透明质酸钠治疗颞下颌关节骨关节病的动物实验研究

目的:评价透明质酸钠对山羊颞下颌关节骨关节病的治疗效果。方法:对8只山羊的双侧颞下颌关节上腔一次性注射胶原酶而诱导骨关节病病变。分2组,4只/组。治疗组,透明质酸钠关节上腔封闭;对照组,关节上腔注射生理盐水。3月后处死,对髁突应用光镜和扫描电镜观察。结果:在光镜和扫描电镜下观察,对照组的髁突、关节盘、关节凹表现为骨关节病变化,治疗组骨关节病表现不明显。结论:通过3个月的观察和研究,证明透明质酸钠关节上腔封闭对颞下颌关节骨关节病具有显著疗效。     

透明质酸钠对兔颞下颌关节骨病的作用

目的通过制动兔的颞下颌关节,制造骨关节病动物模型,采用组织病理学和组织化学方法研究透明质酸钠对制动的颞下颌关节的作用。方法普通家兔18只,分为2个实验组和1个对照组。实验组动物颞下颌关节制动后,左侧关节腔内注射0.06ml透明质酸钠,右侧关节腔内注射同等量的生理盐水,分别观察2周和4周后处死,完整取出双侧颞下颌关节(TMJ)作组织学及组织化学染色,评价关节软骨的改变及软骨中糖胺多糖含量的变化。结果与注射透明质酸钠的左侧关节相比,注射生理盐水的右侧TMJ出现了明显的退行性骨关节病的改变,两者具有显著性差异(P<0.01)。结论透明质酸钠对制动后TMJ的退行性变可起到明显的抑制作用。     

透明质酸酶诱导兔颞下颌关节骨关节病的实验研究

目的：建立兔颞下颌关节骨关节病动物模型。方法：将不同浓度透明质酸酶（ＨＤ）一次性注入两组兔颞下颌关节下腔内,分别于注射后２４ｈ、１、４、８、１２周后处死动物,对颞下颌关节标本进行组织学观察。结果：注射ＨＤ４周后出现关节软骨破坏,关节盘腔原纤维暴露,滑膜慢性炎症等骨关节病表现。结论：本实验研究建立了颞下颌关节骨关节病模型可用于颞与颌关节骨关节病早、中期病变的研究 。     

腺病毒介导HGF转染脂肪干细胞复合温敏型可注射水凝胶对兔颞下颌关节骨关节病髁突软骨的修复作用

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)转染脂肪干细胞复合水凝胶支架材料对促进兔颞下颌关节炎病理状态微环境中受损软骨修复的意义。方法:培养兔脂肪干细胞,利用腺病毒介导对其进行HGF转染并制备ADSCs/HGF/水凝胶支架材料。兔颞下颌关节上腔为注射区并分为5组,A组为空白对照组,B组为模型组,C组为单纯细胞治疗组,单纯脂肪干细胞腔内注射,D组为干细胞复合材料组,为造模后腔内注射干细胞复合可注射水凝胶支架材料,E组为转染后干细胞复合水凝胶注射。所有材料移植成功后各组动物分别于用药第3、9 周后取材,制备标本并行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时定量PCR检测,采用SPSS17.0 软件包对数据进行方差分析及t检验。结果:扫描电镜与组织学观察可见,D、E组软骨病变区改善情况优于B、C组。与模型组比较,实时定量 PCR结果显示,E组MMP-13 表达与空白组相对持平但低于C、D组,差异有显著性(P<0.05);E组 TIMP-1 表达与空白组相对持平但高于C、D组,差异有显著性(P<0.05)。 结论:腺病毒介导HGF转染脂肪干细胞复合可注射型水凝胶对兔颞下颌关节骨关节病受损软骨具有明显修复作用。     

