2-脱氧-D-葡萄糖联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)与顺铂(Cisplatin,Cis-DDP)单独及联合对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响.方法:培养Hela细胞,2-DG、Cis-DDP单独及联合作用于Hela细胞,MTT法检测细胞的存活率;流式细胞仪检测各组药物处理后Hela细胞的凋亡率;ATP实验检测各处理组ATP生成情况;Western blot测定AKT、Caspase-3、PARP-1、MCL-1蛋白表达水平.结果:2-DG、Cis-DDP单独及联合作用Hela细胞均可降低细胞活性,呈时间剂量依赖性,联合用药组与其他各组存活率之间具有显著差异(P<0.05);用药组比对照组细胞ATP生成量降低但24h差异无统计学意义,48h联合用药组ATP生成量明显低于其他各组,且差异具有统计学意义(P<0.05);用药组细胞凋亡率均大于对照组,联合用药组凋亡率大于单药组,且具有明显差异(P<0.05);Western blot显示,联合用药可明显降低AKT、PARP-1、MCL-1蛋白的表达量,并使PARP-1、Caspase-3蛋白分解.结论:2-DG、Cis-DDP可有效抑制肿瘤细胞增殖,诱导其凋亡,2-DG联合Cis-DDP抗肿瘤作用明显增强.     

白皮杉醇增强顺铂杀伤喉癌Hep-2细胞的作用及其机制

目的 探讨白皮杉醇增强顺铂对喉癌细胞的杀伤作用及其分子机制。方法 体外培养喉癌细胞Hep-2,联合使用白皮杉醇及顺铂,CCK8法检测喉癌Hep-2细胞的增殖能力,流式细胞术检测喉癌Hep-2细胞的凋亡率,Hoechst染色检测喉癌Hep-2细胞中细胞核固缩比例,蛋白印迹法检测BCL-2家族蛋白表达变化。结果 白皮杉醇在50 μmol/L时对喉癌Hep-2细胞的增殖凋亡并无显著影响。与顺铂组相比,白皮杉醇联合顺铂组细胞的增殖能力显著降低,48 h细胞吸光度值白皮杉醇联合顺铂组较顺铂组降低60%,流式细胞术检测发现48 h时,白皮杉醇联合顺铂组喉癌Hep-2细胞的凋亡率显著高于顺铂组（P<0.05）,Hoechst染色发现白皮杉醇联合顺铂组喉癌Hep-2细胞的细胞核固缩比例显著增高,差异有统计学意义。蛋白印迹检测发现,白皮杉醇可以显著下调BCL-2蛋白表达水平,上调BAX蛋白表达水平。结论 白皮杉醇可以有效增强顺铂对喉癌细胞的杀伤作用,其分子机制与白皮杉醇可以显著调控BCL-2家族蛋白表达有关。     

降低有氧糖酵解增强非小细胞肺癌耐药细胞对顺铂的敏感性

目的:探究顺铂耐药的非小细胞肺癌细胞糖代谢的特点及抑制有氧糖酵解对非小细胞肺癌细胞顺铂耐药细胞的影响及其机制。方法:通过梯度倍增浓度法建立非小细胞肺癌顺铂耐药细胞模型(A549/DDP);酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, Elisa)检测A549/DDP与A549细胞两组葡萄糖消耗量、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)释放量、乳酸生成及丙酮酸生成量的差异;CCK-8法(cell counting kit-8)检测2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose, 2-DG)及顺铂处理后A549/DDP与A549细胞增殖能力的变化;Elisa检测2-DG处理A549/DDP细胞与A549细胞葡萄糖消耗量、ATP释放量、乳酸生成及丙酮酸生成量的差异;Elisa检测2-DG处理A549/DDP细胞与A549细胞后对非神经元性烯醇化酶(recombinant enolase 1,ENO1)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PD)、缺氧诱导因子-α...     

