山楂酸与顺铂合用对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨山楂酸与顺铂合用对肺癌细胞A549增殖及凋亡产生的影响。方法将人的肺癌细胞系A549经过药物干预(山楂酸、顺铂),并将干预后的肺癌细胞通过MTT实验,分析细胞增殖能力变化,通过流式细胞技术,分析细胞的凋亡水平变化。通过Western blot分析细胞中XIAP、Survivin的表达水平变化。结果山楂酸和顺铂合用后,A549细胞的增殖率显著降低,凋亡水平显著提高;荧光电子显微镜下观察到凋亡细胞明显增加,核碎裂明显,细胞大片脱落;Western blot结果显示,山楂酸和顺铂合用,显著下调XIAP、Survivin的蛋白表达量。结论山楂酸和顺铂合用抑制肺癌细胞的增殖,促进肺癌细胞的凋亡,并下调细胞中凋亡抑制相关指标XIAP、Survivin的表达水平。     

内源性大麻素联用顺铂对人肺腺癌A549细胞的诱导凋亡作用

目的观察内源性大麻素（AEA）、顺铂（DDP）单用或联用对人肺癌A549细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测AEA和DDP对肺癌A549细胞的增殖抑制作用,以流式细胞仪（FCM）PI单染检测AEA联用DDP对细胞周期的影响,以Annexinv／PI双染法检测AEA联用DDP对细胞凋亡的影响。结果AEA对肺癌细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量、时间依赖性。10,20μmol／L的AEA和1,2mg／L的DDP联合作用24,48,72h后,细胞增殖抑制率显著高于单用组;两药联用后诱导细胞凋亡的作用显著增强,AEA可使A549细胞阻滞于G2／M期。结论AEA及DDP对肺癌A549细胞的增殖具有显著的抑制作用,并可诱导细胞凋亡,在一定范围内呈量效关系,且两者联合应用具有相加或协同作用。     

伏利诺他联合顺铂对A549细胞的抑制作用及其机制研究

目的本文旨在研究伏利诺他(SAHA)与顺铂(DDP)联用对A549细胞在体外和体内的抑制作用,并初步探索其作用机制。方法在体外实验中,采用MTT法检测SAHA和DDP对A549细胞增殖的影响;Tunel法检测SAHA和DDP对细胞凋亡的影响。在体内实验中,建立肿瘤动物模型,将小鼠随机分为模型组、DDP组和DDP+SAHA组。每组小鼠给予相应剂量药物。4周后,所有小鼠处死并取肿瘤组织,采用RT-PCR和Western blot法检测bcl-2、bax和p53的mRNA及蛋白的表达水平。结果MTT实验结果提示DDP+SAHA抑制细胞增殖的作用比DDP强。Tunel实验结果提示DDP+SAHA处理后的A549细胞凋亡数目比DDP单独处理的多(P <0.05)。在体内实验中,DDP+SAHA组小鼠肿瘤体积明显小于模型组和DDP组(P <0.05)。RT-PCR和Western blot实验结果提示,DDP+SAHA可增加bax和p53的mRNA及蛋白表达水平,同时降低bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。结论 SAHA与DDP联合应用对A549细胞和肿瘤模型小鼠具有较强的抗肿瘤作用,其作用可能是通过对bcl-2/bax和p53的调控来实现的。     

