生精障碍相关基因单核苷酸多态性研究进展

生精相关基因遗传多态性是生精障碍的一个重要的遗传病因.通过基因敲除技术现已鉴定出大量与精子发生密切相关基因.此类生精障碍基因包括表达酶类、受体类、细胞凋亡类、转录调控类等基因.上述基因的遗传易感性、感染和环境等因素共同作用导致男性非梗阻性无精子症和少精子症.生精障碍相关基因单核苷酸多态性(SNP)分析可从分子水平上阐述...     

生精细胞凋亡的基因调控

睾丸生精细胞凋亡是维持精子发生动态平衡,限制生精上皮生精细胞数量的一个重要生理机制,受多种因素调控。本文就基因等对精子发生过程中生精细胞凋亡调控的研究近况进行综述。     

精子发生中的端粒与端粒酶

端粒长度、端粒酶活性在生精细胞分化与增殖的各个阶段各不相同 ,从精原细胞到精子的成熟过程中 ,端粒酶活性的不断下降与端粒长度的依次增加呈负相关 ,在成熟精子细胞和精子中 ,端粒酶活性完全丧失。近年来研究表明 ,在少精子症和生精细胞成熟阻滞的无精子症病人之间 ,睾丸中端粒酶活性表达水平相近。人端粒酶活性、端粒酶逆转录酶为精子发生高度敏感和特异的标志 ,特别对原发性无精子症病人睾丸灶性精子发生的诊断具有重要的临床意义。     

Fas和FasL 系统在非梗阻性无精子症睾丸中的表达

目的：为探讨睾丸生精功能障碍与细胞凋亡的关系，研究Fas和FasL系统在非梗阻性无精子症睾丸支持、间质和生精细胞中的表达。方法：对20例非梗阻性无精子症患者行睾丸开放性活检，常规病理检查，按Johnson评分法评价精子发生和发生障碍的程度；采用免疫组化SABC法对睾丸支持、间质和生精细胞进行Fas和FasL表达的检测。结果：睾丸活检生精功能评为8分有14例，3分有2例，6、5、4和2分各有1例。在20例非梗阻性无精子症睾丸的间质、支持和生精细胞均有Fas和FasI。的表达；而支持细胞Fas和FasL的阳性和强阳性表达率明显高于间质和生精细胞。结论：非梗阻性无精子症的睾丸支持、间质及生精细胞Fas和FasL的高表达与精子生成障碍是一致的，非梗阻性无精子症可能与生殖细胞过度凋亡密切相关。     

FAS/FASL系统介导的生精细胞凋亡在男性生殖中的作用

生精细胞凋亡是机体清除过量及缺陷生精细胞的正常生理机制,其病理状态下的过度凋亡会导致少、弱精子症发生.FAS/FASL系统是介导哺乳动物睾丸生精细胞凋亡的主要途径.FASL特异性的与生精细胞膜上的FAS结合后,通过胞内肽段的死亡结构域激活相关的半胱天冬氨酸酶级联反应,诱导其凋亡.FAS/FASL系统在调节生精细胞凋亡中发挥重要作用,FAS与FASL的结合可触发细胞凋亡,是人体生长发育过程中正常的生理现象,但其过度表达会对精子数量质量产生不利影响.本文综述FAS/FASL系统在生精细胞凋亡中的作用,并讨论与之相关的特发性少、弱精子症所致男性不育.     

