～100ng/mL范围内线性关系良好,定量下限为2.0ng/mL;高、中、低3种浓度的日内、日间RSD均<10%;绝对回收率为83.8%~93.2%,相对回收率92.7%~105.3%。结论:本方法快速、简便、重现性好,可用于瑞格列奈的临床药动学和药效学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中西洛他唑浓度

目的建立灵敏快速检测人血浆中西洛他唑浓度的HPLC-MS/MS方法。方法采用色谱柱为Thermo Hy-purity C18（150 mm×2.1 mm,5μm,USA）,流动相为乙腈（含0.1%甲酸）-甲醇=25∶75（v/v）;流速为0.2mL.min-1;ESI＋离子源,MRM进行离子方式监测。质谱参数：源电压3 500V,源温度100℃,去溶剂化温度350℃,锥孔气流速50 L.h^-1,去溶剂化气流速350 L.h^-1;血浆处理采用乙腈直接沉淀萃取方法。结果血浆中西洛他唑检测方法的线性范围为4.90-2 510 ng.mL-1,最低检出浓度为4.90 ng.mL-1,血浆中西洛他唑的方法回收率在80%-120%,日内RSD〈10%,日间RSD〈15%。结论本方法用于测定人血浆中西洛他唑的浓度,简单、快速、灵敏。     

UPLC-MS/MS法测定小鼠血浆及脑组织中马钱子碱浓度

目的建立小鼠血浆及脑组织中马钱子碱浓度的UPLC-MS/MS测定方法 ,用于小鼠马钱子碱药动学研究。方法色谱柱为Acquity UPLC BEHC18柱（2.1mm×50mm,1.7μm）。流动相为水（含0.1%甲酸）-甲醇（75：25,v/v）,流速0.25mL.min-1,柱温40℃。吗氯贝胺为内标,采用ESI＋模式,多重反应选择离子检测,马钱子碱m/z395→324,吗氯贝胺m/z269→182。样品处理采用液液萃取。结果马钱子碱在小鼠血浆中线性范围为5.016～5016ng.mL-1,脑组织中线性范围为3.009～725.4ng.g-1,日内精密度（RSD）均〈8.5%,日间精密度（RSD）均〈11.2%,方法回收率范围血浆中为91.7%～112.9%,脑组织中为95.6%～107.2%。结论本方法简单、灵敏、准确,适用于小鼠体内马钱子碱浓度测定及药动力学研究。