肿瘤坏死因子联合足叶乙甙对肺癌细胞株A549的毒性作用及临床意义

目的：研究肿瘤坏死因子（TNFα）和足叶乙甙（VP16）联合抗肿瘤的作用及其机制。方法：用MTT法检测不同浓度的TNFα、VP16及TNFα/VP16对人肺癌细胞系A549的细胞毒作用及流式细胞仪观察TNFα、VP16及TNFα联合VP16分别对A549的细胞周期的影响。结果：TNFα、VP16对A549细胞的生长抑制作用有时相及剂量依赖关系，而TNFα联合VP16对A549抑制作用较TNFα、VP16单个作用显著（P＜0．01），对细胞周期用药后G2期明显下降（13．2％下降至3．0％，S期上升（27．3％上升至42．5％）（P＜0．05）。结论：VP16联合TNFα可增加对肺癌细胞A549的抑制率，对A549细胞的作用是通过抑制DNA合成及有丝分裂使G0＋G1＋S期不能及时转至G2、M期。     

肿瘤坏死因子抑制人肺癌细胞增生能力的体外研究

利用多细胞球体 ,探讨体外培养条件下肿瘤坏死因子 (TNFα)对肺癌细胞增生能力的影响。发现TNF( 1 0 4U/mL)与人肺癌细胞系A5 4 9球体共同培养后对A5 4 9细胞球体生长有一定的抑制作用 (P <0 .0 5 )。TNF与A5 4 9单层细胞作用后 ,观察细胞生长曲线的变化 ,计算细胞倍增时间 ,测定细胞集落形成率。发现TNF可改变A5 4 9细胞的生长曲线 ,使细胞倍增时间由 37h延长至 4 3h ,集落形成率由 5 2 %降低为 1 5 %。结果表明TNF对增生性肺癌干细胞有一定的抑制作用。     

马鞭草有效成分对人绒毛膜癌耐药细胞株JAR／VP16的逆转作用研究

目的:研究马鞭草有效成分4'-甲醚-黄芩素(4'-methylether-scutellarein,4'-M-S)对人绒毛膜癌多药耐药细胞株JAR/VP16的耐药逆转作用.方法:MTT法检测4'-M-S对JAR/VP16细胞的增殖抑制作用,确定药物逆转浓度及其对耐药细胞的逆转倍数和逆转效率;单克隆抗体酶免定量法测定耐药细胞中绒毛膜促性腺激素(hCG)分泌变化;流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率;光镜和透射电镜观察耐药细胞形态学改变.结果:4'-M-S对JAR/VP16细胞具有明显增殖抑制作用,20 μg/ml 4'-M-S可显著逆转JAR/VP16细胞对鬼臼乙叉甙(VP16)、氨甲喋呤(MTX)及放线菌素D(ACTD)的耐受性,逆转倍数为:5.02、3.67、2.48;逆转效率为:81.19%、76.89%、64.08%;4'-M-S联合作用后,耐药细胞hCG分泌量明显下降;细胞周期阻滞于G0～G1期和G2～M期,细胞凋亡率达19.71%;透射电镜观察发现细胞质空泡化、内质网扩张、核物质浓缩边聚等早期凋亡现象.结论:4'-M-S对JAR/VP16细胞具有耐药逆转作用,可能的机制是抑制耐药细胞生长及诱导细胞凋亡.     

缺氧对人肺腺癌细胞A549细胞周期阻滞和HIF-1α表达的影响

目的　探讨缺氧导致肿瘤细胞周期阻滞的作用及机制。方法　人肺腺癌细胞A5 4 9分成 3组 :缺氧 12h组、缺氧 2 4h组及对照组。缺氧组分别在缺氧条件下 (37℃ ,5 %CO2 、 2 0 %O2 饱和度 )培养 12h和 2 4h ,对照组置于正常氧浓度条件下 (37℃ ,5 %CO2 、 2 1%O2 饱和度 )培养 2 4h。流式细胞仪分别测定 3组细胞周期分布 ,免疫组织化学S P法分别测定 3组细胞缺氧诱导因子 1α (HIF 1α)表达。结果　①缺氧 12h组、缺氧 2 4h组的G0 /G1期比例 (70 2 0± 3 33) %、 (82 85± 1 75 ) %显著高于对照组 (5 0 36± 4 0 9) % ,差异有显著性意义 ,F =2 0 2 34,P <0 0 1。②缺氧 12h组、 2 4h组及对照组HIF 1α表达为 0 16 4± 0 0 18、 0 2 5 6± 0 0 5 3、 0 0 12± 0 0 0 3,其差异有显著性意义 (F =10 5 2 8,P <0 0 1)。③缺氧组HIF 1α表达与G0 /G1期比例呈明显正相关性 (r =0 815 ,P <0 0 1)。结论　缺氧使人肺腺癌细胞A5 4 9发生G0 /G1期阻滞 ,HIF 1α在缺氧导致的人肺腺癌细胞A5 4 9G0 /G1期阻滞中可能起重要作用。     