辛伐他汀联合顺铂对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的研究辛伐他汀联合顺铂对人非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用MTT法检测0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L顺铂和3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L辛伐他汀对A549细胞增殖抑制率的影响;考察2.5μmol/L顺铂与3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L辛伐他汀联用对A549细胞增殖抑制作用的协同效果;Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术检测5μmol/L顺铂与25μmol/L辛伐他汀联合应用对对A549细胞凋亡率的影响;分光光度法检测辛伐他汀(25μmol/L)联合顺铂(2.5μmol/L)对A549细胞caspase-3活性的影响。结果辛伐他汀或顺铂对A549细胞的增殖有显著的抑制作用,随着浓度的增加、时间的延长,呈时间、剂量相关性,其抑制作用增强(P0.01)。顺铂(2.5μmol/L)与不同浓度(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)辛伐他汀联用对A549细胞的增殖有抑制作用,随着时间的延长,辛伐他汀剂量的增加,两者联用抑制作用呈增强的趋势(P0.01),2.5μmol/L顺铂联用辛伐他汀25μmol/L的抑制作用具有协同效果。25μmol/L辛伐他汀和2.5μmol/L顺铂能有效地诱导A549细胞的凋亡,而且两者联合使用可以显著增加A549细胞的凋亡率。25μmol/L辛伐他汀联合2.5μmol/L顺铂应可以显著增加A549细胞的caspase-3酶活性。结论辛伐他汀能够显著增强顺铂对A549细胞增殖抑制、诱导凋亡的作用,可能通过上调caspase-3活性诱导A549细胞凋亡。     

Lipocalin-2过表达对人肺癌 A549细胞增殖、凋亡及侵袭力的影响

目的：采用基因过表达方法上调人肺癌 A549细胞 Lipocalin-2表达,观察 Lipocalin-2对细胞增殖、凋亡、细胞周期调控及侵袭力的影响。方法构建 Lipocalin-2过表达慢病毒载体,转染人肺癌 A549细胞。Real-time PCR 和 Western blot 检测转染后人肺癌 A549细胞中 Lipocalin-2表达水平。MTT 实验检测细胞增殖。流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况。Transwell 小室实验检测细胞侵袭力。结果与阴性对照组和空载体对照组比较,转染组 Li-pocalin-2 mRNA 和蛋白表达水平均显著增加,差异有统计学意义（ P ﹤0.05）。Lipocalin-2过表达慢病毒载体转染后,细胞增殖率和侵袭力显著增加,同时细胞凋亡率及 G0/ G1期细胞比例显著降低,S 期细胞比例显著提高,差异有统计学意义（ P ﹤0.05）。结论 Lipocalin-2过表达通过调控人肺癌 A549细胞周期、抑制凋亡促进细胞的增殖,还明显提高细胞的侵袭力。     

SDZ诱导肺癌A549细胞凋亡

目的旨在探讨SDZ体外对肺癌A549细胞生长的作用。方法采用hoechst染色、荧光显微镜下观察SDZ诱导肺癌A549细胞凋亡的作用。结果经SDZ1000μg／ml作用24h肿瘤细胞即可发生凋亡,凋亡率达31．7％。结论SDZ体外可诱导肺癌A549细胞凋亡。     

siRNA 靶向沉默 Lipocalin-2基因增加人肺癌 A549细胞对顺铂的敏感性

目的：利用针对 Lipocalin-2的小干扰 RNA（siRNA）沉默人肺癌 A549细胞中 Lipocalin-2基因表达,观察其对顺铂化疗敏感性的影响。方法分别采用免疫组织化学 SP 法和 Western blot 检测 Lipocalin-2在肺癌组织和3种肺癌细胞株（A549、NCI-H661、NCI-H446）中的表达情况。设计并构建靶向 Lipocalin-2的 siRNA 转染 A549细胞,采用Real-time PCR 和 Western blot 检测转染效率。MTT 法检测顺铂处理后细胞存活率及半数抑制浓度（IC50）。流式细胞术检测顺铂处理后细胞凋亡率。结果 Lipocalin-2蛋白在肺癌组织和肺癌 A549、NCI-H661、NCI-H446细胞中均异常高表达（ P ＜0.05）。siRNA-Lipocalin-2转染 A549细胞能在 mRNA 和蛋白水平显著抑制 Lipocalin-2表达,同时顺铂诱导的细胞存活率显著降低,凋亡率显著增高（ P ＜0.05）。结论利用特异性 siRNA 能有效抑制人肺癌 A549细胞中Lipocalin-2 mRNA 和蛋白表达,增强细胞对顺铂的敏感性。     

