应用两种麦管系统对小鼠囊胚的玻璃化冷冻

目的比较两种麦管系统对小鼠囊胚的玻璃化冷冻比较,以期建立一种有效的囊胚冷冻方法。方法分别应用开放麦管系统和传统麦管系统对小鼠扩张囊胚进行玻璃化冷冻,比较冷冻复苏以后囊胚的存活率和孵出率。结果应用开放麦管系统冷冻的小鼠囊胚复苏后的存活率(82.3%)显著高于应用传统麦管系统者(68.6%, P<0.01)。前者冷冻的小鼠囊胚复苏后的囊胚孵出率(70.3%),也明显高于应用传统麦管系统者(57.1%, P<0.05)。结论应用开放性麦管系统进行小鼠囊胚的玻璃化冷冻是一种行之有效的冷冻方法。     

激光人工皱缩在囊胚玻璃化冷冻中的应用

目的:探讨激光人工皱缩对囊胚冻融后移植效果的影响。方法:回顾分析新疆佳音医院生殖医学中心270例囊胚培养成功并进行玻璃化冷冻后移植患者的临床资料,根据是否进行激光人工皱缩将其分为对照组与人工皱缩组,比较两组囊胚复苏后的复苏率、临床妊娠率、着床率和流产率。结果:两组患者的流产率差异不显著(P>0.05),复苏率、临床妊娠率和着床率差异显著(P<0.05)。结论:采用激光人工皱缩技术能够提高囊胚的复苏率以及移植后着床率和妊娠率。     

不同浓度冷冻保护剂乙二醇在人扩张囊胚玻璃化冷冻中的应用

目的研究不同浓度冷冻保护剂乙二醇(ethlene glycol,EG)在人扩张囊胚玻璃化冷冻中的应用。方法不同浓度EG 15%,30%,40%,联合15%二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO),0.5 mol/L蔗糖(sucrose),采用两步法,利用改制半麦管为冷冻载体,玻璃化冷冻人扩张囊胚。比较解冻后囊胚存活率,扩张率及孵出率;并比较微吸管吹吸、辅助孵化针刺破胞膜辅助脱水及未辅助脱水对冷冻扩张囊胚的影响。结果由1原核(pronucleus, PN)发育而来的扩张囊胚玻璃化冷冻解冻后囊胚存活率15%EG组明显高于30%及40%EG组(P<0.05)。由2PN 发育成的扩张囊胚玻璃化冷冻解冻后囊胚孵出率15%EG组明显高于30%及40%EG组(P<0.05)。在冷冻过程中给予人工辅助脱水组解冻后囊胚孵出率明显高于未辅助脱水组(P<0.05)。微吸管吹吸组与辅助孵化针刺破胞膜辅助脱水组囊胚孵出率差异无显著性(P>0.05)。结论15%EG为人扩张囊胚玻璃化冷冻中有效和合适浓度。玻璃化冷冻中给予人工辅助脱水,能提高解冻后囊胚的发育潜能。     

玻璃化冷冻囊胚复苏移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的妊娠结局比较

目的比较玻璃化冷冻囊胚复苏后移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的临床妊娠结局。方法回顾性分析2013年1月至2014年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心行玻璃化冷冻复苏后移植囊胚的不孕症患者134例(134个周期)的妊娠情况,其中卵裂期胚胎培养至囊胚冷冻复苏后移植者79个周期(A组),卵裂期胚胎冷冻复苏后继续培养至囊胚再移植者55个周期(B组)。比较2组患者临床妊娠率、着床率及早期流产率。结果 A组79个周期,复苏囊胚数151个,存活囊胚数133个,复苏率88.08%(133/151);获得可移植囊胚72个周期,妊娠周期46个,妊娠率为63.89%(46/72),着床率51.56%(66/128),早期流产率为15.21%(7/46)。B组55个周期227个胚胎,复苏存活170个胚胎,复苏率74.89%(170/227);其中45个周期共形成可移植囊胚93个,囊胚形成率为54.70%(93/170);获得妊娠周期23个,妊娠率为51.11%(23/45),着床率为36.56%(34/93),早期流产率13.04%(3/23)。A组囊胚复苏率高于B组卵裂期胚胎复苏率(P<0.05),且A组着床率显著高于B组(P<0.05),但2组临床妊娠率、流产率、异位妊娠率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻囊胚复苏移植能获得较高的着床率和妊娠率,囊胚可能是玻璃化冷冻胚胎的较好阶段。     