二甲双胍联合2-脱氧-D-葡萄糖对肝癌细胞增殖与凋亡的影响及其机制

目的 研究二甲双胍(Met)和2-脱氧-D-葡萄糖(2DG)联合用药对肝癌HepG2、Hep3B细胞增殖及凋亡的影响及其机制.方法 Wst-1试剂检测Met和2DG单独及联合应用对HepG2、Hep3B细胞增殖的影响;光学显微镜下观察Met、2DG单独及联合作用后HepG2、Hep3B细胞形态上的改变;流式细胞术观察各组药物处理后细胞凋亡的变化;Western blotting测定HepG2细胞的Caspase-3、PARP、Mcl-1的表达情况.结果 药物联合组HepG2细胞的存活率为(22.48 ±0.51)％,与对照组(100.00±5.05)％、Met组(80.68±5.10)％和2DG组(72.56±4.34)％比较,差异具有统计学意义(P ＜0.001;P＜0.001;P=0.001).联合组Hep3B细胞的存活率为(29.16±1.34)％,与对照组(100.00±1.23)％、Met组(59.58±1.92)％和2DG组(33.87±1.95)％比较,差异具有统计学意义(P ＜0.001;P＜0.001;P=0.001).显微镜下,Met和2DG联合用药组HepG2细胞数量明显减少,而漂浮的死亡细胞增多;而联合组虽然也造成Hep3B细胞密度减少,但并未见显著增加脱落细胞.流式细胞术检测HepG2细胞联合用药组的凋亡率为(39.63±0.21)％,与对照组(7.12±0.14)％、Met组(12.56±0.35)％和2DG组(15.16±1.93)％比较,差异具有统计学意义(P ＜0.001;P ＜0.001;P=0.001);Hep3B细胞联合用药组的凋亡率为(12.58±1.03)％,与对照组(2.82±0.51)％和Met用药组(8.98±0.86)％比较,差异具有统计学意义(P ＜0.001;P=0.007),与2DG用药组(12.40±1.78)％比较,差异不具有统计学意义(P=1.000).Western blotting进一步显示,联合用药组可以观察到Caspase-3激活、多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)切割以及Mcl-1表达降低.结论 Met和2DG联合用药可以有效抑制HepG2、Hep3B细胞的增殖,并诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与激活Caspase-3、切割PARP底物、降低Mcl-1蛋白表达有关.     

人参皂甙 Rh2 联合顺铂对食管癌细胞的杀伤作用

目的：体外观察低剂量人参皂甙Rh2（ginsenoside Rh2,GS-Rh2）对抗肿瘤药顺铂（cisplatin,DDP）杀伤人食管癌细胞株Eca109的影响,并探讨其可能的作用机制.方法：人食管癌细胞Eca109经培养符合条件后,分别加用0.3μg/ml DDP（A组）、20μmol/ml GS-Rh2（B组）、0.3μg/ml DDP＋20μmol/ml GS-Rh2（C组）、对照组（D组）处理48小时.流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和死亡率.高效液相色谱检测各组细胞内DDP的药物浓度.蛋白质印迹法检测各组细胞中p53表达.结果：细胞凋亡率和死亡率C组显著高于A、B两组（P＜0.05）;C组细胞内DDP的药物浓度显著高于A组细胞（P＜0.05）;C组细胞p53表达水平低于A组（P＜0.05）.结论：体外低剂量GS-Rh2能增强DDP对人食管癌细胞Eca109的杀伤作用,其作用机制可能与降低细胞内p53表达有关.     

顺铂诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制的研究

目的:研究顺铂在体外诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法测定顺铂对Hela细胞增殖的影响;流式细胞仪和Hochest33258检测药物作用前后的细胞凋亡情况;RT-PCR检测HPVE6的mRNA水平表达;WesternBlot测定HPVE6、p53、p21、Bax、Bcl-2蛋白水平的表达。结果:顺铂抑制Hela细胞生长呈时效和量效关系;经10μg/ml顺铂分别在12、24、36、48小时作用Hela细胞,亚G1峰与对照组有显著性差异;RT-PCR提示顺铂作用Hela细胞后HPVE6的mRNA水平表达逐渐降低;WesternBlot提示顺铂作用Hela细胞后HPVE6的蛋白水平表达逐渐降低,p53、p21和Bax蛋白水平表达逐步升高,Bcl-2的表达无变化。结论:顺铂通过抑制HPVE6的表达,恢复p53的功能,引起细胞凋亡,起到杀伤肿瘤的作用。     