miR-214对人肺癌A549细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:通过构建miR-214的真核表达载体,研究其对人肺癌A549细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:以A549细胞基因组DNA为模板,扩增得到miR-214前体序列,插入表达载体pcDNA3.1(+)克隆获得pcDNA3.1(+)-miR-214。将真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-214转染到A549细胞中,并采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)对其表达情况进行验证。采用MTT和transwell小室等方法分别检测转染重组质粒pcDNA3.1(+)-miR-214对A549细胞增殖能力和侵袭能力的影响。结果:成功构建了miR-214稳定过表达的真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-214;real-time PCR检测结果表明,转染pcDNA3.1(+)-miR-214后A549细胞中miR-214过表达(P<0.05)。miR-214过表达后A549细胞的增殖和侵袭能力均明显降低。结论:miR-214在A549细胞中过表达能够抑制细胞的增殖和侵袭能力,为进一步深入研究miR-214在肿瘤中的作用机制提供了实验依据。     

夏枯草乙醇提取物体外诱导肺癌细胞A549凋亡的研究

目的探讨夏枯草乙醇提取物对人肺癌细胞系A549细胞的增殖、迁移、细胞周期及凋亡的影响。方法不同质量浓度夏枯草提取物作用于人肺癌A549细胞,采用MTT比色法、细胞划痕实验等检测其对肿瘤细胞的生长及迁移的抑制作用,应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化情况,并使用Annexin-V FITC和PI双染试剂盒进行凋亡分析。结果一定质量浓度的夏枯草提取物可明显抑制肺癌细胞的增殖和迁移,并呈量效和时效关系,可诱导细胞发生G0/G1期或G2/M期细胞周期阻滞,且Sub G1峰比例明显上升,在低、中质量浓度(1.0和2.0mg·L-1)时以晚期凋亡为主,在高质量浓度(4.0mg·L-1)时主要发生早期凋亡。结论夏枯草提取物可抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移,改变细胞周期,诱导肿瘤细胞凋亡。     

TNF-α对人肺癌A549细胞凋亡的影响

目的探讨TNF-α对人肺癌A549细胞凋亡的影响;方法培养人肺癌A549细胞,与TNF-α(10、100U·ml-1)共孵育,通过Western blot分析P53蛋白表达的变化,同时利用Annexin V/PI双染色流式细胞仪,检测人肺癌A549细胞凋亡率的变化。结果与空白组相比,TNF-α组的P53蛋白表达明显升高,且细胞凋亡率也明显升高,分别为1.22±0.62和1.65±0.38(P<0.01)。结论TNF-α可以诱导人肺癌A549细胞凋亡,从而可能起到抗肿瘤的疗效。     

低剂量卡铂诱导人肺癌细胞A549过早性衰老的作用研究

目的考察低剂量卡铂诱导人肺癌细胞A549过早性衰老的作用。方法 A549细胞经不同浓度卡铂处理,采用MTT法和克隆形成率试验检测卡铂对细胞增生的抑制作用;β-半乳糖苷酶染色试验检测卡铂诱导细胞衰老情况;FCM法检测卡铂对细胞凋亡和细胞周期分布的影响;全波长荧光酶标仪检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平变化。结果低剂量卡铂能诱导细胞衰老;不同浓度卡铂作用细胞48 h后,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞显著增多;细胞周期多停滞于G0/G1期,S期显著减少,且细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。结论低剂量卡铂能诱导人肺癌细胞A549过早性衰老。     

紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移和侵袭作用的影响

目的:研究紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移和侵袭作用的影响及其作用机制。方法:将细胞分为空白对照组、紫杉醇(3μmol/L)组、顺铂(30μmol/L)组和联合用药(紫杉醇3μmol/L+顺铂30μmol/L)组,培养48 h。采用MTT法测定相对细胞活力;流式细胞术测定细胞周期;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测细胞中人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、蛋白激酶B(AKT)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达。结果:与空白对照组比较,各给药组细胞的相对细胞活力降低,细胞发生G1期阻滞,细胞的迁移和侵袭能力降低,细胞中PTEN、p27表达增强,AKT磷酸化及Cyclin D1、MMP-2和MMP-9表达减弱,差异均有统计学意义(P<0.05);与单用药组比较,联合用药组作用效果增强,以上指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:紫杉醇和顺铂联用后对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移和侵袭的抑制作用增强,其机制可能与上调PTEN、p27的表达,下调Cyclin D1、MMP-2、MMP-9的表达及抑制AKT磷酸化有关。     

二氯乙酸钠联合顺铂诱导人肺腺癌A549细胞株凋亡的实验研究

目的研究二氯乙酸钠(Sodium dichloroacetate,DCA-Na)、顺铂(DDP)联合对人肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法用MTT法检测DCA-Na、DDP应用对A549细胞增殖抑制作用的影响;流式细胞仪(Annexin V-FITC/PI法)检测DCA-Na、DDP单药及两药联合作用于A549细胞凋亡率的变化;用分光光度法检测DCA-Na作用于A549细胞后半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、-8、-9蛋白的活性。结果DCA-Na、DDP单药组均对A549细胞增殖有抑制作用,且呈明显的剂量-时间依赖性。0.4、2μg/mL的DDP与37.5、75、150μg/mL的DCA-Na联合作用A549细胞24、48、72 h后的抑制率显著高于同浓度DDP单药组(P<0.05),且2μg/mL的DDP与75μg/mL的DCA联合在48 h表现为协同作用。流式细胞仪检测显示,A549细胞联合组凋亡率显著高于各单药组(P<0.05)。DCA-Na作用于A549细胞后,分别在12、24、48、72 h测得Caspase-3、-8、-9蛋白活性显著高于对照组(P<0.05)。结论 DCA-Na对人肺腺癌A549细胞的增殖有抑制作用,并且随着药物浓度增加、作用时间延长,其抑制作用也增加(呈剂量和时间依赖性)。一定浓度范围的DCA-Na和DDP联合作用于人肺腺癌A549细胞能够产生协同作用。DCA-Na可诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,且与DDP联合后其诱导凋亡作用更为显著。     

西瑞香素对肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的影响

目的探讨西瑞香素对肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的影响。方法通过Transwell小室分析西瑞香素对肺癌A549细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测西瑞香素对肺癌A549细胞迁移能力的影响;Western blotting检测西瑞香素作用于A549细胞后MMP-2、MMP-9侵袭相关蛋白的表达。结果 Transwell小室实验结果提示,西瑞香素对A549细胞侵袭能力有抑制作用;划痕实验结果提示,西瑞香素对A549细胞迁移能力有抑制作用;Western blotting结果提示,西瑞香素抑制MMP-2、MMP-9侵袭相关蛋白的表达。随着药物浓度增加,MMP-2、MMP-9表达减少,具有剂量依赖性。结论西瑞香素对A549细胞体外侵袭及迁移有抑制作用,这种作用与抑制MMP-2、MMP-9表达有关。     

美洲大蠊提取物YS-F对人非小细胞肺癌细胞A549增殖及凋亡的影响

目的:探讨美洲大蠊提取物对人非小细胞肺癌细胞A549增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法:将美洲大蠊干燥虫体以90%乙醇冷浸提取后,经聚酰胺柱色谱以水-甲醇梯度洗脱,得20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%甲醇洗脱部位(YS-A～H)。采用MTT法筛选活性部位,并检测不同剂量活性部位作用后的细胞增殖抑制率;采用流式细胞术检测不同剂量活性部位作用后的细胞凋亡、细胞周期和线粒体膜电位变化情况。结果:YS-A～H的半数抑制浓度分别为(95.25±8.42)、(129.93±7.24)、(221.28±12.68)、(275.39±14.87)、(276.76±16.32)、(31.90±5.34)、(163.15±6.97)、(122.81±8.36)μg/mL,以YS-F的活性最强。经YS-F 3、9、27、81μg/mL作用24、48、72 h后,各时间点的细胞增殖抑制率均显著升高,且药物作用48、72 h时的细胞增殖抑制率显著高于同组24 h,作用72 h时的细胞增殖抑制率均显著高于同组48 h(P<0.01)。除YS-F 3μg/mL作用24 h、YS-F...     

