缝隙连接对心肌肥厚兔室性心律失常的影响

目的研究兔慢性压力超负荷模型中缝隙连接(G J)对室性心律失常的影响。方法30只兔随机分为假手术组(Sham组)、心肌肥厚组(LVH组)和抗心律失常肽组(AAP10组)。LVH组和AAP10组通过缩窄腹主动脉制备兔左室压力超负荷心肌肥厚模型,Sham组仅游离腹主动脉未进行缩窄。动物饲养3个月后制备兔左室楔形心肌块的灌注模型,Sham组和LVH组灌流台氏液,AAP10组灌流含AAP10的台氏液,记录不同起搏周长下容积心电图、跨室壁离散度(TDR)及刺激反应间期(SR I),并观察早期后除极(EAD)及室性心律失常的发生率。结果在不同频率起搏下,LVH组SR I和TDR与Sham组比较均明显增加(P<0.05)。而AAP10组的SR I和TDR与LVH组比较明显减小(P<0.05)。Sham组无1例诱发EAD和室性心律失常;在5 000 m s起搏时LVH组和AAP10组EAD的发生率分别为10/10、3/10,室性心律失常发生率分别为4/10,1/10,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论G J激动剂AAP10减轻了心肌肥厚时SR I的延长和TDR增加,相应的减少了EAD和室性心律失常的发生率。     

短QT间期综合征发生室性心律失常机制探讨

目的:探讨吡那地尔(pinacidil)建立的短QT间期综合征模型致室性心律失常的机制,并观察缝隙连接激动剂抗心律失常肽(AAP10)对该模型电生理参数的影响.方法:利用pinacidil灌注家兔楔形心肌块建立短QT间期综合征模型. 将20只新西兰长耳白兔随机分成pinacidil组和AAP10组,每组10只.pinacidil组灌流10 μmol/L的pinacidil,AAP10组灌流AAP10 500 nmol/l和pinacidil 10 μmol/L的混合液,同步记录灌流前后内外膜动作电位和容积心电图,观察灌流前后QT间期,跨室壁离散度(TDR),程序性刺激观察心肌组织不应期和室性心律失常的诱发情况.结果:灌流pinacidil后,QT间期从(291±19)ms缩到(232±19) ms (P<0.05),TDR从(44±12)ms减少到(22±7)ms(P<0.05),而不应期从(164±8)ms减少到(112±14)ms(P<0.05),室性心律失常发生率从0/10增加至8/10(P<0.05).AAP10 组和pinacidil组的TDR、QT间期、不应期及室性心律失常的诱发率无显著差别.结论:TDR减小和不应期的缩短可能是pinacidil建立的短QT间期模型致室性心律失常的基础,AAP10对pinacidil诱导的短QT间期综合征模型电不稳定性无明显影响.     

抗心律失常肽在兔肥厚心肌心律失常中的作用

目的:研究缝隙连接开放剂抗心律失常肽(AAP10)抗肥厚心肌室性心律失常的作用并探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)与心律失常的关系.方法:30只日本大耳白兔随机分为假手术组(Sham组)、左室肥厚组(LVH组)、AAP10组.LVH组和AAP10组行腹主动脉缩窄术,Sham组开腹但不行腹主动脉缩窄术.术后喂养8周.制备左室楔形心肌块灌注模型.Sham组和LVH组灌注正常台式液,AAP10组灌注含100 nmol/L的AAP10台式液.利用浮置玻璃微电极法同步记录楔型心肌块跨壁心电图和内外膜心肌细胞跨膜动作电位,程序电刺激起搏,记录早期后除极及室性心律失常的发生率.采取Western blot检测3组Cx43表达;采取免疫荧光方法显示3组Cx43的分布.结果:Sham组、LVH组、AAP10组室性心律失常的发生率分别为0、40%、10%.与Sham组相比,LVH组Cx43表达下降(50.7±6.1)%(P＜0.05),AAP10组与LVH组相比,Cx43表达上升(20.9±4.7)%,P＜0.05.免疫荧光显示肥厚心肌Cx43分布紊乱,由正常的端端分布成为细胞表面随机分布,加入AAP10后可改善其分布.结论:肥厚心肌有较高的心律失常发生率,肥厚心肌细胞Cx43表达下降并且排列紊乱,AAP10可提高Cx43的表达及改善其分布,降低室性心律失常的发生率.     