丹参酮A与全反式维甲酸协同诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株的分化和凋亡

目的　研究丹参酮 A(Tanshinone A,Tan A)联合全反式维甲酸 (ATRA)对早幼粒细胞白血病细胞 (NB4 )诱导分化及凋亡的协同效应。方法　 0 .5 μg/ m l Tan A分别联合 0 .5 μg/ ml、0 .2 5 μg/ ml和 0 .12 5 μg/ml ATRA作用 NB4细胞 5 d,观察 NB4细胞形态学变化 ,检测硝基蓝四氮唑 (NBT)还原能力 ;流式细胞术检测CD11b,CD33的表达 ,并进行细胞周期和细胞凋亡分析。结果　 Tan A联合 ATRA可协同诱导 NB4细胞分化和凋亡。联合作用组第 5 d细胞生长抑制率均超过 80 % ;90 %左右的 NB4细胞分化 ,其中杆状和分叶核细胞比例超过6 5 % ;NBT还原能力显著升高。流式细胞术分析显示 CD11b表达升高 ,CD33表达降低 ;G0 / G1 期细胞增加 ,有明显的细胞凋亡 ,与 Tan A或 ATRA单独作用组相比均有显著性差异 (P<0 .0 1)。Tan A与 ATRA(0 .12 5 μg/ m l～0 .5 μg/ m l)联合对 NB4细胞的影响没有明显的浓度依赖倾向。结论　 Tan A联合 ATRA对 NB4细胞诱导分化和凋亡有协同作用 ;在 ATRA一定浓度范围内 ,这种协同作用无 ATRA剂量依赖性。     

雌激素和异黄酮类药物对中性粒细胞粘附分子表达的影响

目的　研究雌激素和异黄酮类药物对中性粒细胞粘附分子表达的影响。方法　利用肿瘤坏死因子 ( TNFα)处理健康人和缺血性中风患者的中性粒细胞 ,加用不同浓度的异黄酮 ( WZ1 、WZ2 )和雌激素 ( WZ3 、WZ4)进行干预 ,采用流式细胞仪定量测定细胞表面的粘附分子表达。结果　 110 ng/ml TNFα对健康人中性粒细胞有明显的激活作用 ,可使 CD18表达上调 10 % ,CD6 2 L平均荧光强度下降 15 % ,阳性细胞百分数下降 30 %。 2异黄酮类药物 WZ1 、WZ2 对中性粒细胞表面的 CD18和 CD6 2 L表达基本上没有影响。 3用雌激素类药物 WZ3 、WZ4预处理中性粒细胞后再加 TNFα激活 ,可以使中性粒细胞表面粘附分子 CD18的平均荧光强度下降 8% ,CD6 2 L的平均荧光强度增加 15 % ,CD6 2 L 的阳性细胞百分率增加 2 0 % ;如果先用 TNFα激活中性粒细胞然后再用 WZ3 、WZ4处理 ,中性粒细胞粘附分子的表达与单纯 TNFα组之间无显著性差别。 4TNFα处理缺血性中风患者中性粒细胞后 ,CD18表达增加 2 0 % ,CD6 2 L 的平均荧光强度和阳性细胞百分数均下降 30 % ,与健康对照组相比有统计学差异 ;雌激素预处理后可以抑制中性粒细胞的激活。结论　 1TNFα是中性粒细胞强有力的激活剂 ,在中风的发生、发展过程发挥了重要作用。 2异黄酮类药     