S-甲基异硫脲治疗颞下颌关节骨关节病的动物实验研究

目的探讨S- 甲基异硫脲（SMT）对黑山羊颞下颌关节骨关节病的治疗效果。方法选取9只纯种黑山羊,随机分为正常对照组、实验对照组和实验组,每组3只。对实验组和实验对照组黑山羊双侧颞下颌关节上腔一次性注射胶原酶,诱导骨关节病病变。正常对照组不作任何治疗;实验对照组为对实验动物关节上腔注射生理盐水0.5 mL;实验组为对实验动物关节上腔注射SMT 0.5 mL。处死动物后在光镜和扫描电镜下观察颞下颌关节的变化。结果在光镜和扫描电镜下观察,实验对照组髁突、关节盘、关节凹表现为骨关节病变化;实验组中则表现出不同程度的改善。结论通过3个月的观察和研究,发现SMT关节上腔重复注射能抑制颞下颌关节骨关节病的发展,其作用机制可能与SMT抑制一氧化氮合酶在关节局部产生过多的一氧化氮有关。     

HGF基因转染软骨细胞治疗兔颞下颌关节骨关节病的研究

目的 建立兔颞下颌骨关节病动物模型,观察携带有GFP-HGF cDNA基因体外转染兔髁突软骨细胞后对兔颞下颌骨关节病的治疗效果。方法 以Ⅱ型胶原酶进行颞下颌关节腔内注射,建立颞下颌骨关节病动物模型。取兔髁状突软骨细胞体外进行培养与增殖,第2代软骨细胞进行GFP-HGFcDNA转染。将收集的转染后的软细胞进行动物模型关节腔内注射,并与对照组(空白质粒组)比较,通过组织切片观察治疗效果。结果 兔颞下颌关节经两次法注射胶原酶可在2周时出现偏侧咀嚼症状;动物模型显示转染细胞可促进关节损伤的修复,促进愈合。结论 转染HGF的软骨细胞可促进颞下颌骨关节病的愈合。     

兔颞下颌关节骨关节病动物模型超微结构的观察

目的：反映颞下颌关节骨关节病（Temporomandibular Joints Osteoarthritis,TMJOA）的超微结构变化,为该病的诊断和基因治疗打下良好基础。方法：选择35只新西兰白兔,分为实验组和健康对照组,通过TMJ内注射Ⅱ型胶原酶来诱导兔产生TMJOA,通过扫描电镜动态全程观察4、8、12、16、20、24w兔颞下颌关节的超微结构变化。结果：随时间的延长,病变先是表现为逐渐加重,以后出现缓解趋势,实验组中均于4w后出现较明显的骨关节病损,其中12w组达到病变高峰,20、24w组出现局部修复现象。结论：兔颞下颌关节骨关节病模型超微结构改变,与人TMJOA的基本病理改变十分一致,具有良好的可比性和相似性。     

TGF-β3转染脂肪干细胞复合OGP-HA-ChS支架对兔髁突受损软骨的修复作用

目的: 探讨TGF-β3转染脂肪干细胞ADSCs复合OGP（成骨多肽）-HA（透明质酸）-ChS（硫酸软骨素）支架修复兔髁突受损软骨的可行性。方法: 分离培养兔ADSCs,利用重组腺病毒构建携带TGF-β3基因表达载体,并转染至兔ADSCs。14 d后,观察细胞荧光表达情况并计算病毒转染效率,Western 印迹检测TGF-β3蛋白表达。50只大白兔随机分为5组,A组为空白组,B组为TGF-β3转染ADSCs组,C组为OGP-HA-ChS支架组,D组为ADSCs复合OGP-HA-ChS组。E组为TGF-β3转染ADSCs复合OGP-HA-ChS组,兔颞下颌关节骨关节病模型制备完成后,按照实验分组进行材料移植。各组动物分别于材料移植第3、9周后取材,制备标本并行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时荧光定量PCR检测。采用SPSS17.0 软件包对数据进行统计学分析。结果: 扫描电镜与组织学观察可见,D、E组软骨病变修复改善情况优于B、C组。与模型组比较,实时定量 PCR结果显示,E组MMP-3 表达与A组相对持平但低于C、D组,差异有显著性（P<0.05);E组 TIMP-1 表达与A组相对持平但高于C、D组,差异有显著性（P<0.05)。结论: TGF-β3转染ADSCs复合OGP-HA-ChS支架对兔髁突受损软骨具有修复作用。     