咪达普利对家兔陈旧性心肌梗死远离梗死区心肌在体和离体跨室壁复极离散度的影响

目的:从在体和离体两个方面探讨咪达普利对陈旧性心肌梗死(OMI)远离梗死区心肌跨室壁复极离散度(TDR)的影响。方法:24只兔随机分为3组,两组开胸结扎左回旋支制成OMI模型,术后1周将1组给予咪达普利0.625 mg/(kg·d)口服(咪达普利组),另1组给予安慰剂口服(OMI组),第3组开胸但不结扎冠状动脉,也在术后1周给予安慰剂口服(假手术组)。3个月后分别记录3组左心室游离壁远离梗死区心外膜下、中层和心内膜下3层心肌的在体单相动作电位时程(MAPD)和离体单细胞的动作电位时程(APD),并计算TDR。结果:在体研究表明,当R-R间期为300 ms时,3层心肌的90％复极的单相动作电位时程(MAPD90)无明显差异,刺激迷走神经使R-R间期延长为800 ms时,3组的中层心肌MAPD90均较心外膜下和心内膜下心肌明显延长,TDR增加。在咪达普利组,TDR为(40.80±3.74)ms,明显小于OMI组(58.00±4.30)ms(P<0.05),与假手术组(34.06±3.31)ms相比差异无显著性意义。远离梗死区的3层心室肌酶解为单细胞后进行离体实验,在1Hz刺激下,3组中层心肌单细胞(M细胞)的APD90均较心外膜下心肌细胞和心内膜下心肌细胞明显延长,咪达普利组的跨室壁单细胞APD离散(TD-APD)为(228.45±13.94)ms,明显小于OMI组(288.32±19.66)ms(P<0.05),与假手术组(210.32±17.43)ms相比差     

抗心律失常肽对低钾低镁条件下伊布利特致尖端扭转性室性心动过速的影响

目的探讨缝隙连接开放剂抗心律失常肽(AAP10)对低钾、低镁条件下伊布利特致尖端扭转性室性心动过速(TdP)及心肌电不稳定性的影响。方法 54只日本长耳大白兔随机制备成左室楔形心肌块模型,随机分为对照组、低钾低镁组、伊布利特组、低钾低镁伊布利特组和AAP10干预组。对照组灌流正常台氏液,低钾低镁组灌流低钾低镁台氏液,伊布利特组灌流浓度2mg/l的伊布利特,低钾低镁伊布利特组灌流溶有同浓度伊布利特的低钾低镁台氏液,AAP10组给予AAP10干预的条件后灌流溶有伊布利特的低钾低镁台氏液。比较各组早期后除极(EAD)、R on T室性早搏和TdP的发生情况,以及QT间期、T波顶点到终点距离(Tp-e)和Tp-e/QT的变化。结果与对照组比较,低钾低镁伊布利特组QT间期、Tp-e和Tp-e/QT延长,EAD、R on T室性早搏、TdP的发生率明显增多。AAP10干预组,TdP、QT间期、Tp-e和Tp-e/QT比低钾、低镁伊布利特组显著减少。结论 AAP10可能通过开放缝隙连接减少跨壁复极离散度,从而起到预防伊布利特在低钾、低镁条件下的致TdP的作用。     

兔心肌心室间复极离散的电生理学机制研究

目的观察生理和缺血状态下兔心室间复极离散,探讨临床缺血心肌发生室性心律失常的电生理机制。方法酶解法急性分离兔心室肌细胞,采用细胞膜片钳技术,分别观察对照组(正常心室内膜动作电位时程)和缺血组(缺血心室内膜动作电位时程)在不同刺激频率下[即基础循环周长(basic cycle length,BCL)=2000、1000、500及250 ms]左右心室肌心内膜细胞的动作电位时程变化。结果对照组生理心肌的室间离散分别为(47.70±7.89)ms,(45.50±7.00)ms,(40.30±7.33)ms,(37.90±6.45)ms;缺血后心室间离散则分别为(91.90±7.67)ms,(91.40±7.62)ms,(88.60±7.78)ms,(89.20±6.91)ms。结论生理状态的心肌左右心室间存在复极离散,缺血状态下心室间复极离散增大。这种心室间的复极异质性可能是缺血心肌发生室性心律失常的电生理机制之一。     