六亚甲基二乙酰胺体外对白血病细胞株的抗增殖作用及其机理研究

目的　研究抗肿瘤药物六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)在体外对人白血病细胞株U937,K5 6 2增殖和凋亡的作用 ,初步从细胞周期调控的角度探讨其作用机理。方法　应用MTT比色法和锥虫蓝拒染法观察HMBA对细胞增殖的抑制作用。用细胞周期素A/DNA双染色法检测不同浓度HMBA(1、2、4mmol/L)实验组细胞胞浆内细胞周期素A蛋白表达水平 ,并进行DNA含量分析。用异硫酸盐荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶双染色法 ,DNA片段变化和亚G1峰检测细胞凋亡。结果　 (1)HMBA能明显地抑制K5 6 2 ,U937细胞增殖 ,呈剂量依赖性 (K5 6 2细胞经HMBA干预后第六天 ,对照组、1、2、4mmol/L组MTT法的 5 95nm吸光度值分别为 1 0 3、0 81、0 5 8、0 36 )。 (2 )HMBA能剂量依赖性地下调胞浆内细胞周期素A表达水平 ,(K5 6 2细胞经HMBA干预后 ,对照组 ,1、2、4mmol/L组细胞周期素A阳性率分别为 34 4 %± 5 2 % ,16 1%± 2 5 % ,9 9%± 1 7% ,7 6 %± 2 0 % ) ,S期细胞比例与细胞周期素A的改变趋势是一致的。 (3)各实验组均未检测到有凋亡发生。结论　HMBA通过下调S G2期周期素A表达而打破了K5 6 2 ,U937细胞增殖的环节 ,是其发挥抑制白血病细胞增殖的机理之一     

CD40信号对肺癌细胞化疗敏感性影响的实验研究

目的　观察激发CD4 0分子对肺癌细胞的化疗敏感性影响。方法　以肺癌细胞株A5 4 9和SPC A 1为研究对象 ,以可溶性CD4 0配体 (sCD4 0L)及激发型CD4 0单克隆抗体 5C11处理A5 4 9和SPC A 1细胞 ,采用四氮唑盐(MTT)比色法比较CD4 0激发前后化疗药物顺铂 (DDP)或丝裂霉素 (MMC)对细胞增殖的影响 ,免疫荧光标记和流式细胞术测定激发CD4 0分子前后化疗药物对肺癌细胞的杀伤作用。结果　激发CD4 0分子可增强DDP及MMC对CD4 0表达肺癌细胞株A5 4 9增殖的抑制率 (P <0 .0 5 )以及增强DDP及MMC对该细胞株的杀伤效应 (P <0 .0 5 ) ;而CD4 0不表达细胞株SPC A 1经sCD4 0L或 5C11处理不能产生类似的作用。结论　激发CD4 0信号可引起CD4 0表达肺癌细胞A5 4 9对化疗药物DDP及MMC的敏感性增加 ,可能在肺癌的治疗中具有潜在的应用价值。     

芬维A胺和硼替佐米联用调节内质网应激蛋白促进肺癌A549细胞凋亡

目的 探讨芬维A胺\[fenretinide,N-(4-hydroxyphenyl) retinamide (4-HPR),一种人工合成的维甲酸\]与硼替佐米联合应用对非小细胞肺癌A549细胞的促凋亡作用。方法 将非小细胞肺癌细胞株A549用不同浓度的4-HPR(2.5、5、10、20 μmol/L)和硼替佐米(0.1、0.2、0.4、0.8 μmol/L)单独或联合处理24 h。应用MTT法检测4-HPR和硼替佐米单独或联合处理对细胞的生长抑制作用;碘化丙啶(PI)染色和流式细胞术检测细胞周期;Annexin Ⅴ-FITC和PI双染检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测内质网应激相关凋亡蛋白CHOP的表达。结果 4-HPR和硼替佐米单独处理肺癌细胞株A549能够以剂量依赖性方式抑制细胞增殖,两药联用后抗增殖作用明显增强。细胞周期检测显示两药联用能导致细胞停滞于G0/G1期,S期细胞显著减少。与两药单独使用相比,4-HPR和硼替佐米联用能显著增强A549细胞凋亡,伴随内质网应激蛋白CHOP的mRNA和蛋白表达增强。结论 4-HPR和硼替佐米联用能促进肺癌A549细胞的凋亡,为药物联合治疗肺癌提供了实验基础。     