人类凋亡生精细胞超微结构研究

目的 :研究人类生精细胞凋亡的超微结构特征。　方法 :10例不育男性 ,年龄 2 8～ 36岁 ,手淫留取精液标本 ,生理盐水洗涤离心 ,戊二醛固定 ,树脂包埋 ,超薄切片 ,电镜观察。　结果 :①生精细胞及精子存在多形态的超微结构异常 ;②生精细胞凋亡的发生是一连续过程 ,电镜下根据其形态变化可分为 3个阶段 :即凋亡发生的初始阶段 ,首先出现生精细胞核染色质浓缩 ,电子密度高 ,核膜间隙宽 ,局部核膜下或核双层膜间形成空泡 (出芽 ) ;第 2阶段出现核膜膨胀折叠 ,互相融合形成花环状结构 ;第 3阶段表现核膜、胞核裂解 ,细胞形成凋亡小体和残余体 ;③精子凋亡表现为顶体结构异常 ,浆内形成空泡 ,细胞器部分或全部消失 ,胞核浓缩呈细杆状 ,体积缩小 ,核周缘电子密度减低 ;④组织细胞、粒细胞吞噬凋亡的生精细胞或精子并形成髓鞘样结构。　结论 :①生精细胞和精子发生凋亡是男性不育病人常见的异常现象 ;②生精细胞凋亡早期胞核的“出芽”方式有 2种 :即核膜下和核膜间形成囊泡 ,在这过程中 ,核表面先出现针状突起 ,然后转变为光滑 ;③凋亡的生精细胞或精子最后被组织细胞或粒细胞吞噬 ;④对不育男性精液电镜检查 ,了解生精细胞的亚微结构 ,对该病的诊断和治疗具有重要价值。     

超生理剂量十一酸睾酮引起生精细胞凋亡的动态研究

目的：以生精细胞凋亡作为指标探讨超生理剂量十一酸睾酮（ＴＵ）抑制精子发生的机制。方法：正常生育史男性２０例肌内注射ＴＵ,应用瑞－吉染色和ＴＵＮＥＬ法对精液中脱落细胞进行凋亡率的动态检测。结果：用药后精子密度和生精细胞数较用药前显著下降（Ｐ＜０．０１）,精母细胞和精子细胞凋亡率则显著上升（Ｐ＜０．０１）。结论：ＴＵ具有显著的抑制精子发生的效应。其作用机制除通过抑制促性腺激素而导致睾丸内睾酮（Ｔ）浓度降低,继之使精子发生停滞外,还可能有促进生精细胞凋亡的作用。     

生精细胞移植与睾丸功能研究

精原干细胞移植是将供体睾丸细胞转移到受体睾丸中的一项新技术。来自于转基因或变异型供体的一定数量的生精细胞 ,通过显微注射技术进入到受体睾丸的精曲小管中。注射后 ,精原干细胞可以在受体睾丸中生长发育 ,启动精子发生 ,产生具有受精能力的精子。这项技术将容许科学家们作以下研究 :①研究精子发生的基础 ;②为不育男性提供了一种使精子发生重新产生的方法 ;③从遗传学方面控制精原干细胞而发展转基因动物。生精细胞移植与睾丸功能研究@商学军 @黄宇烽     

六味地黄汤抑制大鼠生精细胞凋亡及其促进精子发生

用醋酸棉酚建造大鼠生精障碍模型,用六味地黄汤灌胃治疗,以市售六味地黄丸和甲基睾酮分别为对照和阳性对照,TUNEL法检测实验各组大鼠睾丸生精细胞的凋亡情况,计数实验各组大鼠精子数量,考察实验各组大鼠精子的质量.结果表明,六味地黄汤各治疗组、阳性对照组大鼠的精子数量、精子爬高均与模型组有显著性差异(P<0.01),各治疗组大鼠的精子质量(活力)也显著优于模型组;各实验组大鼠睾丸凋亡的生精细胞明显少于模型组.由此显示,六味地黄汤复方可显著抑制大鼠睾丸生精细胞的凋亡,对生精障碍大鼠有显著的促进生精作用,并可显著提高大鼠精子的质量.     