氯化铯诱发在体心脏触发性心律失常的实验研究

心内膜单相动作电位研究表明,单相动作电位的复极进程能够正确反映心肌细胞动作电位复极时程。狗静脉注射氯化铯后早期后除极电位(EAD)的发生率为100％,单相动作电位90％复极时程明显延长(224.4±50.6ms VS 368.4±34ms),与QT间期延长相一致。氯化铯诱发的室性心律失常发生于EAD顶峰,触发心律联律间期与EAD联律间期密切相关。硫酸镁使EAD和室性心律失常同时消失。提示该心律失常为EAD触发活性所致。     

钙调蛋白抑制剂对陈旧性心肌梗死兔室性心律失常的影响

探讨钙调蛋白抑制剂W 7对陈旧性心肌梗死(HMI)兔室性心律失常的影响,将 30只雄性日本大耳白兔随机分假手术组(Sham)、HMI组和W 7干预组。Sham组开胸但不结扎冠状动脉;HMI组和W 7干预组开胸并结扎冠状动脉左室支制备心肌梗死模型,喂养 3个月后进行研究。W 7干预组在程序刺激前以 50μmol/kg的剂量溶于20ml生理盐水中,在 10min内静脉推注,HMI组和Sham组静脉推注生理盐水。将双极电极刺入左室梗死周边部位及Sham组的相应部位,程序刺激诱发心律失常,记录室性心动过速的发生率,测定心室颤动阈值。结束实验后取出心脏并称量左室重量。结果:Sham组、HMI组和W 7组诱发室性心动过速的发生率分别为 0 /10、8 /10和 3 /10。Sham组与HMI组差异有显著性(P<0. 01);W 7组与HMI组相比较室性心律失常发生率降低,差异有统计学意义(P<0. 05)。三组的心室颤动阈值分别为 13. 30±0. 95V、8. 90±1. 37V和 11. 80±1. 14V,三组之间差异均有显著性(P<0. 01)。结论:钙调蛋白抑制剂能提高HMI兔的心室颤动阈值,降低室性心律失常的发生率。     

兔在体左心室肥厚心肌跨室壁复极不均一性的实验研究

目的　探讨兔在体左心室肥厚心肌跨室壁复极不均一性的变化。方法　以腹主动脉缩窄术制备家兔高血压左心室肥厚模型 (腹主动脉缩窄组 ) ,并设假手术组 (仅游离腹主动脉未缩窄 )作为对照。采用自制复合式电极在兔左心室游离壁同步记录在体心内膜、心肌中层、心外膜心肌单相动作电位 (MAP) ,比较两组间跨室壁复极不均一性的差异。结果　腹主动脉缩窄组平均动脉压、左心室游离壁厚度、全心重量及其与体重比率均大于假手术组。缩窄组三层心肌单相动作电位复极至 10 0 %的时程 (MAPD1 0 0 ) (内膜 191± 19ms,中层 2 44± 2 4m s,外膜 196± 15 ms)均比假手术组 (内膜 170± 18ms,中层 172± 15 ms,外膜 168± 16m s)延长 ,以中层心肌 MAPD1 0 0 的延长最为明显 ;缩窄组跨室壁复极离散度 (TDR) (65± 10 ms)较对照组 (4± 3 m s)明显增大 (P<0 .0 1)。结论　兔在体左心室肥厚心肌跨室壁复极不均一性明显增大 ,可能是肥厚心肌心律失常发生增多的原因之一     