乳腺癌细胞体外摄取2-脱氧葡萄糖荧光类似物

目的 观察2-脱氧葡萄糖(2-DG)荧光类似物2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,34羟氨基]-2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)被高表达葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的乳腺癌细胞靶向摄取的情况.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化法检测乳腺癌MDA-MB-231细胞GLUT-1 mRNA和蛋白的表达,采用Western blot法比较乳腺癌MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞GLUT-1的蛋白表达量.应用2-NBDG孵育人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用荧光显微镜及流式细胞仪观察、分析对2-NBDG的摄取情况,比较MDA-MB-231和MCF-7细胞吸收2-NBDG量的差异.结果 RT-PCR和免疫组化检测结果显示,MDA-MB-231细胞高表达GLUT-1;Western blot检测结果进一步显示,MDA-MB-231细胞的GLUT-1表达(0.946 4±0.007)高于MCF-7(0.833±0.010).荧光成像及流式细胞仪分析结果显示,MDA-MB-231细胞能快速摄取2-NBDG,且加入50 mmol/L D-葡萄糖后,荧光强度降低了46.0%.2-NBDG孵育乳腺癌细胞20 min后,MDA-MB-231细胞荧光强度(25.10±0.57)明显高于MCF-7细胞(10.12±0.62).结论 2-NBDG能迅速被高表达GLUT-1的乳腺癌MDA-MB-231细胞靶向吸收.     

冬凌草甲素逆转黑色素瘤细胞顺铂耐药的作用及机制

目的：探讨冬凌草甲素（Ori）逆转人黑色素瘤细胞顺铂（DDP）耐药的作用及其机制。方法：分别将黑色素瘤DDP耐药细胞A375/DDP和M14/DDP分为对照组、2μmol/L Ori组、4 mg/L DDP组和2μmol/L Ori+4 mg/L DDP组。CCK-8法、Transwell实验、Annexin Ⅴ-FITC/PI染色流式细胞术分别检测各组细胞的增殖活力、侵袭和迁移能力及凋亡水平,透射电子显微镜观察自噬小体,免疫荧光染色法观察微管相关蛋白轻链3(LC3)点状结构,WB法检测A375/DDP细胞自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3Ⅱ和LC3Ⅰ的表达。结果:与4 mg/L DDP组相比,2μmol/L Ori+4 mg/L DDP组细胞增殖活力、迁移和侵袭能力均显著下降（均P<0.01）,凋亡水平显著升高（P<0.01）。4 mg/L DDP组细胞中可见大量自噬小体以及LC3点状染色,但2μmol/L Ori+4 mg/L DDP组仅可见少量。与对照组相比,4 mg/L DDP组细胞中Beclin-1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的蛋白表达水平均显著升高（均P<...     

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人食管癌细胞Eca-109的致凋亡研究

目的探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖是否具有诱导人食管癌细胞Eca-109发生凋亡的作用.方法采用体外细胞培养实验方法,应用MTT法、流式细胞仪检测、DNA琼脂糖凝胶电泳、透射电镜等技术,观察药物对细胞生长的抑制率及细胞的形态学变化,检测凋亡峰及DNA Ladder.结果 MTT法测得细胞抑制率具有显著的时间及浓度依赖性;透射电镜下可见到凋亡典型的形态学变化,流式细胞仪检测显示细胞周期的G1期阻滞及凋亡峰;DNA琼脂糖凝胶电泳显示清晰的DNA梯状电泳.结论 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖能够明显的抑制人食管癌细胞Eca-109的增殖,并诱导其发生凋亡.     