线粒体铁蛋白对顺铂诱导A549细胞凋亡的作用研究

目的探讨线粒体铁蛋白(FtMt)在顺铂(DDP)诱导人非小细胞肺癌A549细胞活性氧(ROS)生成和细胞凋亡过程中的作用。方法细胞分为对照组、顺铂低、中和高剂量组,采用0、2.5、5和7.5μg/ml浓度的顺铂处理A549细胞,MTT法检测细胞存活率;流式细胞术法检测A549细胞凋亡、活性氧(ROS)、Ca²⁺和线粒体膜电位(MMP)水平;qPCR法检测A549细胞凋亡后FtMt、铁蛋白重链(FTH)、铁蛋白轻链(FTL)、转铁蛋白受体1(TfR1)、铁调节蛋白1(IRP1)、铁调节蛋白2(IRP2)、Cu/Zn-超氧化物歧化酶(SOD₁)、Mn-超氧化物歧化酶(SOD₂)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的mRNA表达水平;分光光度法检测A549细胞中酶活力(Caspase-3、SOD和GSH-Px)和MDA含量。结果与对照组、DDP低和中剂量组比较,DDP高剂量组A549细胞存活率、MMP水平和IRP2的mRNA水平明显降低(P<0.05),而细胞的早期凋亡率、ROS水平、Ca²⁺水平、...     

注射用胸腺法新对人肺癌A549细胞凋亡的影响

目的:研究注射用胸腺法新对人肺癌A549细胞凋亡的影响。方法:以0(空白对照)、25、50、100、200、400 mg/L注射用胸腺法新作用于肺癌A549细胞24、48、72 h后,用MTT法检测并计算细胞增殖抑制率。以0(空白对照)、50、100 mg/L注射用胸腺法新作用于肺癌A549细胞48 h后,用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,用Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达和蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平。结果:与空白对照比较,注射用胸腺法新作用后A549细胞的增殖抑制率增加,与浓度和作用时间呈正相关(P<0.05);50、100 mg/L的注射用胸腺法新作用48 h后A549细胞的凋亡率增加(P<0.05);100 mg/L的注射用胸腺法新作用48 h后A549细胞中Caspase-3表达增强、Bcl-2/Bax和Akt磷酸化水平降低(P<0.05)。结论:注射用胸腺法新可通过激活Caspase-3、下调Bcl-2/Bax比例、抑制Akt信号通路来抑制A549细胞增殖,并促进其凋亡。     

醌茜素对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及初步机制研究

<正>醌茜素是一种具有高效性、高选择性和细胞能透性的药物。虽然醌茜素能够有效抑制前列腺癌细胞的增殖~[1],但醌茜素对肺癌细胞的作用机制尚不清楚。本文研究了醌茜素对人肺癌A549细胞周期及细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。1材料与方法1.1材料3种人肺癌A549、NCI-H23、NCI-H460细胞株及     

顺铂诱发肺癌和癌前细胞凋亡及基因表达改变

凋亡在许多生理过程如植物生长发育、胚胎的生长以及人类疾病如自身免疫疾病、癌症发生等过程中起着重要作用。癌发生不同阶段细胞对凋亡因素的敏感性研究在肿瘤防治中有重要意义。本研究用一株ＳＶ４０Ｔ转染而建立的人支气管上皮永生化细胞系Ｍ、肺腺癌细胞系ＧＬＣ及小...