不同冷冻载体对小鼠成熟卵母细胞玻璃化冷冻的影响

目的:探讨玻璃化冷冻小鼠成熟减数第二次分裂中期(MⅡ期)卵母细胞的最佳冷冻载体及冷冻方法。方法:用乙二醇和蔗糖为玻璃化冷冻保护剂,将小鼠成熟MⅡ期卵母细胞分为冻融、暴露和对照组。冻融组分别采用普通麦管、封闭式拉细麦管(CPS)和开放式拉细麦管(OPS)作载体,采用玻璃化快速冷冻和快速复温的方法冻存小鼠成熟卵母细胞;暴露组卵母细胞仅暴露在冷冻和复苏液中,不进行冷冻;对照组卵母细胞不接触冷冻和复苏液。观察各组处理后卵子回收、受精、卵裂等情况。结果:冻融组普通麦管、CPS和OPS处理的卵母细胞回收率分别为92.0%、92.3%和72.3%,OPS处理卵母细胞的回收率显著低于普通麦管和CPS处理的卵母细胞(P<0.001);普通麦管、CPS和OPS处理的卵母细胞复苏存活率分别为43.5%、72.2%和76.5%,CPS和OPS处理卵母细胞的复苏存活率显著高于普通麦管组处理的卵母细胞(P<0.001)。冻融、暴露和对照组的卵裂率分别为38.6%、69.2%和73.5%,冻融组显著低于暴露和对照组(P<0.001)。结论:CPS法在玻璃化冷冻保存成熟的卵母细胞方面有价值。     

玻璃化冷冻囊胚复苏移植与新鲜囊胚移植的临床结局比较

目的:比较新鲜囊胚移植周期与玻璃化冷冻囊胚复苏移植周期的临床结局?方法:回顾性分析2009~2011年本院生殖中心完成的874例囊胚移植周期,其中新鲜囊胚移植周期(A组)280例,冻融囊胚复苏移植周期(B组)594例,比较两组临床妊娠率?种植率?妊娠结局及新生儿情况等各项指标?结果:①A组平均移植胚胎数显著高于B组,分别为(1.88 ± 0.47)和(1.70 ± 0.53)个;临床妊娠率及种植率A组(43.93%?24.96%)显著低于B组(55.39%?40.51%,P < 0.05);②A组和B组的流产率?早产率?单胎率?多胎率分别为13.82%?32.46%?70.16%?29.84%和16.72%?33.84%?71.86%?28.14%,孕龄分别为(265.49 ± 14.45)d?(264.43 ± 16.08)d均无统计学差异(P > 0.05)?两组中仅B组见1例异位妊娠,而A组无异位妊娠;③A组和B组巨大儿?生长受限及新生儿出生缺陷发生率分别为6.00%?19.66%?1.70%和9.40%?17.82%?0.90%,两组间无统计学差异?结论:玻璃化冷冻囊胚复苏移植显著提高了囊胚移植的种植率及妊娠率,且并没有增加新生儿出生缺陷?流产率?早产率,也没有增加巨大儿和新生儿生长受限的出生比率?因此,玻璃化冻融囊胚移植技术是安全有效的,值得在临床上应用推广?     

卵裂期胚胎、囊胚的玻璃化冷冻解冻的妊娠结果分析

目的 比较卵裂期胚胎、囊胚行玻璃化冷冻解冻后的妊娠结果.方法 回顾性分析2010年6月～2010年9月在该院生殖中心行玻璃化冷冻解冻患者共185周期的妊娠情况;其中卵裂期胚胎冷冻解冻后移植者127周期,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养后移植者42周期,囊胚冻融后移植16周期.结果 玻璃化冷冻解冻患者共185周期,移植176周期,获得妊娠75周期,妊娠率42.61%;卵裂期胚胎冻融后移植者,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养者,囊胚冻融移植者复苏率分别为96.76%(299/309)、95.83%(161/168)、94.12%(32/34),着床率分别为22.37%(66/295)、23.44%(15/64)、50%(14/28).妊娠率分别为40.94%(52/127)、33.33%(11/33)、75%(12/16).卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养的患者共42人,其中有9人未形成可移植囊胚而取消移植.其他两组解冻后没有取消移植的例数.结论 3组的玻璃化冻融复苏率无统计学差异.囊胚冷冻解冻能获得较高的着床率和妊娠率.     