丹参酮ⅡA与全反式维甲酸协同诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株的分化和凋亡

目的研究丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA, TanⅡA)联合全反式维甲酸(ATRA)对早幼粒细胞白血病细胞(NB4)诱导分化及凋亡的协同效应.方法0.5 μg/ml TanⅡA分别联合0.5 μg/ml、0.25 μg/ml和0.125 μg/ml ATRA作用NB4细胞5 d,观察NB4细胞形态学变化,检测硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力;流式细胞术检测CD11b,CD33的表达,并进行细胞周期和细胞凋亡分析.结果TanⅡA联合ATRA可协同诱导NB4细胞分化和凋亡.联合作用组第5 d细胞生长抑制率均超过80%;90%左右的NB4细胞分化,其中杆状和分叶核细胞比例超过65%;NBT还原能力显著升高.流式细胞术分析显示CD11b表达升高,CD33表达降低;G0/G1期细胞增加,有明显的细胞凋亡,与TanⅡA或ATRA单独作用组相比均有显著性差异(P<0.01).TanⅡA与ATRA(0.125 μg/ml～0.5 μg/ml)联合对NB4细胞的影响没有明显的浓度依赖倾向.结论TanⅡA联合ATRA对NB4细胞诱导分化和凋亡有协同作用;在ATRA一定浓度范围内,这种协同作用无ATRA剂量依赖性.     

透明质酸酶和透明质酸对血管内皮细胞增殖及CD44表达的影响

目的 :探讨透明质酸酶 (HAase)和透明质酸 (HA)对血管内皮细胞增殖的影响和可能机制 ,寻找促血管新生的新途径。 方法 :采用牛主动脉内皮细胞 (BAEC)离体培养模型 ,分别经 HAase或 HA刺激 ,用 MTT法观察 BAEC增殖率的变化 ;经流式细胞术 (FCM)测定细胞周期和细胞表面粘附分子 CD44的表达。 结果 :HAase(5 0μg/ ml)作用后细胞增殖率 (% )为5 0 .10± 1.2 3(P<0 .0 1) ,使细胞周期中 S期和 G2 / M期细胞比例增加 12 .8% ,CD44的表达细胞数和表达量增加 ;而高浓度HA (10 0μg/ m l)则抑制 BAEC的增殖和 CD44的表达。 结论 :HAase可降解细胞外基质中具有抗血管新生作用的 HA,促进内皮细胞的增殖 ,有可能提高促血管生长因子治疗心肌缺血的局部疗效     

川芎嗪对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响及其机制

目的:研究川芎嗪对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响,并探讨川芎嗪治疗肺癌的作用机制。方法:选用肺癌A549细胞体外培养,在不同浓度川芎嗪作用下,应用MTT法检测肺癌细胞的增殖抑制,应用流式细胞仪检测肺癌细胞的凋亡及细胞周期的分布,采用免疫细胞化学方法检测川芎嗪对肺癌A549细胞Bcl-2及Bax表达的影响。结果:川芎嗪对肺癌A549细胞增殖有明显抑制作用,且呈时间剂量依赖关系;川芎嗪能够使A549细胞G0/G1期、G2/M期细胞增多,与对照组比,差异显著(P<0.01);川芎嗪能够下调肺癌A549细胞Bcl-2的表达,对Bax无明显影响,使Bcl-2/Bax下降。结论:川芎嗪对肺癌A549细胞的增殖有抑制作用,其机制可能与川芎嗪能够改变A549细胞周期分布,下调肺癌A549细胞Bcl-2表达,改变Bcl-2/Bax比例,促进肿瘤细胞凋亡等有关。     

当归补血汤对内皮细胞增殖和粘附分子表达的影响

目的　了解当归补血汤对内皮细胞增殖及分泌粘附分子 (ICAM- 1)的影响 ,探讨当归补血汤对造血调控的机理。方法　建立人脐静脉内皮细胞体外培养模型 ,将 HU VEC与当归补血汤不同剂量 (0、4、40、40 0和40 0 0 μg/ m l)一起培养 ,以流式细胞分析术测定内皮细胞增殖周期 ,同时对粘附分子进行测定。结果　当归补血汤能够促进内皮细胞分泌粘附分子 ,对照组 CD5 4(ICAM- 1)仅有少量表达 ,而实验组 CD5 4(ICAM- 1)表达明显较对照组增多 (P<0 .0 5 )。细胞周期分析结果表明 ,实验组与对照组相比 ,有更多的细胞处于 S期 (P<0 .0 5 )。提示当归补血汤能够促进细胞由静止期进入增殖期。结论　当归补血汤能够促进内皮细胞的增殖以及细胞粘附分子的表达。     