肉毒杆菌毒素对兔颞下颌关节骨关节病咀嚼肌肌电的影响

目的：研究肉毒杆菌毒素对颞下颌关节骨关节病咀嚼肌功能的影响,为应用肉毒杆菌毒素治疗该病提供依据.方法：30只兔作咀嚼肌肌电图检查,其结果作为肌电正常值,并应用胶原酶注射法制成颞下颌关节骨关节病动物模型,随机分为2组.实验组兔双侧嚼肌、颞肌注射肉毒杆菌毒素,对照组仅为骨关节病状态.分别于4、8、12周末对2组兔作咀嚼肌肌电图检查,分析对比2组兔肌电电位的变化.所得资料用SPSS11.0软件行团体t检验.结果：姿势位时,对照组各时间点肌电电位显著高于正常;实验组在4周、8周末低于正常,12周末与正常相比无显著差异（P＞0.05）.牙尖交错最大紧咬状态下,对照组各时间点肌电电位显著低于正常;实验组在4周、8周末略低于正常,12周末与正常相比无显著差异（P＞0.05）.结论：肉毒杆菌毒素能改变颞下颌关节骨关节病咀嚼肌的功能状态,促进肌功能恢复正常.     

关节内注射曲安奈德对山羊颞下颌关节骨关节病的影响

目的:观察关节内注射曲安奈德后,山羊颞下颌关节骨关节病的组织病理学变化。方法:在10只山羊的双侧颞下颌关节上腔一次性注射Ⅰ型胶原酶0.8ml,诱导制作山羊骨关节病模型;随机将动物分为对照组和治疗组,每组5只,分别在注射Ⅰ型胶原酶后30、60d后,进行第1次和第2次治疗;第1次治疗90d后,处死2组动物,切取关节标本,进行光镜和扫描电镜观察,并对2组关节光镜下9个区的组织病理学变化进行评分,每个区得出平均分后,应用SAS统计软件GLM模型对治疗组和对照组的分数进行统计学处理,评价有无差异。结果:光镜和扫描电镜下观察,对照组髁突、关节盘、关节窝表现为骨关节病变化,治疗组表现出较对照组更严重的病理变化。光镜下治疗组与对照组的组织学得分有显著性差异(P<0.01)。结论:关节上腔注射曲安奈德,能加重骨关节病的程度。     

富血小板纤维蛋白对兔脂肪干细胞成骨分化的影响

目的：体外分离培养兔脂肪干细胞（adipose—derived stem cells,ADSCs）,鉴定其分化能力并观察富血小板纤维蛋白（platelet—rich fibrin,PRF）对ADSCs成骨分化的影响。方法：取新西兰兔腹股沟处的脂肪组织,将其分离获得脂肪干细胞,培养至第三代用于实验。分别以油红O、茜素红染色鉴定其成脂和成骨分化能力。取兔耳中央动脉血一次离心法制备PRF膜。将脂肪干细胞分为2组：对照组不含PRF膜;实验组含PRF膜。用碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测不同时间点PRF对ADSCs成骨分化的影响。结果：脂肪干细胞呈长梭形贴壁生长;油红O及茜素红染色均呈阳性;在不同的时间点,实验组ALP活性值均高于对照组（P〈0．05）。结论：ADSCs具有成骨的潜能,且PRF可以促进ADSCs向成骨细胞分化。     

牙囊细胞条件培养液在大鼠脂肪间充质干细胞向成牙骨质分化中的作用

目的：探讨牙囊细胞条件培养液（DFCCM）在诱导大鼠脂肪间充质干细胞（ADSCs）向成牙骨质样细胞分化中的作用。方法：分离培养大鼠脂肪间充质干细胞、牙囊细胞,制备DFCCM。用DFCCM诱导ADSCs,通过MTT检测ADSCs增殖能力的变化;免疫荧光及实时定量PCR方法检测成骨关键蛋白一骨钙素（OCN）、碱性磷酸酶（ALP）及成牙骨质关键蛋白一牙骨质附着蛋白（CAP）,牙骨质蛋白（CP23）的情况。结果：牙囊细胞条件培养液诱导ADSCs后可抑制ADSCs的增殖能力。DFCCM诱导7d后,ADSCs细胞浆内表达OCN及CAP。同时DFC—CM诱导ADSCs后CAP,CP23,ALP及OCNmRNA表达水平显著高于对照组。结论：牙囊细胞条件培养液构建的微环境可使ADSCs向成牙骨质样细胞分化,为于细胞介导的牙骨质再生提供新的思路。     