顺铂诱导人结肠癌细胞凋亡的实验研究

 采用细胞培养方法，通过AO染色，DNA微电泳及电镜观察顺铂作用下结肠癌细胞凋亡过程。实验结果表明：结肠癌SW1116细胞在不同浓度的顺铂作用2小时后，呈现不同程度的凋亡。电镜观察到凋亡的细胞表现为细胞核皱缩，核内染色质结块状，趋边缘性分布；DNA微电泳呈拖尾现象，提示凋亡细胞内DNA片断化；凋亡细胞AO染色呈阳性反应，其阳性率随顺铂的浓度增高而递增，与对照组相比，差异有显著意义（P＜0．05）。因此认为顺铂可诱导和促进结肠癌细胞凋亡，这一现象可能是顺铂抗癌作用之一。     

沉默ERK增强A375黑素瘤细胞对TRAIL诱导细胞凋亡的敏感性

目的:探讨直接抑制细胞外信号调节激酶(extra cellular signal-regulated kinase,ERK)表达后,对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对黑素瘤细胞杀伤作用的影响及其作用机制.方法:用携带ERK特异或对照shRNA的慢病毒感染A375黑素瘤细胞,48 h后加入终浓度为100 μg/ml基因重组TRAIL蛋白继续培养6h,收获细胞,碘化丙啶染色,用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和TRAIL受体的表达;Western blotting检测相关蛋白的表达水平.结果:亚型特异的ERK shRNA分别沉默ERK1或ERK2,导致A375细胞出现G1期阻滞(对照shRNA组的G1期细胞比例为71％,ERK1、ERK2、ERK1 +2 shRNA组分别增加到85％、90％和81％,P＜0.01);S期细胞从对照组的11％减少到2％左右(P＜0.001)、G2/M期细胞也从对照组的17％减少到3％(P＜0.01).细胞周期改变伴有P21、P27蛋白上调和Cyclin D1蛋白降低,但未见明显的细胞凋亡.经对照shRNA和TRAIL处理的细胞,仅有15％的凋亡率,而ERK shRNA和TRAIL联合处理则使凋亡率达到40％ ～60％ (P＜0.01).抑制ERK蛋白表达能显著上调细胞表面TRAIL受体DR4的表达(从对照组32％增加到75％～80％,P＜0.01),但DR5变化不明显.ERK抑制还明显降低A375细胞的葡萄糖转运受体1(Glut 1)和己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)的蛋白表达水平.结论:直接抑制ERK不仅可以抑制肿瘤细胞周期的进展,而且可以增强TRAIL对A375黑素瘤细胞的杀伤作用,其机制与上调细胞表面DR4的表达和干扰肿瘤细胞糖代谢有关.     

Overexpression of DDB2 enhances the sensitivity of human ovarian cancer cells to cisplatin by augmenting cellular apoptosis

Cisplatin is one of the most widely used anticancer agents, displaying activity against a wide variety of tumors. However, development of drug resistance presents a challenging barrier to successful cancer treatment by cisplatin. To understand the mechanism of cisplatin resistance, we investigated the role of damaged DNA binding protein complex subunit 2 (DDB2) in cisplatin‐induced cytotoxicity and apoptosis. We show that DDB2 is not required for the repair of cisplatin‐induced DNA damage, but can be induced by cisplatin treatment. DDB2‐deficient noncancer cells exhibit enhanced resistance to cell growth inhibition and apoptosis induced by cisplatin than cells with fully restored DDB2 function. Moreover, DDB2 expression in cisplatin‐resistant ovarian cancer cell line CP70 and MCP2 was lower than their cisplatin‐sensitive parental A2780 cells. Overexpression of DDB2 sensitized CP70 cells to cisplatin‐induced cytotoxicity and apoptosis via activation of the caspase pathway and downregulation of antiapoptotic Bcl‐2 protein. Further analysis indicates that the overexpression of DDB2 in CP70 cells downregulates Bcl‐2 expression through decreasing Bcl‐2 mRNA level. These results suggest that ovarian cancer cells containing high level of DDB2 become susceptible to cisplatin by undergoing enhanced apoptosis.     

