贵州省3株甲3(H3N2)亚型流感病毒的血凝素基因HA1区序列分析

目的对贵州省3株甲3(H3N2)亚型流感病毒的血凝素基因HA1区序列进行分析。方法提取核酸,PCR扩增,测序分析、比对。结果同源性分析和系统发育树都说明了相同(或相近)年份的毒株核苷酸序列同源性较高,亲缘关系较近;不同年份的毒株核苷酸序列的同源性较低,亲缘关系较远;3株H3N2毒株共有59各位点核苷酸替换。结论通过序列测定分析,结果表明1995-2005年纵向比较,贵州省甲3(H3N2)亚型流感病毒的血凝素基因HA1区序列发生了变异;通过与Genbank上相应年份标准株横向比较,贵州省3株甲3(H3N2)亚型流感病毒的血凝素基因HA1区序列未发生大的变异,仅有少数核苷酸的替换。     

贵州省A(H1N1)亚型流感病毒HA基因系列分析

目的:了解贵州省A(H1N1)流感病毒血凝素抗原的基因变异情况.方法:对贵州省分离的部分A(H1N1)流感病毒株利用聚合酶链反应进行扩增,将扩增产物进行序列测定,然后进行基因系列分析.结果:2001-2005年贵州省分离的A(H1N1)流感病毒株有以下位点发生变异:202G>R、203D>N、225R>K、268M>R...     

H5N1流感病毒的单克隆抗体研究获新突破

近日，来自中科院上海巴斯德研究所、英国国家医学研究院、深圳市第三人民医院、束埔寨巴斯德研究所和清华大学医学院的研究人员公布了一项研究成果，     

甲型H5N1和甲型H9N2流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可能用于人类疫苗的候选疫苗病毒的研制

此文概述了2010年2月17日-9月26日甲型H5N1和甲型H9N2流感疫情、甲型H5N1流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可用于人类疫苗的病毒研制状况.     

甲型H5N1和甲型H9N2流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可能用于人类疫苗的候选疫苗病毒的研制

此文概述了2010年2月17日-9月26日甲型H5N1和甲型H9N2流感疫情、甲型H5N1流感病毒的抗原性和遗传学特征以及可用于人类疫苗的病毒研制状况.     

妊娠期感染甲型H1N1流感病毒1例

孕妇,23岁,怀孕26周。因发热、咽痛和全身肌肉酸痛7d,加重伴咳嗽、气促3d到我院就诊。入院查：体温38．0℃,血压105／64mmHg（1mmHg=0．133kPa）,脉搏110次／min,     

灭活H5N1亚型禽流感病毒A疫苗的安全性和免疫原性

H5N1亚型禽流感病毒A具有新H5亚型血凝素，免疫原性极低，对金刚烷胺及奥塞米韦耐药。具有高致病性、高住院率和高致死率，在世界范围内引起严重瘟疫，急需有效的疫苗来预防。     

唐山地区甲型H1N1流行性感冒与普通发热临床特征对比分析

对2009年10月23日至12月22日唐山市人民医院发热门诊就诊的临床及实验室检查资料完整的36例甲型H1N1流感患者和相同时间段内的季节性甲型H3流感以及普通发热患者的临床特征进行对比分析。1对象与方法1.1研究对象甲型H1N1流感确诊病例诊断依据参照卫生部《甲型H1N1流感诊疗方案(2009年第三版)》[1]标准:出现流感样临床表现,同时甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性,故36例甲型H1N1流感核酸检测阳性的患者均被确诊为甲型H1N1流感;     

表达甲型H1N1流感病毒血凝素抗原的DNA疫苗构建及其免疫原性评价

目的 构建表达甲型H1N1流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)抗原的DNA疫苗,并在小鼠中测试其免疫原性.方法 运用人密码子优化技术合成甲型H1N1流感病毒HA序列,并转移至DNA疫苗载体,用Western blotting检测其表达效率.采用单纯随机抽样方法把BALB/c小鼠分成DNA疫苗组和对照组.用...     