睾丸支持细胞和间质细胞在生精细胞凋亡中的作用

睾丸精子发生过程中存在生精细胞凋亡，支持细胞和间质细胞作为非生殖细胞对生精细胞凋亡具有重要作用，本文对这方面的研究作一综述。     

一氧化氮对精子功能的影响

一氧化氮 (NO)是一种具有广泛生物学活性的信使分子和细胞毒性因子。近年研究表明 ,NO对哺乳动物的生殖活动具有重要的调节作用。NO参与精子发生、获能并影响精子质量。低浓度NO具有保护精子活力 ,促进精子获能的作用 ;而高浓度NO则损害生精功能 ,抑制精子活动度及降低顶体反应率。NO与氧自由基相互作用 ,共同参与精子功能的调节。     

睾丸支持细胞和间质细胞在生精细胞凋亡中的作用

睾丸精子发生过程中存在生精细胞凋亡，支持细胞和间质细胞作为非生殖细胞对生精细胞凋亡具有重要作用。本文对这方面的研究作一综述。     

雷公藤多甙抑制大鼠精子发生的研究

目的探讨雷公藤多甙对大鼠精子发生的抑制作用及其可能的信号通路。方法成年雄性大鼠给予雷公藤多甙(16 mg/kg)灌胃,每日1次,在2及6周检测血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和可的松水平;光镜观察睾丸组织的形态学变化;原位末端标记法(TUNEL)观察睾丸生精细胞凋亡;免疫组织化学法观察凋亡通路相关蛋白Bax/Bcl-2的表达。结果给药组与对照组相比,性激素、肾上腺皮质激素均无显著变化(P均>0.05);给药2周后精子数下降和畸形率上升(P<0.05),给药4和6周精子数下降和畸形率升高更显著(P<0.001);组织学检查给药组大鼠生精小管内各级精母细胞和精子细胞数明显减少,生精细胞排列紊乱,原始精原细胞和支持细胞(Sertoli细胞)未见明显改变。与正常对照组相比,生精小管内生精细胞凋亡显著增加(2周P<0.05,4和6周P<0.001)。凋亡相关蛋白Bax表达明显上调,Bcl-2表达无显著差异。结论雷公藤对大鼠精子发生的抑制作用表现为增加生精细胞凋亡,导致精子计数下降,精子的畸形率升高。雷公藤多甙使睾丸Bax表达增加,与诱导生精细胞凋亡相关,可能是相关的信号通路之一。进一步研究雷公藤多甙作用的分子信号机制有助于今后降低剂量、减少毒副作用,探讨其作为一种安全的男性避孕药可能性。     

输精管结扎诱发生精细胞凋亡的研究进展

生精过程是一个精细的调节过程 ,近年生精细胞凋亡的研究进展非常迅速。输精管结扎作为一种刺激因素影响生精细胞凋亡 ,研究表明输精管结扎可使生精细胞凋亡增多。输精管结扎诱导生精细胞凋亡的机制与输精管压力增高、NO作用的影响、基因调控及睾酮水平等有关。本文综述了近年对输精管结扎诱发生精细胞凋亡的研究 ,这对未来男性生殖系统更深入的研究有重要作用     

不育症精液生精细胞凋亡率检测

目的了解精液中生精细胞的状况和生精细胞凋亡率与不育症的关系,并作为评估睾丸功能的指标。方法293例精液标本用瑞-姬染色,油镜下进行生精细胞形态学及凋亡率检出与分析。并采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL)染色进行对照,确认瑞-姬染色对生精细胞凋亡鉴别的可行性。结果在293例精液中,有生精细胞者273例占93.1%;无生精细胞者20例占6.9%。生精细胞凋亡率随精子数量减少而增加,以无精子症者最高,比生育组高5.8倍(P<0.001)。显示瑞-姬染色的可行性与优越性。结论睾丸生精障碍与生精细胞过度凋亡密切相关,可在精液中检出脱落生精细胞,根据精液生精细胞凋亡率可作为评估睾丸功能的指标之一。     

促性腺激素释放激素拮抗剂对大鼠睾丸支持细胞雄激素受体和Fas配体基因表达的影响

本实验利用注射促性腺激素释放激素拮抗剂（ＧｎＲＨ Ａ）引起睾丸生精细胞程序化死亡的大鼠模型，用地高辛标记的大鼠雄激素受体和Ｆａｓ配体的ＲＮＡ探针对大鼠睾丸石蜡切片进行原位杂交，观察雄激素受体和Ｆａｓ配体基因在生精细胞凋亡中的变化。结果显示，ＧｎＲＨ Ａ处理后曲细精管有退行性变，原位杂交表明此时Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞的雄激素受体表达明显减低，而Ｆａｓ配体表达显著升高。提示Ｆａｓ配体的表达可能与生精上皮细胞程序化死亡关系密切。     