人类卵母细胞玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,玻璃化冷冻可避免冻融过程中细胞内冰晶的形成,降低细胞损伤,在人类配子、胚胎的冷冻保存中取得了不少进展.近十几年来,玻璃化冷冻技术已成功应用于成熟卵母细胞、未成熟卵母细胞等方面的冷冻保存并取得成功.该技术操作简单、迅速快捷,正逐渐成为人类辅助生殖技术中重要的应用技术之一.本文综述了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞方面的研究进展.     

囊胚玻璃化冷冻预平衡时间对辅助生殖妊娠结局的影响

目的 探讨囊胚激光皱缩后缩短玻璃化冷冻预平衡时间对临床妊娠及新生儿结局的影响。方法 回顾性分析2018年1月至2021年12月于海口玛丽医院进行囊胚复苏移植患者的临床资料,从中筛选501例患者518个移植周期。根据实验室囊胚玻璃化冷冻技术标准操作程序修订前后的预平衡时间将其分为A组（9~10min）和B组（7~8min）,比较两组间的妊娠结局和新生儿结局。结果 两组患者的年龄、移植胚胎数、卵泡刺激素、体质量指数、不孕年限、原发不孕比例、移植日内膜厚度和内膜方案比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;两组的囊胚存活率、着床率、临床妊娠率、活产率、早期流产率、多胎妊娠率、母体并发症比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。两组的新生儿性别比、孕周、早产儿比例、出生体质量、低出生体重儿、巨大儿、剖宫产、出生缺陷比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 囊胚激光皱缩后,缩短玻璃化冷冻预平衡时间不影响囊胚复苏移植的妊娠结局。     

单胚胎玻璃化冷冻对小鼠胚胎体外发育的影响

目的:比较单胚胎玻璃化冷冻与慢速冷冻对小鼠分裂期胚胎损伤和体外发育的影响,探讨使用玻璃化冷冻保存大量胚胎的可行性。方法:选择8-细胞胚胎随机进行改良的玻璃化和慢速冷冻,复苏后培养至囊胚孵出,计数胚胎复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、细胞团数、孵出率,并进行组间比较分析。结果:玻璃化冷冻组复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、孵出率、细胞团数分别为100%、12.7%、75.7%、66.4%、112,慢速冷冻组分别为87.1%、31.0%、35.5%、58.7%、78,除囊胚孵出率其余各指标两组间差异均具有统计学意义。结论:单胚胎玻璃化法冻存小鼠分裂期胚胎复苏后细胞成活率高,结构完整,更好的保持了胚胎的发育潜能。     

两种炎症性关节炎小鼠模型的比较

目的 通过比较胶原诱导(CIA)和人肿瘤坏死因子α转基因(hTNFα-Tg)小鼠关节炎模型的临床特征,为炎症性关节炎疾病的致病机理和药物筛选研究提供合适的模式动物.方法 分别采用鸡Ⅱ型胶原注射DBA/1小鼠建立经典的类风湿性关节炎(RA)模型,利用人肿瘤坏死因子α注射FVB小鼠建立关节炎转基因小鼠模型,通过关节表观特征观察、关节炎指数分析和病理观察评分对炎症性关节炎模型进行评价.结果 在炎症细胞浸润方面,CIA模型主要有中性粒细胞浸润,hTNFα-Tg模型主要是淋巴细胞浸润,且差异有统计学意义(P<0.05);在细胞增殖方面,两种模型都显示滑膜细胞的增生,与CIA模型相比,hTNFα-Tg模型滑膜增生最为严重,差异有统计学意义(P<0.05);在骨侵蚀方面,两种模型都显示增生滑膜对骨的侵蚀,两种模型比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 两种关节炎模型均在一定程度上模拟人关节炎的临床症状,但也存在着差异.CIA模型造模时间长,能较好模拟RA临床特征;hTNFα-Tg模型属于自发型,表现为滑膜不断增生,符合RA晚期临床特征.     