褪黑素通过促凋亡协同增强顺铂对人喉癌细胞增殖的抑制作用

目的:研究褪黑素(melatonin,MT)对人喉癌细胞增殖与凋亡的影响及MT增强人喉癌细胞对顺铂(cisplatin,DDP)治疗的敏感性.方法:采用不同质量浓度MT和DDP单独或联合处理Hep-2细胞;通过CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,采用两药相互作用指数(co-efficient of drug interaction,CDI)评估MT是否影响Hep-2细胞对DDP的敏感性.结果:CCK-8检测结果显示,单用MT或DDP可浓度依赖性抑制Hep-2细胞的增殖,MT可协同增强DDP对Hep-2细胞的增殖抑制作用(CDI＜1).流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期结果显示,MT可促进Hep-2细胞凋亡以及增加亚G1期细胞比例(P＜0.01),MT可协同DDP促进Hep-2细胞凋亡[0.5 mmol/L MT联合20μg/ml DDP组的细胞凋亡率显著高于20 μg/ml DDP组,(40.9±3.0)％vs(11.0±0.9)％,P＜0.01]以及亚G1期细胞比例[0.5 mmol/L MT联合20 μg/mlDDP组的亚G1期细胞比例显著高于20 μg/ml DDP组,(73.0±2.4)％vs(40.4±3.0)％,P＜0.01].加入Caspase抑制剂Z-VAD-fmk可逆转MT和/或DDP对Hep-2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导作用(均P＜0.01).结论:MT能以Caspase依赖的方式诱导人喉癌细胞Hep-2的凋亡,从而协同增强DDP对细胞的增殖抑制作用.     

负载MnO2纳米颗粒的可得然复合水凝胶的构建及其联合光热疗法对黑色素瘤B16-F10细胞的杀伤效果

目的：构建负载二氧化锰（MnO2）纳米颗粒的可得然（Cur）复合水凝胶MnO2@Cur（简称MGel）,研究其对黑色素瘤B16-F10 细胞的杀伤效果。方法：采用热诱导法制备Cur 水凝胶（Gel）,物理负载MnO2构建MGel,表征其宏观和微观形貌,检测其机械性能、降解性能以及光热转换性能等理化性能,并研究其联合PTT 对小鼠皮肤黑色素瘤B16-F10 细胞的光热杀伤效果。结果：MGel 具有优异的机械和可降解性能,抗拉伸强度达（127.97±3.60）kPa、抗压缩强度达（151.44±5.23）kPa,28 d 降解率约58.17%。MGel 负载MnO2纳米片（粒径约 180 nm）获得优异的光热转换性能,负载1.0 mg/mL MnO2的MGel 在1.0 W/cm2的808 nm NIR光照4 min 后到达最高温度50 ℃。细胞毒性实验和Calcein-AM/PI 荧光双染色实验表明,MGel 联合PTT有效杀伤B16-F10 黑色素瘤细胞,NIR 光照使得MGel 组细胞存活率降低至（4.68±0.66）%（P<0.000 1）。结论：MGel 复合水凝胶具备优异的机械性能、可降解性能以及光热转换性能,其联合PTT能有效杀伤肿瘤细胞,可能成为一种有效治疗黑色素瘤的新手段。     

Extracellular Nucleotides and Nucleosides Induce Proliferation and Increase Nucleoside Transport in Human Glioma Cell Lines

Extracellular purines (adenosine triphosphate (ATP), adenosine 5-diphosphate (ADP) and adenosine) and pyrimidines (uridine 5-triphosphate (UTP) and UDP) are important signaling molecules that mediate diverse biological effects via P1 and P2 purinergic receptors. The human glioma cell lines U87 MG, U251 MG and U138 MG were treated with purines and pyrimidines for 24 or 48h and proliferation was measured by [³H]-thymidine incorporation, flow cytometry and cell counting. The studies showed that extracellular nucleotides and nucleosides induce proliferation of the studied glioma cells. Incorporation of [³H]-thymidine followed the order of ATP guanosine inosine adenosine > UTP > ADP while ATPS and 2MeSATP had no effect. The effect of ATP was partially inhibited by suramin and by reactive blue 2 (RB2). Co-treatment with the following antagonists of P1 purinoreceptors DPCPX, CPT or 8PT did not block the effect of adenosine while a specific antagonist of the A₃ receptor, MRS1220, totally blocked the effect of adenosine. ATP and adenosine also increased the overall uptake of [³H]-thymidine into the cell, producing a positive effect on the [³H]-thymidine incorporation measurements. These data indicate that the uptake of thymidine and proliferation of gliomas can be induced by purines and pyrimidines via both P1 and P2 purinoceptors.     