聚精丸治疗少精子症的实验研究

目的:观察聚精丸对少精子症患者精子超微结构和生精细胞凋亡的影响,探讨聚精丸对精子生成的作用机制。方法:50例少精子症患者口服聚精丸5g/次,3次/d,3个月为1个疗程,连续服用1~4个疗程,分别于治疗前、治疗1、3、6、12个月后,通过透射电镜和流式细胞仪(FCM)观察精子超微结构和生精细胞的凋亡、生精细胞倍体比例的变化。结果:①精子超微结构治疗6个月后顶体基质密度有所增加,治疗12个月后顶体膜形态完整性有明显改善;核的病理改变和尾部异常改变不明显。②生精细胞凋亡治疗后细胞碎片和凋亡细胞减少,治疗3个月后与治疗前比较差异有显著性(P<0.05),治疗12个月后与治疗前比较差异有极显著性(P<0.01)。③生精细胞倍体比例经聚精丸治疗3个月后,单倍体成熟精子增多,与治疗前比较差异有极显著性(P<0.01);脱落的精母细胞减少,与治疗前比较差异有显著性(P<0.05)。结论:聚精丸可改善少精子症患者精子顶体基质密度和顶体膜结构形态的病理性改变,提高顶体膜和顶体酶的质量;降低生精细胞及精子凋亡速率,提高单倍体精子的百分率,降低二倍体细胞的百分率。     

睾丸细胞生物学研究进展

睾丸是男性生殖腺,由生精小管和间质构成。生精小管主要由生精细胞和支持细胞组成,是精子发生场所;间质中主要是间质细胞,间质细胞合成与分泌雄激素。本文介绍睾丸3种细胞的发育分化,以及成年期睾丸细胞的结构和生物学研究进展。     

微小RNA在非梗阻性无精症中的研究进展

精子发生是一个复杂的生殖细胞分化过程,受到多方面因素的影响,其中微小RNA(microRNAs,miRNAs)在精子产生过程中发挥着重要角色,而广泛的mRNA转录后调控则是精子发生的一个显著特征.非梗阻性无精症(NOA)患者是由于睾丸中没有精子而引起不育,在导致NOA的原因中,miRNAs表达的失调与NOA患者生精功能受损有关.因此对miRNAs的研究,可以从分子水平阐明miRNAs异常表达和调控引起的生殖细胞生成障碍的机制,这对NOA的发病、诊断、治疗及预后判断具有非常重要的意义.     

“生精宝”对小鼠少精子症模型的作用及其机制探讨

目的:研究"生精宝"对小鼠少精子症模型生精功能的作用并探讨其机制。方法:昆明种雄性小鼠60只随机分4组:"生精宝"组17只(组1),维生素E组17只(组2),空白造模对照组16只(组3),正常空白对照组10只(组4);前3组予腹腔内连续5d注射环磷酰胺造模,前两组于造模次日给药灌胃,组1每只小鼠给予"生精宝"药汤2g/(kg.d),组2给予维生素E75mg/(kg.d),第36d处死各组全部小鼠。用放免法测血清睾酮水平;取一侧附睾制备悬液作精子分析,另一侧睾丸切片行HE染色,计数生精上皮层次和间质细胞,TUNEL法检测生精细胞凋亡。结果:组1血清睾酮,生精上皮层次以及间质细胞计数方面相对于组3有明显改善且高于组2,组1生精细胞凋亡阳性率低于组2和组3,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05),组1各项检测指标与组4比较无显著差异(P>0.05)。结论:"生精宝"可明显增加间质细胞数量,从而分泌高水平睾酮作用于睾丸生精上皮层次,增强生精功能;"生精宝"作用机制可能为抑制生精细胞凋亡,增加上皮层次,促进精子发生;睾酮可能为生精细胞凋亡抑制的诱导因素。