心室肌复极快慢与尖端扭转型室性心动过速发生率的性别差异

目的 :观察雌雄兔离体心室肌复极时程的差异 ,探讨其与尖端扭转型室性心动过速 (TdP)性别差异的关系。方法 :以Langendorff法依次用台氏液、含索他洛尔的台氏液和含索他洛尔的低钾、镁台氏液灌流离体兔(雌雄各 8只 )心 ,记录雌、雄兔心用索他洛尔前后心内膜单相动作电位 ,比较雌雄兔在低钾、镁台氏液灌流后TdP发生率的差异。结果 :用索他洛尔前 ,起搏周期 (CL)从 4 0 0ms延长至 180 0ms,雄兔内膜单相动作电位时程复极90 %的时限 (MAPD90 )由 (181.0± 6 .5 )ms延长到 (2 14 .0± 7.5 )ms ,增幅 (18.2± 8.3) % ;雌兔内膜MAPD90 由(186 .0± 6 .3)ms延长至 (2 76 .0± 8.2 )ms。增幅 (48.4± 9.4 ) %。用索他洛尔后 ,CL从 4 0 0ms增至 180 0ms,雄兔内膜MAPD90 由 (2 2 4 .0± 6 .9)ms延长到 (2 95 .0± 7.6 )ms ,增幅 (31.7± 8.7) % ;雌兔内膜MAPD90 由 (2 34.0±6 .3)ms延长至 (376 .0± 9.7)ms,增幅 (6 0 .7± 8.5 ) %。用索他洛尔前后雌兔内膜MAPD90 均明显长于雄兔 (P<0 .0 1)。 7只雌兔发生TdP ,发生率 87.5 % ;1只雄兔发生TdP ,发生率 12 .5 %。结论 :复极快慢的不同可能是TdP发生率性别差异的主要原因     

钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂对心肌肥厚兔室性心律失常的影响

目的观察钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN-93对心肌肥厚兔室性心律失常的影响。方法雌性新西兰大白兔随机分为4组：假手术组（Sham组）、心肌肥厚组（LVH组）、心肌肥厚＋KN-93组（KN-93组）、心肌肥厚＋KN-92组（KN-92组）,每组10只。LVH、KN-93及KN-92组通过缩窄腹主动脉制备兔心肌肥厚模型,Sham组仅游离腹主动脉未进行缩窄。8周后制备兔左室楔形心肌块的灌注模型,同步记录心内、外膜动作电位及跨壁心电图,观察低钾（2mmol／L）、低镁（0．25mmol／L）台氏液灌流及慢频率刺激条件下各组早期后除极（EAD）和尖端扭转型室性心动过速（Tap）的发生率,并记录在不同起搏周期下QT间期、动作电位时程（APD）及跨室壁复极离散度（TDa）的变化。结果在低钾、低镁台氏液灌流及2000～4000hi8慢频率刺激下,Sham、LVH、KN-92组（0．5μmol／L）及KN-93组（0．5μmol/L）EAD的发生率分别为0／10、10／10、9／10和5／10,Tdp的发生率分别为0／10、5／10、4／10和1／10;当KN-92组及KN-93组中药物浓度增至1μmol／L时,EAD的发生率分别为9／10和3／10,Tdp的发生率分别为4／10和1／10。而且KN-93组、KN-92组对QT间期、APD及TDR无明显影响（P〉0．05）。结论钙调蛋白激酶Ⅱ特异性抑制剂KN-93能够有效抑制心肌肥厚兔室性心律失常的发生,其主要作用机制是通过减少EAD的发生来实现。     

胺碘酮与抗心律失常肽合用对陈旧性心肌梗死兔心缝隙连接蛋白43和室性心律失常诱发率的影响

目的 研究胺碘酮与抗心律失常肽合用抗心律失常的效果.方法 日本长耳兔200只,随机分为假手术组20只(A组)和结扎冠状动脉的心肌梗死(心梗)模型组180只.术后8 周末,再将存活的124只心梗模型兔随机分为对照组31只(B组)、胺碘酮组31只(C组)、抗心律失常肽(AAP10)组31只(D组)、胺碘酮+AAP10组31只(E组).第9周开始给A、B及D组兔口饲生理盐水2 ml、1次/d,给C、E组兔口饲含胺碘酮的生理盐水2 ml、1次/d,胺碘酮用量100 mg·kg-1·d-1.12周末,A、B、C、D、E组各存活20、24、26、25、27只.查超声心动图,麻醉后取左室心肌块动脉插管灌流,A、B及C组灌流台氏液,D、E组灌流加入500 nmol/L AAP10的台氏液,程序刺激同时记录容积心电图及QT、QRS、ERP、Tp-e及室性心律失常诱发率,计算Tp-e/QT.灌流完成后取心肌组织,利用Western blot和免疫荧光技术检测缝隙连接蛋白(Cx)43.组间计数资料统计学分析采用bonferroni方法校正的卡方检验或精确检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.组间计量资料统计分析采用完全随机设计资料的方差分析;另B、C、D、E组间计量资料采用析因设计的方差分析,以评价两种药物之间的交互作用,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 A、B、C、D、E组心律失常诱发率分别为0、62.5%、26.9%、40.0%、22.2%,E组较B组诱发率减小.B组较A组Tp-e/QT增大,E组较B组Tp-e/QT减小.B组较A组Cx43表达明显减少.C、E组较B组Cx43表达增加,差异有统计学意义.结论 陈旧性心梗兔离体心肌块模型可用于室性心律失常的研究.胺碘酮慢性应用能上调心梗兔Cx43,与AAP10合用上调心梗兔Cx43作用加强,并进一步减小Tp-e/QT,抗心律失常作用进一步加强.     