褪黑素联合顺铂通过诱导细胞凋亡抑制人胶质瘤细胞U251和SHG-44增殖

目的：研究褪黑素（melatonin,MT）和顺铂（cisplatin,DDP）单独或联合应用对人胶质瘤细胞U251和SHG-44增殖及凋亡的影响。方法：采用不同质量浓度MT和DDP单独或联合处理U251和SHG-44细胞,并设对照组（不加任何药物）及乙醇组（加入乙醇）;以CCK-8法检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡和细胞周期,采用两药相互作用指数（coefficient of drug interaction,CDI）评估MT是否影响U251和SHG-44细胞对DDP的敏感性。结果：CCK-8结果显示,单用MT或DDP可浓度依赖性抑制U251和SHG-44细胞的增殖,MT还可协同增强DDP对U251和SHG-44细胞的增殖抑制作用（CDI<1）。流式细胞术检测结果显示,MT可促进U251和SHG-44细胞的凋亡,MT可增强DDP对U251和SHG-44细胞的凋亡诱导作用,0.5 mmol/L MT联合20 μg/ml DDP组U251和SHG-44的细胞凋亡率显著高于20 μg/ml DDP组\[（66.3±1.0）% vs （45.9±1.7）%,（35.5±0.8）% vs （15.5±0.8%）;均P<0.01\];而且0.5 mmol/L MT联合20 μg/ml DDP 组U251和SHG-44细胞的G1期比例显著高于20 μg/ml DDP组\[（52.4±2.1）% vs （27.9±1.5）%,（39.7±1.5）% vs （27.7±1.3）%;均P<001\]。结论：MT能显著增强DDP对人胶质瘤细胞U251和SHG-44的凋亡诱导作用,从而协同增强DDP对细胞增殖的抑制作用,有望成为人胶质瘤化疗的辅助药物。     

姜黄素对人黑色素瘤细胞凋亡机制探讨

目的：观察姜黄素对人恶性黑色素瘤细胞系A375凋亡的影响作用,探讨姜黄素抗癌的作用机制。方法：将人恶性黑色素瘤细胞系A375等分为4组,分别用0、5、10和20μmol/L的不同浓度姜黄素对该细胞株作用48h后,通过MTT法测定细胞增殖能力;利用流式细胞仪检测细胞凋亡;采用RT-PCR方法检测细胞BIRC mRNA的表达;蛋白质印迹法检测细胞BIRC7蛋白及Caspase-3蛋白的表达。结果：5μmol/L姜黄素对A375细胞增殖抑制率为（13.28±5.28）%,10μmol/L为（19.24±4.15）%,20μmol/L为（36.93±4.78）%,各组间差异有统计学意义,F=65.68,P〈0.01。5μmol/L姜黄素作用于A375细胞48h后凋亡率为（15.88±7.21）%,10μmol/L为（22.31±5.63）%,20μmol/L为（31.61±4.82）%,对照组为（3.36±1.54）%,各组间差异有统计学意义,F=25.78,P〈0.01。0μmol/L姜黄素作用A375细胞48h后BIRC7基因mRNA表达相对倍率为6.15±1.11,5μmol/L为4.54±1.23,10μmol/L为3.36±0.66,20μmol/L为2.54±0.65,各组间差异有统计学意义,F=4.743,P=0.015。0μmol/L姜黄素分别作用A375细胞48h后细胞BIRC7蛋白表达相对比值为0.88±0.36,5μmol/L为0.71±0.28,10μmol/L为0.56±0.14,20μmol/L为0.43±0.15,各组之间差异均有统计学意义,F=3.36,P=0.037。伴随姜黄素作用浓度的升高,A375细胞的生长呈显著抑制状态,呈剂量依赖性。肿瘤细胞生长、BIRC7mRNA和BIRC7蛋白表达水平均显著下调,呈剂量依赖性。结论：姜黄素可以抑制人恶性黑色素瘤细胞系A375的增殖,也可以促进其凋亡,具有抗癌作用,其作用机制之一可能通过下调BIRC7基因的表达促使黑色素瘤细胞凋亡。     

