LC-MS/MS测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的:建立测定人血浆中替米沙坦浓度的LC-MS/MS方法,并用该法研究替米沙坦片在健康人体内的药代动力学。 方法:采用LC-MS/MS测定人血浆中不同时间点替米沙坦的浓度,以地西泮为内标,血浆样品用乙腈沉淀蛋白,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18 (100 mm×2.1 mm,3.5 μm),流动相为乙腈-0.3%甲酸水溶液(55∶45),流速0.3 ml/min,柱温30℃。 结果:替米沙坦的线性范围为2.5～500 ng/ml (r=0.995 7),最低定量限为2.5 ng/ml(S/N>10),日内和日间RSD<8%。 结论:本法操作简单,选择性好,灵敏度高,适用于替米沙坦的人体药代动力学研究。     

固相萃取-UPLC-MS/MS法建立大鼠血浆中蒜氨酸含量测定方法

目的建立基于UPLC-MS/MS与固相萃取(SPE)相结合的大鼠血浆中蒜氨酸的分析方法。方法用强阳离子基质的SPE柱提取大鼠血浆中的蒜氨酸和降低基质效应,UPLC-MS/MS法进行测定。结果对SPE方法中淋洗液和洗脱液进行优化,选择水为淋洗液,甲醇-氨水(95∶5)为洗脱液,回收率>68%;蒜氨酸的标准曲线相关系数r2>0.99;蒜氨酸测定的日内精密度和日间精密度良好,相对标准偏差(RSD%)分别低于2.1和8.2。结论本方法可有效降低复杂生物样品中的基质效应,测定方法准确、可靠,具有很好的应用前景。     

固相萃取LC-MS/MS法测定疏血通注射液中次黄嘌呤浓度

[目的]建立固相萃取液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定疏血通注射液中次黄嘌呤浓度。[方法]疏血通注射液经固相萃取柱处理后,采用LC-MS/MS进行含量测定。色谱柱为Acquity BEH C18分析柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-水(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min。于ESI负离子模式下,以多反应离子监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子为m/z 134.9→92.0(次黄嘌呤)和m/z 151.0→92.1(内标6-巯基嘌呤)。[结果]次黄嘌呤在质量浓度0.1～0.5μg/mL范围内与待测物和内标的峰面积比值呈良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为98.7%,RSD为0.31%。[结论]该方法简便、准确、灵敏,可用于疏血通注射液中次黄嘌呤的浓度测定。     

LC-MS/MS法测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的：建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在人体内的药代动力学。方法：血浆样品经乙酸乙酯萃取后,在正离子检测方式下选择多反应监测扫描方式进行质谱分析。结果：血浆中的内源性物质对样品测定无干扰,专属性良好。辛伐他汀的线性范围为0.1~10ng/mL,最低定量限为0.1ng/mL,平均提取回收率为81.4%,日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的要求。测定的辛伐他汀片在人体内T1/2为（2.46±1.25）h;Tmax为（1.96±1.00）h;Cmax为（1.70±1.48）ng/mL;AUC0-24为（7.08±5.27）ng.h/mL;AUC0-∞为（8.11±5.83）ng.h/mL。结论：该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可以满足本实验低浓度药物测定及药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的:建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在人体内的药代动力学。方法:血浆样品经乙酸乙酯萃取后,在正离子检测方式下选择多反应监测扫描方式进行质谱分析。结果:血浆中的内源性物质对样品测定无干扰,专属性良好。辛伐他汀的线性范围为0.1~10ng/mL,最低定量限为0.1ng/mL,平均提取回收率为81.4%,日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的要求。测定的辛伐他汀片在人体内T1/2为(2.46±1.25)h;Tmax为(1.96±1.00)h;Cmax为(1.70±1.48)ng/mL;AUC0-24为(7.08±5.27)ng.h/mL;AUC0-∞为(8.11±5.83)ng.h/mL。结论:该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可以满足本实验低浓度药物测定及药代动力学研究。     

固相萃取形式应用概况

固相萃取作为一种新发展起来的预处理技术,近年来得到了广泛的重视.本文分别介绍了固相萃取的三种形式:固相萃取柱、固相萃取盘和固相微萃取的原理及其在药物分析和其他方面的应用情况.     

固相萃取-LC-MS/MS测定牛奶中氟喹诺酮类药物残留

目的:建立同时测定牛奶中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星和芦氟沙星残留的固相萃取-HPLC/MS/MS测定方法。方法:牛奶样品经酸化、乙腈沉淀蛋白质后,过C18固相萃取小柱净化,HPLC-MS/MS分析,流动相为甲醇-10 mmol/L醋酸铵水溶液(25∶75),色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS C18柱。结果与结论:方法学试验表明:本方法灵敏度高(定量限0.5 ng/g)、精密度好(RSD     

固相萃取-LC-MS/MS测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留

目的： 建立同时测定鸡蛋中诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星残留的固相萃取-LC-MS/MS测定方法。 方法： 鸡蛋样品经乙腈沉淀蛋白质和正己烷脱脂后,过HLB固相萃取小柱净化,LC-MS/MS分析,流动相为乙腈-0.1%甲酸(13∶87),色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS C₁₈柱。 结果： 建立的固相萃取-LC-MS/MS选择性好,灵敏度和准确度均良好。 结论： 建立的方法可作为多种药物残留检测的常规方法。     