两种助孕方式下D5、D6囊胚行冻融移植后妊娠结局的比较

目的 比较体外受精-胚胎移植(IVF-ET)与胚胎植入前遗传学诊断或胚胎植入前遗传学筛查(PGD/PGS)周期中D5、D6囊胚形成情况及妊娠结局,同时探究D5、D6囊胚的发育潜能及两种助孕方式的优劣.方法 回顾性分析行IVF-ET助孕的138个周期及PGD/PGS筛查助孕的148个周期,按移植胚胎的发育天数分为IVF-D5组、IVF-D6组、PGD/PGS-D5组和PGD/PGS-D6组,分析比较各组的一般情况、囊胚形成情况及冻融移植后的种植率、临床妊娠率、流产率等.结果 IVF-D5组与IVF-D6组相比、PGD/PGS-D5组与PGD/PGS-D6组相比,D5组囊胚形成率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率均高于D6组(P＜0.05);PGD/PGS周期中D5组整倍体囊胚检出率高于D6组(p＜0.05);IVF-D5组与PGD/PGS-D5组相比、IVF-D6组与PGD/PGS-D6组相比,两组间的囊胚形成率、优质胚胎率、种植率及临床妊娠率均差异无统计学意义.结论 两种助孕方式下冻融移植D5囊胚比D6囊胚可获得较好的临床妊娠结局;与IVF相比,PGD/PGS并未明显改善患者的妊娠结局.     

两种甲状腺超声数据报告系统诊断效能的比较

目的 比较Kwak与ACR(2017)两种甲状腺影像报告和数据系统(TI-RADS)的诊断效能。 方法 回顾性收集2017年3月至2019年4月于山东大学第二医院行手术治疗的792例甲状腺结节患者资料,以1 940个甲状腺结节为研究对象开展研究。由2名从事甲状腺超声专业的高年资医师,分别采用两种TI-RADS评估标准对结节进行回顾性判读并进行统计学评价和比较。 结果 Kwak TI-RADS最佳诊断分界点为≥4a 级,其灵敏度、特异度分别为82.71%、76.06%;ACR(2017)TI-RADS最佳诊断分界点为TR5级,其灵敏度、特异度分别为68.67%、85.46%。Kwak TI-RADS的灵敏度高于ACR(2017)TI-RADS(P<0.001),而ACR(2017)TI-RADS的特异度高于Kwak TI-RADS(P<0.001)。Kwak TI-RADS的受试者工作曲线下面积(AUC)为0.826,高于ACR(2017)TI-RADS的0.810(P=0.024)。在≥1 cm结节中,两种TI-RADS体系的AUC差异无统计学意义(P=0.918);在<1 cm结节中,两种TI-RADS体系的AUC均较低,且Kwak高于ACR(2017)(P<0.001)。 结论 Kwak TI-RADS诊断效能略优于ACR(2017)TI-RADS,Kwak TI-RADS的灵敏度较高,而ACR(2017)TI-RADS的特异度较高。     

两种血气分析检测系统的偏倚评估与可比性研究

目的探讨CHIRON 348血气/电解质分析和ECOSYS血气分析检测系统的检测性能及二者的可比性。方法同一标本及质控物同时在两台仪器上分别测定2次,参照EP9-A文件对测定PH、PCO2、PO2的结果进行偏倚估计,并计算检测结果的系统误差,判断不同检测系统测定结果的可比性。结果两检测系统测定PH、PCO2、PO2的相关系数分别为r=0.9896、r=0.9777、r=0.9965;系统误差较小,低于允许总误差;PH的相对偏倚很小,PCO2和PO2的最大相对偏倚分别为17.74%、23.52%。结论ECOSYS型血气分析仪替代CHIRON 348型血气/电解质分析仪,其结果具有可比性,不会对临床引入明显偏倚。     

小鼠囊胚在人羊膜上着床行为的实验研究

目的：探索用人羊膜作为胚胎着床模型支持材料的可行性。方法：将妊娠第上天的小鼠囊胚培养在人羊膜的基础面，并作病理观察。结果：小鼠囊胚能在羊膜上正常脱带、贴附和扩展，其脱带率和贴附率与在培养板中 结果没有差异，但扩展率显著低于在培养板中的值；滋养层细胞对羊膜的基膜有侵入，二者在结构上有交错。结论：人羊膜可用作胚胎体外着床模型的建立，是一种有特殊应用价值的生物膜。     