甲型H1N1流感病毒疫苗接种的安全性分析

目的:探讨甲型H1N1流感病毒疫苗接种的安全性,为预防接种提供科学依据.方法:随机选取2009年11月～2010年2月在我县疾病预防控制中心接种甲型H1N1流感病毒疫苗的中小学生4 980名进行临床指标监测,对出现不良反应进行分析.结果:在4 980名接种者中51例出现不良反应,发生率1.02%,其中1级不良反应44例(86.27%),2级不良反应7例(13.73%),无3级及4级不良反应发生,不良反应均能在1～3 d自行缓解或治愈,未出现有临床意义的严重不良事件.结论:甲型H1N1流感病毒疫苗不良反应低,可以安全接种.     

上海地区人群甲型H1N1流感抗体水平监测分析

目的 了解上海地区不同年龄组人群甲型H1N1流感血清抗体水平,对人群中甲型H1N1与2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)的血清抗体水平进行分析比较.方法 应用常规微量血凝抑制试验(micro-hemagglutination inhibition test,HI)对上海地区不同年龄组(0～5月龄、6月龄～4岁、5～24岁、25～59岁和≥60岁)人群进行甲型H1N1流感抗体检测.各年龄组抗体阳性率的比较采用Pearson X2检验和Fisher确切概率法进行分析.结果 上海地区人群甲型H1N1流感血清抗体总阳性率为9.2%(37/404).不同年龄组中以老年人组(≥60岁)的血清抗体阳性率最高,为25.0%(21/84);其次是成年人组(25～59岁),血清抗体阳性率为10.0%(8/80);其他年龄组血清抗体阳性率较低.Pearson X2检验结果显示不同年龄组之间抗体阳性率差异有统计学意义.在2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)抗体阳性的329份血清中有31份甲型H1N1流感抗体阳性,季节性疫苗株抗体阴性的75份血清中有6份甲型H1N1流感抗体阳性.经Pearson X2检验分析,这两层人群甲型H1N1流感抗体阳性率差异没有统计学意义.结论 上海地区人群血清中甲犁H1N1流感抗体水平普遍偏低,其中老年人组抗体水平最高,人群对甲型H1N1流感病毒普遍高度易感;季节性疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)HI抗体阳性人群血清不能对甲型H1N1流感病毒产生交叉保护抑制.     

上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后抗体水平监测分析

 目的  了解上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后的抗体水平;观察甲型H1N1流感疫苗对该人群的免疫保护作用。 方法    应用常规微量血凝抑制试验（micro-hemagglutination inhibition test, HIT）对上海地区在校中学生分3个时间段进行甲型H1N1流感病毒抗体的血清学监测,3个时间段的抗体阳性率比较采用Pearson χ2 检验进行分析。 结果  2009年甲型H1N1流感流行前上海地区在校中学生的血清抗体阳性率仅为1.3%。经过一段时间流行后,血清抗体阳性率升至8.5%。接种甲型H1N1流感疫苗后,血清抗体阳性率升至87.3%。经Pearson χ² 检验分析,3个时间段在校中学生的血清甲型H1N1流感抗体阳性率差异有统计学意义（χ²=243.7,P<0.05）。 结论  在甲型H1N1流感流行前,上海地区在校中学生对其几乎没有免疫力,接种甲型H1N1流感疫苗能为该人群提供较好的免疫保护作用。     

贵州省新型甲型HIN1(2009)流感病毒HA-1基因分析

目的 建立并完善贵州省新型甲型H1N1流感病毒基因分析检测技术平台,了解贵州省新型甲型H1N1(2009)流感病毒HA1片断与WHO公布的流行株有否发生变异.方法 收集16株新型甲型H1N1流感病毒毒株,提取病毒核酸RNA,通过RT-PCR扩增HA1片断,用电泳观察PCR产物目的条带大小,经过纯化、测序,用Biodeit、MEGA4相关软件进行序列比对,同源性及差异性分析,构建系统发育树.结果 贵州省(2009)代表株与中俄代表株A/Habarovak/01/2009 (H1N1)和墨西哥第一株甲型H1N1流感A/Mexio City/001/2009(H1N1)同属一个谱系,亲缘关系较近,同源性在93.2％～95.8％之间.结论 贵州省(2009)代表株与WHO公布的流行株在核苷酸水平上有一定程度的变异.     