人参皂甙Rg-1对牙周炎大鼠牙周组织中TNF-α、IL-1β表达的影响

目的：检测牙周炎大鼠牙周组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-1β（in-terleukin-1β,IL-1β）水平的变化,探讨人参皂甙Rg-1对其表达的影响及治疗牙周炎的机理。方法：选用100只体重160-200g Wistar大白鼠,随机分成10组,每组10只。A组：正常对照组,与F组同时处死。B-J组建立牙周炎大鼠模型。B-E组：人参皂甙Rg-1治疗组,给药后第1、2、3、4周末处死。F-J组：牙周炎对照组,于造模成功后第0、1、2、3、4周末处死。取大鼠上颌磨牙牙周组织标本作切片,光镜观察,采用免疫组织化学法检测TNF-α、IL-1β水平变化,进行统计学分析。结果：F组牙周组织中TNF-α、IL-1β表达明显高于A组（P〈0.05）;各时间段牙周炎治疗组牙周组织中TNF-α、IL-1β表达明显低于相应的牙周炎组（P〈0.05）。结论：人参皂甙Rg-1可以抑制实验性牙周炎大鼠牙周组织中TNF-α、IL-1β的表达,具有治疗牙周炎的作用。     

透明质酸改性聚乳酸支架组织工程软骨的构建

目的 利用透明质酸( hyaluronic acid,HA)改性聚乳酸(polylactic acid,PLA)支架来构建同种异体组织工程软骨,分析探讨HA改性PLA支架构建组织工程软骨的可行性.方法 采用盐析法制备出高孔隙率的PLA支架,采用低浓度NaOH、碳化二亚胺和HA进行支架改性.支架预湿后接种第3代兔髁突软骨细胞悬液,体外培养1周后用于动物实验.软骨细胞-HA改性PLA支架复合体为实验组,软骨细胞-PLA支架复合体为对照组.分别于4、6、8周按照标记取出植入物,进行组织学检测.利用ImageJ软件进行免疫组化染色阳性强度的分析.结果 细胞-支架复合体植入后,未产生排斥反应.HE染色结果示软骨样组织形成.Masson染色及甲苯胺蓝染色结果显示染色逐渐加深.Ⅱ型胶原免疫组化染色随时间增加阳性强度增加,实验组4、6、8周时的免疫组化染色强度差异有统计学意义(F=26.68,P=0.000),对照组4、6、8周时的免疫组化染色强度差异有统计学意义(F=20.59,P=0.000).相同时间点实验组Ⅱ型胶原分泌强度高于对照组.结论 利用HA改性PLA支架可以构建同种异体软骨,且其质量高于未改性PLA.     

兔血管化面神经移植动物模型的建立

目的: 介绍一种兔血管化面神经移植动物模型建立的方法。方法：选用15只新西兰白兔,带动静脉血管蒂的耳大神经移植组6只,行血管化神经移植修复面神经缺损;游离耳大神经移植组6只,行游离神经移植修复面神经缺损;空白组3只,面神经缺损后不行修复。术后第1、4个月,分别观察兔面部形态的变化,术后4个月行面神经电生理检测,处死后取面神经移植段标本作病理学、免疫组织化学等检测,应用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果：面神经移植术后,兔手术侧上唇形态及功能均有一定恢复,血管化神经移植组的结果均优于对照组。在神经移植段内均可见轴突再生,良好的血供促进轴突再生。结论：本实验提供了一种操作容易、稳定可靠的兔血管化面神经移植模型,对面神经移植修复的研究有一定价值。     

磨牙缺失对幼年大鼠空间学习记忆能力的影响

目的：探讨不同磨牙缺失数对幼年大鼠空间学习记忆能力的影响。方法：健康幼年大鼠60只随机分成3、6、9、12颗磨牙缺失组、麻醉对照、正常对照6组。在造模后1周,采用Morris水迷宫系统测试各组大鼠学习记忆能力,每周1次,连续6周。结果：9颗、12颗磨牙缺失组间大鼠游泳平均逃逸潜伏期（the swimming average escape latency,SAEL）无明显差异,但均显著高于其它4组（P〈0.001）;6颗磨牙缺失组大鼠与3颗磨牙缺失组、麻醉组及正常对照组间SAEL比较有差异（P〈0.05）;3颗磨牙缺失组、麻醉组及正常对照组组间SAEL比较均无显著性差异。各磨牙缺失组大鼠随着磨牙缺失数目的增多tP/tT值有逐渐下降趋势,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,但3颗磨牙缺失组与正常组及麻醉组间tP/tT值无明显差异,其他各磨牙缺失组与正常组及麻醉组间tP/tT值均有差异（P〈0.05）。结论：较多数目磨牙缺失会对幼年大鼠空间学习记忆能力造成不同程度的损伤,而个别磨牙缺失对幼年大鼠空间学习记忆能力无显著性影响。     