树突状细胞、自然杀伤细胞和粘附分子在银屑病发病中的作用

目的　研究树突状细胞、自然杀伤细胞 (NK细胞 )和粘附分子在银屑病发病中的作用。方法　采用免疫组化方法检测治疗前后银屑病皮损区人类白细胞抗原 - DR(HL A- DR)、CD1a、CD16、CD5 7、肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)、细胞间粘附分子 - 1(ICAM- 1)的表达。结果　银屑病进行期和静止期皮损区 HL A- DR、CD1a、CD16、CD5 7、TNF- α及 ICAM- 1阳性表达无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;治疗后消退期皮损组织病理改善 ,各标记阳性表达明显减少甚至消失 ,经 Wilcoxon秩和检验有统计学差异 (P<0 .0 5 )。结论　树突状细胞、NK细胞和粘附分子在银屑病的发病中起着非常重要的作用     

TNF-α,G-CSF调节CD3AK细胞诱导的HL-60凋亡

目的 :探讨肿瘤坏死因子α(TNF α) ,粒细胞集落刺激因子 (G CSF)对CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡的影响。方法 :用细胞形态学观察 ,DNA琼脂糖电泳 ,原位末端标记法分别检测HL 6 0自然凋亡率、CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡率、TNF α和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率、G CSF和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率。结果 :HL 6 0细胞自然凋亡率 (4.6 0± 2 .17) % ;CD3AK细胞诱导HL 6 0细胞凋亡率 (2 7.38± 4 .91) % ;TNF α和CD3AK诱导的HL 6 0凋亡率 (33.0 9± 5 .2 2 ) % ;G CSF和CD3AK(7.35± 2 .2 6 ) % (F =96 .80 ,P <0 .0 1)。结论 :TNF α加强CD3AK细胞诱导的HL 6 0凋亡 ,G CSF抑制CD3AK诱导的HL 6 0凋亡     

厌氧加强三氧化二砷对A549细胞G1期的阻滞作用

[摘要]目的观察低浓度三氧化二砷(As2O3)在不同氧环境下对肺癌A549细胞增殖抑制、细胞周期阻滞、细胞凋亡的诱导作用。方法分别在常氧(21% O2)、低氧(5% O2)、厌氧(0% O2)环境利用0 μmol/L As2O3(空白对照组)、1 μmol/L As2O3、1 μmol/L VP-16体外诱导培养肺癌A549细胞24 h,通过甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法测细胞增殖抑制率,通过碘化丙啶(propidium iodide, PI)染色、流式细胞仪检测细胞周期,通过Annexin Ⅴ/PI双染色法检测细胞凋亡。结果1 μmol/L As2O3组A549细胞增殖抑制率及G0/G1期细胞比例随缺氧加重而增加;厌氧环境下该组细胞增殖抑制率及G0/G1期细胞比例均高于空白对照组(P<0.05),但其细胞凋亡率较空白对照组降低(P<0.05);与3种相应氧环境下VP-16组相比较,As2O3组A549细胞增殖抑制率、G0/G1期细胞比例、G2/M期细胞比例、细胞凋亡率均减少(P<0.05)。结论1 μmol/L As2O3对A549细胞无明显诱导凋亡作用,厌氧环境下该剂量As2O3可以通过G1期阻滞抑制A549细胞增殖。     

米非司酮对早孕蜕膜中TNF-α和NK细胞亚群的影响

①目的　观察应用米非司酮终止妊娠后子宫蜕膜中肿瘤坏死因子α(TNF α)和自然杀伤 (NK)细胞亚群 (CD+ 56CD-16,CD+ 56CD+ 16,CD-56CD+ 16)的变化 ,探讨米非司酮致流产的免疫作用机制。②方法　 4 0例早孕药物流产妇女 ,给予口服米非司酮 2d ,总量 15 0mg ,第 3天加服米索前列醇 6 0 0 μg .采用流式细胞技术对蜕膜组织中NK细胞亚群CD+ 56CD-16,CD+ 56CD+ 16,CD-56CD+ 16及TNF α的表达进行检测。并与 4 0例同孕龄的人工流产妇女 (对照组 )对照。③结果　药物流产组CD+ 56CD-16,CD+ 56CD+ 16,CD-56CD+ 16的百分比分别为 (2 9.2 2± 8.0 5 ) % ,(7.2 4± 4 .11) % ,(10 .0 2± 3.10 ) % ,对照组分别为 (15 .87± 5 .31) % ,(4.34± 1.98) % ,(5 .82± 2 .34) % ,二者比较差异均有显著性(t=4 .0 2 0～ 8.75 5 ,P <0 .0 1)。TNF α的表达程度药物流产组为 (34.4 5± 7.6 5 ) % ,对照组为 (2 1.6 4± 7.4 3) % ,二者比较差异有显著性 (t=7.5 97,P <0 .0 1)。④结论　米非司酮主要作用于早孕母胎界面 ,可使蜕膜中NK细胞和TNF α表达增加 ,从而导致局部免疫微环境的变化 ,诱导胎儿免疫排斥反应 ,这可能是米非司酮致流产的免疫机制之一。     