H9N2禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶DNA疫苗对小鼠的免疫保护研究

目的 检测H9N2禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)DNA疫苗保护小鼠抵抗致死量同源病毒感染的能力.方法 通过小鼠肺对肺传代,建立禽流感病毒A/chicken/Jiangsu/07/2002(H9N2)小鼠适应株.同时,构建病毒HA和NA DNA疫苗,以不同剂量电击法免疫小鼠1或2次,在初次免疫后4周或加强免疫后1周用致死量(40 LD50)鼠适应型病毒攻击小鼠.通过测定小鼠血清抗体滴度、小鼠存活率和肺部病毒滴度来评价疫占的效果.结果 HA或NADNA 10μg免疫1次或3μg免疫2次均可保护小鼠抵抗致死昔H9N2病毒的感染.结论 低剂量HA或NA DNA可为抗H9N2禽流感病毒感染提供有效的免疫保护.     

人用H5N1禽流感病毒疫苗生产工艺的优化

目的 建立优化的人用H5N1禽流感病毒疫苗生产的工艺。方法 在不同的稀释倍数、收获时间及灭活剂添加量下,通过测量收获液的病毒滴度和血凝效价,来确定病毒的最佳生产条件,并对离心法和凝胶过滤层析法的纯化效果进行对比。结果 103~104半数鸡胚感染量(50% egg infective dose,EID50)病毒接种鸡胚,收获的鸡胚尿囊液的病毒滴度和血凝效价最高,分别为10-8.3EID50和1∶480;在56~72 h血凝效价最高。甲醛浓度1∶10 000灭活144 h为灭活最佳条件。两种纯化方法得到的样品纯度和卵清蛋白的去除率相近,但离心纯化法和凝胶过滤层析纯化法病毒回收率有较大的差异,分别为19%和70%。结论 成功建立了高产毒的鸡胚基质H5N1禽流感病毒培养、灭活及纯化工艺。     

甲型H5N1禽流感病毒血凝素在sf9昆虫细胞中的表达及其鉴定

目的  利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达甲型H5N1禽流感病毒血凝素（hemagglutinin,HA）并对其进行鉴定。方法  根据sf9昆虫细胞密码子偏好性,对A/Goose/Guangdong/1/96（H5N1）禽流感病毒的HA基因进行序列优化并全长合成。构建重组供体质粒pFastHA,经PCR及测序鉴定后,转化DH10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒BacmidHA,用M13引物进行PCR鉴定。采用脂质体法转染sf9细胞,获得重组杆状病毒rBacHA。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）、蛋白质印迹法以及间接免疫荧光法对rBacHA表达产物进行分析。结果  供体质粒pFastHA经双酶切后产生了1条与预期大小相符的1 707 bp条带,序列测定证实目的基因无突变。穿梭质粒BacmidHA经PCR扩增,得到1条与预期大小相符的3 180 bp条带。SDS-PAGE结果显示,rBacHA表达产物的相对分子质量约为65 000。蛋白质印迹法分析表明,表达产物能与禽流感病毒阳性血清结合。在荧光显微镜下,感染rBacHA的sf9细胞呈现绿色荧光,提示HA基因得到表达。结论  利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统成功制备了具有良好抗原性的重组HA蛋白。     

安徽省1例H9N2流感病例及回顾性分析

目的 分析H9N2流感病毒感染患者的感染来源及流行病学特征。方法 对2015年4月发现的H9N2流感患者流行病学个案调查资料及相关标本的检测结果进行描述性流行病学分析。结果 该例患者临床主要表现为轻症流感样症状。患者发病前有活禽市场暴露史;活禽市场环境监测标本中H9型禽流感病毒核酸阳性率为24.1%;29名密切接触者在观察期内未出现流感样聚集性疫情。结论 该病例感染来源可能与农贸市场环境暴露有关,病毒来源于禽源H9N2流感病毒。