固相萃取-反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中羟基积雪草苷的浓度

目的:建立大鼠血浆中羟基积雪草苷测定的高效液相色谱法.方法:固相萃取法对样品进行纯化处后,选用Welchrom-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),水-乙腈(24:76)为流动相测定药物含量;流速:1.0ml/min;紫外检测波长:225 nm;柱温:30℃;内标:葫芦素B.结果:在此色谱条件下,羟基积雪草苷和内标葫芦素B的保留时间分别为5.11 min和8.14min.线性范围为5μg/ml～1.5 mg/ml(r=0.9998),最低检测浓度为1μg/ml.方法回收率在90.21%～95.65%,提取回收率在80.65%～87.04%.日内与日间精密度的RSD在1.31%～3.07%(n=5).结论:该检测方法简便可靠,选择性和重现性好,符合常规生物样品检验的要求,可用于羟基积雪草苷在大鼠体内的药代动力学研究.     

HPLC—MS／MS测定人血浆中文拉法辛的浓度及人体生物等效性

目的研究2种盐酸文拉法辛胶囊的人体生物等效性。方法 24名男性健康志愿者采用随机双交叉试验方案设计,分别口服受试制剂或参比制剂（博乐欣）50 mg,采集36 h内动态血标本;HPLC-MS/MS法测定血浆中文拉法辛的浓度,DAS程序对试验数据进行处理,计算药动学参数和相对生物利用度,判定2种制剂的生物等效性。结果受试制剂和参比制剂的主要药动学参数Cm ax分别为（59.32±17.21）、（60.58±17.42）μg·L^-1,Tm ax分别为（2.08±0.46）、（2.25±0.55）h,T1/2分别为（6.69±1.67）、（6.35±1.69）h,AUC0-36分别为（524.65±227.01）、（528.22±226.57）μg·L^-1.h,AUC0-∞分别为（544.81±246.05）、（546.85±244.62）μg·L^-1.h,2种制剂主要药动学参数经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,并计算90%置信区间,表明2种制剂生物等效,受试制剂的人体相对生物利用度为（100.37±10.41）%。结论 2种盐酸文拉法辛胶囊生物等效。     

高效液相色谱法测定人血浆中阿昔莫司的浓度及其药代动力学

目的 建立人血浆阿昔莫司的定量分析方法,为药代动力学研究提供技术手段。方法 采用高效液相色谱法,以Inertsil/ WondaSilTM C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱为固定相;以乙腈∶2mmol/L四丁基溴化铵（磷酸调pH值至3）=13∶87（V/V）为流动相,咖啡因为内标。流速1.0mL/min;检测波长263nm。结果 阿昔莫司在0.05~6μg/mL浓度范围内线性关系良好,标准曲线方程为y=0.74190342x-0.0025535（r2=0.99926),最低定量限为0.05μg/mL,绝对回收率、精密度、准确度与稳定性均符合生物样本测定要求。结论 本研究所建立方法专属性强,灵敏度高,精密度和准确度好,可用于阿昔莫司药代动力学研究。     

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中拉莫三嗪的浓度

 目的 建立简单、快速和灵敏的高效液相色谱串联质谱法以测定人血浆中拉莫三嗪的浓度。 方法 血浆样品经甲醇直接沉淀蛋白后,采用Thermo Hypurity C18柱(4.6×250 mm,5 μm)分离,流速为0.20 mL/min,以甲醇∶0.1%甲酸＝80∶20为流动相等度洗脱。通过电喷雾离子源进入质谱,以二级质谱多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式进行检测。结果 拉莫三嗪的线性范围为8.19～2 096 ng/mL,平均相对回收率在80% ～ 120%范围内,日内和日间变异均 <15%。结论 本法简单、快速、重现性好,能够用于拉莫三嗪的人体药代动力学性研究。     

高效液相色谱串联电喷雾质谱法测定大鼠血浆中山茛菪碱

目的建立大鼠血浆中山莨菪碱的测定方法,并研究山莨菪碱的大鼠药动学。方法采用液相色谱串联电喷雾离子阱质谱法测定大鼠血浆中山莨菪碱。大鼠血浆样品经甲醇2次沉淀蛋白并萃取后,以甲醇-2mmol/L醋酸铵缓冲液(用甲酸调pH3.5)(70:30)为流动相,用AgilentZorbaxEclipseXDB-C_(18)色谱柱分离,通过电喷雾离子阱质谱,以选择离子反应监测方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z306→140(山莨菪碱)和m/z290→124(内标,阿托品)。结果山莨菪碱线性范围为10-5000μg/L,r=0.9990,最低检测限为2μg/L,日内、日间测定值RSD小于4.2%。结论该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内山莨菪碱的药动学研究。     