雌激素和异黄酮类药物对内皮细胞粘附分子CD54表达的影响

为探讨雌激素和异黄酮类药物对内皮细胞粘附分子CD54表达的影响,作者采用10ng/ml肿瘤坏死因子(TNFα)处理人脐静脉内皮细胞6小时,并加用不同浓度的异黄酮(WZ1,WZ2)和雌激素(WZ3,WZ4)进行干预48小时,而后用流式细胞仪定量测定细胞表面粘附分子CD54的表达,并进行统计学分析.结果:①10ng/ml的TNFα可使内皮细胞表面粘附分子CD54的表达升高4倍,与对照组相比具有统计学差异(P＜0.05);②10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L异黄酮和异卟黄酮对由TNFα诱导的内皮细胞的CD54表达有轻度促进作用;③哌嗪雌酚酮和雌二醇预处理内皮细胞48小时后再加TNFα激活,内皮细胞表面CD54平均荧光强度与单纯TNFα组相比下降明显(P＜0.05),各浓度组之间不具统计学差异(P＞0.05).以上结果提示:异黄酮和异卟黄酮对内皮细胞粘附分子CD54的表达无抑制作用;哌嗪雌酚酮和雌二醇可在一定程度上抑制CD54的表达,从而为抗粘附疗法提供了一条新思路.     

大蒜素协同紫杉醇对肺癌细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨大蒜素对人肺癌A549细胞周期的影响及其与周期特异性抗癌药物紫杉醇联合使用的抗肿瘤作用。方法MTT法检测大蒜素对肺癌细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期改变,Annexin V-FITC标记法定量检测细胞凋亡,观察大蒜素与紫杉醇联合使用后药物对细胞毒活性的改变。结果大蒜素可明显抑制A549细胞生长,72h药物半数抑制浓度(IC50)为18.55μg.ml-1;9.30μg.ml-1大蒜素作用A549细胞24 h后,与对照组比较,G0/G1期细胞的百分率明显减少,而G2/M期明显增加(P<0.05),大蒜素与紫杉醇联合使用后,紫杉醇72 hIC50值由单独应用的9.21μg.ml-1下降至1.07μg.ml-1;细胞凋亡率由53.2%增至97.0%。结论大蒜素可将肺癌A549细胞阻滞于G2/M期,大蒜素与紫杉醇联合使用可能具有协同抗肿瘤作用。     

低氧对卵巢癌A2780细胞周期阻滞的影响

目的　探讨低氧及其诱导产生的低氧诱导因子 1α(HIF -1α) 对卵巢癌细胞周期阻滞的影响。方法　低氧培养复制人卵巢癌A2780细胞低氧模型。“诱骗法” (decoy) 阻断 HIF 1α的功能。A2780 细胞分成 8 组, A1: 常氧组, A2: 常氧+decoy, B1: 5% O2 低氧组, B2: 5% O2 低氧+ decoy, C1: 3% O2 低氧, C2: 3% O2 低氧+ decoy,D1: 1% O2低氧组, D2: 1% O2低氧+decoy。免疫细胞化学及Western blot、RT- PCR和流式细胞术分别检测各组细胞HIF- 1α蛋白, mRNA表达水平和分析细胞周期。结果　免疫细胞化学染色发现 HIF- 1α蛋白在低氧培养 A2780 细胞核中表达呈阳性; Western blot 检测发现低氧明显增加 HIF 1α蛋白的表达水平且随低氧程度加重而增加 (P<0 .05), decoy对其蛋白表达无明显影响; RT PCR检测发现低氧明显增加HIF 1αmRNA的表达水平, 但随低氧程度加重, 其mRNA表达水平无明显变化 (P>0. 05), decoy对其 mRNA表达无明显影响; 流式细胞术检测发现低氧时卵巢癌A2780细胞G0/G1期比率显著增加 (P<0 .05), G0/G1期比率随着低氧程度加重而增加 (P<0 .05), decoy能明显降低 G0/G1期细胞比率 (P<0 .05)。结论　低氧能明显诱导卵巢癌 A2780 细胞 G0/G1 期阻滞和 HIF -1α的表达,HIF -1α在