阿帕替尼通过抑制HMGA2增强顺铂对胃癌的抗瘤作用

目的：探讨阿帕替尼（apatinib,APA）联合顺铂（cisplatin,DDP）对胃癌（gastric carcinoma,GC）细胞增殖、侵袭和迁移 能力的影响及其分子机制。方法：收集2016年1月到2019年6月武威市人民医院手术切除的50例GC患者的癌及癌旁组织标 本,以及GC细胞系MGC803和SGC7901, 用qPCR检测组织中HMGA2和细胞中增殖、迁移及侵袭相关mRNA的表达水平。采 用脂质体转染技术, 将pcHMGA2转染MGC803和SGC7901细胞,经分别用不同浓度的DDP和APA处理,分为NC、pcHMGA2、 pcHMGA2+DDP及pcHMGA2+DDP+APA组, 用Western blotting检测GC细胞中HMGA2蛋白的表达水平,MTT、Transwell小室 法分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果：HMGA2 mRNA在GC组织中表达水平高于癌旁组织（P<0.05）,且高表达组 GC患者的生存率显著降低（P<0.01）。DDP 显著抑制 MGC803 和 SGC7901 细胞的增殖、侵袭和迁移能力（均P<0.01）; DDP+APA组MGC803和SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著低于DDP组（均P<0.01）;APA显著增强DDP对GC细胞 HMGA2表达的抑制作用（均P<0.01）;APA通过下调HMGA2表达增强DDP对GC的抗肿瘤性。结论：APA能促进DDP对GC的 抗瘤作用,其分子机制可能是增强DDP对HMGA2表达的抑制作用有关。     

重组人血管内皮抑制素联合顺铂对小鼠腹水瘤抑制作用及其机制探讨

目的研究重组人血管内皮抑制素(恩度)联合顺铂治疗小鼠S180腹水瘤的有效性和安全性,并探索其相关作用机制。方法应用小鼠S180细胞株建立腹水瘤动物模型。120只造模后的ICR小鼠随机分为对照组(0.9%NaCl,d1~d10)、恩度组(恩度8mg/kg,d1~d5,d7~d10;0.9%NaCl,d6)、顺铂组(顺铂0.04 mg/kg,d6;0.9%NaCl d1~d5,d7~d10)和恩度联合顺铂组(恩度8mg/kg,d1~d5,d7~d10;顺铂0.04mg/kg,d6)。记录各组小鼠体质量、腹水体积、腹水中肿瘤细胞、红细胞数以及生存期;检测各组小鼠的腹膜渗透性和肝肾功能;流式细胞仪检测腹水肿瘤细胞的凋亡率;ELISA方法检测腹水中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)的表达。结果恩度联合顺铂组小鼠的腹水体积为(2.1±1.0)mL,肿瘤细胞数为(10.6±2.5)×107 mL-1,红细胞数为(12.0±3.1)×107 mL-1,上述各指标均低于对照组、恩度组和顺铂组。联合组的中位存活期为24.1d,明显长于对照组(12.7d)、恩度组(16.8d)和顺铂组(18.9d)。顺铂组小鼠腹水中肿瘤细胞的凋亡率为(68.9±5.4)%,明显高于对照组(12.4±2.3)%和恩度组(11.0±3.8)%。恩度组小鼠的腹膜渗透性为(2.03±0.05)ng/mL,VEGF浓度为(23.7±3.0)ng/mL,MMP-2为(10.3±1.1)ng/mL,显著低于对照组和顺铂组。各组小鼠的肝肾功能未发现明显异常。结论恩度联合顺铂治疗S180腹水瘤疗效显著,安全性好;其机制可能与恩度下调VEGF和MMP-2的表达及顺铂促进肿瘤细胞的凋亡有关。