高效液相色谱质谱检测血浆秋水仙碱及其药动学研究

目的 建立人血浆秋水仙碱检测的高效液相色谱-质谱检测方法,研究秋水仙碱片的人体药动学.方法 血浆样品0.1 mL,经乙醚-二氯甲烷萃取,以ZORBAX Extend-C18为色谱柱;流动相为甲醇-10 mmol·L-1乙酸铵,流速为1.1 mL·min-1;采用质谱电喷雾离子化法,正离子多重反应检测(MRM).测定12名健康志愿者单剂量口服2 mg秋水仙碱片后的血药浓度经时过程.由DAS2.0程序计算药动学参数.结果 秋水仙碱浓度在0.05-10 μg·L-1范围内线性关系良好;平均回收率分别为(92.47±1.73)%;日内RSD≤2.99%,日间RSD≤2.22%.结论 本方法简便、快速、准确可靠,适用于人血浆秋水仙碱浓度的测定及其药代动力学研究.     

高效液相色谱-大气压化学电离源-质谱法测定人血浆中帕洛诺司琼浓度

目的:建立液质联用法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中帕洛诺司琼浓度的方法?方法:色谱条件为Hypersil GOLD(150.0 mm × 4.6 mm,5 μm)柱,流动相为0.2%醋酸铵水溶液(含0.1%甲酸)-甲醇(50∶50),质谱条件为大气压化学电离源(APCI源),血浆样品中加入内标,碱化后用乙酸乙酯提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定?结果:血浆样品中帕洛诺司琼浓度在0.04~20.00 ng/ml的线性范围内关系良好(r = 0.999 9),定量下限为0.04 ng/ml;低?中?高浓度的回收率?批内及批间精密度均符合生物样本测定方法学要求?结论:本方法灵敏度高?专属性强?重现性好,可用于帕洛诺司琼药代动力学研究及血药浓度监测?     

高效液相色谱法测定人血浆中氨溴素及药物动力学研究

目的：通过建立高效液相色谱法测定正常人口服盐酸氨溴素缓释胶囊后的血药浓度，以了解氨溴素的药物动力学行为。方法：血样经碱化后乙醚提取，盐酸反提后进样，以甲醇－０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．３）－四氢呋喃（７０∶２７．５∶２．５，ｖ／ｖ）为流动相，利多卡因作为内标，在２４８ｎｍ处定量检测。结果：本法线性范围宽（１０～２００μｇ／Ｌ，ｒ＝０．９９９４），回收率稳定（８７．２±２．８）％，精确度高（日内ＲＳＤ≤４．１％，日间ＲＳＤ≤８．１％）。测定了健康受试者口服盐酸氨溴素缓释胶囊的血药浓度，并计算了相关的药物动力学参数。结论：应用本法可测定氨溴素血药浓度，可用作生物利用度研究，为临床合理用药提供参考。     

HPLC法同时测定人血浆中哌拉西林/他唑巴坦的浓度及健康人体药动学研究

目的采用HPLC法同时测定人血浆中哌拉西林/他唑巴坦的浓度,并考察12名健康受试者分别单次静脉滴注注射用哌拉西林钠/他唑巴坦钠(2 g/0.5 g、3 g/0.75 g和4 g/1 g)后的人血浆中药动学行为。方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白,以茶碱为内标,二氯甲烷提取去杂质,水相进样,采用梯度洗脱的方式同时测定哌拉西林/他唑巴坦,经Capcell Pak MG C18柱分离,220 nm波长检测。结果哌拉西林的血浆样品线性范围为0.4～400μg.mL-1,他唑巴坦的为0.4～100μg.mL-1;方法提取回收率为92.5%～97.4%,日内和日间精密度均小于12.2%。对3个剂量组的Cmax、AUC0-t进行相关性分析,他唑巴坦的相关系数分别为0.898和0.893,哌拉西林的分别为0.900和0.909。结论采用HPLC法同时测定哌拉西林/他唑巴坦,准确性好,操作简单;药动学研究结果表明:血浆中哌拉西林/他唑巴坦体内动力学行为符合线性药动学,不同剂量组性别间的药动学参数差异无统计学意义。     

高效液相色谱-串联质谱同时测定人血浆中8种抗抑郁药的浓度

目的：建立同时测定血浆中米氮平、舍曲林、帕罗西汀、度洛西汀、阿米替林、去甲阿米替林、艾司西酞普兰及劳拉西泮8种抗抑郁类药物浓度的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）。方法：内标为度洛西汀-d7,使用甲醇将血浆样品进行蛋白沉淀后分析。Waters Cortecs C18(2.1mm×50.0mm,2.7μm)色谱柱, 0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸甲醇溶液梯度洗脱,流速0.5mL/min,电喷雾阳离子源。通过实验对这一方法的专属性、精密度、回收率等进行考察。结果：米氮平、帕罗西汀、艾司西酞普兰在1~200ng?mL-1;舍曲林、去甲阿米替林、度洛西汀、阿米替林及劳拉西泮在2.5~500 ng?mL-1范围内均表现良好的线性关系,回收率在94.70%~101.31%之间,精密度（RSD）小于15%。结论：该方法在临床同时测定服药患者血液中抗抑郁药物的浓度时相较其他方法具有快速、灵敏、准确的特点,且具有专属性强,重复性好,稳定性高的优点。