升高咬合对青春期大鼠髁突软骨中增殖细胞核抗原表达变化的影响

目的：探讨升高咬合后髁突软骨中增殖细胞核抗原（PCNA）的变化情况及意义。方法：40只5周龄雄性SD大鼠,随机分为对照组和实验组（双侧后牙板升高咬合）。分别于术后7、14、21及28d,取其右侧髁突,应用免疫组织化学SABC法检测大鼠髁突软骨中PCNA的表达变化,并作图像分析和统计学处理。结果：与对照组相比,实验组髁突软骨PCNA阳性细胞表达在实验第7、14d明显减少,第28d明显增多（P〈0.05）。结论：咬合升高可以引起大鼠髁突软骨的适应性改建。     

山羊颞下颌关节损伤模型的建立及组织学评价

目的: 建立山羊颞下颌关节损伤模型,比较不同损伤类型的组织病理学改变及对预后的影响。方法：模拟临床损伤类型,16只成年山羊双侧关节随机分为4组。DD组：剪断关节盘后附着,牵引向前,固定于冠突根部,形成不可复性关节盘前移位;CCD组：磨除髁突外侧1/3软骨,造成髁突软骨损伤;DD+CCD组：形成关节盘前移位+髁突软骨损伤。C组：空白对照组。分别于术后2周和1个月观察3种损伤类型的大体及组织学改变。对髁突软骨进行组织学评分,采用SPSS17.0软件包比较4组之间的差异。结果：DD+CCD组,2周和1个月时见囊内纤维性黏连,剩余软骨粗糙;镜下见剩余软骨结构紊乱,蛋白多糖降解。1个月时,软骨剥脱及囊内纤维黏连加重。DD组,2周和1个月时剩余髁突软骨结构紊乱,纤维带完整,少量血管再生;蛋白多糖少量降解。CCD组,2周和1个月时缺损区与关节盘发生黏连;剩余软骨结构和蛋白多糖与空白对照组相比基本正常。各组之间比较,软骨退行性变程度1个月时比2周时更严重,统计评分按严重程度分别为DD+CCD组(11.75±0.75)、DD组(8.75±0.25)、CCD组(1.75±0.85)和C组(0.00±0.00),各组之间比较均存在显著差异(P<0.05)。结论：通过手术成功建立了3种山羊TMJ损伤模型,其中,DD+CCD组对关节软骨的破坏最严重,DD次之,CCD最轻。     

生长期山羊囊内骨折复位术中保留髁突软骨的重要性:三维CT头影测量分析

目的:通过三维CT头影测量分析,探讨保存髁突软骨在生长期山羊囊内骨折手术治疗中的作用。方法:6个月龄山羊12只,随机分为实验组(n=8)和对照组(n=4),实验组双侧髁突造成囊内骨折并同期行手术复位固定,一侧保留髁突软骨,另一侧切除髁突软骨。术后即刻、3个月和6个月行头颅CT扫描,采用SimPlant11.2软件进行髁突高度的三维测量,通过SAS 6.12软件包对数据进行统计学分析,评价下颌支的生长发育情况。结果:保留髁突软骨组术后3个月和6个月,下颌支的平均高度为(51.85±1.67)㎜和(56.25±4.49)㎜,切除髁突软骨组为(45.18±1.31)㎜和(46.59±1.66)㎜,对照组为(51.52±1.95)㎜和(56.19±3.38)㎜。其中,保留髁突软骨组和对照组无统计学差异(P>0.05);保留髁突软骨组和切除髁突软骨组有统计学差异(P<0.05)。结论:手术复位固定生长期髁突囊内骨折时,保存髁突软骨不会影响下颌支生长发育;破坏髁突软骨则导致下颌支生长发育受限。