抗心律失常肽与溶血磷脂酸对兔室性心律失常影响的研究

目的 探讨抗心律失常肽(antiarrhythmic petide 10,AAP10)和溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对兔室性心律失常的影响及其作用机制.方法 24只新西兰大白兔随机分为正常对照组、LPA组和AAP10干预组,建立兔左心室楔形心肌块模型,同步记录楔形心肌块内、外膜心肌细胞动作电位和跨室壁心电图,程序电刺激起搏,记录室性心律失常发生率.通过免疫印迹技术(Western blot)检测三组心肌去磷酸化缝隙连接蛋白43(non-phosphorylated connexin 43,NPCx43)的变化,采用免疫荧光技术观察NP-Cx43的分布.结果 LPA组QT间期、动作电位复极90%时程(90%of duration of action potential,APD90)、跨室壁复极离散度(transmural repolarization dispersion,TDR)与对照组相比均明显增加(P＜0.01),同时多形性室性心动过速的诱发率也明显增加(62.5%比0,P＜0.01),并伴随NP-Cx43含量明显增加(P＜0.01);AAP10干预组与LPA组相比,QT间期、内膜APD90、TDR均明显缩小(P＜0.01),多形性室性心动过速的诱发率也明显降低(P＜0.05),NP-Cx43含量也明显下降(P＜0.01).三组之间总Cx43含量差异无统计学意义.结论LPA有明显致心律失常作用,其机制可能与引起NP-Gx43含量增加、抑制缝隙连接通道功能有关,而AAP10可以拮抗LPA引起的NP-Cx43含量增加,同时降低LPA所致室性心律失常的发生率,具有抗心律失常的保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effect and potential mechanism of lysophosphatidic acid (LPA) and antiarrhythmic peptide (AAP10) on rabbit ventricular arrhythmia. Methods Twenty-four rabbits were randomly divided into three groups (n =8 each): control group, LPA group and AAP10 + LPA group. Using arterially perfused rabbit ventricular wedge preparations, transmural ECG and action potentials from both endocardium and epicardium were simultaneously recorded in the whole process of all experiments with two separate floating microeletrodes. The incidence of ventricular arrhythmia post S1S2 stimulation was recorded. Protein levels of nonphosphorylated Cx43 and total Cx43 were evaluated by Western blot. The distribution of nonphosphorylated Cx43 was observed by confocal immunofluorescence microscopy. Results Compared with the control group, the QT interval, endocardial action potential duration, transmural repolarization dispersion (TDR) and incidence of ventricular arrhythmia were significantly increased and nonphosphorylated Cx43 expression was significantly upregulated in the LPA group. Compared with the LPA group, cotreatment with AAP10 can reduce the QT interval, endocardial action potential duration, TDR and incidence of ventricular arrhythmia (25.0% vs 62. 5%, P ＜ 0. 01 ) and downregulate nonphosphorylated Cx43. Conclusions LPA could promote the arrhythmia possibly by upregulating nonphosphorylated Cx43 and subsequent gap junction transmission inhibition. Gap junction enhancer AAP10 could attenuate the proarrhythmic effect of LPA probably by downregulating myocardial nonphosphorylated Cx43 expression.     