两种套石网篮在输尿管软镜碎石取石术中应用的对比研究

目的：对比2种套石网篮在输尿管软镜碎石取石术中应用的效率和安全性。方法：75名进行输尿管软镜下碎石取石术的肾结石患者被随机分为2组,由同一组手术医师进行手术,A组患者在术中采用美国Boston Scientific公司的Escape镍钛合金结石回收篮（型号M0063902010）取石,B组患者在术中采用美国COOK公司的NCircle镍钛合金取石网篮（型号NTSE-022115-UDH）取石,比较2组患者取石效率、手术时间、清石率及并发症等情况。结果：平均取石时间A组患者为27 min,B组患者为35 min,平均每分钟最快取石次数A组患者为7.70次,B组患者为3.87次,术后1个月结石清除率A组患者为89.19%,B组患者为68.42%,上述3项数据均是A组患者优于B组患者,且差异有统计学意义。平均手术时间A组患者为68 min,B组患者为71 min,术后并发症发生率A组患者为5.41%,B组患者为5.26%,上述2项数据2组间差异无统计学意义。术中无出现套石网篮损伤患者集合系统及输尿管软镜情况。结论：2种套石网篮均可安全应用于输尿管软镜碎石取石术,选择适合的套石网篮有助于提高输尿管软镜碎石取石术的取石效率和结石清除率。     

降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响

目的:探讨降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响。方法:将孕4d小鼠胚泡随机接种到添加不同浓度降钙素的培养液内培养,观察记录胚泡的孵化、粘附及扩展等生长情况。于孕4d给小鼠子宫角注射降钙素抗体,孕8d检查胚胎植入数并进行组织学观察。结果:培养液内加入10nmol/L降钙素后,胚泡的孵化、粘附及扩展率均明显提高(P<0.01),注射降钙素抗体的小鼠,其胚胎植入数明显减少(P<0.001),镜下可见胚胎组织蜕化坏死,蜕膜细胞空泡变性。结论:降钙素可促进小鼠胚泡的孵化、粘附及扩展和促进胚泡植入。     

两种神经功能评分评价大鼠局灶性脑缺血模型的初步研究

目的探讨Garcia和Bederson两种神经功能评分对大鼠局灶性脑缺血模型的评价意义。方法 16只大鼠采用线栓法阻塞大脑中动脉建立局灶脑缺血再灌注模型,24 h后分别采用Garcia和Bederson两种神经功能评分方法进行评价,并行TTC染色法测定脑梗死体积百分比(BIVP),应用Spearman相关分析判断神经功能评分与BIVP的相关性。结果 16只大鼠行大脑中动脉阻塞模型术后存活15只,Garcia评分与BIVP呈显著负相关(r=-0.930,P<0.001),Bederson评分与BIVP呈显著正相关(r=0.794,P<0.001)。结论 Garcia评分及Bederson评分均可作为局灶性脑缺血模型行为学评价指标,前者可能更适合。     

高浓度葡萄糖对小鼠囊胚Fas/FasL蛋白表达的影响

目的 探讨高浓度葡萄糖对小鼠囊胚Fm/FmL蛋白表达的影响.方法 通过促超排卵,获取妊娠 3.5 d小鼠囊胚,随机分成3组,即对照组(空白)、低糖组(葡萄糖浓度为7.5 mmol/L)和高糖组(葡萄糖浓度为28.0 mmol),分别培养在含0、7.5和28.0 mmol/L葡萄糖的M199培养基中,培养24 h后,然后再吸出囊胚.每组随机吸取30个囊胚用免疫组织化学S-P法,检测不同浓度葡萄糖对小鼠囊胚Fas/FasL蛋白的表达状况,利用HPIAS-1000图像分析系统测定Fas/FasL蛋白在以上3组中表达的平均光密度和平均阳性面积率.结果 Fas/FasL蛋白表达结果:空白组中囊胚细胞胞浆中可见少量浅棕黄色颗粒,Fas/FasL的表达呈弱阳性.低糖组中囊胚细胞胞浆未见着色,Fas/FasL蛋白的表达呈阴性.高糖组囊胚细胞胞浆中可见较多的棕黄色颗粒,Fas/FasL的表达呈强阳性.空白组与低糖组囊胚Fas/FasL表达的阳性面积率及平均光密度差异无显著性(P>0.05),高糖组与空白组和低糖组相比均差异存在显著性(P<0.01).结论 高浓度葡萄糖可诱导凋亡蛋白Fas/FasL的过度表达,导致囊胚细胞数目过度减少,从而影响囊胚的正常发育和着床.