Recovery time dispersion measured by body surface mapping: noninvasive method of assessing vulnerability to ventricular tachyarrhythmias

To assess the significance of recovery time (RT) dispersion measured by body surface mapping, we investigated body surface RT isochrone maps of 40 patients with anterior old myocardial infarction (OMI), 40 patients with dilated cardiomyopathy (DCM), and 40 controls. Among the OMI and DCM groups, 20 patients per group had sustained ventricular tachycardia (VT). The dispersion of corrected recovery time (RTc) by Bazett's formula significantly increased in OMI patients (169 +/- 38 ms) and DCM patients (163 +/- 22 ms) compared with controls (147 +/- 10 ms) (P <.01). RTc dispersion was greater in OMI patients with sustained VT than in those without sustained VT [184 +/- 43 ms vs. 155 +/- 24 ms (P <.05)], as well as in DCM patients with sustained VT compared with those without sustained VT [170 +/- 25 ms vs. 156 +/- 17 ms (P <.05)]. The results suggest that RTc dispersion determined by body surface mapping can be useful for assessing vulnerability to sustained VT.     

早期口服卡维地洛对兔陈旧性心肌梗死边缘带不应期和钠电流的影响

研究卡维地洛(Car)对陈旧性心肌梗死(OMI)心室梗死边缘带有效不应期(ERP)及钠电流(INa)的影响。家兔按体重随机分为3组,OMI组:开胸结扎冠状动脉左回旋支;Car组:手术同OMI组,并于手术前开始服用Car0.33mg·kg1·d1;假手术(Sham)组:开胸,但不结扎冠状动脉,各组动物均喂养3月。整体心脏Langendorff灌流下记录边缘带的ERP。应用双酶法分离左心室梗死边缘带(IBZ)的心肌细胞。利用膜片钳记录在电压钳模式的INa。结果:OMI组ERP较Sham组显著延长(216.9±4.6msvs160.0±3.8ms,P<0.01),Car组ERP为179.2±9.7ms,较OMI组明显缩短。OMI组IBZ存活心肌细胞的INa的密度较Sham组显著性降低,动力学研究显示,INa半失活电压曲线V1/2移向更负,其恢复时间常数值延长,从而导致INa恢复减慢;而Car组心肌细胞的INa的密度较OMI组明显增大,P<0.05,INa稳态失活曲线和恢复曲线与Sham组无显著差异。结论:卡维地洛可以抑制OMI后心室肌ERP延长,并使INa密度增大。此可能是该药减少OMI后心律失常的发生,降低病死率的机制之一。     

Epicardial but not endocardial premature stimulation initiates ventricular tachyarrhythmia in canine in vitro model of long QT syndrome

OBJECTIVES: To explore the mechanism, we tested the hypothesis that premature epicardial stimulation transiently increased the dispersion of repolarization leading to VT. BACKGROUND: Premature stimulation initiated ventricular tachycardia (VT) when applied to the epicardium but not to the endocardium in a canine model of long QT syndrome (LOTS). METHODS: We optically mapped action potentials (APs) on the cut-exposed transmural surfaces of isolated wedges of canine ventricular walls perfused with anemone toxin II (ATX-II), which produced type 3 LQTS with an asymmetrical transmural profile of repolarization that was earliest in the epicardium and latest in deep subendocardium. RESULTS: Earliest excitable epicardial stimulation triggered VT in 5 of 18 wedges receiving > or =5 nmol/L ATX-II by direct activation of epicardium, which delayed repolarization in the still refractory midmyocardium and further enhanced the dispersion of repolarization. These VTs were initiated 197 +/- 72 ms (n = 10) after the premature stimulation, from focal regions of earliest repolarization downstream to the steepest local spatial gradients of repolarization, and maintained by new focal activation and reentry. Transmural differences in the cycle lengths of activations altered conduction pathways and resulted in torsades de pointes-like polymorphic VT. In contrast, VTs were not initiated by endocardial stimulation at the same premature intervals or when ATX-II was < or =2.5 nmol/L. Failed VT initiation was associated with significantly lower maximum local gradient of repolarization. CONCLUSIONS: Heterogeneic repolarization in LQTS provides a transmural asymmetrical substrate for the earliest excitable epicardial, but not endocardial, stimulation to further delay midmyocardial repolarization and produce a steep spatial gradient of repolarization potential initiating torsades de pointes-like polymorphic VT.